目的 建立加速溶剂萃取(ASE)结合亲水液相色谱(HILIC)柱分离测定坚果中8种生育酚异构体的方法.方法 2 g坚果样品经ASE提取富集后,用BEH Amide色谱柱(150 mm×3.0 mm,1.7 μm)分离,以90％正己烷,10％叔丁基甲基醚-四氢呋喃-甲醇(20∶ 1∶0.1,V/V)作为流动相等度洗脱,荧光检测器激发波长294 nm,发射波长328 nm检测,外标法定量.结果 4种生育酚在0.5～ 80.0 μg/ml、4种生育三烯酚在0.5～ 30.0 μg/ml之间具有良好的线性(r2 ＞0.998),方法检出限在0.032～0.070 mg/kg之间,方法定量限范围0.096 ～ 0.210 mg/kg,三个水平加标回收率在87.5％ ～ 114.2％之间,6次重复测定相对标准偏差(RSD)均≤12％.结论 本方法具有良好的灵敏度、回收率和重复性,适用于坚果中8种生育酚异构体的含量分布的测定.

目的 探讨自拟健脾益气方药(SMP-SSRQ)的抗抑郁作用及其机制.方法 建立慢性不可预知性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁小鼠模型,随机分为正常组、模型组、SMP-SSRQ低、中、高剂量组(8、16、32 mg·kg-1),每组12只.正常对照组与模型组动物给予同体积的生理盐水,SMP-SSRQ各剂量组分别给予相应剂量的药物.均采用灌胃给药,每天2次,连续给药2周.通过旷场、糖水消耗、强迫游泳和悬尾等实验检测动物的不同行为学指标;采用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测各组小鼠大脑前额叶皮质和海马组织中免疫球蛋白超家族11(Igsf11)、蛋白质二硫键异构酶2(Pdia2)、生育酚结合蛋白(Sec14l2)mRNA及蛋白水平的表达变化.结果 与模型组比较,SMP-SSRQ各治疗组均可增加抑郁小鼠的水平移动格数、直立次数以及糖水偏好指数(P<0.05),降低强迫游泳和悬尾不动时间,明显改善抑郁症状;低、高剂量的SMP-SSRQ能明显降低抑郁小鼠大脑皮层前额叶与海马组织中Igsf11、Pdia2、Sec14l2 mRNA及蛋白的表达水平,与模型组比较差异有显著性(P<0.05).结论 SMP-SSRQ可有效改善小鼠的抑郁行为,机制可能与其下调小鼠皮层和海马组织中的Igsf11、Pdia2、Sec14l2的mRNA及其蛋白水平有关.

目的 建立具有大体积流通池的荧光检测超高效液相色谱法测定食品中4种生育酚异构体的方法.方法 样品中的生育酚异构体经皂化和液液萃取,Waters BEH Shield RP18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7 μm)分离,以乙腈加甲醇(1∶1)及纯水作为流动相,梯度洗脱,采用具有大体积流通池的荧光检测器检测.结果 4种生育酚异构体1～60 μg/ml范围内呈良好的线性关系(r2≥0.999 8),平均回收率为78.8％～111％,相对标准偏差(RSD)为0.22％～10.8％.结论 方法简便、快速、灵敏度高、试剂用量少,适用于食品中生育酚的常规检测.

目的 天然RRR-α-生育酚活性高于合成all-rac-α-生育酚,纵向调查母乳中天然和合成构型的α-生育酚以了解不同阶段婴儿的动态需求.方法 招募单胎足月分娩的健康产妇,随访收集初乳、过渡乳和成熟乳,用高效液相色谱测定α-生育酚的含量及立体异构体(RRR,RSR,RSS,RRS,Σ2S)组成,比较天然RRR与合成构型的比例.结果 随哺乳期进展,总α-生育酚从初乳的9.20mg/L下降到成熟乳的4.10 mg/L;在整个哺乳阶段,天然RRR构型均是α-生育酚的优势构型(～85％),合成构型中RRS比例(5.10％-6.02％)稍高于其他构型(2.32％-3.58％);不同阶段RRR与合成2R构型的平均比值稳定在5.95-7.50,但存在明显个体差异.结论 天然RRR-α-生育酚在母乳VE供给中占绝对优势,而其他合成构型含量有限,表明婴儿在整个哺乳阶段均需要高含量的RRR-α-生育酚供给.

