目的:通过胚胎时差成像技术（TLT）结合人工智能（AI）探索体外胚胎发育曲线（EDM）中的卵裂球计数曲线“跳变值”与胚胎形态学特征的相关性，并探讨其在体外受精（IVF）胚胎评估中应用的可行性。方法:本研究为自主研发的AI胚胎评估软件的诊断性试验，即临床数据AI再评估，为回顾性研究。收集2020年12月至2021年12月于重庆医科大学附属妇女儿童医院生殖医学中心行IVF的1 226例患者共6 545个胚胎，其中2 869个胚胎进行囊胚培养。所有胚胎通过TLT培养并进行观察，由TLT记录软件Embryo Viewer依据胚胎发育动力学绘制EDM。本课题组自主研发的AI胚胎评估软件对胚胎发育过程中的卵裂球数目进行实时识别、记录，并与EDM进行比较，分析由卵裂球计数变化而形成的跳变值与胚胎结局的相关性。采用Spearman相关性及logistic回归分析跳变值与胚胎形态学评估、胚胎着床及活产的相关性，使用受试者工作特征（ROC）曲线评估各指标对胚胎着床、活产的预测价值。结果:Spearman相关性分析显示，受精卵受精后72 h卵裂球计数曲线提取的总跳变值与卵裂模式、囊胚形成、培养至第3天胚胎（D3胚胎）的形态学评级、D3胚胎的细胞均一度、D3胚胎的细胞碎片率均呈显著负相关（ β值分别为-0.268、-0.116、-0.213、-0.159、-0.222； P均<0.001），与D3胚胎的细胞数呈显著正相关（ β=0.034； P<0.001）。多因素logistic回归分析显示，胚胎总跳变值排序与囊胚形成（ OR=0.97，95% CI为0.93~0.99； P=0.034）、胚胎着床（ OR=0.96，95% CI为0.93~0.98； P=0.044）呈显著负相关；ROC曲线分析显示，胚胎总跳变值排序预测胚胎着床能力与传统胚胎形态学评估方法相近［其曲线下面积（AUC）分别为0.679、0.620］。多因素logistic回归分析显示，活产与患者年龄（ OR=0.91，95% CI为0.88~0.93； P<0.001）、D3胚胎形态学评级（ OR=0.77，95% CI为0.59~0.99； P=0.045）及胚胎总跳变值排序（ OR=0.98，95% CI为0.96~0.99； P=0.038）呈显著负相关，而与获卵数（ OR=1.08，95% CI为1.05~1.11； P<0.001）及移植日子宫内膜厚度（ OR=1.09，95% CI为1.06~1.12； P<0.001）呈显著正相关；ROC曲线分析显示，纳入建模的以上多个因素预测活产的AUC值为0.666。 结论:跳变值及其排序是对体外胚胎卵裂期发育的系统量化，其与胚胎发育质量及临床结局相关，可能是胚胎体外评估及选择的有益补充。

目的:建立一个能够对卵胞质内单精子显微注射（ICSI）卵子受精失败进行早期判断进而实施早期补救性人工激活的技术体系，并探讨其激活效率及应用价值。方法:首先回顾性分析2017年1月至2018年3月期间广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心150个采用时差胚胎动态监测系统（Time-lapse）系统培养的ICSI周期第二极体（Pb2）释放时间分布及其与受精及胚胎发育结局的关系，探讨Pb2释放作为ICSI受精失败早期判断指标的可行性。其次采用随机对照试验，收集2018年3月至2019年6月期间93个ICSI助孕周期的225个受精失败卵子，根据人工激活方式不同分为未激活组（NAOA组）、早期激活组（RAOA组）、晚期激活组（LAOA组），同时将其余ICSI注射卵子作为对照组，比较4组受精及胚胎发育参数，探讨ICSI受精失败早期补救性人工激活的效率和应用价值。结果:Time-lapse监测ICSI注射后卵子有Pb2释放组的受精率（99.91%）、双原核（2PN）受精率（97.76%）显著高于无Pb2释放组（0.03%、0.00%）且差异均具有统计学意义（ P均<0.001）；ICSI注射后卵子Pb2释放时间为（3.04±1.45） h，Pb2释放时间分布及占比分别为0~3 h（58.58%）、3~5 h（36.29%）、5~8 h（3.92%）、>8 h（1.21%）；NAOA组Pb2释放率、受精率、2PN受精率均为0%，LAOA组2PN受精率（36.00%）、第3日（D3）优质胚胎率（8.00%）、第5日（D5）囊胚转化率（0%）、D5优质囊胚转化率（0%）均显著低于RAOA组（60.00%、44.19%、51.16%、25.58%）且差异均有统计学意义（ P=0.005， P=0.002， P<0.001， P=0.005），同时均显著低于对照组（97.63%、48.62%、63.23%、37.94%）且差异均有统计学意义（ P均<0.001）；RAOA组Pb2释放率（84.00%）、受精率（81.33%）、2PN受精率（60.00%）、2PN卵裂率（95.56%）均显著低于对照组（100.00%、99.68%、97.63%、99.51%）且差异均具有统计学意义（ P<0.001， P<0.001， P<0.001， P=0.04），但D3优质胚胎率、D5囊胚转化率、D5优质囊胚转化率2组间差异均无统计学意义（ P均>0.05）。 结论:Time-lapse监测Pb2释放可以作为早期判断ICSI卵子受精失败的指标，在ICSI注射后5 h对受精失败卵子进行早期补救性人工激活可以获得正常受精和理想的胚胎发育结局。

