目的:探索三阴性乳腺癌(TNBC)细胞中USP5的表达及其对细胞生物学行为的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测USP5在TNBC细胞MDA-MB-231和BT-549细胞中的表达。通过转染慢病毒(shRNA)敲低USP5的表达。采用免疫共沉淀(CO-IP)实验验证USP5对活化C激酶1受体(RACK1)泛素化水平的影响。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验检测细胞增殖能力，Transwell检测细胞迁移能力的变化。两组之间的比较采用独立样本 t检验。 结果:MDA-MB-231细胞和BT-549细胞中USP5的表达(3.167±1.102，4.700±1.609)，明显高于正常乳腺细胞系MCF-10A(1.000±0.300)，差异有统计学意义( t＝3.287、3.915， P<0.05)。在USP5稳定敲低的细胞系中USP5蛋白的表达(MDA-MB-231：0.160±0.012；BT-549：0.190±0.028)显著低于阴性对照细胞(MDA-MB-231：1.000±0.179；BT-549：1.000±0.015)，差异有统计学意义(MDA-MB-231： t＝5.279， P<0.001；BT-549： t＝6.538， P<0.001)。USP5敲低的细胞中，RACK1的表达量(MDA-MB-231：0.250±0.023；BT-549：0.210±0.034)低于阴性对照细胞(MDA-MB-231：1.000±0.163；BT-549：1.000±0.036)，差异有统计学意义(MDA-MB-231： t＝6.729， P<0.01；BT-549： t＝5.172， P<0.001)。敲低USP5后RACK1泛素化水平显著增高。在CCK-8实验中，敲低USP5后细胞增殖显著弱于(MDA-MB-231：1.140±0.102；BT-549：1.100±0.073)阴性对照细胞(MDA-MB-231：1.710±0.173，BT-549：1.950±0.087)，差异有统计学意义(MDA-MB-231： t＝4.053， P<0.05；BT-549： t＝10.550， P<0.001)。EDU实验证明，USP5敲低细胞株[阳性细胞率MDA-MB-231：(30.33±7.76)%；BT-549：(31.60±5.70)%]比阴性对照细胞[阳性细胞率MDA-MB-231：(64.33±4.50)%；BT-549：(75.42±4.10)%]细胞增殖明显降低，差异有统计学意义(MDA-MB-231： t＝5.361， P<0.01；BT-549： t＝9.826， P<0.001)。敲低USP5后细胞迁移能力(MDA-MB-231：47.67±5.73；BT-549：51.00±8.60)较阴性对照细胞(MDA-MB-231：87.33±14.88；BT-549：93.69±6.12)显著下降，差异有统计学意义(MDA-MB-231： t＝3.517， P<0.05；BT-549： t＝5.713， P<0.01)。 结论:USP5通过调节RACK1表达促进TNBC迁移和增殖。

