目的:制备一种针对整合素αM(CD11b)受体的预定位分子探针 68Ga-1，4，7-三氮杂环壬烷-1，4，7-三乙酸-甘氨酸-精氨酸-谷氨酸-精氨酸-谷氨酸-十一聚乙二醇-1，2，4，5-四嗪/CD11b抗体片段-反式-环辛烯[ 68Ga-NOTA-Polypeptide-PEG 11-Tz/anti-CD11b-F(ab′) 2-TCO]，并通过microPET显像探讨其作为CD11b受体靶向分子探针的可行性。 方法:采用免疫荧光法检测小鼠巨噬细胞RAW264.7膜表面CD11b受体的表达情况。将CD11b抗体与TCO连接，并通过酶切法得到anti-CD11b-F(ab′) 2-TCO。对配体NOTA-Polypeptide-PEG 11-Tz进行 68Ga标记，检测标记率以及放化纯。进行预定位细胞结合实验，建立CT26结肠癌荷瘤裸鼠模型，进行预定位生物分布以及microPET显像实验。用免疫组织化学检查验证肿瘤微环境中CD11b +细胞的浸润情况。用单因素方差分析比较组间差异。 结果:免疫荧光检测结果显示RAW264.7细胞膜表面高度表达CD11b受体。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)验证成功合成anti-CD11b-F(ab′) 2-TCO。放射性配体 68Ga-NOTA-Polypeptide-PEG 11-Tz标记率约为94.6%，比活度为7.0~7.4 MBq/μg，放化纯大于95%。预定位细胞结合实验证实该分子探针与CD11b受体有较好的靶向性。生物分布及显像结果示，在预定位4、12以及24 h时间间隔下，模型鼠肾放射性摄取较高，表明分子探针通过肾代谢；肿瘤/肌肉比值为9.23±1.45、12.53±1.36和10.74±1.11( F＝848.8， P<0.05)；在预定位12 h注射放射性配体后1 h显像，肿瘤与非靶器官对比度最佳：肿瘤标准摄取值(SUV)为0.67±0.12，肌肉SUV为0.09±0.04。免疫组织化学结果示，CT26结肠癌微环境中浸润了大量CD11b +细胞。 结论:成功合成预定位分子探针 68Ga-NOTA-Polypeptide-PEG 11-Tz/anti-CD11b-F(ab′) 2-TCO，该标记物对CD11b阳性结肠癌具有较强的靶向能力，有望用于靶向CD11b受体的体内示踪。

乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤。 99Tc m-联胼尼克酰胺-3聚乙二醇-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸环肽二聚体（ 99Tc m-3PRGD 2）是近年来人工合成的可用于乳腺癌分子显像的一种SPECT示踪剂。 99Tc m-3PRGD 2 SPECT/CT可用于早期诊断乳腺癌并进行准确的分期及分子分型，据此进行诊疗方案的选择，有助于降低患者的病死率，并提高患者的生活质量。笔者就 99Tc m-3PRGD 2 SPECT/CT在乳腺癌诊疗过程中的应用进展进行综述，并作出展望。

目的:通过 99Tc m-联肼尼克酰胺-3聚乙二醇-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸环肽二聚体(3PRGD 2)显像在体观察类风湿关节炎(RA)大鼠蒙药森登-4汤治疗前后放射性分布变化，并探究其治疗机制。 方法:取200只雌性SD大鼠(6~7周龄)，分为胶原诱导性关节炎(CIA)组(176只)和空白对照组(24只)。将CIA模型大鼠通过简单随机抽样法分为森登-4汤治疗组(24只)、依那西普治疗组(24只)和阴性对照组(24只)。造模及治疗前后均行 99Tc m-3PRGD 2显像，分析各组病变关节与纵隔的靶/非靶(T/NT)放射性比值，分析相应血清学、病理及免疫组织化学指标。采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis秩和检验分析数据。相关性分析采用Pearson或Spearman相关分析。 结果:CIA组成功造模95只，成模率为54%(95/176)。治疗后，阴性对照组、森登-4汤治疗组、依那西普治疗组T/NT比值差异有统计学意义(0.766±0.144、0.260±0.094和0.238±0.099； F＝163.00， P<0.001)，而2个药物治疗组间差异无统计学意义( P>0.05)。药物治疗后，血清血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、整合素α vβ 3表达水平均显著低于阴性对照组( F值：49.43~92.36，均 P<0.001)；关节病理滑膜细胞增生指数也明显低于阴性对照组( H＝34.25， P<0.001)；滑膜组织中VEGF、TNF-α、整合素α vβ 3、CD31、CD34表达水平也显著低于阴性对照组( H值：13.51~26.84，均 P<0.001)，而2组药物治疗组间上述指标差异均无统计学意义(均 P>0.05)。治疗后，森登-4汤治疗组( r值：0.56~0.59， rs值：0.49~0.69)、依那西普治疗组( r值：0.50~0.55， rs值：0.46~0.70)和阴性对照组( r值：0.55~0.80， rs值：0.58~0.86)的T/NT比值与上述各指标均呈正相关( P<0.001或 P<0.05)。 结论:通过 99Tc m-3PRGD 2显像与分子病理验证，蒙药森登-4汤可通过下调VEGF等血管因子抑制新生血管形成，延缓病情进展、改善临床症状。