准确评估胚胎发育对于辅助生殖技术(ART)成功至关重要.传统方法多基于主观的胚胎形态学评估,缺乏客观性和实时性.时差成像技术(TLT)提供更稳定的培养环境,实现胚胎发育的动态监测,分析和建模不同发育时期的动态学参数,用于预测胚胎的植入潜力.然而,动态学参数通常需要人工标注,引入主观干扰,数据模型分析能力差异较大,与实际情况相差甚远,尤其在染色体整倍性分析方面表现较弱.随着人工智能(AI)的不断发展,TLT与AI的结合提供了减少TLT人工标注时间、提高胚胎植入率和染色体整倍性预测等方面的可能性.旨在探讨TLT结合AI在形态学和动态学参数方面对胚胎植入潜力和染色体整倍性的应用.

目的 探讨时差培养分析系统在选择高发育潜能胚胎中的应用价值.方法 选取2020年10月—2021年10月在南方医科大学附属深圳市妇幼保健院生殖中心接受体外受精/卵泡浆内单精子注射(IVF/ICSI)助孕治疗的不孕症患者进行回顾性分析,采用时差培养技术培养,来源为双原核(2PN)的胚胎,共113枚胚胎,69个移植周期,根据着床情况分为完全着床组(58枚胚胎)和完全未着床组(55枚胚胎),比较两组患者胚胎发育动力学参数.结果 完全着床组胚胎的双原核出现时间(PNA)、双原核消失时间(PND)、2细胞(t2)、3细胞(t3)、4细胞(t4)、5细胞(t5)、8细胞(t8)及第2次细胞分裂周期(cc2)发育动力学参数[(7.44±6.02)h、(24.26±3.13)h、(26.62±3.04)h、(38.19±3.81)h、(38.88±4.18)h、(51.75±4.97)h、(55.51±5.36)h 及(11.57±1.65)h]均快于完全未着床组[(6.99±1.37)h、(25.42±2.54)h、(28.16± 2.80)h、(39.37±3.54)h、(40.91±3.33)h、(54.95±5.07)h、(59.85±5.64)h 及(11.21±2.51)h]胚胎发育速度,但差异均无统计学意义(t=1.554、1.676、0.248、0.107、1.663、0.100、0.910及2.517,均P＞0.05);完全着床组胚胎的第3次细胞分裂周期(cc3)、第2次细胞分裂的同步性(s2)、第3次细胞分裂的同步性(s3)发育动力学参数[(13.04±2.46)h、(0.69±1.21)h 及(3.80±2.37)h]均快于完全未着床组[(14.04±4.05)h、(1.57±1.88)h 及(5.70±3.91)h]胚胎发育速度,差异均有统计学意义(t=6.672、13.641及7.494,均P＜0.05).结论 胚胎发育早期卵裂周期同步性好的胚胎具有更好的发育潜能,可为进行选择性单胚胎移植提供基础.

目的 观察时差监测培养系统在人未成熟卵母细胞体外成熟(IVM)中的应用,并探讨核成熟后最佳的授精时机. 方法 收集我生殖中心促排卵周期中捐赠用于科研的240枚GV期卵母细胞,应用时差监测培养系统联合IVM技术,观察卵母细胞核成熟的动力学参数,包括GV破裂时间、第一极体排出时间、MⅠ持续和MⅡ静止的时间段.经过培养,对其中160枚卵母细胞根据第一极体排出后不同ICSI授精时间分为3组:＜3 h组、3～6h组和＞6 h组,比较各组的受精情况及胚胎发育情况. 结果 240枚GV期卵母细胞体外成熟率为73.3％,平均GV破裂时间为实施IVM后的(7.0±0.3)h,MI持续平均时间为(14.9±0.2)h,第一极体排出平均时间为(22.7±0.5)h.不同授精时间3组的正常受精率、卵裂率和可利用胚胎率比较均无显著性差异(P＞0.05). 结论 时差监测培养系统为未成熟卵母细胞IVM培养系统优化提供了新思路;第一极体排出后的3～6 h实时ICSI可用胚胎率有增高的趋势,但其具体影响及最佳授精时间仍有待进一步研究探讨.

人类辅助生殖技术(ART)包括人工授精( AI)和体外受精－胚胎移植( IVF-ET)及其衍生技术.近年不孕不育患者比例有升高趋势,此外因二胎政策的开放,有生育需求的高龄患者比例有所增加,ART技术现已成为治疗不孕不育患者的重要方式.随着科技的发展,许多衍生技术的应用,包括卵母细胞的体外成熟培养、时差成像系统、精子微量冷冻、代谢组学评估胚胎发育潜能等,弥补了ART技术的不足,使ART技术更完善,更准确地满足患者的需求.但是,新技术的应用仍然存在一些问题,在临床实施过程中,需要不断改进、更新和完善.

