目的:探讨雄激素受体（AR）对从前列腺癌LNCaP细胞中分选出的CK5 +CK8 +细胞的作用及其调控机制。 方法:采用流式细胞术从LNCaP细胞中分选CK5 +CK8 +细胞，使用慢病毒载体携带AR基因转入CK5 +CK8 +细胞。实验分为转入AR的AR CK5 +CK8 +组和转入空载体的V CK5 +CK8 +组，在1、10 nmol／L二氢睾酮（DHT）培养条件下，采用蛋白质印迹法检测AR、p-AKT和bcl-2蛋白的表达，应用四甲基偶氮唑盐（MTT）法、细胞迁移实验和琼脂糖凝胶克隆形成实验检测AR对CK5 +CK8 +细胞生物学特性的影响。采用MTT法检测应用AKT信号通路活化抑制物LY 294002（LY）、γ-生育三烯酚（γ-TT）和（或）诱导AR表达的5-氮胞嘧啶（5-AZA）对CK5 +CK8 +细胞增殖的影响。 结果:AR基因转入CK5 +CK8 +细胞后，AR表达增强，p-AKT和bcl-2蛋白表达水平降低。在1、10 nmol／L DHT作用2、4、6 d后，AR CK5 +CK8 +组细胞较V CK5 +CK8 +组细胞增殖受抑制程度高，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。DHT 1、10 nmol／L作用3 d后，AR CK5 +CK8 +组细胞较V CK5 +CK8 +组细胞迁移能力下降[迁移细胞数：（54±9）个比（113±21）个，（13±3）个比（34±6）个]，差异均有统计学意义（ t＝4.450， P<0.01； t＝5.157， P<0.01）。DHT 1、10 nmol／L作用3周后，AR CK5 +CK8 +组细胞较V CK5 +CK8 +组细胞成瘤能力弱[克隆数：（39±　7）个比（105±16）个，（41±6）个比（86±6）个]，差异有统计学意义（ t＝6.631， P<0.01； t＝8.662， P<0.01）。5 nmol／L LY＋10 nmol／L 5-AZA、5 nmol／L LY＋5 nmol／L γ-TT、10 nmol／L 5-AZA＋5 nmol／Lγ-TT、2.5 nmol／L LY＋5 nmol／L 5-AZA＋2.5 nmol／L γ-TT联合1 nmol／L DHT或10 nmol／L DHT作用2、4、6 d均能抑制CK5 +CK8 +细胞增殖（均 P<0.05）。 结论:AR可以抑制从LNCaP中分选出的CK5 +CK8 +细胞增殖，导致细胞迁移和成瘤能力下降；其可能通过抑制AKT-bcl-2信号通路的活化而发挥作用。

目的 了解生育三烯酚对小鼠免疫功能的影响.方法 根据《保健食品检测与评价技术规范》的要求,设立3个剂量组(50、75和100mg/kg·BW)和1个阴性对照组.经过30天的口服给与不同剂量生育三烯酚后,比较小鼠的免疫器官脏器系数、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能和自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)活性的变化.结果 与对照组小鼠半数溶血值(half value of hemolysin,HC50)(223.0±6.7)相比较,75 和 100mg/kg·BW 剂量组的 HC50 值(238.0±7.3,245.2±7.8)明显升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05);75 mg/kg·BW组小鼠抗体生成细胞数[(44.4±5.7)×103个]较对照组[(36.7±6.2)×103个]增加,差异有统计学意义(P＜0.05);生育三烯酚促进刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导后脾淋巴细胞转化能力75和100 mg/kg·BW组(0.249±0.042、0.256±0.033)明显高于对照组(0.183±0.064),差异均有统计学意义(均P＜0.05);100mg/kg·BW组小鼠在绵羊红细胞攻击前后左后跖厚度差值[(0.60±0.14)mm]明显高于对照组[(0.47±0.08)mm],差异有统计学意义(P＜0.05);75和100 mg/kg·BW组NK细胞活性分别为24.8±4.8、26.4±7.8,明显高于对照组(14.2±4.3),差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 生育三烯酚对小鼠免疫力有增强的作用.

