目的:采用两样本孟德尔随机化方法来评估 91 种炎性因子与前列腺癌的潜在因果关系.方法:选取91 种炎性因子的全基因组关联分析(GWAS)汇总统计数据(n=14 824)结合FinnGen最新第9 版数据库中选取前列腺癌作为结局进行孟德尔随机化分析.通过逆方差加权法(IVW)、MR-Egger回归、简单中位数法(SM)、加权中位数法(WM)、加权中值法(WME)等回归模型的OR值和95%CI评估炎性因子与前列腺癌的因果关系,其中IVW法得出的因果关系相对稳定,作为本研究的主要统计方法.进一步采用贝叶斯分析法对孟德尔分析结果进行验证.使用Cochran's Q检验评估遗传工具变量的异质性,使用MR-Egger截距检验评估多效性,使用留一法评估作为工具变量的单核苷酸多态性(SNPs)对暴露和结局因果关系影响的敏感性.结果:IVW法结果显示,91 种炎性因子中白介素-22 受体 A1(IL-22RA1)、磺基转移酶 1A1(ST1A1)与前列腺癌发病风险呈正向因果关联:IL-22RA1:IVW[OR(95%CI):1.12(1.00～1.25),P=0.04];ST1A1:IVW[OR(95%CI):1.08(1.00～1.16),P=0.03].趋化因子配体 11(CXCL11)、白介素 17A(IL-17A)与前列腺癌发病风险呈反向因果关联;CXCL11:IVW[OR(95%CI):0.88(0.81～0.95),P=0.00];IL-17A:IVW[OR(95%CI):0.91(0.84～0.98),P=0.02].MR-Egger截距分析未检测到潜在的水平多效性(P 均>0.05,IL-22RA1=0.885,ST1A1=0.949,CXCL11=0.391,IL-17A=0.884).MR-PRESSO 未检测到偏倚 SNPs(P 均>0.05,IL-22RA1=0.479,ST1A1=0.629,CXCL11=0.326,IL-17A=0.444),未发现异质性(P均>0.05,IL-22RA1=0.543,ST1A1=0.677,CXCL11=0.336,IL-17A=0.494),留一法敏感性分析结果图提示无个别单核苷酸多态性位点对整体因果关系预测产生明显影响,故分析结果可靠.结论:91 种炎性因子中IL-22RA1、ST1A1 与前列腺癌有正向因果关系,随着这些因子的水平增加,前列腺癌发病的风险升高;CXCL11、IL-17A与前列腺癌有反向因果关系,即随着这些因子的水平增加,前列腺癌发病风险降低.

目的 探讨血清可溶性Toll样受体4(sTLR4)、白介素22受体1(IL-22R1)、血小板激活因子(PAF)水平在胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎(CAM)中的变化及对早发型败血症(EONS)的预测价值.方法 选择郑州大学附属郑州中心医院妇产科的122例胎膜早破的产妇作为研究对象,根据胎盘病理结果为CAM组与非CAM组,分析sTLR4、IL-22 R1、PAF水平在胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎中的变化;根据随访结果分为EONS组与非EONS组,分析sTLR4、IL-22 R1、PAF水平对EONS发生的预测价值.结果 122例胎膜早破产妇中有46例合并CAM,发生率为37.70％,有76例产妇未合并CAM,占62.30％.CAM组WBC、PLT、CRP、sTLR4、IL-22 R1、PAF水平均高于非CAM组,差异有统计学意义(t=23.063、15.534、17.763、8.988、12.588、6.352,P<0.05).多因素logistic回归分析显示:IL-22 R1、PAF水平增高与胎膜早破合并CAM发生密切相关(P<0.05).122例胎膜早破产妇中有16例发生EONS,发生率为13.11％,有106例产妇未发生EONS,占86.89％.EONS组CAM比例、sTLR4、IL-22 R1、PAF水平均高于非EONS组,差异有统计学意义(x2=4.820,t=6.935、4.938、3.577,P<0.05).多因素logistic回归分析显示:CAM及sTLR4、IL-22 R1水平增高与胎膜早破产妇发生EONS密切相关(P<0.05).sTLR4、IL-22 R1、PAF三者联合预测的AUC为0.851(0.770～0.933),灵敏度为81.3％,特异度为79.2％,高于单一检测(P<0.05).结论 血清sTLR4、IL-22 R1、PAF在胎膜早破合并CAM中明显增高,与CAM及EONS发生密切相关,三指标联合检测对EONS发生有良好的临床预测价值.

