目的:研制出具有良好缓释性能的依托孕烯（etonogestrel，ENG）/炔雌醇（ethinyl estradiol，EE）复方阴道环，并对其体外释放测定方法学开展研究，确立与实时释放方法具有良好相关性的加速释放方法。方法:以乙烯-醋酸乙烯共聚物（ethylene-vinyl acetate copolymer，EVA）为基质，以热熔挤出法制备ENG/EE复方阴道环，建立基于摇瓶法的体外实时释放测定方法和加速释放测定方法，考察该复方阴道环的体外释放行为及释放机制，并对其实时释放经时过程和加速释放经时过程的相关性进行分析。结果:所得阴道环外观圆整，表面光滑，在优选出的体外实时释放条件（释放介质：200 mL纯水，37 ℃恒温水浴振荡器中60 r/min振摇）中缓慢释药，第21天ENG和EE累计释放量分别为54.39%和46.80%，在优选出的体外加速条件（释放介质：200 mL 0.6%十二烷基硫酸钠水溶液，55 ℃下60 r/min振摇）下药物释放经时过程及其机制与实时释放条件下的拟合结果相关系数均大于0.99。结论:本研究研制的ENG/EE复方阴道环的体外缓释效果显著，所建立的加速释放方法与实时释放方法相关性良好，可供此类阴道环产品的质量评价研究及体外释放研究方法指南的制定提供有益参考。

目的:建立动物体温后降模型，探索浸泡性冻僵及机体复温过程中的体温后降对机体的影响。方法:配制低温模拟海水(温度为1℃)，将小型猪胸部以下部位淹没于低温模拟海水中。在小型猪的体温降到28.0℃时，立即将小型猪移出水面，35.0℃水浴复温。实时监测体温、心电图和心率等指标，分别于入水前、出水时及体温后降导致心电图出现室颤时采血，测定血糖、血小板、尿素氮、肌酐、血清钾、总胆红素、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、冷休克蛋白、肾上腺素等指标。结果:随着浸泡时间的延长，小型猪的体温逐渐降低，心率逐渐加快，但体温降到35.5℃后，心率逐渐降低。复温过程中，体温先继续下降，下降至最低平均温度25.3℃后开始回升，平均体温后降幅度为2.7℃。小型猪心率下降至平均50次/min后开始回升，在体温达到平均37.1℃时，心率恢复到平均112次/min。与入水前相比，出水时小型猪的血糖、尿素氮、肌酐、总胆红素、血清钾、谷草转氨酶、冷休克蛋白水平显著升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。与出水时相比，体温后降导致室颤时小型猪的血糖值显著降低，尿素氮、肌酐、总胆红素和谷草转氨酶水平显著升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。血小板、乳酸脱氢酶、肾上腺素等指标未发生显著变化。 结论:低温海水浸泡及"体温后降效应"显著影响机体的心功能、血糖及肝肾功能，可为下一步提出冻僵机体复温时体温后降的预防及救治策略提供理论依据。

目的:观察体外冲击波联合运动疗法治疗女性骨盆肌筋膜疼痛综合征(MPPS)的疗效。方法:采用随机数字表法将82例女性MPPS患者分为冲击波组(21例)、运动组(21例)、联合组(20例)及对照组(20例)。所有患者于每天睡前进行40 min温水浴，并每周进行3次肌电生物反馈治疗(每次治疗20 min)，持续治疗4周；冲击波组在此基础上针对双侧坐骨结节内侧及梨状肌体表投影区给予冲击波治疗，能量密度为1.4～9.8 mJ/mm 2，冲击频率3～6 Hz，总冲击次数为3000次，每周治疗2次；运动组则在治疗师指导下进行运动训练，包括呼吸训练、手膝相抗训练、臀大肌激活训练及骨盆周围肌肉牵伸训练等，3次/周；联合组则给予体外冲击波治疗及运动训练，具体方法及疗程同上。于治疗前、治疗4周后分别采用疼痛视觉模拟评分(VAS)、女性性功能指数(FSFI)及肛门反射检查对4组患者进行疗效评定；于治疗结束1个月后随访各组患者复发率及不良反应情况。 结果:治疗后4组患者疼痛VAS评分及FSFI评分均较治疗前明显改善( P<0.05)；并且冲击波组、联合组疼痛VAS评分[分别为(0.9±0.6)分和(0.3±0.5)分]均显著优于对照组及运动组[分别为(1.3±0.9)分和(1.0±0.8)分]，组间差异均具有统计学意义( P<0.05)；治疗后运动组、联合组肛门反射检查阴转阳比例(分别为85.7%和75.0%)亦显著优于对照组及冲击波组(分别为45.0%和52.4%)，组间差异均具有统计学意义( P<0.05)。治疗结束1个月后随访发现，4组患者复发率组间差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:体外冲击波联合运动训练能进一步提高女性MPPS患者康复疗效，缓解患者疼痛，提高生活质量，该联合疗法值得临床推广、应用。