目的 研究中国不同地区母血、脐带血中天然RRR构型和合成构型α-生育酚的分布,为指导孕产妇膳食及婴幼儿配方乳粉中维生素E的添加提供参考.方法 在上海、广州、天津、成都、兰州、长春六个地区共收集母血、脐带血221对,用高效液相色谱测定o-生育酚含量及各手性异构体组成.采用非参数检验进行不同地区间的差异性检验,采用Spearman进行相关性分析.结果 全国六地区母血和脐带血中α-生育酚含量中位水平分别为15.38 mg/L和2.12 mg/L,RRR含量中位水平分别为13.17 mg/L和1.82 mg/L,RRR构型占母血和脐带血中α-生育酚总量分别为87.83％和86.44％.α-生育酚和RRR含量呈现出一定的地区差异(H1=38.382,H2=37.650,P＜0.001).母血与脐带血的α-生育酚(r=0.197,P=0.003)和RRR(r=0.150,P=0.027)含量有正相关性,母血中两者含量与产前体重和孕前体重存在负相关,脐带血中两者含量与产次、胎龄存在正相关,与孕前体重等均存在负相关(P＜0.05).结论 母血和脐带血中α-生育酚含量虽然存在一定的地区差异,但都以天然RRR形式为主.即RRR是母血和脐带血中α-生育酚的绝对优势构型,对孕产妇、胎儿和婴儿健康均有重要意义.

目的 分析浙江省鱼、虾、蟹等44种水产品中α-、β-、γ-、δ-生育酚(tocopherol,T)和α-、β-、γ-、δ-三烯生育酚(tocotrienol,T3)8种维生素E异构体的含量.方法 采用碱液加热皂化,液液萃取净化富集,反相高效液相色谱-荧光检测器检测,外标法定量分析维生素E,开展各异构体的含量分析与比较.结果 19种河鱼和14种海鱼中α-生育酚当量(α-tocopherol equivalent,α-TE)范围为0.10 ～4.01mg/100 g可食部,所含维生素E异构体的种类有明显区别.河鱼中α-T、α-T3检出率为100％,γ-T、γ-T3检出率分别为31.58％和68.42％,而14种海鱼中α-T检出率为100％,α-T3、γ-T、γ-T3检出率分别为28.57％、28.57％、35.71％.在野生和养殖生长环境下,鳙鱼、白鲢鱼、汪刺鱼和大黄鱼中各异构体种类有差异,但含量差异无统计学意义.4种河虾蟹和7种海虾蟹中α-TE范围为0.31～14.27 mg/100 g可食部,均以α-T为主.母蟹中α-T含量略高于公蟹中,但差异无统计学意义,其他异构体种类及含量水平基本相同.海鱼中γ-T和α-T3有强相关性,河鱼中维生素E各异构体相关性较弱,虾蟹中维生素E各异构体有一定的相关性.结论 不同淡水和海产品食物中维生素E含量水平差异较大,食用不同的水产品对机体的维生素E异构体和活性总量摄入有不同的影响.

目的 建立反相高效液相色谱法同时测定肉制品中维生素A、3种维生素E异构体及胆固醇的方法,并用此方法测定了几种肉制品中对应营养素的含量.方法 样品经皂化和液液萃取,采用Waters Symmetry C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)进行分离,以甲醇-水(98∶2,V/V)为流动相.二极管阵列检测器在190～350 nm范围内进行3D扫描,选择325、294和210 nmn分别作为维生素A、3种维生素E异构体以及胆固醇的特征吸收波长进行检测.以苯并[e]芘作为维生素A、E的内标定量.胆固醇采用外标法定量.结果 维生素A、3种生育酚和胆固醇分别在浓度为0.18～9.00、0.76～15.2和0.11～5.50 mg/mL范围内呈良好线性关系,相关系数r＞0.995;检出限分别为5、20和330 μg/100 g,定量限分别为15、60和990μg/100 g;基质中3种营养素高中低3个浓度水平的测量精密度均小于7.0％、加标回收率为86.3％～105.6％(n= 6).结论 该方法灵敏准确,适用于肉制品中维生素A、维生素E以及胆固醇的同时测定.

