[目的]为了探究草珊瑚[Sarcandra glabra(thunb)nakai]不同器官中内源激素对类胡萝卜素差异积累的可能调控机制.[方法]通过代谢组学方法分析草珊瑚中内源激素和类胡萝卜素代谢物在不同器官间的差异分布情况,结合转录组学技术挖掘草珊瑚类胡萝卜素相关差异酶基因,进一步预测参与调控差异酶基因的转录因子及其激素相关顺式响应元件,从而分析内源激素对类胡萝卜素差异积累的可能调控作用.[结果]吲哚-3-羧酸(indole-3-carboxylic acid)、反式茉莉酸[(-)-jasmonic acid]、二氢茉莉酮酸甲酯(ethyl dihydrojasmonate)、油菜素甾酮(castasterone)、油菜素内酯(brassinolide)等 7 种内源激素在叶中的含量更高,与角黄素(canthaxanthin)、海胆酮(echinenone)、新黄质(neoxanthin)和念珠藻黄素(nostoxanthin)等 8 种差异代谢物等富集部位一致;而脱落酸(abscisic acid,ABA)、赤霉素 4,5-甲氧基水杨酸(gibberellin 4,5-methoxysalicylic acid)、二氢茉莉酸(dihydrojasmonic acid)和 5,6-二羟基吲哚(5,6-dihydroxyindole)在根中的含量更高,与脱落酸醛(abscisic aldehyde)、4,4'-二聚戊烯(4,4'-aiapolycopenedial)、花药黄质(antheraxanthin)这 3 种差异代谢物富集部位一致;关键转录因子MYB106、SPL1、NAC015、ERF064、WRKY44、BHLH116 可通过响应AUX、SA、GA、ABA、Me_JA等植物激素的刺激,参与调控类胡萝卜素合成途径的DXS、VDE、ABA2、AOG、ZEP、CYP97C1、DWARF27、CRTISO、LCYB、PSY这 10 种代谢酶的表达.实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)结果表明,随机选取的 8 个差异基因表达趋势与转录组测序结果一致.[结论]筛选出草珊瑚叶和根与类胡萝卜素相关的 15 种差异内源激素与 11 种差异代谢物,预测了 6 种转录因子参与调控 10 种代谢酶.

目的 探究药食同源中药复方(葛根、夏枯草、杜仲叶、菊花、山楂、芹菜)对两肾一夹(2 kidneys and 1 clip,2K1C)型高血压大鼠血压、肠道菌群结构和血清代谢物的调控作用.方法 2K1C型高血压大鼠随机分为模型组、氯沙坦(0.3mg/kg)组和药食同源中药复方低、中、高剂量(0.5、2.5、5.0mg/kg)组,每组7只.连续给药6周后,取眼周血,采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清相关指标;采用16S rDNA测序技术分析各组大鼠肠道菌群变化;采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肝脏和肾脏组织病理变化;采用高效液相质谱检测各组大鼠血清代谢产物变化.结果 药食同源中药复方干预6周后,大鼠血压明显下降(P＜0.05、0.001),血清中总胆红素(total bilirubin,TBIL)和直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)水平显著降低(P＜0.05).16SrDNA测序结果显示,在门水平上,大鼠肠道微生物群落的主要结构由厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria)、放线杆菌门(Actinobacteria)和酸杆菌门(Acidobacteria)组成,其中与模型组比较,药食同源中药复方组拟杆菌门相对丰度升高,厚壁菌门相对丰度降低;在属水平上主要由乳酸杆菌属Lactobacillus、肠球菌属Enterococuus、布劳特氏菌属Blautia、罗姆布茨菌属Romboutsia和丁酸弧菌属Anaerostipes组成,药食同源中药复方组乳酸杆菌属相对丰度明显高于模型组.各组大鼠血清代谢产物存在明显差异,筛选得到143个差异性血清代谢产物.药食同源中药复方组血清中牛磺胆酸、L-抗坏血酸、焦谷氨酸、苯乙酰甘氨酸水平显著上调,甘氨胆酸水平显著下调.组织病理切片结果表明,药食同源中药复方干预可修复高血压造模造成的腹主动脉及肾脏结构性损伤,进一步修复腹主动脉及肾脏的功能.结论 药食同源中药复方可通过改善2KlC型高血压大鼠肠道菌群结构,调节血清代谢产物,从而发挥对高血压的治疗作用.

