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哺乳动物耳蜗Kölliker器的形态学及退化机制研究
编辑人员丨4天前
目的:探索哺乳动物耳蜗K?lliker器退化过程中是否存在自噬现象。方法:以P1~P14的SD大鼠耳蜗为研究对象,运用HE染色和透射电镜观察K?lliker器在耳蜗早期发育过程中的显微和亚显微形态学改变,并利用免疫组化、Western blot分子生物学实验观察自噬标记物LC3、Beclin1、P62在早期发育过程中的动态变化。结果:利用HE染色及透射电镜大鼠耳蜗K?lliker器支持细胞的形态从底回向顶回逐渐由假复层柱状上皮转变为单层立方上皮,细胞层数和数量逐渐减少,最终形成成熟的内沟区域,并观察到自噬小体。免疫组化耳蜗K?lliker器支持细胞LC3-II、Beclin1、P62呈阳性。Western blot观察到P3~P10自噬相关蛋白呈逐渐下降的趋势。结论:哺乳动物耳蜗K?lliker器退化过程中存在时间依赖性的自噬现象。
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编辑人员丨4天前
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利用包载骨形态发生蛋白-4腺病毒异位成骨移植修补骨缺损的研究
编辑人员丨4天前
目的:构建包载骨形态发生蛋白(BMP)-4的腺病毒并利用其骨骼肌内异位成骨特性,探索移植异位形成的自体骨进行骨缺损修补的体内效果。方法:2018年6月至2020年3月,将BMP-4基因构建入AAV载体内,纯化出AAV-BMP-4。将AAV-BMP-4吸附于明胶海绵(Gelfoam)上并植入郑州大学实验动物中心SPF饲养室饲养的SCID小鼠的股肌袋内,4周后进行AAV-BMP-4的活性测定。在小鼠背部皮下应用AAV-BMP-4,观察骨骼肌肉诱导异位成骨,待骨组织形成稳定后,取出这些骨组织移植入事先制备好的小鼠的颅骨缺损模型中,观察其骨缺损修复效果。结果:成功构建出纯化后浓度达5×10 12 vp/ml的AAV-BMP-4病毒颗粒。病毒颗粒植入小鼠的股肌袋内可成功诱导异位骨组织的形成,小鼠背部皮下植入AAV-BMP-4+Gelfoam复合体后4周出现了少量的新生骨组织,骨量达1 cm×2 cm×2 cm。X线和MicroCT的检查均证实了小鼠的背部皮下骨组织形成。经修剪移植入小鼠颅骨缺损模型处的骨组织在植入缺损处后,没有出现异常增生的现象,而是不断地随着时间的推移进行着外形的轻微改建,颅骨缺损得到了良好的修复。 结论:体外构建的AAV-BMP-4具有良好的生物学活性,AAV-BMP-4+Gelfoam在骨骼肌肉中可有效诱导成骨,利用新生骨组织可以成功地修复颅骨缺损的动物模型。移植的骨组织植入颅骨缺损后未出现过度生长的现象,且与宿主骨结合良好。
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编辑人员丨4天前
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用以评估和校准人类生物学年龄的表观遗传学时钟的构建
编辑人员丨4天前
目的:构建适用于评估和校准人类生物学年龄的表观遗传学时钟模型。方法:于2019年7月1日至11月30日从广西壮族自治区长寿队列选取186名研究对象,于2020年10月1日至12月31日从解放军总医院第七医学中心体检人群选取124名研究对象。采用自制问卷收集人口学特征、家族疾病史等资料,通过体格检查测量对象的心率和血压,采集空腹外周静脉血,分别检测空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和端粒长度,采用靶向甲基化位点测序检测EDARADD cg09809672、IPO8 cg19722847、NHLRC1 cg22736354、P2RX6 cg05442902和SCGN cg06493994基因位点的甲基化水平。排除DNA甲基化和端粒长度检测质量控制不合格的54名对象,最终对256名对象资料进行分析。分析不同年龄段甲基化水平变化情况,采用多重线性回归法构建生物学年龄预测模型,采用Kendal秩相关分析评价年龄差值[即(公历年龄-生物学年龄)]与端粒长度的相关性,比较各年龄组不同年龄差值对象的健康相关指标。结果:对象年龄的 M( Q1, Q3)为67(51,91)岁,其中女性166名(64.84%)。随年龄增加,基因位点甲基化水平分别呈下降(EDARADD cg09809672、IPO8 cg19722847和P2RX6 cg05442902)和上升趋势(NHLRC1 cg22736354和SCGN cg06493994)(均 P<0.05)。所构建的生物学年龄预测模型为: Y=-53.121×EDARADD cg09809672-137.564×IPO8 cg19722847+141.040×NHLRC1 cg22736354-67.893×P2RX6 cg05442902+149.547×SCGN cg06493994+4.592×sex+64.185( R2=0.86, P<0.001),式中 Y为生物学年龄,方程各项依次为5个基因位点甲基化水平、性别(男性=1,女性=2)和截距。