目的:探讨自噬抑制剂Spautin-1对小鼠创伤性颅脑损伤(TBI)后焦虑样行为的影响及其机制。方法:36只C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术组、TBI组、TBI+自噬抑制剂Spautin-1组，每组12只。后2组小鼠采用改良的Feeney自由落体硬膜外撞击法建立TBI模型。造模后10 min，TBI+自噬抑制剂Spautin-1组小鼠侧脑室注射2 μL Spautin-1溶液(10 mmol/L)，另外2组注射等量溶剂。造模后1、7、14 d采用神经系统症状评分(NSS)评估小鼠的运动、感觉和反射功能。造模后15、16 d分别采用旷场实验、高架十字迷宫实验评估小鼠的焦虑样行为。造模后16 d采用尼氏染色检测小鼠杏仁核区尼氏小体的数量，免疫荧光染色检测小鼠杏仁核区神经元特异性核蛋白(NeuN)阳性细胞数、白细胞介素(IL)-18及IL-1β阳性星形胶质细胞数，Western blotting实验检测小鼠杏仁核区自噬、焦亡相关蛋白的表达。结果:(1)造模后1、7 d，与假手术组比较，TBI组、TBI+自噬抑制剂Spautin-1组小鼠的NSS评分增加，差异均有统计学意义( P<0.05)。(2)造模后15、16 d，与假手术组比较，TBI组、TBI+自噬抑制剂Spautin-1组小鼠旷场实验的跨格次数、中央区停留时间百分比下降，高架十字迷宫实验的进入开放臂次数(OE)百分比、开放臂停留时间(OT)百分比下降；与TBI组比较，TBI+自噬抑制剂Spautin-1组小鼠的跨格次数、中央区停留时间百分比、OE百分比、OT百分比升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。(3)与假手术组比较，TBI组、TBI+自噬抑制剂Spautin-1组小鼠杏仁核区尼氏小体、NeuN阳性细胞数减少；与TBI组比较，TBI+自噬抑制剂Spautin-1组小鼠杏仁核区尼氏小体、NeuN阳性细胞数增加，差异均有统计学意义( P<0.05)。(4)与假手术组比较，TBI组、TBI+自噬抑制剂Spautin-1组小鼠杏仁核区IL-1β、IL-18阳性星形胶质细胞百分比增加；与TBI组比较，TBI+自噬抑制剂Spautin-1组小鼠杏仁核区IL-1β、IL-18阳性星形胶质细胞百分比减少，差异均有统计学意义( P<0.05)。(5)与假手术组比较，TBI组、TBI+自噬抑制剂Spautin-1组小鼠杏仁核区NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、成孔蛋白D-N末端片段(GSDMD-N)、泛素特异性肽酶(USP)13及B淋巴细胞瘤-2相互作用蛋白(Beclin1)的表达上调，微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ值升高；与TBI组比较，TBI+自噬抑制剂Spautin-1组小鼠杏仁核区NLRP3、活化Caspase-1、GSDMD-N、USP13、Beclin1蛋白的表达下调，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ值降低，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:自噬抑制剂Spautin-1能够改善小鼠TBI后的焦虑样行为，其机制可能与抑制小鼠杏仁核区星形胶质细胞的自噬依赖性焦亡相关。

目的:探讨泛素特异性蛋白酶7（USP7）在瘢痕溃疡癌变过程中的生物学作用及其临床意义。方法:采用回顾性观察性研究结合生物信息学分析方法。从癌症基因组图谱（TCGA）数据库和基因表达综合数据库中获取USP7在肿瘤和/或其对应癌旁正常组织中的RNA表达谱数据，并将RNA测序数据进行log 2转化。通过多维度癌症基因集cBioPortal数据库分析 USP7基因变异情况，并分析其突变位点。通过TIMER 2.0数据库中“差异表达”模块获得TCGA数据库中肿瘤、癌旁正常组织USP7 mRNA表达情况。使用基因表达谱交互分析2（GEPIA2）数据库分析皮肤黑色素瘤（SKCM）、宫颈鳞状细胞癌（CESC）、肺鳞状细胞癌（LUSC）和头颈鳞状细胞癌（HNSC）中高表达USP7患者与低表达USP7患者的生存率并绘制Kaplan-Meier生存曲线。