目的:比较浅部、深部感染来源的氟康唑耐药白念珠菌体外对8种抗真菌药物的敏感性及耐药基因突变。方法:26株深部感染来源白念珠菌耐药株、33株浅部感染来源白念珠菌耐药株，参照CLSI酵母菌检测方案M27-A4测定上述菌株对氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、泊沙康唑、两性霉素B、氟胞嘧啶、特比萘芬、米卡芬净8种药物单独或联合的体外敏感性。提取所有耐药菌株DNA，通过PCR检测ERG3、ERG11、FUR1 3种耐药基因的突变情况。满足正态分布和方差齐性检验的定量资料两组间比较采用独立样本 t检验，不满足者组间比较采用Mann-Whitney U检验，定性资料组间比较采用卡方检验。 结果:氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、氟胞嘧啶的最小抑菌浓度（MIC）在浅部感染组和深部感染组间差异均有统计学意义（均 P<0.05），而两性霉素B、米卡芬净的MIC两组间差异无统计学意义（均 P > 0.05）。96.6%的菌株特比萘芬MIC值>64 μg/ml，无法进行组间对比。15株白念珠菌（7株深部感染来源、8株浅部感染来源）特比萘芬+唑类（氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、泊沙康唑）联合药敏试验均显示为协同效应，部分抑菌浓度（FIC）指数0.033~0.187；氟胞嘧啶+唑类、氟胞嘧啶+两性霉素B、两性霉素B +氟康唑组合均无明显协同作用，FIC指数0.56~1.125。浅部感染来源白念珠菌ERG3基因突变包括错义突变V351A（33株，100%），深部感染来源白念珠菌包括错义突变V351A（13株，50%）、A353T（4株，15%）；浅部感染来源白念珠菌ERG11基因突变包括错义突变I437V（32株，97%）、Y132H（23株，70%）、T123I（16株，48%）、K128T（6株，18%）、D116E（5株，15%）、A114S（4株，12%）、E266D（2株，6%）、G448E（2株，6%）、G465S（2株，6%），深部感染来源白念珠菌包括I437V（23株，88%）、E266D（13株，50%）、E260G（5株，19%）、V488I（4株，15%）；浅部感染来源白念珠菌FUR1基因突变包括错义突变R101C（11株，33%），深部感染来源白念珠菌未检出错义突变。 结论:浅部与深部感染来源白念珠菌氟康唑耐药株对药物的敏感性及基因突变位点均有所差别。