近年来兴起的时差成像技术在为胚胎发育提供稳定培养环境的同时可通过拍摄系统全程记录植入前胚胎的动态发育过程,从而获得更加全面准确的胚胎发育信息.这些信息能够显示人类胚胎行为学及动力学指标,建立胚胎评估模型,能有效地克服形态学评估主观性大、所提供信息有限的弊端,成为胚胎评估更为有利的手段.本文总结了时差成像技术建立的参数与模型,及其在胚胎评估中的临床应用.

目的 观察体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中2、4细胞卵裂球多核细胞的发育情况,并观察其胚胎移植后的妊娠结局.方法 选取行IVF-ET的患者96例,人工受精后时差成像技术观察胚胎卵裂球发育情况,将其分为均无多核胚胎(A组)、2细胞卵裂球多核者(2细胞一个卵裂球多核及4细胞无多核、2细胞均有多核及4细胞无多核胚胎,B组)、4细胞卵裂球多核者(2细胞一个卵裂球多核及4细胞至少一个卵裂球多核、2细胞均有多核及4细胞至少一个卵裂球多核胚胎,C组)、2细胞无多核且4细胞至少一个卵裂球多核胚胎者(D组).结果 A组培养第3天优质胚胎率和培养第5、6天可利用囊胚率均显著高于B、C、D组(P均＜0.05),B组培养第3天优质胚胎率与培养第5、6天可利用囊胚率均优于C组(P均＜0.05).在妊娠结局方面,A组行72个周期胚胎移植,种植率58.33％ (42/72),流产率7.14％ (3/42),活产率54.17％ (39/72);B组共行8个周期胚胎移植,其中2细胞一个卵裂球多核及4细胞无多核胚胎4个,3例患者种植成功,0例流产,3例均为活产;2细胞均有多核及4细胞无多核胚胎4个,4例患者种植成功,1例流产,3例活产.结论 2、4细胞卵裂球多核均可影响胚胎发育及移植后妊娠结局,其中4细胞卵裂球多核对胚胎发育影响更明显.

目的 比较时差成像(time-lapse,TL)系统培养与常规培养卵裂期胚胎移植的妊娠和新生儿出生结局,评价TL技术的安全性.方法 回顾性分析2016年1月至2019年3月在本中心行体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕治疗的1999周期临床资料,根据胚胎培养方式,分为time-lapse组(n=871)和常规组(n=1128),比较两组的妊娠和新生儿结局.结果 两组移植日内膜、异位妊娠率、早期流产率、晚期流产率、多胎率、早产率、不良新生儿结局、低体质量儿、极低体质量儿、巨大儿、分娩孕周、新生儿体重、畸形率及男女性别比之间差异均无统计学意义(P>0.05);TL组的移植胚胎数明显少于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);TL组的临床妊娠率、着床率、活产率及抱婴回家率明显高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TL培养可改善IVF妊娠结局,对新生儿出生结局无不良影响,该技术是胚胎培养的安全有效方法.

目的 比较时差成像(time-lapse imaging,TLI)系统与常规胚胎培养的胚胎结局和临床妊娠结局,探讨基于TLI技术的胚胎优选模型的临床应用价值.方法 回顾性分析2019年6～11月在我院行体外受精/卵泡浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕的610个周期患者资料.按胚胎培养方式的不同分为常规培养组(n=543)和TLI组(n=67),常规培养组通过胚胎形态学评分优选胚胎,TLI组结合胚胎形态学和动力学方法优选胚胎.比较两组患者女方年龄、不孕年限、BM I、激素水平、胚胎结局、种植率和临床妊娠率等临床资料;再将两组根据女方年龄、获卵数和可用胚胎数进行分组,比较各亚组间种植率和临床妊娠率的差异.结果 两组患者间的一般资料和获卵数、正常受精数、可用胚胎数、囊胚形成率均无显著性差异(P>0.05);TLI组的卵母细胞利用率显著高于常规培养组(37.15％vs.35.30％)(P<0.05).进行新鲜周期移植的两组患者在移植日的子宫内膜厚度和移植个数上均无显著性差异(P>0.05),TLI组的种植率和临床妊娠率较常规培养组略有增高,但无显著性差异(P>0.05).亚组分析显示,不同年龄段,TLI组的种植率和临床妊娠率较常规培养组均略有提升,但无显著性差异(P>0.05);获卵数≥10个或D3可用胚胎数/移植个数>3时,TLI组的临床妊娠率和种植率较常规培养组均有增高趋势,但无显著性差异(P>0.05).结论 TLI系统可显著提高卵母细胞利用率,TLI优选模型是一种简单的胚胎优选方案;获卵数>10个或D3可用胚胎数/移植胚胎数>3时,T L I胚胎优选方案的种植率和临床妊娠率较常规优选方案可能有所改善.