目的 建立白芷UPLC指纹图谱,结合化学计量学方法寻找不同熏硫程度白芷质量差异的标志物.方法 该药物的分析采用月旭XtimeUPLCC18色谱柱(4.6mm×150mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1％乙酸,梯度洗脱;体积流量0.35 mL/min;柱温35℃;检测波长305 nm.采用中药指纹图谱相似度评价软件进行相似度评价,结合聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析对白芷样品进行全面的质量评价.结果 共得到11个共有峰,并通过对照品比对出其中7个(白当归素、氧化前胡素、异欧前胡素、欧前胡素、珊瑚菜素、佛手柑内酯、水合氧化前胡素);33批样品指纹图谱的相似度为0.735～0.997.聚类分析仅将白芷样品聚为3类;主成分分析将样品分为3类,与4种熏硫程度分类一致.正交偏最小二乘法-判别分析筛选出5种差异性成分,经对照品比对,确定了其中2种差异性成分,分别为氧化前胡素、水合氧化前胡素.3种主成分含量测定结果为欧前胡素0.444～3.725 mg/g,珊瑚菜素0.241～0.631mg/g,异欧前胡素0.179～0.508 mg/g.结论 该方法稳定可靠可用于不同熏硫程度白芷的质量控制.

采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20和制备型高效液相等色谱方法对石椒草属植物石椒草Boenninghiausenia sessilicarpa全草乙醇提取物的石油醚萃取部位进行分离纯化,同时根据化合物波谱数据对单体化合物进行结构鉴定.从石油醚萃取部位共分离鉴定了 15个香豆素类化合物,结构鉴定分别为:欧芹烯酮酚甲醚(1)、九里香素(2)、3-(1,1-二甲基烯丙基)-8-羟基-7-甲氧基香豆素(3)、花椒毒素(4)、异茴芹素(5)、状芸香素(6)、异去甲基呋喃羽叶芸香素(7)、欧前胡素(8)、珊瑚菜内脂(9)、白芷脑素(10)、白当归素(11)、新比克白芷内酯(12)、chalepin(13)、鲁望桔内酯(14)、3-(1,1-二甲基烯丙基)-花椒内酯(15).化合物1～3、6～10和14～15均首次从石椒草中分离得到.

目的 研究达乌里芯芭Cymbaria dahurica L.的化学成分.方法 达乌里芯芭70％乙醇提取物采用大孔树脂、Sephadex LH-20、硅胶、聚酰胺、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果 从中分离得到33个化合物,分别鉴定为梓醇(1)、京尼平-1-O-β-D-龙胆双糖苷(2)、栀子苷(3)、龙胆苦苷(4)、桃叶珊瑚苷(5)、cis-eurostoside(6)、eurostoside(7)、玉叶金花苷酸(8)、8-表马钱子苷酸(9)、小麦黄素(10)、木犀草素(11)、金圣草素(12)、芹菜素(13)、5,7-二羟基-3',4',5'-三甲氧基黄酮(14)、槲皮素(15)、反式咖啡酸(16)、咖啡酸乙酯(17)、trans-p-hydroxycinamic acid(18)、cis-p-hydroxycinnamic acid(19)、原儿茶酸(20)、对羟基苯甲酸(21)、香草酸(22)、丁香酸(23)、没食子酸(24)、3,4,5-三甲氧基苯甲酸(25)、acteoside(26)、isocrenatoside(27)、酪氨酸(28)、N,N,N-三甲基甘氨酸内盐(29)、β-谷甾醇(30)、胡萝卜苷(31)、stigmastanol-3β-p-glyceroxydihydrocoumaroate(32)、β-谷甾醇棕榈酸酯(33).结论 化合物 6、19、27～29、32为首次从芯芭属植物中分离得到.通过2D NMR及X射线单晶衍射首次确切归属了化合物9的8、9位碳氢信号的顺序.

目的:分析福建省平潭岛长江澳沙滩珊瑚菜群落现状,提出保护与合理开发方案.方法:实地考察,样地调查.结果:(1)长江澳31个2 m×2 m样方中,除木麻黄种苗外,共有物种9科14属15种.(2)样地内频度前三位植物为海边月见草(80.65％)、老鼠艻(77.42％)、珊瑚菜(45.16％);密度前三位植物为老鼠艻(1.73％)、海边月见草(1.65％)、肾叶打碗花(1.20％);多度前三位植物为老鼠艻(22.46％)、海边月见草(21.41％)、肾叶打碗花(15.63％);盖度前三位植物为海边月见草(20.55％)、老鼠艻(15.87％)、牛筋草(3.13％).(3)珊瑚菜的频度、密度、多度、盖度分别为45.16％、0.98％、12.80％、1.42％.结论:平潭岛长江澳沙滩珊瑚菜资源较丰富,生态适宜,破坏严重,须加大保护力度.

