目的:初步探讨泛素偶联酶2C(UBE2C)在膀胱癌(BC)中的表达及临床意义，为后续利用该基因作为BC早期诊断的生物标记或治疗靶点提供理论基础。方法:采用全转录组测序及表达谱分析比较15例BC组织和15例癌旁组织的差异表达基因，并联合TCGA数据库分析该基因在BC中的表达及表达量与癌症分期、预后的影响。采用Western blot法检测三种BC细胞株(5637、HT-1197、J82)和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1的UBE2C表达量。免疫组化检测BC组织和癌旁组织的UBE2C表达水平。通过构建UBE2C敲低、过表达J82细胞株，考察UBE2C表达对人BC J82细胞增殖的影响。结果:全转录组测序数据差异表达分析结果显示，UBE2C基因在BC组织中的表达量是癌旁组织的13.38倍。基于TCGA数据库的生物信息学分析结果显示，UBE2C在BC组织中的平均表达量高于在癌旁组织中的平均表达量( P<0.001)，UBE2C表达量与临床分期呈正相关( P<0.001)；K-M曲线评估结果显示，UBE2C高表达组的总体生存率和无病生存率均较低表达组低(均 P<0.001)。Western blot法检测结果显示，三种BC细胞株的UBE2C表达量均较正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1细胞株的UBE2C表达量高(均 P<0.05)。免疫组化检查结果显示，UBE2C在BC组织的平均表达量高于其在癌旁组织的平均表达量( P<0.001)。细胞学水平显示，UBE2C敲低的J82细胞株(KD-J82)的UBE2C表达量明显较野生型J82株(WT-J82)低，而UBE2C过表达的J82细胞株(OE-J82)的UBE2C表达量明显较WT-J82高。 结论:UBE2C基因是BC发生发展的关键基因。降低UBE2C表达后，能明显抑制BC细胞的增殖，是BC潜在的生物标志物和治疗靶点。

目的:探讨联合检测尿液中人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)、核基质蛋白22(NMP22)在膀胱癌诊断中的临床价值。方法:选取2013年11月至2014年5月在中山大学第一附属医院收治的膀胱癌患者78例(训练组)，同期选取5例肾结石、4例良性膀胱肿物、6例良性前列腺增生、6例血尿症、4例尿路感染患者和16例健康志愿者组成对照A组(41例)。选取2013年11月至2014年7月在中山大学肿瘤研究中心收治的膀胱癌患者111例(独立验证组)，同期选取7例肾结石、6例良性膀胱肿物、9例良性前列腺增生、6例血尿症、8例尿路感染患者和24例健康志愿者组成对照B组(60例)。检测并比较UBE2C、NMP22及两者联合(模型)的诊断准确度，并通过独立验证组对UBE2C、NMP22及模型的诊断准确度进行验证。结果:训练组的UBE2C和NMP22浓度均高于对照A组，差异有统计学意义( P<0.0001)。两组UBE2C和NMP22浓度均不受性别、年龄及吸烟情况的影响，差异无统计学意义( P>0.05)，但肌层浸润肿瘤和高级别肿瘤的浓度均分别较非肌层浸润肿瘤及低级别肿瘤增高，差异有统计学意义( P<0.05)。独立验证组的UBE2C和NMP22浓度均分别高于对照B组，差异有统计学意义( P<0.0001)。训练组中，UBE2C的曲线下面积(AUC)值为0.779，灵敏度为71%，特异度为85%；NMP22的AUC值为0.793，灵敏度为78%，特异度为80%；模型的AUC值为0.875，灵敏度为87%，特异度为88%；联合检测的模型准确性均优于单一检测，差异有统计学意义( P<0.05)。独立验证组中，UBE2C的AUC值为0.757，灵敏度为71%，特异度为80%；NMP22的AUC值为0.781，灵敏度为77%，特异度为79%；模型的AUC值为0.872，灵敏度为89%，特异度为85%。联合检测的模型诊断性能均优于单一检测，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:UBE2C可作为膀胱癌诊断的肿瘤标志物，联合UBE2C、NMP22检测可提高膀胱癌诊断的准确度。