目的:探究整合素α7(ITGA7)在骨肉瘤中的表达，及其在骨肉瘤肺转移过程中的作用及其机制。方法:利用基因表达数据库(GEO)数据库(52例骨肉瘤组织和12例对照)和细胞系(HOS细胞和hFOB 1.19细胞)明确骨肉瘤中ITGA7的mRNA和蛋白表达水平。采用慢病毒转染技术对HOS细胞中ITGA7进行敲减和过表达后，细胞球漂浮培养条件下比较6组独立样本的HOS细胞球生长。采用RNA-seq技术检测3组独立样本的HOS细胞过表达ITGA7后下游基因变化。两组间连续变量比较采用非配对的 t检验，3组间比较采用单因素方差分析。 结果:GEO数据库结果显示骨肉瘤组织中ITGA7的mRNA水平较对照组织显著降低(7.45±0.10比7.61±0.04， t＝9.64， P<0.01)，骨肉瘤细胞系中ITGA7在mRNA水平(0.59±0.16比1.02±0.25， t＝3.59， P<0.01)和蛋白水平(1.32±0.28比2.34±0.40， t＝5.03， P<0.01)均表达下调。敲减ITGA7后骨肉瘤细胞球直径显著大于对照组[(310.21±32.62) μm比(230.84±21.66) μm， t＝4.96， P<0.01]，而过表达ITGA7后细胞球直径显著小于对照组[(116.03±12.91) μm比(230.84±21.66) μm， t＝11.12， P<0.01]。RNA-seq结果显示过表达ITGA7组391个基因表达显著上调，293个基因显著下调，其中37个失巢凋亡相关基因表达上调，12个失巢凋亡相关基因表达下调。进一步通过定量聚合酶链反应(qPCR)结果证实过表达ITGA7组B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)(1.74±0.30比0.92±0.15， t＝5.98， P<0.01)和Bak1(3.52±0.57比1.06±0.21， t＝9.82， P<0.01)的表达水平显著上调，而B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)(0.43±0.22比1.09±0.24， t＝4.85， P<0.01)的表达水平显著下调。 结论:ITGA7在骨肉瘤中表达下调，过表达ITGA7促进骨肉瘤失巢凋亡。骨肉瘤中低水平的ITGA7对于维持其失巢凋亡抵抗能力具有重要作用，并可能在骨肉瘤肺转移过程中发挥重要作用。