目的:建立一种测定兔眼组织中加替沙星浓度的方法，并比较加替沙星眼用凝胶兔眼单次和多次点眼后在眼组织及血浆中的药代动力学特征。方法:取94只健康新西兰兔。任意选取10只新西兰兔不给予任何药物用于空白组织获取，将剩余84只按照随机数字表法随机分成单次给药组36只和多次给药组48只，雌雄各半，均取左眼为实验眼。单次给药组左眼给予1滴加替沙星眼用凝胶，分别于点眼后0.5、1、3、5、7、10 h收集泪液后进行心脏取血并处死，分别取房水、结膜、角膜、巩膜、虹膜－睫状体、晶状体、玻璃体、视网膜和脉络膜；多次给药组左眼每次给予1滴加替沙星眼用凝胶，每天3次，分别于连续给药第4和第6天首次给药后0.5 h，第7天首次给药后0.5、1、3、5、7、10 h进行心脏取血和眼组织收集。采用甲醇沉淀蛋白法预处理各样本，采用高效液相色谱串联质谱法测定并计算实验兔血浆及眼组织中加替沙星的达峰浓度(C max)、达峰时间(T max)、曲线下面积(AUC)等药代动力学参数，流动相采用甲醇-0.1%乙酸水溶液(体积比＝70∶30)，采用正离子多反应检测模式，以环丙沙星为内标物，并参照《中国药典》(2020年版)9012生物样品定量分析方法验证指导原则对方法的选择性、标准曲线和定量下限、准确度和精密度、提取回收率和基质效应、稳定性进行验证。结合加替沙星对眼部常见感染菌的最小抑菌浓度(MIC 90)，计算各组织和血浆C max/MIC 90和AUC/MIC 90值。 结果:加替沙星在各眼组织和血浆中线性关系良好；角膜组织中的日间准确度为－1.5%～6.0%，日间精密度≤15%；角膜组织中的提取回收率为92.0%～94.8%，经内标归一化计算得到的低、中、高浓度的基质效应精密度均不大于3.3%，单次给药后加替沙星在眼前节和后节组织均有较高的药物浓度分布，AUC 0－t从高到低分别为泪液、角膜、结膜、虹膜－睫状体、巩膜、房水、脉络膜、视网膜、晶状体和玻璃体，C max分别为94.90 μg/g、7.34 μg/g、3.65 μg/g、1.81 μg/g、1.75 μg/g、1.31 μg/ml、0.86 μg/g、0.53 μg/g、0.13 μg/g、0.07 μg/ml，除晶状体、脉络膜和玻璃体液中的T max为0.5 h，其余各组织T max均为1 h。多次给药第4、6、7天的0.5 h各眼部组组织中加替沙星浓度比较，差异无统计学意义( P>0.05)，且角膜、结膜和巩膜中AUC 0－t约为单次给药的2.04、2.12和2.32倍。单、多次给药后进入体循环的加替沙星浓度均低于25.00 ng/ml。对于金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌，加替沙星眼用凝胶连续用药后在眼前节结膜、角膜、巩膜、虹膜－睫状体、房水和脉络膜中的药代动力学/药效学均可满足C max/MIC 90≥10且AUC/MIC 90≥30。 结论:成功构建快速灵敏的眼组织加替沙星浓度测量方法。加替沙星眼用凝胶以每天3次点眼连续用药3 d后眼组织可达到稳态浓度，且比单次给药在眼组织浓度升高。局部使用加替沙星眼用凝胶可实现眼部结膜、角膜、巩膜、虹膜－睫状体常见感染细菌的有效治疗。

目的:根据万古霉素在肾功能亢进(ARC)和肾功能正常患者中的药物代谢动力学/药物效应动力学(PK/PD)原理，应用蒙特卡罗模拟优化ARC和肾功能正常患者万古霉素对常用革兰阳性菌的初始给药方案。方法:使用文献公开发表的ARC及肾功能正常患者中的群体PK模型，收集2017至2019年南京医科大学附属苏州医院甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)、甲氧西林耐药表皮葡萄球菌(MRSE)、粪肠球菌、屎肠球菌的最小抑菌浓度(MIC)分布。采用蒙特卡罗模拟计算不同万古霉素日剂量的目标获得概率(PTA)和累积反应分数(CFR)，以预测达到与PK/PD参数指标AUC 0～24 h/MIC的万古霉素给药剂量，推荐最佳给药方案。 结果:蒙特卡罗模拟结果显示，MIC＝0.5时ARC患者对革兰阳性菌万古霉素日剂量2.0 g/d的PTA为97.30%，而肾功能正常患者只需要1.5 g/d，PTA即可达99.16%。MIC＝1时，肾功能正常患者需要万古霉素2.5 g/d，PTA可达92.91%，而ARC患者需要万古霉素3.5 g/d，PTA才可达88.71%。当MIC≥2时，万古霉素常规推荐的给药剂量(2.0～4.0 g/d)很难达到理想的PTA值。对于常见革兰阳性菌，肾功能正常患者需要万古霉素3.0 g/d，CFR可达91.36%，而ARC患者需要万古霉素4.5 g/d，CFR可达90.60%。MRSA和屎肠球菌的MIC≤1的占比分别为97.25%和94.50%。肾功能正常患者MRSA感染给予万古霉素2.5 g/d，CFR可达93.95%，屎肠球菌给予万古霉素3.0 g/d，CFR可达94.46%；而ARC患者MRSA感染给予万古霉素3.5 g/d，CFR可达91.42%，屎肠球菌给予4.0 g/d，CFR可达93.07%。MRSE的MIC＝1和2占比分别为64.64%和27.44%，粪肠球菌为77.09%和20.13%。肾功能正常患者粪肠球菌感染给予万古霉素4.0 g/d，CFR可达92.55%，MRSE需要万古霉素4.5 g/d，CFR可达92.79%，而ARC患者MRSE和粪肠球菌需要万古霉素6.0 g/d，CFR才可达88.35%和92.03%。当革兰阳性菌MIC≤0.5时ARC患者给予万古霉素2.0 g/d和肾功能正常者予1.5 g/d，PTA均可≥90%。MIC＝1时肾功能正常患者推荐万古霉素3.0 g/d，ARC患者推荐万古霉素4.5 g/d，PTA和CFR可达90%以上。MIC≥2的革兰阳性菌万古霉素常规给药日剂量(2.0～4.0 g/d)对于ARC和肾功能正常患者均很难达到目标的PTA及CFR。结论:与肾功能正常患者相比，ARC患者万古霉素需要更大的日剂量才可达目标PTA和CFR。MIC≥2的革兰阳性菌感染，建议改用其他敏感性更好的抗革兰阳性菌药物治疗。

