目的:了解狂犬病病毒在体外组织和体液样本中的生存能力。方法:通过病毒滴度测定、直接免疫荧光、RT-PCR和病毒分离实验室技术手段对体外组织和悬液中狂犬病病毒生存活力进行验证。结果:随着温度升高，脑组织和悬液中狂犬病病毒活力逐渐下降，在56℃，30 min后病毒即失去感染力，在37℃时，组织中病毒活力可保持7 d；在pH9.6时，1 h后无法检测病毒活力；终浓度30%以上乙醇，500 mg/L以上次氯酸钠和100 mg/L以上苯扎溴铵对悬液中狂犬病病毒作用3 min后即可完全灭活；80%丙酮对组织中狂犬病病毒灭活作用最强，在浸泡4 h后样本即无法进行病毒分离。结论:狂犬病病毒不耐高温，在pH6.8~7.4环境中较为稳定，常用消毒剂即可对病毒发挥作用；本实验旨在为狂犬病病毒的体外生存活力提供详细数据，为下一步狂犬病防控工作开展提供理论支持。

目的:建立DB-WAX毛细管柱同时测定工作场所空气中30种挥发性有机污染物的快速检测方法。方法:于2020年8月，用活性炭管采集工作场所空气中正戊烷、正己烷、甲基环己烷、辛烷、丙酮、乙酸乙酯、丁酮、苯、3-戊酮、三氯乙烯、四氯乙烯、甲苯、乙酸丁酯、2-己酮、乙酸异戊酯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、乙酸戊酯、邻二甲苯、氯苯、苯乙烯、环己酮、对氯甲苯、溴苯、间二氯苯、对二氯苯、邻二氯苯、邻氯甲苯、1, 2, 4-三氯苯30种物质，经二硫化碳解析，解吸液经DB-WAX柱分析，火焰离子化检测器测定。结果:30种挥发性有机污染物分离效果好，工作曲线线性相关系数均>0.999，相对标准偏差0.1%~3.2%，解吸效率77.0%~117.1%，定量下限0.33~ 5.33 μg/ml，最低定量浓度0.22~ 3.55 mg/m 3，加标回收率95.4%~104.9%。 结论:该方法能够较好地分离和测定工作场所空气中30种挥发性有机化合物，操作简便、快捷。

目的:探讨3-溴丙酮酸-胆固醇酯(3-bro-mopyruvate cholesterol ester,3-BP-Cl)增强乳腺癌对他莫昔芬(tamoxifen,TAM)敏感性作用及机制.方法:MTT法检测药物对乳腺癌细胞活力的影响,并使用金氏公式检验3-溴丙酮酸-胆固醇酯与他莫昔芬是否具有协同抗乳腺癌作用.Calcein AM/PI染色法检测药物对细胞的毒性作用,集落克隆形成法检测药物对乳腺癌细胞的增殖抑制作用.流式细胞术检测药物诱导乳腺癌细胞的凋亡作用.Western blot检测药物对细胞己糖激酶2、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.结果:MTT结果显示3-溴丙酮酸-胆固醇酯具有抑制乳腺癌作用,与他莫昔芬联用能显著抑制MCF-7细胞生长活性(P<0.05).金氏公式测算结果显示3-溴丙酮酸-胆固醇酯与他莫昔芬具有协同抑制乳腺癌细胞增殖作用(q>1.15).Calce-in AM/PI染色结果显示两药联用组细胞死亡数量最多.集落克隆形成实验结果显示两药联用组MCF-7细胞的集落数量最少.Annexin V凋亡结果显示与单药组相比,联用组细胞凋亡数量显著升高(P<0.01).Western blot结果显示3-溴丙酮酸-胆固醇酯具有抑制MCF-7细胞内己糖激酶2、Bcl-2表达,增强Bax表达的作用.结论:3-溴丙酮酸-胆固醇酯可增加乳腺癌细胞对他莫昔芬的敏感性,协同发挥抑制乳腺癌细胞的作用.机制与其下调细胞内己糖激酶2、Bcl-2的表达,增强Bax的表达有关.