目的:运用网络药理学及实验验证的方法探讨小补肝汤干预运动性疲劳的有效成分及可能作用机制.方法:在中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索小补肝汤的活性成分;通过人类基因组数据库(Genecards)、药物数据库(Drugbank)、在线人类孟德尔遗传(OMIM)、遗传药理学与药物基因组学数据库(PharmGkb),获取疾病的靶标基因;利用Venny2.1.0在线工具绘制药物与疾病靶点的韦恩图,获得交集靶点,将其导入STRING数据库,构建蛋白相互作用(PPI)网络图,通过Bioconductor等在线软件进行基因组数据的高通量分析,得到基因本体(GO)生物功能注释图和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集通路图,预测作用通路,并采用动物实验验证网络药理学预测结果.结果:通过筛选得到小补肝汤36种活性成分,药物-疾病共同靶点244个;通过构建药物-成分-靶点-疾病调控网络,筛选出豆甾醇(Stigmasterol)、海风藤酮(Kadsurenone)、β-谷固醇(Beta-sitosterol)、山蒟酮C(Hancinone C)及黄杉素(Taxifolin)等核心成分;通过蛋白互作网络的构建,筛选出AKT1、GNAQ及PTGS2等11个关键靶点;GO富集分析得出生物学过程BP 3 675个,包括对药物的反应、对氧含量的反应、对缺氧的反应等;细胞组分379个,包括膜筏、膜微区、线粒体外膜等;分子功能624个,包括DNA-结合转录因子结合、泛素蛋白连接酶结合及G蛋白偶联胺受体活性等;KEGG富集分析得出涉及的信号通路主要有钙信号通路(GNAQ-PLCB2-IP3R1-CAM)、cAMP信号通路和甲状腺激素信号等通路.动物实验结果显示,与正常对照组比较,模型对照组负重游泳力竭时间显著减少,血清中乳酸(LD)、尿素氮(BUN)的含量显著升高,肝糖原与肌糖原的含量显著降低(P＜0.01),骨骼肌组织病理可见骨骼肌细胞排列紊乱不均,有较多炎症细胞弥漫浸润,骨骼肌组织GNAQ、PLCB2、IP3RI、CAM蛋白表达显著上调(P＜0.01);与模型对照组比较,各给药组小鼠负重游泳力竭时间显著增加(P＜0.01),血清中LD、BUN的含量明显降低(P＜0.05),肝糖原与肌糖原的含量明显升高(P＜0.05),各给药组小鼠骨骼肌纤维排列有所改善,炎性细胞浸润明显减少,骨骼肌组织GNAQ、PLCB2、IP3RI、CAM蛋白表达明显下调(P＜0.05).结论:小补肝汤能下调运动性疲劳小鼠骨骼肌组织中GNAQ、PL-CB2、IP3RI、CAM蛋白表达,从而调节胞内钙离子浓度,减轻因钙超载导致的细胞线粒体、肌浆网功能破坏而引起的疲劳.

目的 探讨脂肪酸合成酶(FASN)、泛素偶联酶2C(UBE2C)、胰岛素生长因子-1(IGF-1)在老年脑胶质瘤组织中的表达及与其预后的关系.方法 选取60 例老年脑胶质瘤患者,采集癌组织与癌旁正常组织,采用免疫组织化学法测定其FASN、UBE2C、IGF-1 表达;分析FASN、UBE2C、IGF-1 表达与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier法分析FASN、UBE2C、IGF-1 表达与患者预后的关系.结果 癌组织中FASN、UBE2C、IGF-1 阳性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);FASN、UBE2C、IGF-1 与患者性别、体重指数(BMI)、肿瘤部位无关(P>0.05);FASN、UBE2C、IGF-1 与肿瘤分化程度、组织学分级、淋巴结转移有关(P<0.05);Kaplan-Meier法结果显示,FASN、UBE2C、IGF-1 阳性表达患者的生存率[37.50%(18/48)、38.46%(20/52)、33.33%(15/45)]低于阴性表达患者[75.00%(9/12)、87.50%(7/8)、80.00%(12/15)].结论 FASN、UBE2C、IGF-1 在老年脑胶质瘤患者癌组织内呈高表达,其表达与分化程度、组织学分级、淋巴结转移密切相关,且阳性表达患者预后更差.