目的:了解体外膜氧合（ECMO）治疗脓毒症患儿常用抗菌药物药代动力学（PK）和药物效应动力学（PD）参数特点。方法:前瞻性队列研究。选择2021年3月至2022年12月在湖南省儿童医院重症医学科接受抗菌药物并使用ECMO治疗的20例确诊或疑似脓毒症患儿为ECMO组，通过治疗药物监测（TDM）分析抗菌药物PK-PD参数。回顾性收集同科室同期使用万古霉素且未接受ECMO治疗的25例脓毒症患儿作为对照组。用Bayesian反馈法计算患儿的万古霉素个体PK参数，比较两组间PK参数差异，分析谷浓度与曲线下面积（AUC）的相关性。采用Wilcoxon检验进行组间比较。结果:ECMO组20例中男6例、女14例，发病年龄47（9，76）月龄。ECMO组中12例（60%）患儿使用万古霉素，谷浓度<10 mg/L 7例，10~20 mg/L 3例，>20 mg/L 2例；AUC/最小抑菌浓度（MIC）（MIC=1 mg/L）<400 1例，400~600 3例，>600 8例。11例（55%）患儿使用β内酰胺类抗菌药物，50%给药间隔时的血药浓度（简称C T50）>4 MIC 10例，谷浓度>MIC 9例，其中头孢哌酮C T50、谷浓度均达标。对照组25例中男16例、女9例，发病年龄12（8，32）月龄。万古霉素谷浓度与AUC呈正相关（ r 2=0.36， P<0.001）。ECMO组中万古霉素半衰期和24 h AUC（AUC 0~24 h）均高于对照组［5.3（3.6，6.8）比1.9（1.5，2.9）h、685（505，1 227）比261（210，355）mg·h/L， Z=2.99、3.50，均 P<0.05］，消除速率常数和清除率均低于对照组［0.1（0.1，0.2）比0.4（0.2，0.5）、0.7（0.5，1.3）比2.0（1.1，2.8）L/h， Z=2.99、2.11，均 P<0.05］。 结论:ECMO治疗患儿常用抗菌药物的半衰期较长，AUC 0~24 h升高，消除速率常数和清除率较低。