年龄差值与端粒长度Kendall秩相关系数为0.731( P<0.001)。与年龄差值<0的对象相比,年龄差值≥0的对象未成年期收缩压较高[分别为(88.50±8.89)和(109.83±9.48)mmHg,1 mmHg=0.133 kPa],青壮年期TC较低[分别为(5.48±0.23)和(3.98±0.54)mmol/L],TG较低[分别为(3.51±0.32)和(3.41±0.20)mmol/L],中年期FBG较低[分别为(6.17±0.67)和(5.37±0.79)mmol/L],高龄老年期舒张压较高[分别为(76.99±6.78)和(83.97±9.36)mmHg](均 P<0.05)。 结论:所构建的表观遗传学时钟模型可用于评估和校准人类生物学年龄。
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编辑人员丨4天前
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天然气田工人轮班作业和心理资本对糖脂代谢异常的交互作用
编辑人员丨4天前
目的:探讨轮班作业和心理资本对糖脂代谢异常的交互作用。方法:采用方便抽样方法,于2018年10月纳入某天然气田1 415名作业人员为研究对象,通过问卷调查收集人口学特征、轮班作业和心理资本等信息,按照标准规范测量其生理、生化指标。采用多因素logistic回归模型分析轮班作业和心理资本对糖脂代谢异常的交互作用。结果:1 415名研究对象中,血糖异常的检出率为21.2%(300例),糖尿病检出率为8.3%(118例);总胆固醇异常的检出率为40.4%(572例),高胆固醇血症的患病率为11.3%(160例);甘油三酯异常的检出率为41.6%(588例),高甘油三酯血症的患病率为24.7%(350例);低密度脂蛋白异常的检出率为17.3%(245例),低密度脂蛋白升高的检出率为4.0%(56例);高密度脂蛋白异常的检出率为1.3%(18例)。多因素非条件logistic回归模型分析显示,轮班作业、低水平自我效能、低水平乐观均与血糖异常存在正向关联( P值均<0.05),轮班作业与甘油三酯异常存在正向关联( P值均<0.05);但未见轮班作业与低水平自我效能、低水平希望、低水平韧性、低水平乐观对糖脂代谢异常存在交互作用。 结论:轮班作业是血糖异常、甘油三酯异常的危险因素,自我效能和乐观是血糖异常的保护因素,未见轮班作业和心理资本对研究人群的糖脂代谢异常存在交互作用。
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编辑人员丨4天前
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沉默Krüppel样因子5对电离辐射后大鼠小肠上皮IEC-6细胞生物学功能的影响
编辑人员丨4天前
目的:探讨沉默Krüppel样因子5(KLF5)对电离辐射后体外培养的大鼠小肠上皮IEC-6细胞生物学功能的影响。方法:给予大鼠小肠上皮IEC-6细胞12 Gy照射,分别在照后0、0.5、1、2、3、5、7、24 h,检测KLF5的表达。给予IEC-6细胞0、2、4、8、12和16 Gy X射线照射,照后3 h收集细胞蛋白,采用Western blot法检测IEC-6细胞中KLF5的表达。设计并合成特异性针对大鼠KLF5基因的shRNA靶序列,构建到慢病毒载体中,通过感染人胚肾293T细胞,对慢病毒进行包装和滴度测定。使用包装好的慢病毒感染IEC-6细胞,荧光显微镜下观察转染效率,转染72 h后分别采用实时-PCR和Western blot方法检测感染后细胞中KLF5 mRNA及蛋白的表达。后续实验分为阴性对照组、shKLF5组、单纯照射组、照射+ shKLF5组4组。采用CCK-8法观察8 Gy照射后KLF5沉默细胞的增殖活性,流式细胞术检测8 Gy照射后KLF5沉默细胞的周期分布和凋亡,免疫荧光染色观察2 Gy照射后KLF5沉默细胞中γ-H2AX焦点数量。结果:不同剂量射线照射后KLF5表达逐渐增加,呈现明显的剂量效应关系。12 Gy照射后KLF5表达呈现先升高后降低的趋势,照后5 h表达量最高。KLF5 shRNA慢病毒载体构建成功,感染的IEC-6细胞中KLF5 mRNA及蛋白水平均在转染72 h明显降低。照射+shKLF5组细胞在照射后24 h阻滞在G 2/M期现象显著( t=11.56, P<0.05),细胞增殖明显受到抑制,其细胞凋亡率(12.49±0.63)%,明显高于单纯照射组(7.42±0.49)%,两组比较差异有统计学意义( t=10.98, P<0.05),照射+shkLF5组细胞核中各时间点的γ-H2AX焦点数量明显多于同一时间点阴性对照组( t=22.07、23.89、11.24、59.97、20.85, P<0.05)。 结论:成功构建KLF5 shRNA慢病毒载体,并建立KLF5敲低小肠上皮细胞株。下调细胞内KLF5表达,能够使细胞周期阻滞在G 2/M期,抑制照射后细胞的增殖,促进细胞的凋亡,DNA双链断裂水平增加,修复延迟。