目的:评价 99Tc m-甲苯磺酸钠烟酰胺腙聚乙二醇双环精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽（简称 99Tc m-3PRGD 2）SPECT/CT显像对不摄碘进展性放射性碘难治性分化型甲状腺癌（RAIR-DTC）的诊断效能。 方法:前瞻性选择2019年10月至2022年5月在福建省立医院行 99Tc m-3PRGD 2 SPECT/CT检查的59例RAIR-DTC患者，其中男性17例、女性42例，中位年龄为51（28，80）岁。所有患者均行 99Tc m-3PRGD 2 SPECT/CT显像，其中22例接受酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗，37例接受促甲状腺激素（TSH）抑制治疗（13例在2周内接受了 18F-FDG PET/CT显像）。取每例患者最大病灶的最大标准化摄取值（SUV max）进行分析。采用ROC曲线评估 99Tc m-3PRGD 2 SPECT/CT显像的诊断效能并计算 99Tc m-3PRGD 2 SPECT/CT显像检出RAIR-DTC病灶的SUV max临界值；采用Pearson相关分析法分析病灶长径（TL）、刺激性甲状腺球蛋白（sTg）水平与SUV max的相关性；采用配对 t检验比较分析RAIR-DTC患者TKI治疗前后sTg水平、SUV max、TL间的关系；采用Spearman分析法分析 99Tc m-3PRGD 2 SPECT/CT显像与 18F-FDG PET/CT显像在检出阳性病灶的SUV max之间的关系。 结果:59例RAIR-DTC患者的276个病灶被纳入分析，其中TKI治疗前后对比病灶59个。 99Tc m-3PRGD 2 SPECT/CT显像对RAIR-DTC病灶诊断的灵敏度和特异度分别为94.9% （95% CI：90.7%~97.3%）和88.7%（95% CI：77.5%~95.0%）。ROC曲线结果显示， 99Tc m-3PRGD 2 SPECT/CT显像检出RAIR-DTC病灶的SUV max临界值为2.70。Pearson相关分析结果显示，靶病灶的SUV max与sTg水平、TL均呈正相关（ r=0.811、0.635，均 P=0.001）。22例患者经TKI治疗后，RAIR-DTC病灶的SUV max显著降低（ t=11.027， P=0.001）。Spearman相关分析结果显示， 99Tc m-3PRGD 2 SPECT/CT显像与 18F-FDG PET/CT显像在检出阳性病灶的SUV max间呈正相关（ r=0.560， P=0.001），且ROC曲线分析结果显示， 99Tc m-3PRGD 2 SPECT/CT显像对RAIR-DTC病灶的诊断效能与 18F-FDG PET/CT显像的差异无统计学意义（ Z=0.312， P=0.753）。 结论:99Tc m-3PRGD 2 SPECT/CT显像对不摄碘进展性RAIR-DTC的诊断具有较高的灵敏度和特异度，与 18F-FDG PET/CT显像相似。

目的:探讨整合素α6(ITGA6)蛋白、基因和miR-4484与胃癌病理分期的关系。方法:收集2017年6—9月于四川大学华西医院行手术治疗(未经辅助治疗)的30例原发性胃癌患者的胃癌及癌旁(距离瘤体>5 cm)正常胃黏膜组织。采用实时荧光定量PCR检测miR-4484和ITGΑ6的表达水平，采用Western blot法检测ITGA6蛋白的表达水平，采用双荧光素酶报告基因验证ITGΑ6与miR-4484的关系，采用Spearman相关分析明确miR-4484与ITGA6在胃癌组织中表达水平的相关性。结果:胃癌组织中ITGA6的表达水平(32.30±13.47)高于正常癌旁组织(24.55±10.25， P＝0.015)，受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.660，其诊断敏感度为43.3%，特异度为96.7%。胃癌组织中miR-4484的表达水平(4.11±2.87)低于正常癌旁组织(5.75±2.80， P＝0.029)，ROC曲线下面积为0.690，其敏感度为30.0%，特异度为86.7%。胃癌组织中miR-4484表达水平与ITGA6呈负相关( r＝-0.621， P<0.001)。ITGA6在胃癌组织中的表达水平(0.65±0.19)高于正常癌旁组织(0.26±0.12， P<0.001)。与ITGΑ6 3′UTR野生型+miR-NC组比较，ITGΑ6 3′UTR野生型+miRNA mimics组细胞荧光素酶活性降低(分别为50.69±5.10和34.00±1.19， P<0.001)，ITGΑ6 3′UTR野生型+ASO miR-4484组细胞荧光素酶活性高于ITGΑ6 3′UTR野生型+miR-NC组(分别为82.44±6.37和50.69±5.10， P<0.001)，ITGA6为miR-4484的直接靶基因。T1、T2、T3、T4(4a和4b)期胃癌组织中miR-4484的表达水平分别为9.98±2.24、5.28±2.03、2.92±2.04和4.11±2.87，差异有统计学意义( P<0.001)。N0、N1、N2、N3期胃癌组织中ITGA6的表达水平分别为29.55±8.32、21.71±3.75、24.60±8.79和40.69±15.83，差异有统计学意义( P＝0.022)。N0、N1、N2、N3期胃癌组织中miR-4484的表达水平分别为5.01±3.52、5.48±2.76、5.88±1.83和2.30±1.56，差异有统计学意义( P＝0.032)。M0、M1期胃癌组织中ITGA6的表达水平分别为26.28±7.66和52.08±8.12，差异有统计学意义( P<0.001)。M0、M1期胃癌组织中miR-4484的表达水平分别为4.95±2.74和1.34±0.80，差异有统计学意义( P<0.001)。 结论:ITGΑ6在胃癌组织中呈高表达，miR-4484在胃癌组织中呈低表达，且其表达水平与胃癌的临床病理特征有关。ITGΑ6为miR-4484的直接靶基因，miR-4484可能通过调控ITGΑ6发挥抑制胃癌侵袭转移的作用，miR-4484和ITGΑ6可能作为新的胃癌预后标志物及潜在的治疗靶点。