目的 克隆珊瑚菜Glehnia littoralis补骨脂素合成酶(psoralen synthase,PS)基因全长cDNA序列,并进行生物信息学和表达量分析.方法 在前期珊瑚菜转录组测序的基础上,筛选出表达量较高的2条PS基因G1PS1和GlPS2序列.利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)方法对2个基因cDNA序列3'端进行克隆,DNAMAN拼接后得到基因全长cDNA序列,并对其编码蛋白进行生物信息学分析.利用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)方法检测GlPS1和GlPS2基因的组织特异性表达.结果 G1PS1和G1PS2基因cDNA序列全长分别为1 885 bp和l 971 bp,编码495和502个氨基酸残基,蛋白相对分子质量分别为55 740.7和56 363.9,等电点为8.28和6.62,均属于细胞色素P450超家族,含有1个跨膜区,为亲水性蛋白.系统进化分析表明,G1PS1和G1PS2与伞形科欧防风Pastinaca sativa、旱芹Apium graveolens、大阿米芹Ammi majus PS蛋白亲缘关系较近.RT-qPCR结果显示GlPS1基因在根中表达量较高,在叶中表达量较低,而G1PS2基因在花中表达量较高,在根中表达量较低.结论 首次获得珊瑚菜GlPS1和GlPS2基因的全长cDNA序列并进行了表达分析,为进一步开展珊瑚菜补骨脂素合成酶基因的功能和遗传调控机制研究奠定基础.

目的:对珊瑚菜(Glehnia littoralis)4-香豆酸:辅酸A连接酶(4-Coumarate:Coenzyme A Ligase,Gl4CL)基因编码区进行克隆及序列分析.方法:本研究在前期珊瑚菜高通量测序的基础上,利用cDNA末端快速扩增(Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE)方法对Gl4CL基因全长cDNA序列进行克隆.对Gl4CL蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析.利用实时荧光定量PCR方法检测Gl4CL基因在珊瑚菜的根、叶中的表达情况.结果:Gl4CL基因cDNA序列全长1 951 bp,编码544个氨基酸,其中开放阅读框1 635 bp,5'非编码区153 bp,3'非编码区163 bp.生物信息学分析表明,G14CL蛋白大小约为59.481 kDa,等电点为8.20.Gl4CL基因在珊瑚菜的根和叶均存在表达,且在根中表达量显著高于叶.结论:本研究为进一步开展Gl4CL基因功能和遗传调控研究奠定基础,通过深入探讨Gl4CL基因的表达调控与木质素、植株生长表型等关系,有望获得抗病虫害、抗逆性强的北沙参高产优质品系.

目的:研究飞龙掌血根的香豆素类化学成分.方法:综合运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20色谱、半制备高效液相色谱等色谱方法富集、分离、纯化飞龙掌血中的化学类成分,采用NMR和质谱等波谱学方法鉴定化合物的结构.结果:从飞龙掌血中分离得到15个香豆素类成分,鉴定为:飞龙掌血素(1)、九里香内酯(2)、8-(3,3-dime-thylallyl)-6,7-dimethoxycoumarin(3)、柠檬内酯(4)、6-formyllimettin(5)、artanin (6)、飞龙掌血内酯酮(7)、yunngnin B(8)、美花椒内酯(9)、珊瑚菜内酯(10)、cedrecomarin B(11)、6-(3'-氯-2'-羟基-3'-甲丁基)-5,7-二甲基香豆素(12)、飞龙掌血内酯烯酮(13)、别美花椒内酯(14)、飞龙掌血内酯烯醇(15).结论:其中,化合物8、9、11、14为首次从该属植物中分离得到,化合物4为首次从该植物中分离得到.

目的 研究飞龙掌血根皮正丁醇部位的化学成分.方法 利用各种色谱技术提取分离纯化该药材提取物中的天然产物,并经过波谱方法鉴定化合物结构.结果 从飞龙掌血根皮正丁醇部位分离得到13个化合物,鉴定出香豆素类化合物7个,其中呋喃香豆素类化合物6个:分别为茴芹内酯(1)、佛手内酯(2)、别欧前胡素(3)、异茴芹内酯(4)、走马芹内酯(5)、珊瑚菜素(6)、飞龙掌血内酯(7);有机酸酯类化合物4个:对苯二甲酸单异辛酯(8)、阿魏酸甲酯(9)、4-甲氧基肉桂酸(10)、4-羟基肉桂酸甲酯(11);生物碱类化合物1个:两面针碱(12);黄酮类化合物1个:橙皮苷(13).结论 化合物8为首次从芸香科植物中分离得到,化合物3、5、9、10、11为首次从该植物中分离得到.