目的 探讨多巴胺一型受体激动剂非诺多泮(FNDP)是否对小鼠胸主动脉瘤(TAA)具有保护作用.方法 对 3周龄的雄性 C57BL/6J 小鼠采用 β-氨基丙腈(BAPN)复制TAA模型.25 只小鼠分为三组:对照组、BAPN组、BAPN+FNDP组(腹腔注射FNDP).统计TAA的发生率和生存率,观察胸主动脉的大体变化,弹力蛋白(Elastin)染色观察形态学改变.免疫组化法检测基质金属酶 2(MMP2)、基质金属酶9(MMP9)和 白细胞分化抗原68(CD68)的变化.明胶酶谱法检测MMP2 和MMP9 的活性.反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测多巴胺受体 1(D1DR)、多巴胺受体 2(D2DR)、多巴胺受体 3(D3DR)、多巴胺受体 5(D5DR)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及平滑肌蛋白22α(SM22α)的mRNA表达情况.结果 与对照组相比,BAPN组有明显的TAA形成,胸主动脉壁弹力纤维紊乱与断裂,且D1DR和D5DR的mRNA水平均显著下降.与BAPN组相比,BAPN+FNDP组小鼠TAA的形成率和动脉瘤破裂率明显降低;胸主动脉壁的弹力纤维紊乱与断裂明显改善;胸主动脉壁内MMP2 和MMP9 的表达水平均显著下降,血清中MMP2 的酶活性显著降低;胸主动脉壁中巨噬细胞浸润显著降低,且IL-1β、IL-6、TNF-α和 MCP-1的mRNA水平均显著下降;α-SMA和SM22α mRNA表达水平无显著差异.结论 FNDP可抑制小鼠TAA的进展,有可能成为治疗TAA的一个潜在药物.

目的:研究哮喘中线粒体自噬相关基因(mitochondrial autophagy-related gene,MRG)表达情况、构建疾病预测模型,根据MRG特征对哮喘进行分型并挖掘可能的潜在靶标与治疗药物.方法:基因表达综合数据库中获得哮喘气道上皮转录组学数据,筛选出差异表达MRG,并在哮喘小鼠气道上皮及白介素(interleukin,IL)-13刺激的小鼠原代气道上皮细胞模型中行免疫组化验证;运用机器学习算法构建哮喘预测模型,根据MRG表达谱分型,基因本体论及京都基因与基因组百科全书分析生物学功能及相关信号通路差异;药物基因组学数据库筛选可能的靶向药物.结果:哮喘患者MRG整体表达较健康受试者显著升高,差异最显著基因为线粒体外膜转位酶5(translocase of outer mitochondrial membrane 5,TOMM5),其在哮喘患者、哮喘小鼠气道上皮细胞及IL-13刺激的小鼠原代上皮细胞模型中表达均上调;22个MRG中筛选出7个疾病最相关特征基因(TOMM5、FUN 14结构域蛋白1、线粒体外膜转位酶22、自噬接头受体蛋白1、磷酸甘油酸变位酶5、线粒体融合蛋白2及核糖体蛋白S27a),并以此构建哮喘预测模型,受试者工作特征曲线评估显示预测性能良好;共识聚类分析将哮喘分为2个亚型,两型在基因表达及通路富集方面均存在显著差异;不同分型靶向小分子药物的预测结果分别为XMD8-92和Verrucarin-A.结论:上述7个MRG可作为哮喘预测的有效分子标志物,研究结果有望为患者疾病分型及个体化治疗提供新的参考依据.