目的:构建靶向整合素α vβ 3诊疗一体化放射性分子 177Lu－伊文思蓝(EB)－精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸(RGD)并探讨其用于非小细胞肺癌(NSCLC)－患者来源异种移植瘤(PDX)模型显像及治疗的效果。 方法:将RGD肽与白蛋白结合基团EB相连接，构建特异性靶向整合素α vβ 3的EB－RGD，并经螯合剂1，4，7，10－四氮杂环十二烷－1，4，7，10－四乙酸(DOTA)偶联完成靶向分子 177Lu标记。构建68只NSCLC－PDX模型鼠，取28只注射 177Lu－EB－RGD或 177Lu－RGD行microSPECT显像和生物分布研究；另行 177Lu－EB－RGD放射靶向治疗实验：取PDX模型鼠40只，分为生理盐水组(A组)、18.5 MBq 177Lu－RGD组(B组)、18.5 MBq 177Lu－EB－RGD组(C组)、29.6 MBq 177Lu－EB－RGD组(D组)，每组10只，观察治疗后50 d内模型鼠肿瘤体积变化情况。2组间比较采用两独立样本 t检验。 结果:177Lu－EB－RGD的标记率在95%以上，比活度为(55±14) GBq/μmol，其体外稳定性好，放化纯大于95%。注射 177Lu－EB－RGD后4～96 h，NSCLC－PDX模型鼠肿瘤清晰可见，注射后4、24、72、96 h的肿瘤/肌肉摄取比值(T/M)分别为7.34±0.67、14.63±3.82、15.69±3.58及15.99±5.42；生物分布结果示 177Lu－EB－RGD摄取[每克组织百分注射剂量率(%ID/g)]与SPECT显像结果一致，且4 h时的 177Lu－EB－RGD在肿瘤中的摄取明显高于 177Lu－RGD[(10.15±1.17)与(3.30±1.47) %ID/g； t＝18.60， P<0.05]。 177Lu－EB－RGD治疗后，A组与B组模型鼠的肿瘤体积均快速增加；而C组与D组肿瘤体积呈持续降低趋势，在第28天时C组与D组肿瘤均已肉眼不可见，且在随后的监测时间内未见复发。 结论:177Lu－EB－RGD能靶向α vβ 3阳性的NSCLC－PDX模型，显像效果好，对肿瘤生长有明显抑制作用，有望为晚期靶向治疗耐药或无效的肺癌患者提供新的治疗策略。

目的:探索缺氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor 1α，HIF1α）启动N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine，m6A）去甲基化酶ALKBH5改善子宫内膜容受性分子标志物整合素蛋白αν（integrin αν，ITGAV）表达的内在机制。方法:利用人子宫内膜癌Ishikawa细胞，低氧以及干扰HIF1α条件下实时荧光定量PCR（real time quantity PCR，RT-PCR）或Western blotting检测ALKBH5的表达；过表达或干扰ALKBH5表达后，RT-PCR或Western blotting检测对 ITGAV基因和蛋白表达的影响；荧光素酶报告基因系统分析miR-136-5p靶向 ITGAV mRNA表达；RNA pull-down分析及m6A甲基化检测ALKBH5与miR-136-5p竞争性结合 ITGAV mRNA上甲基化位点序列。 结果:低氧条件下HIF1α时间依赖性促进ALKBH5蛋白在Ishikawa细胞中的表达。过表达ALKBH5后，ITGAV的表达水平升高（ P<0.001），Ishikawa细胞增殖能力增强（ P<0.001）； ALKBH5敲除后，ITGAV的表达水平降低（ P<0.001），Ishikawa细胞的增殖能力下降（ P=0.019）。miR-136-5p靶向调节 ITGAV mRNA后， ITGAV mRNA（ P=0.007）和蛋白表达水平（ P=0.015）下调。miR-136-5p靶向调节ITGAV的序列与ALKBH5所识别的甲基化位点所在序列重叠，两者在调控 ITGAV mRNA上存在竞争性。 结论:HIF1α通过调控ALKBH5，竞争性地结合miR-136-5p所靶向的 ITGAV mRNA上特定序列，精细化调节ITGAV的表达，改善子宫内膜容受性。