目的:探讨糖酵解抑制剂3-溴丙酮酸(3-BP)对耐顺铂鼻咽癌细胞HNE1/DDP增殖和凋亡的影响.方法:MTT比色法和集落克隆形成实验检测3-BP对HNE1/DDP细胞的增殖抑制作用,PI染色法检测3-BP对HNE1/DDP细胞凋亡的影响,Western blotting检测凋亡相关蛋白多聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)、髓样细胞白血病-1(Mcl-1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的表达.结果:3-BP可显著抑制HNE1/DDP细胞的增殖,其48 h的IC50值为260.2μmol/L.低浓度(10、20、40μmol/L)的3-BP能明显抑制HNE1/DDP细胞集落克隆的形成.3-BP可诱导HNE1/DDP细胞发生明显的细胞凋亡(P<0.01),80、160、320μmol/L 3-BP作用48 h的细胞凋亡率分别为(13.7±2.1)％、(25.5±2.4)％、(45.5±3.5)％,对照组的细胞凋亡率为(1.6±0.6)％.Western blotting结果显示,3-BP处理HNE1/DDP细胞后可促进PARP的剪切,能下调抗凋亡蛋白Mcl-1和Bcl-2的表达.结论:3-BP对HNE1/DDP细胞具有增殖抑制及凋亡诱导作用,其机制可能与下调抗凋亡蛋白Mcl-1和Bcl-2的表达相关.

目的 观察溴氰菊酯暴露对抗性白纹伊蚊幼虫氨基酸的影响,探索溴氰菊酯毒性相关氨基酸标志物.方法 从广州市越秀区采集白纹伊蚊幼虫,实验室饲养,取F1代幼虫进行溴氰菊酯抗性测定;将抗性白纹伊蚊F1代幼虫分成药物暴露组、丙酮暴露组和空白对照组(每组10条),前两组分别用溴氰菊酯丙酮溶液和相同浓度的丙酮暴露,空白对照组不做处理;用LC-MS/MS检测三组幼虫体内的氨基酸水平,每组重复检测6次.结果 F1代幼虫LC50=0.065 mg/L,确定为抗性种群;药物组幼虫体内12种氨基酸与空白对照组出现差异(P<0.05),其中丙氨酸、瓜氨酸、酪氨酸、甘氨酸、亮氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、蛋氨酸和苏氨酸11种氨基酸水平在暴露后降低(P<0.05),组氨酸水平在暴露后升高(P<0.05);药物组幼虫体内的丙氨酸、瓜氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸的变化与丙酮暴露组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 溴氰菊酯丙酮溶液暴露可导致抗性白纹伊蚊幼虫体内12种氨基酸水平改变,其中丙氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和瓜氨酸浓度水平降低与溴氰菊酯暴露有关.

目的 建立尿液中1-溴丙烷代谢物(溴丙酮、1-溴-2-丙醇)的定性定量检测方法.方法 把小白鼠经呼吸道进行1-溴丙烷染毒制做动物模型,取染毒后小白鼠尿液于顶空瓶中,用动态顶空法进行样品处理,气相色谱-串联质谱联用仪进行定性定量检测,外标定量法.结果 采用动态顶空法对化合物进行浓缩、富集,DB-5MS(30 m×0.25 mm×0.25μm)型毛细管柱进行目标峰分离,EI离子源,选择离子扫描法(SIM)进行质谱检测,可对尿液中溴丙酮和1-溴-2-丙醇进行有效分离和准确定性、定量.批内重复性2.8％～4.9％,加标回收率91.8％ ～ 109.6％.染毒动物尿液中溴丙酮和1-溴-2-丙醇的检出率100％.结论 动态顶空-气相色谱-串联质谱联用法可对1-溴丙烷代谢物(溴丙酮、1-溴-2-丙醇)进行准确定性、定量检测,溴丙酮和1-溴-2-丙醇可以作为1-溴丙烷暴露的生物标志物.