目的 采用GC-MS法分析得荣县光核桃Prunus mira Koehne仁油中脂溶性成分.方法 热榨法榨取光核桃仁油,GC-MS法分离、鉴定,并测定各个化合物相对含有量,对结果进行聚类分析和主成分分析.结果 夺松村的光核桃仁油中有20个化合物,β-谷甾醇、反式角鲨烯和油酸羟丙基酯含有量较高,1个特有化合物(4-甲基壬烷);日堆村的有22个化合物,β-谷甾醇、油酸和γ-生育酚含有量较高,1个特有化合物(1,2,4-三甲基环己烷);绒贡村的有24个化合物,油酸、β-谷甾醇和反式角鲨烯含有量较高;张仁村的有22个化合物,以β-谷甾醇、油酸和γ-生育酚含有量较高,2个特有化合物(反式-2,4-癸二烯醛和二十八醛).10批样品分为6类.夺松村第一主成分的累积贡献率81.86％.结论 得荣县光核桃仁油有35个化合物,以油酸、β-谷甾醇、反式角鲨烯、γ-生育酚和维生素E为主,特有化合物4个.

目的 建立加速溶剂萃取(ASE)结合亲水液相色谱(HILIC)柱分离测定坚果中8种生育酚异构体的方法.方法 2 g坚果样品经ASE提取富集后,用BEH Amide色谱柱(150 mm×3.0 mm,1.7 μm)分离,以90％正己烷,10％叔丁基甲基醚-四氢呋喃-甲醇(20∶ 1∶0.1,V/V)作为流动相等度洗脱,荧光检测器激发波长294 nm,发射波长328 nm检测,外标法定量.结果 4种生育酚在0.5～ 80.0 μg/ml、4种生育三烯酚在0.5～ 30.0 μg/ml之间具有良好的线性(r2 ＞0.998),方法检出限在0.032～0.070 mg/kg之间,方法定量限范围0.096 ～ 0.210 mg/kg,三个水平加标回收率在87.5％ ～ 114.2％之间,6次重复测定相对标准偏差(RSD)均≤12％.结论 本方法具有良好的灵敏度、回收率和重复性,适用于坚果中8种生育酚异构体的含量分布的测定.

目的:研究γ-生育三烯酚联合亚砷酸对急性早幼粒细胞NB4生长的抑制作用及可能的分子机制.方法:采用CCK-8、细胞周期实验检测细胞增殖、利用激光共聚焦显微镜、Annexin V/PI染色、Caspase活性检测、Western Blot等方法测定细胞凋亡.采用1 μmol/L ATO及不同浓度(0、15、30、45 μmol/L)的γ-生育三烯酚处理NB4细胞24、48和72小时,通过CCK-8检测细胞的增殖情况,流式细胞术、激光共聚焦显微镜检测细胞周期和凋亡情况,检测Caspase3,8,9的活性,Western Blot检测细胞中c-cas-pase-3、Bcl-2和survivin的蛋白表达.结果:γ-生育三烯酚联合亚砷酸显著抑制NB4细胞增殖(P＜0.01),且随着作用时间延长和γ-生育三烯酚浓度的增加,其增殖抑制作用增强;细胞周期阻滞在S期,S期的比例由38.21％± 2.99上升到50.31％± 5.03;γ-生育三烯酚联合亚砷酸诱导NB4细胞凋亡,1μmol/L ATO联合15、30 μmol/L的γ-生育三烯酚处理48h后,细胞活率分别为82.27％±3.16、66.97％±3.17、12.63％±2.66;1 μmol/L ATO联合30 μmoi/L的γ-生育三烯酚处理后,NB4细胞caspase-3,-8,-9的活性均较ATO单独用药组显著增高,c-caspase-3表达增高而Bcl-2和survivin蛋白的表达无明显变化.结论:生育三烯酚联合亚砷酸对急性早幼粒细胞NB4的生长具有抑制作用,此作用可能与抑制增殖并诱导凋亡相关,其作用靶点可能与促进Cas-pase诱导的凋亡有关.

维生素E包括生育酚(tocopherol)和生育三烯酚(tocotrienol,T3)两大亚族,结构类似,但生育酚的类异戊二烯侧链是饱和植基,而生育三烯酚则有3个不饱和位点.由于人体含量的优势以及抗氧化活性,α-生育酚一直都是研究热点.但是近年来研究指出,生育三烯酚的不饱和侧链使其更容易进入饱和脂肪层膜的组织,从而达到更好的分布,因此,可能有更优越的抗氧化活性和生育酚所没有的其他生理活性[1-2].生育三烯酚在糖尿病、骨代谢、高胆固醇血症、心血管疾病、神经系统疾病和多种癌症的预防和治疗上的显著作用已经得到诸多研究验证[3].我国目前关于生育三烯酚抗癌效果的研究刚刚起步,主要关注于结肠癌.本文对国内外相关研究做一综述,系统阐述生育三烯酚对抗结肠癌的效用和可能机制,为开展下一步临床研究和应用提供参考.