目的:测定临床分离的镰刀菌对抗真菌药物的敏感性，并研究免疫抑制剂他克莫司联合抗真菌药物使用的抗菌效果。方法:以美国临床实验室标准化委员会(CLSI)M27-Ed4及M38-A3方法测定氟康唑、伏立康唑、那他霉素和两性霉素B对24株临床分离致病镰刀菌的最低抑菌浓度(MIC)，并采用棋盘法测定他克莫司分别联合4种抗真菌药物对镰刀菌的抗真菌作用。结果:氟康唑、伏立康唑、那他霉素和两性霉素B对镰刀菌(24株)MIC范围分别是64～256 μg/ml、1～8 μg/ml、2～8 μg/ml和1～8 μg/ml。氟康唑与他莫克司对12.5%菌株(3/24)有协同效应，对所有菌株无拮抗效应；伏立康唑与他莫克司对4.2%菌株(1/24)有协同效应，对所有菌株无拮抗效应；那他霉素与他莫克司对16.7%菌株(4/24)有协同效应，对所有菌株无拮抗效应；两性霉素B与他莫克司对29.2%菌株(7/24)有协同效应，对所有菌株无拮抗效应。结论:镰刀菌在体外对那他霉素敏感，对两性霉素B及伏立康唑部分敏感，与他克莫司联合应用时，均对少部分镰刀菌有联合效应，无拮抗效应。

抗生素耐药性被认为是21世纪人类健康面临的最严重的全球性威胁之一,抗生素的过度使用加剧了细菌耐药性的产生,因此,需要进一步研究细菌耐药的机制,探索新型的耐药菌抑菌策略.本文从细菌耐药性的产生机制及耐药菌新型抑菌策略两方面进行概述,详细阐述了固有耐药性、获得耐药性和适应耐药性三种耐药性的分子机制,发现相较于具有强抗药性的固有耐药性及获得耐药性,新出现的适应耐药性具有群体效应及可逆性的特点.同时对新型抑菌化合物分子、噬菌体疗法、CRISPR-Cas系统疗法和反义疗法等新型抑菌策略进行了归纳,证明新型抗菌方法必须具备特异性和强响应性的特点.本综述旨在对细菌耐药性的发生机制进行总结,并为后续细菌耐药性的防治提供参考.

目的 研究中国健康女性阴道微环境中分离的乳杆菌对细菌性阴道病患者阴道微环境分离的阴道加德纳菌的抑制效应及其机制.方法 通过体外实验将中国健康女性阴道乳杆菌菌株和细菌性阴道病患者的阴道加德纳菌菌株共培养,观察乳杆菌对加德纳菌增殖活性的影响.将乳杆菌、阴道加德纳菌与阴道上皮细胞共培养,计算加德纳菌与上皮细胞的黏附情况,评价乳杆菌对加德纳菌黏附阴道上皮细胞的影响.比较乳杆菌培养的菌液、菌体、上清、阴道上皮细胞、乳杆菌菌体+阴道上皮细胞对加德纳菌增殖的抑制效应,分析乳杆菌抑制加德纳菌的可能机制.结果 对阴道加德纳菌增殖活性有显著抑制作用的乳杆菌菌株有5个(卷曲乳杆菌、加氏乳杆菌、詹氏乳杆菌、发酵乳杆菌和德氏乳杆菌)(P＜0.05),其中3个菌株(卷曲乳杆菌、加氏乳杆菌和詹氏乳杆菌)能够明显干扰加德纳菌对上皮细胞的黏附过程(P＜0.05).菌体、上皮细胞、上清、菌液的抑菌效果逐步递增,而菌体和上皮细胞同时存在时,其抑菌效果明显超过菌液.结论 健康女性阴道乳杆菌菌株可以抑制细菌性阴道病患者阴道加德纳菌的增殖活性,能干扰加德纳菌对阴道上皮细胞的黏附过程.乳杆菌是通过多种机制完成对加德纳菌的抑制效应的.