目的 研究中国不同地区成熟母乳中维生素E含量及异构体组成.方法 在上海、广州、天津、成都、兰州、长春6个地区多中心同步招募604名乳母,年龄(29.58±3.43)岁,初产妇407名(67.38％),阴道分娩335名(55.46％),大专及以上学历493名(81.62％).604例成熟母乳用高效液相色谱测定α-、γ-、δ-生育酚含量及α-生育酚的立体异构体组成(天然RRR和合成构型).结果 以M(P25,P75)表示,中国六地区成熟母乳α-生育酚含量水平为3.16(2.29,4.16) mg/L,RRR-α-生育酚为2.57(1.77,3.48) mg/L,γ-生育酚为0.89(0.58,1.27) mg/L,δ-生育酚为0.17(0.09,0.27) mg/L,提供活性α[生育酚当量为3.09 (2.22,4.10) mg/L,地区差异有统计学意义(P＜0.001).成熟母乳中RRR-α-生育酚占总α-生育酚的比例为83.17％(76.36％,88.43％),其中天津地区成熟母乳RRR占比(77.11％)显著低于兰州(86.16％,P＜0.001),其他地区差异无统计学意义(82.82％ ～ 85.39％).结论 在中国六地区成熟母乳中,维生素E主要由α-生育酚组成,虽然其含量存在地区差异,但均高度富集天然RRR形式,提示RRR-α-生育酚是生命早期维生素E主要活性形式.

维生素E(VE)是稻米营养品质的重要指标.水稻(Oryza sativa)是我国种植最广泛的粮食作物,增加其籽粒的VE含量是实现国民营养强化的一条便捷有效的途径.该研究以籼稻华占(HZ)为父本,粳稻热研2号(Nekken2)为母本,构建120个重组自交系(RILs)群体.采用高效液相色谱法(HPLC)对RILs群体的VE各组分含量进行测定,并基于构建的高密度分子遗传图谱进行QTL定位,谱系分析后挖掘到122个VE总量和分量相关QTLs,分布在12条染色体上.其中qT3α/to2-1的LOD值高达10.32,qT3α2-1的LOD值高达9.91,另有多个控制各异构体含量的主效QTLs,且区间内包含OsGGR1、OsGGR2、OsTC及OsyTMT等VE生物合成基因.通过qRT-PCR检测亲本中VE合成基因的表达量,发现在华占中候选基因的表达量均极显著高于热研2号,推测这些基因的高表达是华占生育酚及生育三烯酚含量高于热研2号的原因.研究挖掘到的QTL数 目较多,LOD值也较大,为进一步筛选和培育高VE含量的水稻新品种奠定了分子基础,同时为揭示水稻VE生物合成的分子调控机制提供了重要基因资源.

目的 探讨不同天然型维生素E化合物之间药理活性的差异,为其研究和应用中维生素E亚型的选择提供依据.方法 检索PubMed、Embase、中国知网(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数据库中天然型维生素E化合物[包括生育酚(TF)和生育三烯酚(TT)]相关文献,总结其治疗潜力及药理学作用机制.结果 与结论TT与TF因结构相似,均具有抗氧化和抗炎特性;又因结构差异,TT在治疗心血管系统、神经系统疾病及抗肿瘤等方面的疗效和健康收益更佳.目前,天然维生素E化合物的使用以α-TF为主,体内生物利用率低仍是TT应用的主要问题,探究TT高效提取和合成的方法是未来进一步实现其药用价值的前提和基础.