目的:探讨γ-生育三烯酚(γ-tocotrienol,γ-T3)在人胃腺癌SGC-7901细胞能量代谢、细胞增殖和凋亡过程中的作用及其机制.方法:用不同浓度(0、15、30、45和60 μmol/L)的γ-T3作用SGC-7901细胞后,采用MTT法检测细胞增殖能力的变化.用30 μmol/L的γ-T3作用SGC-7901细胞后,采用FCM法检测细胞凋亡情况,采用JC-1荧光探针法检测细胞中线粒体膜电位情况,采用DCFH-DA荧光探针法检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,应用乳酸检测试剂盒检测细胞乳酸含量;采用萤火虫荧光素酶法检测细胞中ATP含量.结果:15～60 μmol/L γ-T3作用SGC-7901细胞24 h后,细胞增殖能力受到明显抑制(P值均＜ 0.05).用30 μmol/L的γ-T3处理后,SGC-7901细胞发生凋亡(P＜0.001),且细胞线粒体膜电位明显降低(P＜0.001),而细胞中ROS水平明显升高(P＜0.001),另外乳酸含量也呈升高趋势(P＜0.001),但ATP含量呈降低趋势(P＜0.001).结论:γ-T3可能通过调节人胃腺癌SGC-7901细胞能量代谢来抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.

目的 探究δ-三烯生育酚对HeLa宫颈癌细胞增殖的影响以及microRNA-34a(miR-34a)是否介导这一过程.方法 用荧光定量PCR方法检测miR-34a和细胞增殖关键基因表达的变化,CCK-8检测细胞活力变化,Western blot检测细胞增殖关键基因蛋白水平的变化,流式细胞术检测细胞周期变化;并利用miR-34a模拟剂和抑制剂,探究其对细胞增殖的影响.结果 δ-三烯生育酚处理HeLa宫颈癌细胞36 h显著降低细胞活力并呈剂量依赖效应.用20 μmol/L δ-三烯生育酚处理细胞36 h显著上调miR-34a表达,显著下调细胞周期关键基因CCND1,同时S细胞比例显著下降.细胞转染miR-34a模拟剂后,CCND1表达和细胞活力都下降;而转染miR-34a抑制剂则显著减弱δ-三烯生育酚的增殖抑制作用.结论 δ-三烯生育酚通过上调miR-34a抑制宫颈癌细胞增殖.

目的 研究多花山竹子Garcinia multiflora果实化学成分.方法 采用正、反相硅胶柱色谱及高效液相色谱等多种技术进行分离纯化,并通过谱学数据鉴定化合物结构.结果 从多花山竹子果实乙醇提取物中分离得到了6个化合物,分别鉴定为多花山竹子酮素甲(1)、sargaol (2)、δ-生育三烯酚(3)、木犀草素(4)、1,3,6,7-四羟基(山)酮(5)、对苯二甲酸二(2-乙基)己酯(6).结论 化合物1为新的类金刚烷型间苯三酚类化合物,化合物2、3、6均为首次从该植物中分离得到.

目的 通过卵泡液代谢组学探寻与卵巢低反应相关的生物标志物.方法 采用超高液相色谱-高分辨质谱联用仪对行体外受精-胚胎移植/单精子卵泡浆内显微注射-胚胎移植(IVF-ET/ICSI-ET)的卵巢低反应组30例,以及同时仅因男方因素行IVF-ET/ICSI-ET的对照组49例进行卵泡液代谢组学分析.对比两组的差异代谢物.结果 与卵巢低反应相关的潜在生物标志物有30种,其上调的代谢物有9种,包括L-苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、1-羟基-2-氧代丙基四氢蝶呤、水杨酸镁、尿苷二磷酸、LysoPC(18:1)、LysoPC(18:2)及LysoPC(18:3);下调的代谢物有21种,包括6-氧代己酸酯、亚油酸酯、油酸、十六烷、花生四烯酸、二十二碳六烯酸、13,14-二氢视黄醇、石胆酸、7-脱氢甾醇、硬脂酰肉碱、25-羟基维生素D3、27-羟基胆固醇、3α,7α,12α-三羟基-5β-胆甾烷、13-羟基-α-生育酚、强啡肽A、LysoPC(16:1)、LysoPC(16:0)、LysoPC(18:0)、LysoPC(20:5)、LysoPC(20:4)、LysoPC(20:3).结论 卵巢低反应患者在卵巢储备、卵巢反应、卵子数目、质量方面比正常女性低;卵巢低反应患者卵泡液代谢物与正常女性比较,差异有统计学意义(P<0.05).这些差异代谢物可以作为卵巢低反应的生物标志物.