目的 探讨香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对破骨细胞体积及整合素αvβ3 基因表达的影响.方法 首先制作CSE溶液,实验采用 7周龄C57BL/6J小鼠骨髓单个核细胞加入M-CSF和RANKL诱导生成破骨细胞,将浓度为 5%的CSE加入实验组破骨细胞作用 3 d,对照组不加入CSE.通过Trap染色识别对照组和实验组破骨细胞并于光镜下采图;通过甲苯胺蓝染色识别两组破骨细胞在骨片上形成的骨陷窝并于光镜下采图,均用NIH imageJ计算数量及面积.用实时荧光定量聚合酶链反应,以GAPDH作为内参,最后通过2-ΔΔCT计算,以检测Trap、CTR以及整合素αvβ3 mRNA表达水平.通过Western blot检测整合素αvβ3蛋白表达.结果 破骨细胞表面积及细胞核数量的计量表明,实验组诱导形成的破骨细胞显著大于对照组(P<0.01).实验组骨片上吸收陷窝数量及面积明显多于对照组(P<0.05),CSE处理组的TRAP mRNA水平为 1.16±0.13,明显高于对照组(P<0.05),CTRmRNA水平为 0.38±0.04,明显低于对照组(P<0.01).CSE处理组的整合素αvβ3 mRNA水平为 1.75±0.05,显著高于对照组(P<0.01),蛋白质印迹分析结果也明显高于对照组(P<0.05).结论 CSE能显著增加破骨细胞的体积并上调整合素αvβ3的基因表达,并可能对骨吸收有促进作用.

目的 基于基因表达综合(GEO)数据库,采用生物信息学方法分析缺血性卒中的基因表达情况,结合缺氧相关基因,解析缺氧相关差异基因(HRDEGs)表达特征,筛选出关键基因,为深入了解缺血性卒中提供重要支撑.方法 从GEO数据库下载GSE16561和GSE58294两个数据集,采用Python软件进行数据合并,利用Combat方法消除批次效应,同时保留疾病分组特征.对消除批次效应前后的数据采用主成分分析法进行降维处理,并对缺血性卒中组和正常对照组人群进行组内相关系数(ICC)检测.对合并及批次效应消除后数据集进行基因集富集分析(GSEA)及单样本GSEA,以名义P值(NOM P-val)＜0.05且假阳性率P值(FDR P-val)＜0.25作为标准,筛选出具有显著差异的基因集.利用R软件对GSE16561和GSE58294数据集合并及批次效应消除后的缺血性卒中患者和正常对照者之间的差异表达基因进行鉴定[以log2基因表达差异倍数(FC)的绝对值≥0.58和矫正P值(Padj)＜0.05作为筛选标准],并与在美国国立生物技术信息中心(NCBI)中获取的缺氧相关基因进行交集,得到HRDEGs.对HRDEGs进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,使用STRING数据库构建差异表达基因的蛋白质互相作用网络,利用Cytoscape3.8软件筛选排名前10位的关键基因.结果ICC分析结果显示,消除批次效应后的GSE16561和GSE58294数据集中缺血性卒中和正常对照者的ICC分别为0.94和0.98,一致性极好.GSEA结果显示,对GSE16561和GSE58294合并及批次效应消除后的新数据集中,34个基因集在缺血性卒中样本中显著富集,筛选出表达差异基因404个(均Padj＜0.05),其中高表达基因354个,低表达基因50个.与缺氧相关基因进行交集,获得64个HRDEGs.GO富集分析表明,HRDEGs主要在囊泡腔、细胞质囊泡腔、分泌颗粒腔和特殊颗粒中显著富集,具有酰胺结合、肽结合、磷脂结合和酶抑制活性等分子功能,主要参与了细胞因子产生的正向调节、炎性反应的调节、对细菌来源分子的反应和对脂多糖的反应等生物学过程.KEGG富集分析表明,HRDEGs主要在血脂与动脉粥样硬化、沙门氏菌感染、中性粒细胞胞外陷阱形成、核苷酸结合寡聚化结构域样受体信号通路、癌症中的蛋白聚糖、结核病和坏死性凋亡等通路上存在富集.基于蛋白质互相作用网络,最终筛选出了 10个关键基因,分别为ARG1(精氨酸酶1)、CASP1(含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1)、IL-1R1(白细胞介素1受体1型)、ITGAM(整合素亚基αM)、MMP9(基质金属蛋白酶9)、PTGS2(前列腺素内过氧化物合酶2)、STAT3(信号传感器和转录激活剂3)、TLR2(Toll样受体2)、TLR4、TLR8..结论 通过生物信息学挖掘,本研究获得了 10个缺血性卒中与缺氧相关的关键基因,可能为后续研究工作及诊断治疗提供了潜在靶点.