目的 探讨依维莫司单独及联合伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑和氟康唑对耐药念珠菌及耳念珠菌的体外作用.方法 于2022年3-6月,采用美国临床实验室标准研究所M27-A3微量稀释法和微量肉汤稀释棋盘技术研究依维莫司联合伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑及氟康唑对耐药念珠菌及耳念珠菌的体外治疗作用.通过测定最低抑菌浓度(MIC)和部分抑菌浓度指数来确定协同效应.结果 依维莫司单药治疗22株耐药念珠菌及10株耳念珠菌的MIC为0.250～4.000 mg/L、1.000 mg/L,伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、氟康唑单独使用对22株耐药念珠菌MIC范围分别为0.125～4.000 mg/L、<0.125～2.000 mg/L、0.063～2.000 mg/L、1.000～64.000 mg/L,伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑单独使用对10株耳念珠菌MIC范围分别为0.500～2.000 mg/L、0.125～8.000 mg/L、0.125～1.000 mg/L.当依维莫司与伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、氟康唑联合使用时,对耐药念珠菌的协同作用分别是9株(40.90%)、4株(18.18%)、8株(36.36%)、9株(40.90%).当依维莫司联合唑类作用于耳念珠菌,未发现任何拮抗作用.结论 依维莫司单独使用对耐药念珠菌及耳念珠菌菌株具有明显抗真菌作用,同时依维莫司联合唑类作用于耐药念珠菌时,表现出良好的协同作用,且没有拮抗作用,其进一步提升其抗耐药念珠及耳念珠菌的作用.

目的 评价微米氢化镁(MgH2)颗粒对牙周炎致病菌具核梭杆菌的体外抗菌作用,研究可能的抗菌机制.方法 通过扫描电镜(SEM)和X射线衍射仪(XRD)对实验材料MgH2颗粒的尺寸大小、表面形貌和晶相结构进行表征.使用电子顺磁共振技术(EPR)研究其释放行为,同时使用菌落计数实验(CFU)、溴化四甲基偶氮唑盐法(MTT)研究了MgH2颗粒对具核梭杆菌的抗菌效应.结果 MgH2颗粒呈现为尺寸不均一的微米级球状颗粒,平均尺寸为10.52 μm.XRD谱图具有属于MgH2的(110)、(101)、(200)及(211)特征面的衍射信号.在菌落计数实验(CFU)实验中,当材料浓度达到1.5 mg/mL和2 mg/mL时有显著的抑菌效果,抗菌率分别为45.69%和79.24%.在MTT实验中,具核梭杆菌的活性随着MgH2颗粒浓度的增加而逐渐降低,当MgH2颗粒浓度达到2 mg/mL时,其活性接近于零.结论 MgH2颗粒对具核梭杆菌有着良好的抑菌效果,在临床应用方面具有良好的前景.

为明确鉴定白及块茎腐烂病(根腐病)的病原菌,并筛选能够抑制病原菌的中药材提取物.该研究利用常规组织分离法对病原菌进行分离,通过形态学和分子生物学技术对致病菌株进行鉴定,同时观察了7种中药材提取物对病原菌的抑菌效果.结果表明:(1)从感病叶片、叶鞘及块茎中共分离得到 14 株真菌和4 株细菌,病原菌室内和室外回接表明菌株 GF-1 致病症状与田间一致,致病率均达到 100%.(2)经形态学鉴定,菌株GF-1 为附球菌属(Epicoccum)病原菌,菌落白色绒絮状,圆形;菌丝匍匐向外、向上生长,气生,无色,有隔膜,有分枝,具有分生孢子和厚垣孢子.(3)菌株GF-1 的ITS序列(全长522 bp)与GenBank中已登录的甘蔗的高粱附球菌(E.sorghinum,MN493119.1)序列一致性最高,达 99.62%,与已报道的白及叶斑病致病菌高粱附球菌(E.sorghinum,MF948994.1)的一致性为 98.88%.(4)培养基中含有 0.1～0.2 g·mL-1的青钱柳等 7 种中药材提取物,能够完全抑制GF-1 菌落的生长;当培养基中含有 0.05 g·mL-1的提取物时,肉桂和丁香提取物仍然能够完全抑制菌落的生长.综上认为,引起白及根腐病的致病菌为附球菌属高粱附球菌(E.sorghinum),培养基中分别含有 0.1～0.2 g·mL-1的青钱柳、白及、厚朴、八角、肉桂、蛇床子和丁香 7 种中药材提取物且均能完全抑制致病菌的生长.该研究结果为白及根腐病的防治提供了理论指导.