目的 探究单羧酸转运蛋白1(MCT1)在增强乳腺癌细胞对3-溴丙酮酸(3-BrPA)敏感性中的作用,为乳腺癌治疗提供新思路.方法 MTT法检测3-BrPA对乳腺癌细胞的增殖抑制作用,溴化丙啶单染法流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA试剂盒检测细胞内己糖激酶Ⅱ、乳酸脱氢酶、乳酸、三磷酸腺苷水平,Western blot检测MCT1蛋白的表达,瞬时转染cDNA上调MCTl的表达后,检测3-BrPA对MDA-MB-231细胞的增殖和三磷酸腺苷水平的影响.结果 3-BrPA对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响不明显,200 μmol/L作用24 h后增殖抑制率和凋亡率仅为8.72％和7.8％;但200 μmol/L 3-BrPA作用MCF-7细胞24 h后其增殖抑制率和凋亡率为84.6％和82.3％.MDA-MB-231细胞的MCT1过表达后,200 μmol/L 3-BrPA对细胞的增殖抑制率为72.44％,明显高于对照组(P＜0.05);25、50、100、200 μmol/L 3-BrPA作用细胞6h后,细胞内三磷酸腺苷水平和对照组相比分别为96.98％、88.44％、43.3％、27.56％.结论 MCT1能增强乳腺癌细胞对3-BrPA的敏感性,其机制可能是将3-BrPA转运到细胞内,从而抑制细胞糖酵解来发挥抗肿瘤作用.

目的:利用非线性化学指纹图谱技术结合HPLC对天麻的产地进行鉴别,并对不同产地天麻中天麻素及整体活性成分进行定量分析.方法:采集了云南、湖北、贵州和东北三省4个产地天麻,利用非线性化学指纹图谱及HPLC指纹图谱对其产地进行鉴别.采用硫酸+硫酸锰+溴酸钠+丙酮+样品成分振荡体系,以天麻样本作振荡底物,建立天麻的非线性化学指纹图谱,结合图谱显著的直观差异及系统相似度模式识别对不同产地天麻进行鉴别评价,并测定不同产地天麻活性物质相对整体含量.同时,建立4个产地天麻的高效液相色谱指纹图谱,进行模糊聚类分析,并测定不同产地天麻的天麻素含量.结果:非线性指纹图谱法与HPLC指纹图谱分类结果一致,均能把天麻的产地给予溯源.活性成分相对含量的比较结果显示不同产地的天麻存在品质差异,两种方法相结合,既能对单个活性组分进行定性定量分析,又可获得活性成分整体含量的结果.结论:该研究为天麻的产地鉴别提供了一种简单、经济、快速的新方法,为科学表征天麻活性成分含量提供了新的技术手段.

目的 建立超声辅助萃取(UAE)-分散液液微萃取(DLLME)结合气相色谱串联质谱法(GC-MS-MS)测定饮用水中14种多溴联苯醚(PBDEs)残留的方法.方法 水样采用UAE-DLLME富集提取,1.0 ml丙酮作为分散剂,20μl四氯乙烷作为萃取剂,样品提取后进GC-MS-MS检测,经过DB-5(15 m×0.25 mm,0.20μm)色谱柱分离,多反应监测模式(MRM)进行定量.结果 在0.05～20μg/L(除BDE-209在0.25～100 g/L,外),回归方程均呈较好的线性关系,r＞0.998.该方法的检出限为1.3～72 ng/L,定量下限为3.8～210 ng/L,加标回收率在80.6％～95.6％之间,RSD＜8.4％.结论 该方法具有操作简单、快速、环保,重现性和准确度好等特点,适用于饮用水中14种的PBDEs的测定.

目的 采用顶空气相色谱法同时测定罗库溴铵起始物料LK-7中的8种残留溶剂.方法 采用毛细管色谱柱Aglient DB-624(25 m×0.53 mm,3.0 μm),程序升温,FID检测器,检测器温度:250℃,氮气为载气,流速:1.0 mL·min-1,采用顶空进样方式,进样口温度:200℃,顶空平衡温度:90℃,平衡时间:20 min.结果 乙酸异丙烯酯、甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷、吡啶、乙醚、2,4,6-三甲基吡啶、丙酮8种残留溶剂分别在0.030～0.301(r=1.000 0)、0.06～0.601(r=0.999 8)、0.013 ～0.126(r =0.999 8)、0.001～0.012(r =0.999 6)、0.004～0.041(r=0.999 8)、0.101～ 1.001 (r=0.999 0)、0.004 ～0.042(r=1.000 0)、0.100～1.003 mL·min-1(r=0.999 0)内线性关系良好,平均回收率分别为100.33％(RSD=1.04％)、93.68％(RSD=1.46％)、95.72％(RSD=1.67％)、91.03％ (RSD=1.21％)、95.95％(RSD=1.34％)、91.77％(RSD=2.51％)、99.48％(RSD=0.89％)、95.42％ (RSD=1.33％).结论 该方法可用于罗库溴铵起始物料中的残留溶剂检查.