利用Sangerbox数据库分析USP7在泛癌中的表达与微卫星不稳定性（MSI）或肿瘤突变负担（TMB）的相关性。通过GEPIA2数据库中“相关性分析”模块，评估USP7在泛癌中的表达与5种DNA错配修复基因（ MLH1、 MSH2、 MSH6、 PMS2和 EPCAM）表达水平和3种必需DNA甲基转移酶（DNMT）——DNMT1、DNMT3A、DNMT3B表达水平的相关性。通过TIMER 2.0数据库中“免疫-基因”模块分析USP7在CESC、HNSC、LUSC和SKCM中表达及其与免疫细胞（B细胞、CD4 +T细胞、CD8 +T细胞、中性粒细胞、巨噬细胞和树突状细胞）浸润的相关性。利用GEPIA2数据库的“相似基因检测”模块获得与USP7表达模式相似且排名前100的蛋白集。将前述蛋白集与利用STRING数据库获得的与USP7有直接物理结合作用且排名前50的蛋白集进行交集分析。通过DAVID数据库对上述2个蛋白集进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）和基因本体论（GO）富集分析。收集2018年10月—2022年10月武汉大学附属同仁医院暨武汉市第三医院病理科有相应临床病理特征的正常皮肤、增生性瘢痕、瘢痕溃疡、瘢痕癌的术后标本，采用免疫组织化学法检测组织中USP7表达情况，样本数为6。对数据行Log-rank检验、单因素方差分析及Bonferroni检验。 结果:在泛癌中， USP7的主要基因变异类型为突变和扩增，变异频率（>6%）居前3位的肿瘤依次为膀胱尿路上皮癌、SKCM和子宫内膜癌。 USP7基因在泛癌中的主要突变为错义突变。在突变频率最高的SKCM中，主要突变类型是USP7_ICP0_bdg结构域的错义突变。USP7 mRNA在乳腺浸润癌、胆管癌、结肠癌、食管癌、HNSC、肾嫌色细胞癌、肝细胞肝癌、肺腺癌、LUSC、前列腺癌和胃癌肿瘤组织中的表达均明显高于其对应的癌旁正常组织（ P<0.05），在多形成性胶质细胞瘤、肾透明细胞癌、肾乳头状细胞癌和甲状腺癌中的表达均明显低于其对应的癌旁正常组织（ P<0.05）；此外，USP7 mRNA在SKCM转移组织中的表达远高于其原发肿瘤组织（ P<0.05）。生存曲线显示，在CESC、HNSC、LUSC和SKCM中，高表达USP7患者与低表达USP7患者的存活率比较，差异均无统计学意义（Log-rank P>0.05，风险比分别为1.00、0.99、1.00、1.30）。USP7在结肠癌、结直肠癌、胸腺癌、甲状腺癌中的表达均与TMB呈显著负相关（Pearson相关系数分别为-0.26、-0.19、-0.19和-0.11， P<0.05）；USP7在神经胶质瘤、CESC、肺腺癌、混合肾癌、LUSC中的表达均与MSI呈显著正相关（Pearson相关系数分别为0.22、0.14、0.15、0.08和0.14， P<0.05），在结肠癌、结直肠癌、乳腺浸润癌、前列腺癌、HNSC、甲状腺癌和弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达均与MSI呈显著负相关（Pearson相关系数分别为-0.31、-0.27、-0.13、-0.19、-0.16、-0.18和-0.53， P<0.05）。