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编辑人员丨4天前
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记忆巩固研究的新进展
编辑人员丨4天前
记忆包括记忆的编码、巩固和检索3个过程,其为大脑重要的高级神经功能之一。记忆巩固是指记忆的内部表征及其神经生物学随时间而变化的过程,其本质是在神经元、脑区或脑亚区之间形成新的稳定联系。记忆巩固在编码后立即开始,可能会持续若干天,甚至若干年。文章综述了记忆巩固在清醒和睡眠两种大脑状态的整个过程及记忆巩固神经加工机制等方面的研究进展,以期阐明记忆巩固现象的相关生物学机制。
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编辑人员丨4天前
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视网膜光辐照实验模型研究进展
编辑人员丨4天前
随着电子设备的普及与环境光污染现象的日趋严重,视网膜光辐照引起的损伤及其对视网膜色素变性、年龄相关性黄斑变性等疾病的致病作用逐渐被关注。光-视网膜组织反应类型以光热反应及光化学反应为主,其中可见光产生的光化学反应与视网膜疾病关系密切。光辐照参数包括光辐照波长、辐照能量及辐照时间等,不同参数下光辐照对视网膜细胞的作用还可能受多种外界因素影响。较多视网膜光辐照细胞实验模型建立以研究光辐照,尤其是蓝光对视网膜色素上皮细胞、光感受器细胞及神经细胞损伤的机制。光辐照会导致视网膜各细胞氧化应激、内质网应激及线粒体损伤激活自噬调控细胞凋亡。炎性小体激活及外泌体也参与调控光辐照对视网膜色素上皮细胞的损伤。也有研究探讨不同波长光源对细胞的潜在治疗作用。本文从光-视网膜组织反应类型、生物学研究中常用的光辐照参数,以及视网膜色素上皮细胞光辐照模型、视网膜光感受器细胞光辐照模型、视网膜神经节细胞光辐照模型等方面就视网膜光辐照的实验模型,探讨不同模型间细胞及光辐照参数的差异。
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编辑人员丨4天前
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儿童型滤泡性淋巴瘤37例临床病理学特征
编辑人员丨4天前
目的:探讨儿童型滤泡性淋巴瘤(PTFL)的病理和临床特征。方法:对首都医科大学附属北京友谊医院病理科2012年1月至2018年3月间收集的37例病例进行形态学和免疫表型分析,应用聚合酶链反应(PCR)方法检测Ig基因重排,并对13例行荧光原位杂交(FISH)检测bcl-2和bcl-6基因是否断裂。结果:男性35例,女性2例,发病年龄9~34岁,中位发病年龄16岁,均处于临床Ⅰ期(31例)或Ⅱ期(6例),表现为头颈部淋巴结肿大。32例获得随访,随访时间16~79个月,中位随访时间37个月。仅2例接受小剂量化疗,无论是否完全切除病灶,无1例死亡或进展。形态学上,肿瘤性淋巴滤泡大、形态不规则,由形态一致、中等至大的母细胞组成,核圆形或卵圆形,染色质呈细块状,可见小核仁,胞质稀少,缺乏极向,可见显著的"满天星"现象。瘤细胞表达CD20、CD10和bcl-6,均不表达bcl-2、MUM1和C-MYC,Ki-67显示高增殖指数(50%~90%),肿瘤细胞局限于滤泡内。被检的28例病例均不表达CD43、CD5和CD23。PCR方法检测Ig基因均呈克隆性重排。FISH检测13例病例均无bcl-2和bcl-6基因断裂。结论:PTFL具有不同于普通滤泡性淋巴瘤的形态学、免疫表型和分子遗传学特征,具有高度惰性或类似良性肿瘤的生物学行为。
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编辑人员丨4天前
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《纷乱中的秩序2——生命现象的偶然与必然》
编辑人员丨1个月前
由郑光美院士主编的《生物学通报》科普文选系列丛书第 2 册《纷乱中的秩序 2——生命现象的偶然与必然》一书已出版发行.先有鸡还是先有蛋?动物是如何感受痛觉和痒觉的?动物是如何产生视觉的?人体是如何感知时间的?成功和勤奋有关系吗?人的智力有极限吗?
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编辑人员丨1个月前
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"外界溶液浓度影响根细胞的吸水"实验创新与优化
编辑人员丨2024/6/22
选择新鲜洋葱圈、水培的葱幼苗作为实验材料,创新和优化苏教版生物学七年级"外界溶液浓度影响根细胞的吸水"实验.该实验设计遵循宏观到微观的认知规律,引导学生得出实验结论,且能有效缩短实验准备和实验现象观测时间.
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编辑人员丨2024/6/22