目的 探讨乳腺癌病人组织中人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)及非转移细胞基因2(NME2)的表达,并分析其作为乳腺癌预后评估模型的临床应用价值.方法 通过基因表达谱数据动态分析(GEPIA)在线网站分析1085例乳腺癌组织和291例正常对照组织中UBE2C、NME2表达;利用Kaplan-Meier Plotter在线网站分析UBE2C、NME2表达与乳腺癌病人(1 070例)生存情况.选取2018年1月～2019年12月本院127例乳腺癌病人为研究对象.检测组织中UBE2C、NME2水平,并分析与乳腺癌病人临床病理特征的关系;采用多因素Cox回归模型对乳腺癌不良预后的危险因素进行分析;采用受试者工作特征曲线评估模型对乳腺癌不良预后的诊断效能.结果 GEPIA在线网站数据提示,乳腺癌组织中UBE2C、NME2蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);生存曲线分析显示,UBE2C、NME2表达水平增加,病人生存率降低(Logrank P分别为0.029,0.013).乳腺癌组织中UBE2C、NME2阳性表达率在不同淋巴结转移、临床分期以及病理分级的病人中进行比较,差异有统计学意义(x2=7.826,4.116,5.460,P=0.005,0.042,0.019;x2=4.400,6.211,11.63,P=0.036,0.013,0.001);回归模型分析显示,淋巴结转移、临床分期Ⅲ～Ⅳ期、病理分级G3级及UBE2C阳性表达、NME2阳性表达是乳腺癌病人不良预后的危险因素(P=0.031,0.018,0.016,0.019,0.001),由此构建模型组曲线下面积(AUC)0.835,灵敏度为0.740 3,特异度为0.9412;验证组AUC为0.826,灵敏度为0.880 0,特异度为0.8400.结论 乳腺癌病人组织中UBE2C、NME2升高,与淋巴结转移、临床分期、病理分级及乳腺癌不良预后密切相关.由此构建的预警模型对预测乳腺癌不良预后具有重要的临床价值.

目的:研究神经母细胞瘤中KLF4、UBE2C表达水平与细胞黏附、迁移的相关性.方法:选择2014年5月~2017年2月期间在恩施土家族苗族自治州中心医院诊断为神经母细胞瘤的56例患儿作为研究的NB组并收集病灶组织,选择同期因严重肾盂积水在恩施土家族苗族自治州中心医院就诊的38例患儿作为研究的对照组并收集正常肾上腺组织.测定临床组织样本中KLF4、UBE2C的mRNA表达量及蛋白表达量以及细胞黏附分子、迁移分子的蛋白表达量.结果:NB组神经母细胞瘤组织内KLF4的mRNA表达量及蛋白表达量均显著低于对照组,UBE2C的mRNA表达量及蛋白表达量均显著高于对照组;NB组神经母细胞瘤组织内 PDLIM1、AMF、GPx1、L1CAM、Nrg1、RANK、RANKL、Inβ1、MTA1、MMP9的蛋白表达量均显著高于对照组且与KLF4的蛋白表达量呈负相关,与 UBE2C的蛋白表达量呈正相关.结论:神经母细胞瘤中低表达的KLF4以及高表达的UBE2C能够促进肿瘤细胞的黏附和迁移.

目的:研究泛素偶联酶2C (UBE2C )对神经母细胞瘤增殖、侵袭的调节作用.方法:培养S H-SY5Y神经母细胞瘤细胞株并随机分为 UBE2C-siRNA 组和NC-siRNA 组,分别转染 UBE2C的siR-NA和NC的siRNA .转染siRNA后24小时,抽提细胞内的RNA 并通过荧光定量PCR反应测定促增殖基因 YB-1 、CyclinD1 、CDK4 、Aurora-A 、Ki-67 及增殖抑制基因 LC3 、Beclin1 、GRP78 、IRE1α 、PERK 、ATF6 及侵袭基因 KLF4 、RIPK3 、HIF-1α 、Integrin β1 、MMP9 的 mRNA 表达量.结果:UBE2C-siRNA组细胞中YB-1 、CyclinD1 、CDK4 、Aurora-A 、Ki-67 、KLF4 、RIPK3 、HIF-1α 、Integrin β1 、MMP9的mRNA表达量显著低于NC-siRNA 组,LC3 、Beclin1 、GRP78 、IRE1α 、PERK 、ATF6的mR-NA表达量显著高于NC-siRNA组.结论:抑制 UBE2C基因能够调节神经母细胞瘤内增殖及侵袭基因的表达,进而阻碍细胞的增殖和侵袭.