USP7在CESC中的表达与MSH2和MSH6的表达均呈明显正相关（Spearman相关系数分别为0.51和0.44， P<0.05），在HNSC中的表达与EPCAM、MLH1、MSH2、MSH6、PMS2的表达均呈明显正相关（Spearman相关系数分别为0.39、0.14、0.49、0.54和0.41， P<0.05），在LUSC中的表达与EPCAM、MSH2、MSH6和PMS2的表达均呈明显正相关（Spearman相关系数分别为0.20、0.36、0.40和0.34， P<0.05），在SKCM中的表达与EPCAM、MLH1、MSH2、MSH6和PMS2的表达均呈明显正相关（Spearman相关系数分别为0.11、0.33、0.42、0.55和0.34， P<0.05）；USP7在CESC、HNSC、LUSC和SKCM中的表达与DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的表达均呈显著正相关（Spearman相关系数分别为0.42、0.34和0.22，0.45、0.52和0.22，0.36、0.36和0.22，0.38、0.46和0.21， P<0.05）。USP7在CESC、HNSC、LUSC和SKCM中的表达仅与CD4 +T细胞浸润呈显著正相关（Partial相关系数分别为0.14、0.22、0.13、0.16， P<0.05）。与USP7表达模式相似且排名前100的蛋白集中，排名前5的蛋白依次是C16orf72、BCLAF1、UBN、GSPT1、ERI2（Spearman相关系数分别为0.83、0.74、0.73、0.73和0.72， P值均<0.05）。与USP7有直接物理结合作用且排名前50的蛋白集与前述蛋白集的交集仅有1个蛋白，即为甲状腺激素受体相互作用因子12。KEGG富集分析显示，USP7相关基因涉及细胞周期、剪接体、细胞衰老和p53信号通路等。GO富集分析显示，USP7相关基因涉及转录调控、蛋白质泛素化、DNA修复和细胞质模式识别受体信号通路等。临床样本分析显示，USP7在增生性瘢痕（0.35±0.05）、瘢痕溃疡（0.43±0.04）和瘢痕癌（0.61±0.03）中的表达均明显高于正常皮肤（0.18±0.04）， P<0.05。 结论:USP7可能为临床瘢痕溃疡癌变恶化的生物标志物。

目的:探讨泛素特异性蛋白酶41(USP41)作为乳腺癌新型诊断/预后标志物的潜在价值，并观察USP41对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:分别从癌症基因组图谱(TCGA)数据库、基因表达综合(GEO)数据库的GSE96058数据集中获取1 086例乳腺癌样本、3273例乳腺癌样本的转录组数据及临床信息，利用R 4.1.2分别进行基因表达分析、预后分析、功能富集分析及免疫浸润分析。分别用两种特异性小干扰RNA(siRNA)转染乳腺癌细胞系MCF-7，蛋白质印迹法(Western blot)实验检测转染前后USP41蛋白表达水平，集落形成实验、细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、划痕实验及Transwell实验检测转染后乳腺癌细胞增殖、侵袭与迁移能力并与对照组作比较。Cox回归用于比较预后差异，相对灰度值的比较由单因素方差分析和Tukey HSD事后检验完成，细胞集落数的比较由Welch方差分析和Games-Howell事后检验完成，同一时间下光密度值和相对宽度的比较由两因素重复测量数据方差分析和多重成对比较完成，细胞迁移数的比较由Kruskal-Wallis检验和Dunn事后检验完成，单因素和多因素Cox回归用于确定预后独立危险因素，采用Spearman分析进行相关性分析。结果:USP41在10种癌症组织中高表达，作为乳腺癌诊断标志物的诊断效能一般(曲线下面积为0.717)。USP41高表达与乳腺癌患者更差的总生存期[ P<0.01，风险比( HR)＝1.93，95%可信区间( CI)：1.40～2.66]和无病生存期相关( P<0.01， HR＝2.10，95% CI：1.37～3.23)。Cox回归分析表明USP41是乳腺癌的独立危险因素( P<0.01， HR＝1.406，95% CI：1.13～1.75)。