目的:探讨中、长效胰岛素预处理对烧伤延迟复苏大鼠心肌主要氧化酶、抗氧化酶活性的影响。方法:将40只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假烫组、烧伤延迟复苏组、甘精胰岛素预处理组、精蛋白生物合成胰岛素预处理组，每组10只。以大鼠背部95 ℃水浴15 s制备总体表面积（TBSA）30% Ⅲ度烫伤模型；假烫组大鼠背部于37 ℃温水中15 s模拟烫伤。甘精胰岛素预处理组、精蛋白生物合成胰岛素预处理组、烧伤延迟复苏组分别于伤后2 h皮下注射甘精胰岛素、精蛋白生物合成胰岛素、生理盐水1.0 U·kg -1·d -1，伤后6 h腹腔注射生理盐水40 mL/kg模拟液体延迟复苏；假烫组不进行给药及延迟复苏。假烫组于伤后即刻、其他3组于伤后24 h采集大鼠腹主动脉血及摘取心脏，用分光光度法测定血糖以及心肌组织中氧化酶黄嘌呤氧化酶（XOD）、髓过氧化物酶（MPO）、抗氧化酶铜锌超氧化物歧化酶（CuZn-SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性。 结果:与假烫组比较，烧伤延迟复苏组血糖及心肌组织中XOD、MPO活性均显著升高，CuZn-SOD、CAT、GSH-Px活性显著下降。与烧伤延迟复苏组比较，甘精胰岛素预处理组、精蛋白生物合成胰岛素预处理组血糖及心肌组织中XOD均显著降低〔血糖（mmol/L）：6.37±1.22、6.66±1.45比9.47±0.80，XOD（U/g）：271.93（261.59，275.91）、285.32（251.96，297.29）比363.37（354.12，377.76），均 P<0.05〕，心肌组织中CuZn-SOD、CAT、GSH-Px活性均显著升高〔CuZn-SOD（U/g）：0.13±0.01、0.14±0.01比0.10±0.01，CAT（U/g）：29.17±7.28、27.16±7.37比18.36±4.53，GSH-Px（U/g）：0.33（0.16，0.41）、0.30（0.17，0.41）比0.07（0.04，0.11），均 P<0.05〕；MPO活性仅在甘精胰岛素预处理组显著低于烧伤延迟复苏组（U/g：0.016±0.002比0.020±0.002， P<0.05），但精蛋白生物合成胰岛素预处理组MPO活性与烧伤延迟复苏组比较差异无统计学意义（U/g：0.019±0.003比0.020±0.002， P>0.05）。甘精胰岛素预处理组与精蛋白生物合成胰岛素预处理组间血糖、XOD、MPO、CAT、GSH-Px活性比较差异均无统计学意义，但精蛋白生物合成胰岛素预处理组CuZn-SOD活性较甘精胰岛素预处理组进一步升高（U/g：0.14±0.01比0.13±0.01， P<0.05）。 结论:中、长效胰岛素预处理均可以改善烧伤延迟复苏大鼠心肌组织抗氧化能力，从而抑制活性氧的产生，提高活性氧的清除能力，但二者间仅CuZn-SOD活性有差异，这是否与胰岛素类型有关还需要进一步研究。