泛素偶联酶2C与多种肿瘤细胞的增殖密切相关,但其与肺癌发生和发展的关系尚不明确.本研究以肺癌A549细胞为材料,通过RT-PCR、Western印迹、免疫荧光、SA-β-Gal细胞衰老染色、细胞划痕和Trans-well实验,阐明UBE2C与肺癌细胞的增殖、衰老和迁移能力的关系.结果显示,UBE2C在肺癌细胞中的表达明显高于正常细胞.利用基因修饰技术瞬时过表达或靶向沉默UBE2C后,在肺癌A549细胞中,UBE2C的mRNA和蛋白质水平显著增加3.5倍或减少0.5倍,显著促进或抑制细胞增殖,进而减少或增加细胞的凋亡率.过表达UBE2C后,显著抑制细胞衰老;但沉默UBE2C后,则增加细胞衰老.此外,过表达UBE2C后,下调转移相关基因E-钙黏着蛋白的mRNA和蛋白质表达水平,且上调波形蛋白基因的表达水平,进而促进肺癌细胞的迁移.但靶向敲除UBE2C后,上调E-钙黏着蛋白,同时下调波形蛋白表达水平,进而抑制肺癌细胞的迁移.本研究的开展将明确UBE2C在肺癌中的作用及其机制,为以UBE2C为靶点,提高病人生存期提供了理论基础.

目的 探讨结肠癌患者泛素偶联酶E2C(UBE2C)表达情况及其诊断效能.方法 选取自2016年10月至2018年1月保定市第一中心医院收治的40例结肠癌患者为研究对象.选择同期行体检的健康人群40例为健康组.分析结肠癌患者血清、肿瘤组织及健康组UBE2C表达情况.采用多因素Logistic分析法分析肠癌患者UBE2C表达水平影响因素.结果 结肠癌血清组UBE2C水平和结肠癌肿瘤组织组比较,差异无统计学意义(P>0.05);结肠癌血清组和结肠癌肿瘤组织组UBE2C水平均显著高于健康组(P<0.05).多因素Logistic分析发现,临床病理分期、浆膜受损、癌胚抗原及淋巴结转移与血清UBE2C表达呈正相关(P<0.05);肿瘤大小与血清UBE2C表达无明显相关(P>0.05).结论 结肠癌患者血清及肿瘤中UBE2C水平表达一致,在早期诊断结肠癌有一定的诊断价值,且特异性及敏感度较高.UBE2C水平与临床病理分期、癌胚抗原水平、浆膜损伤及淋巴结转移关系密切.

目的:通过研究泛素偶联酶E2C(ubiquitin-conjugating enzyme E2C,UBE2C)在肾透明细胞癌(kid-ney renal clear cell carcinoma,KIRC)组织中的表达,阐明其对KIRC早期诊断及预后的影响.方法:利用Onco-mine、GEPIA数据库和人类蛋白质表达图谱(The Human Protein Atlas,HPA)分析UBE2C在KIRC组织中mR-NA和蛋白质水平的变化.运用LinkedOmics和GEPIA数据库阐述UBE2C表达与KIRC临床病理学参数的相关性及对预后的影响.在String-DB数据库中探索UBE2C基因在细胞信号转导通路中的位置以及与其关系密切的上下游基因.结果:UBE2C的mRNA在KIRC中表达增加,并且与KIRC病理分级、TNM分期呈正相关,且与种族和人种相关(P＜0.05).我们应用TCGA分析的结果显示:高水平UBE2C是KIRC总生存率和无病生存率不良的独立预后因素(P＜0.01).IHC结果证实,与正常肾组织相比,KIRC中UBE2C的蛋白表达量显著升高(P＜0.05).与UBE2C相关的蛋白有ANAPC10、ANAPC11、ANAPC2、ANAPC4、ANAPC5、AUR-KA、AURKB、CCNB1等,可能参与细胞周期检查点及蛋白泛素化等细胞功能.结论:通过TCGA数据库信息挖掘发现,UBE2C在KIRC组织中呈高表达,且与患者生存期有关,将为后续的肾癌研究提供重要的理论依据.