基因集富集分析表明USP41高表达与多巴胺能的神经形成、多巴胺神经递质释放循环及胰岛素摄取等功能活动相关。免疫浸润分析表明USP41高表达与更丰富的免疫细胞浸润和多种免疫检查点表达呈明显正相关。siRNA1组和siRNA2组USP41蛋白表达水平(3.88±0.27、4.13±0.12)均显著低于对照组(6.03±0.40)，差异有统计学意义( F＝194.405， P<0.01)。siRNA1组和siRNA2组细胞集落数[(20.75±6.13)、(25.50±8.89)个]均显著低于对照组[(76.75±17.23)个]，差异有统计学意义( F＝16.720， P<0.01)。siRNA1组和siRNA2组24 h吸光度值(0.43±0.01、0.44±0.01)均显著低于对照组(0.51±0.04)，差异有统计学意义( F＝11.933， P<0.05)。siRNA1组和siRNA2组24 h侵袭宽度(2.53±0.12、2.67±0.12)均显著高于对照组(1.70±0.10)，差异有统计学意义( F＝67.364， P<0.01)。siRNA1组24 h迁移细胞数[(190.50±19.09)个]显著低于对照组[(351.25±15.88)个]，差异有统计学意义( F＝－2.755， P<0.05)。 结论:USP41高表达与乳腺癌不良预后相关并促进细胞恶性生物学行为。

目的 探究泛素特异蛋白酶10(USP10)对肝细胞癌(HCC)中Krüppe样因子4(KLF4)蛋白的调控及对HCC细胞增殖与侵袭的影响.方法 采用Western blot实验检测USP10和KLF4在人正常肝细胞系L02和HCC细胞系HepG2、HUH7、HCCLM3等中的表达差异.选取HCCLM3和HUH7细胞,将过表达或沉默USP10的慢病毒颗粒(oe-USP10或sh-USP10)转染入细胞中,并将其记为oe-USP10组和oe-NC组.免疫共沉淀(Co-IP)实验检测HCCLM3或HUH7细胞中USP10是否可与KLF4直接结合.加入蛋白酶体抑制剂MG132,再次使用Co-IP检测转染oe-USP10或sh-USP10的HCCLM3和HUH7细胞中 KLF4蛋白的泛素化水平.将过表达KLF4的pcDNA3.1载体质粒及其阴性对照质粒(pc-KLF4 或 pc-NC)共转染入 HCCLM3 和 HUH7 的 sh-USP10组或sh-NC组细胞中,并将细胞记为sh-NC+pc-NC组、sh-USP10+pc-NC 组、sh-NC+pc-KLF4 组和 sh-USP10+pc-KLF4组,采用CCK-8法检测HCCLM3和HUH7中各组细胞的增殖活力,Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力.结果 与 L02 细胞比较,USP10 和 KLF4 在 HepG2、HUH7、HC-CLM3等细胞中蛋白表达均降低(P＜0.05).在HCCLM3和HUH7细胞中,USP10蛋白可直接与KLF4相互结合.同时,MG132处理后,HCCLM3和HUH7细胞中KLF4蛋白表达量呈时间依赖性增加.沉默USP10可增加HCCLM3与HUH7细胞中 KLF4的泛素化,过表达USP10可降低上述细胞中KLF4的泛素化水平.与sh-NC+pc-NC组比较,sh-USP10+pc-NC组中HCCLM3和HUH7的增殖和侵袭能力均升高(P＜0.01),而 sh-NC+pc-KLF4 组和 sh-USP10+pc-KLF4 组的HCCLM3或HUH7细胞增殖和侵袭能力均降低(P＜0.05);与 sh-USP10+pc-NC 组比较,sh-USP10+pc-KLF4 组细胞的增殖和侵袭能力均降低(P＜0.05).结论 在HCC细胞中USP10通过去泛素化促进KLF4蛋白稳定性,进而抑制肿瘤细胞的增殖与侵袭.