目的 探索实验室中一种简便的大鼠烫伤模型制备的方法.方法 选取30 只SPF级雄性SD大鼠,随机分为6 组,每组各5 只,其中一组为空白对照组,其余5 组为实验组.以比色管、温度计和恒温电热水浴锅制作可控温度、固定压力和面积的大鼠烫伤装置,以致伤时间为唯一可变因素,在大鼠背部建立不同深度的烫伤模型.5 组实验组的烫伤部位所受压力、温度均一致,烫时间分别为5 s、10 s、15 s、20 s、25 s,形成直径为3cm的圆形烫伤面,并于烫伤24h后观察各实验组大鼠的皮肤创面及造模后创口形成深度.结果 大鼠在烫伤后10 s、15 s、20 s符合三度六分法对浅Ⅱ度、深Ⅱ度及Ⅲ度烫伤创面程度的划分,其中,烫伤10s后为浅Ⅱ度烫伤,烫伤15s后为深Ⅱ度烫伤,烫伤20s后为Ⅲ度烫伤.通过本实验所采用的烫伤模型制作方法,根据烫伤创面的评价标准可得大鼠后背皮肤烫伤深度与持续时间呈明显正相关.结论 以比色管、温度计和恒温电热水浴锅制作的可控温度、固定压力和面积的烫伤装置,并以致伤时间为唯一可变因素,可制作浅Ⅱ度、深Ⅱ度、Ⅲ度大鼠烫伤模型,操作方便、经济、卫生,容易控制烫伤深度和面积,而且重复性好,是比较理想的烧、烫伤动物模型.

目的 制备运载双层抗原的CS-PLGA微球制剂,并对其进行相关表征鉴定.方法 通过复乳法结合溶剂挥发法制备得到多孔微球后,在4 ℃水浴条件下装载抗原,利用抗原浓度梯度介导的物理扩散促进抗原进入微球内部,并通过静电作用结合在微球外表面,形成内外双层抗原运载.根据聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)材料玻璃转化温度这一特性,促进多孔微球表面孔道在48 ℃条件下发生愈合,使其形成闭合的微球制剂,再将得到的微球制剂与壳聚糖溶液混悬镀层,进行阳离子修饰,逆转微球表面负性电位.通过扫描电子显微镜、动态光散射粒度仪等检测微球形态、粒径分布和电位变化,采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定抗原是否装载至微球制剂中,采用荧光标记的BSA和荧光标记的PLGA材料进行激光共聚焦显微镜观察抗原装载后的分布情况,通过BCA法检测微球制剂的包封率和载药率.结果 扫描电镜和光学显微镜结果显示多孔微球成孔良好,粒径大小为(73.94±0.81)nm,多分散性指数为0.038±0.004.Zeta电位由负转正说明壳聚糖已被成功镀层至微球表面.经过SDS-PAGE、激光共聚焦显微镜等证实BSA已被成功运载.经micro BCA试剂盒检测后多孔微球包封率为(3.01±0.04)％,载药率为(1.50±0.02)％.结论 成功制备得到运载双层抗原的CS-PLGA制剂,为后续缓控释制剂研究提供新思路.

目的 寻找皮肤石蜡包埋组织Ⅳ型胶原免疫荧光(IF-PE)最佳抗原修复方法.方法 以2021年1月至2022年12月在上海交通大学医学院附属儿童医院确诊的X-连锁Alport综合征患儿和父(母)亲共14例皮肤组织,冰冻组织免疫荧光(IF-FT)为自身对照,比较不同抗原修复法IF-PE染色部位和强度.结果 与Ⅳ型胶原IF-FT自身对照比较,采用蛋白酶K修复,仅部分患儿基膜正常分布(6/14),而角质层均异常表达;微波、高温水浴和高压蒸汽3种修复方法,基膜均无正常分布,角质层异常分布(分别为2/14,11/14,12/14);微波联合酶修复法仅2例基膜正常分布,未见角质层异常表达;高压蒸汽联合酶和高温水浴联合酶2种修复法基膜全部正常分布,角质层异常表达(分别为14/14和2/14),表达强度两者接近.结论 高温水浴联合蛋白酶K可作为皮肤石蜡包埋组织Ⅳ型胶原免疫荧光理想的抗原修复法.