目的 探讨血清泛素特异性蛋白酶10(USP10)和沉默调节蛋白6(SIRT6)水平与急性肺损伤(ALI)患者预后的关系.方法 前瞻性选取2023年1月至2023年11月就诊于康复大学青岛中心医院(青岛市中心医院)重症医学科确诊筛选的ALI患者78例为研究对象,设为ALI组;另外选取同期在同医院体检中心体检肺功能正常的患者70例设为对照组.实时荧光定量PCR检测两组研究对象血清中USP10 mRNA相对表达量,采用酶联免疫吸附试验检测血清SIRT6表达水平.比较两组研究对象以及不同病情ALI患者的血清中USP10 mRNA和SIRT6的表达水平;采用多因素Logistic回归分析ALI患者预后危险因素;采用Pearson相关性分析USP10 mRNA与SIRT6表达的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析USP10 mRNA和SIRT6预测ALI患者预后的价值.结果 ALI组患者血清USP10 mRNA和SIRT6的表达水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).重度患者血清USP10 mRNA和SIRT6的表达水平明显低于中度患者,中度患者血清中USP10 mRNA和SIRT6表达水平明显低于轻度患者,差异均有统计学意义(P＜0.05).死亡患者血清中USP10 mRNA和SIRT6表达水平明显低于存活患者,差异均有统计学意义(P＜0.05). USP10 mRNA和SIRT6低表达为ALI患者预后的独立危险因素(P＜0.05).USP10 mRNA与SIRT6表达呈正相关性(r=0.373,P＜0.05);USP10 mRNA最佳截断值为0.69,预测ALI患者预后的曲线下面积(AUC)为0.805,95％CI:0.738～0.871,敏感度为78.21％,特异度为67.43％;SIRT6最佳截断值为18.69 ng/mL,预测ALI患者预后的AUC为0.871,95％CI:0.817～0.925,敏感度为84.62％,特异度为73.08％;USP10 mRNA与SIRT6联合检测预测ALI患者预后的AUC为0.930,95％CI:0.894～0.967,敏感度为93.59％,特异度为76.92％,优于两者单独检测.结论 ALI患者血清中USP10和SIRT6明显降低,与ALI的不良预后密切相关,联合测定血清中USP10和SIRT6可能提升对ALI患者预后的预测价值.

目的 探讨脓毒症合并急性肾损伤(AKI)患者外周血上游转录因子2(USF2)、泛素特异性蛋白酶10(USP10)的表达水平及临床意义.方法 选择2018年1月至2022年12月该院收治的259例脓毒症患者,根据是否合并AKI将患者分为AKI组(107例)和非AKI(NAKI)组(152例).收集临床一般资料,检测外周血中USF2、USP10的表达水平.Pearson分析USF2、USP10与肾功能的相关性.二元Logistic回归分析影响脓毒症患者合并AKI的因素.绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析USF2、USP10诊断脓毒症患者合并AKI的价值.结果 AKI组血清USF2表达水平高于NAKI组,差异有统计学意义(P＜0.05),USP10表达水平低于NAKI组,差异有统计学意义(P＜0.05).AKI组USF2表达与尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、胱抑素C(CysC)呈正相关(P＜0.05),USP10表达与BUN、Scr、CysC呈负相关(P＜0.05).高序贯器官衰竭(SOFA)评分、脓毒症休克、高表达USF2是脓毒症患者发生AKI的危险因素(P＜0.05),高表达USP10是保护因素(P＜0.05).USF2、USP10诊断脓毒症患者发生AKI的曲线下面积(AUC)分别为0.742(95％CI:0.676～0.808)、0.781(95％CI:0.724～0.839),联合 USF2 和 USP10 诊断脓毒症患者发生 AKI 的 AUC 为 0.907(95％CI:0.865～0.948),高于单独诊断(P＜0.05).结论 脓毒症患者外周血中USF2表达增加,USP10表达下降与合并AKI风险增加以及肾功能下降有关.

目的:研究头颈鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)组织中泛素-特异性蛋白酶10(ubiquitin-specific peptidase 10,USP10)的表达情况并探讨其预后价值.方法:通过UALCAN网站分析HNSCC中USP10 mRNA和蛋白质的表达水平,采用免疫组织化学法检测70例HNSCC组织和30例正常组织中USP10蛋白的表达,分析HNSCC中USP10的表达与临床特征和预后的关系.结果:HNSCC组织中USP10表达上调(P＜0.05),且USP10的表达与分化程度相关(P＜0.05).Kaplan-Meier分析结果显示,USP10高表达组生存时间短于低表达组(P＜0.05).Cox回归分析结果显示,淋巴转移和USP10高表达是HNSCC患者预后不良的独立危险因素(P＜0.05).结论:HNSCC中USP10表达升高,USP10可作为HNSCC的预后标志物.

目的:通过5'-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/自噬相关蛋白5(ATG5)信号通路,探讨白花蛇舌草提取物减轻急性胰腺炎(AP)大鼠肺损伤的机制.方法:建立AP肺损伤大鼠模型,随机分为模型组、提取物(白花蛇舌草提取物)组、3-MA(自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤)组、AICAR(AMPK激活剂)组、提取物+AICAR组,每组15只,另取15只大鼠作为假手术组;ELISA检测血清淀粉酶(AMY)、IL-1β、IL-6、IL-18水平;检测大鼠腹水量及肺湿/干重比(W/D);HE观察胰腺及肺组织病理损伤;Western blot检测溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)、自噬底物p62、IL-1β前体蛋白(pro-IL-1β)、胰蛋白酶原活化肽(TAP)、AMPK、p-AMPK、ATG5、自噬标志物LC3-Ⅱ/Ⅰ、泛素特异性蛋白酶10(UPS10)表达.结果:与假手术组相比,模型组大鼠腹水量、肺W/D、胰腺和肺组织病理损伤评分、血清AMY、IL-1β、IL-6、IL-18水平、胰腺组织p62、TAP、pro-IL-1β表达、肺组织p-AMPK/AMPK、ATG5、LC3-Ⅱ/Ⅰ、UPS10、pro-IL-1β表达均升高(P<0.05),胰腺和肺组织LAMP2蛋白表达降低(P<0.05);模型大鼠经白花蛇舌草提取物或自噬抑制剂3-MA干预后,上述指标均得到显著改善(P<0.05),且白花蛇舌草提取物的改善效果优于3-MA(P<0.05);而AMPK激活剂AICAR可削弱白花蛇舌草提取物对AP大鼠肺损伤的改善作用(P<0.05).结论:白花蛇舌草提取物可通过抑制AMPK/ATG5信号通路减轻炎症反应、降低自噬水平改善AP大鼠肺损伤.

目的:观察针灸对帕金森病(PD)Thy1-α突触核蛋白(αSyn)转基因模型小鼠中脑黑质磷酸酶及张力蛋白同源物诱导的蛋白激酶1(PINK1)/帕金蛋白(Parkin)信号通路的影响.方法:将24只Thy1-αSyn转基因小鼠随机分为模型组、针刺组、针灸组和西药组;同窝野生型小鼠6只作为野生组.针刺组取百会和阳陵泉进行针刺;针灸组在针刺组的基础上加灸关元穴;西药组按10 mg/(kg·bw)剂量予雷帕霉素腹腔注射;野生组与模型组给与固定捆绑,不干预.观测各组小鼠总体转棒实验(ORP)评分;采用免疫组织化学法检测各组小鼠脑黑质的酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元;免疫荧光化学法检测αSyn;免疫印迹法检测αSyn、微管相关蛋白轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ、自噬蛋白sequestosome-1(SQSTM-1/p62)、PINK1、Parkin及泛素特异性蛋白酶30(USP30)蛋白表达;荧光定量聚合酶链反应法检测LC3B、p62、PINK1、Parkin及USP30 mRNA表达水平.结果:与野生组相比,模型组小鼠ORP评分及p62、PINK1与Parkin蛋白表达水平显著降低(P<0.01),PINK1 mRNA表达水平降低(P<0.05),USP30蛋白和mRNA表达水平上升(P<0.05).与模型组相比,针刺组和针灸组的ORP评分上升(P<0.05),针灸组和西药组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达上升(P<0.05),针刺组、针灸组及西药组p62、PINK1及Parkin蛋白表达上升(P<0.05),USP30蛋白表达显著降低(P<0.01);针刺组和针灸组Parkin mRNA表达水平增高(P<0.05),针灸组USP30 mRNA表达水平降低(P<0.05).结论:针灸可调节Thy1-αSyn转基因PD模型小鼠PINK1/Parkin信号通路相关分子表达,促进αSyn自噬降解,发挥多巴胺能神经元的保护作用.