目的:优化香附总黄酮的提取工艺.方法:基于U?10(108)均匀设计试验,采用水浴回流法,以香附总黄酮提取率为评价指标,考察回流温度、提取时间、乙醇浓度、料液比、回流次数对香附总黄酮提取效果的影响.分别采用BP神经网络-遗传算法及二维可视化分析对试验结果进行目标寻优,并进行工艺验证.结果:BP神经网络-遗传算法处理分析得到优化结果为:回流温度 95℃、提取时间 165 min、乙醇浓度 90%、料液比 1∶15(g/mL)、回流次数 2 次,验证试验显示此条件下总黄酮平均提取率为 3.22%;二维可视化分析处理得到优化结果为:回流温度 80℃、提取时间 140 min、乙醇浓度60%、料液比1∶40(g/mL)、回流次数2 次,验证试验显示此条件下总黄酮平均提取率为 3.24%.结论:两种优化方法的工艺优化参数不同,且二维可视化分析结果略优于BP神经网络-遗传算法,两种方法的综合比较可为同复杂的提取工艺优化提供新思路.

目的 建立二黄栓制备工艺及其中二硫化二砷含量测定方法.方法 采用G1-熵权法结合正交设计,以外观性状、质量差异和融变时限为评分指标,考察基质类型及用量、熔融温度、搅拌时间、注模温度,得出最佳制备工艺.样品经不同前处理方法处理后,分别采用碘量法与原子吸收分光光度法对二硫化二砷进行定量分析.结果 以混合脂肪酸甘油酯为基质,在 60℃水浴条件下熔融,搅拌 20 min,冷却至 50℃注模为最佳制备工艺.二硫化二砷取样量在59.88～249.48 mg范围内与碘滴定液消耗体积(mL)线性关系良好,Y=0.187 0X+0.527 5,r=0.999 0,平均加样回收率101.48%,RSD1.16%(n=6);原子吸收分光光度法中砷元素在 20～100 μg·mL-1 范围内与吸光度线性关系良好,Y= 6.353 0×10-3X+0.055 8,r=0.998 6,平均加样回收率 99.31%～105.20%,RSD<3.05%(n=9).结论 所建立的二黄栓制备工艺流畅、稳定,对工业化生产具有较好借鉴价值;两种含量测定方法准确,灵敏度高,重复性好,均可用于二黄栓中二硫化二砷定量分析.

目的:观察雀啄灸神阙、关元对寒湿凝滞型原发性痛经(PD)大鼠扭体反应及评分,施灸穴区及子宫温度值,子宫血流灌注量,大鼠血清精氨酸血管加压素(AVP),前列腺素(PG)F2α及血栓素(TX)B2含量的影响,探讨雀啄灸治疗PD的可能机制.方法:将32只雌性未孕健康Wistar大鼠采用随机数字表法分为正常组、模型组、布洛芬组及雀啄灸组,每组8只.除正常组外,其余三组采用冷水浴结合苯甲酸雌二醇复合缩宫素注射的方法造模.雀啄灸组大鼠于造模第8天接受雀啄灸神阙和关元治疗,每次30 min,1次/日,连续3 d;布洛芬组大鼠于造模第8天接受布洛芬溶液(规格为10 mL,125 mg)0.8 mL灌服治疗,1次/日,连续3 d;正常组与模型组给予0.8 mL 生理盐水灌胃,1次/日,连续3 d.第11天,各组大鼠腹腔注射缩宫素(2 U/只).观察各组大鼠20 min内扭体潜伏期及扭体评分,观测大鼠神阙、关元穴区及在体子宫的温度值及血流灌注量,检测大鼠血清中AVP、PGF2α及TXB2的含量.结果:雀啄灸组及布洛芬组扭体潜伏期较模型组明显延长(P<0.01),扭体评分显著降低(P<0.01);与布洛芬组比较,雀啄灸组扭体潜伏期延长(P<0.01),扭体评分降低(P<0.01);与正常组比较,模型组大鼠神阙、关元穴区及子宫温度值,以及子宫血流灌注量明显降低,血清PGF2α、AVP及TXB2含量明显升高(P<0.01);与模型组比较,布洛芬组、雀啄灸组大鼠神阙、关元穴区及子宫温度值,以及子宫血流灌注量均明显升高,血清PGF2α、AVP及TXB2的含量明显降低(P<0.05或P<0.01);与布洛芬组比较,雀啄灸组大鼠神阙、关元穴区及子宫温度值,以及子宫血流灌注量均明显升高(P<0.05),血清AVP及TXB2含量明显降低(P<0.05),血清PGF2α含量无统计学差异(P>0.05).结论:雀啄灸对寒湿凝滞型原发性痛经镇痛效果显著,其机制可能与提高灸治穴区、子宫温度值及子宫血流灌注量,降低血清PGF2α、AVP及TXB2含量有关.