目的 探讨急性脑梗死(ACI)患者血清微小核糖核酸-22-3p(miR-22-3p)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)水平与炎性因子及预后不良的关系.方法 选取2021 年1 月—2022 年12 月上海中医药大学附属第七人民医院神经内科收治ACI患者106 例为ACI组,根据预后情况分为预后不良亚组 37 例和预后良好亚组 69例,另选取同期体检健康者60 例为健康对照组.采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-22-3p水平,酶联免疫吸附法检测血清NLRP3 和炎性因子[白介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平.通过Pearson相关性分析ACI患者血清miR-22-3p、NLRP3 与IL-1β、IL-18、TNF-α的相关性.分析ACI患者预后不良的影响因素,绘制2项指标的受试者工作特征(ROC)曲线分析其预测预后的价值.结果 与健康对照组比较,ACI组血清miR-22-3p水平降低,NLRP3、IL-1β、IL-18、TNF-α 水平显著升高(t/P = 18.698/<0.001、27.091/<0.001、30.154/<0.001、35.104/<0.001、39.834/<0.001).Pearson相关性分析显示,ACI患者血清miR-22-3p与NLRP3、IL-1β、IL-18、TNF-α水平呈负相关(r/P =-0.733/<0.001、-0.719/<0.001、-0.683/<0.001、-0.680/<0.001),血清 NLRP3 与IL-1β、IL-18、TNF-α水平呈正相关(r/P =0.716/<0.001、0.715/<0.001、0.707/<0.001).多因素Logistic回归分析显示,NIHSS评分、IL-1β、IL-18、TNF-α、NLRP3 升高为 ACI 患者预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)= 1.244(1.034～1.497)、1.373(1.067～1.767)、1.047(1.011～1.086)、1.577(1.061～2.343)、1.084(1.022～1.149)],miR-22-3p升高为独立保护因素[OR(95%CI)= 0.933(0.888～0.980)].ROC 曲线分析显示,血清 miR-22-3p、NLRP3水平联合预测ACI患者预后不良的曲线下面积为 0.875,大于两者单独预测的 0.786、0.759(Z/P =2.405/0.016、2.517/0.012).结论 ACI患者血清miR-22-3p水平降低和NLRP3 水平升高,与炎性因子水平升高和预后不良密切相关,血清miR-22-3p、NLRP3 水平联合对ACI患者预后不良的预测价值较高.

目的 探究右美托咪定对癫痫大鼠海马神经元凋亡及脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(Trκ狟)信号通路的影响.方法 腹腔注射氯化锂-硫酸阿托品-盐酸匹罗卡品构建癫痫大鼠模型.将建模成功的36只大鼠随机分为模型组、右美托咪定(50 μg/kg)组、右美托咪定(50 μg/kg)+LM22B-10(BDNF/TrκB狟通路激活剂,5 mg/kg)组,每组12只,另取12只大鼠作为对照组.建模结束后各组大鼠给予对应药物干预,每天1次,连续1周.给药结束24 h后,观察记录各组大鼠癫痫发作频率和持续时间;TUNEL染色观察海马神经元细胞凋亡情况;免疫荧光染色检测海马CA1区脑组织中β-微管蛋白Ⅲ(Tuj1)阳性细胞情况;酶联免疫吸附法检测海马CA1区脑组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6水平;蛋白印迹法检测海马CA1区脑组织中BDNF、TrκB、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白表达.结果 与对照组相比,模型组大鼠癫痫发作频率、持续时间、海马神经元凋亡细胞数目、海马CA1区脑组织TNF-α、IL-6水平、BDNF、TrκB、Bax蛋白表达水平显著升高(P＜0.05);海马CA1区脑组织Tuj1阳性细胞数目、Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P＜0.05);与模型组相比,右美托咪定组大鼠癫痫发作频率、持续时间、海马神经元凋亡细胞数目、海马CA1区脑组织TNF-α、IL-6水平、BDNF、TrκB、Bax蛋白表达水平显著降低(P＜0.05);海马CA1区脑组织Tuj1阳性细胞数目、Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P＜0.05);LM22B-10能部分逆转右美托咪定对癫痫大鼠各项指标的改善作用(P＜0.05).结论 右美托咪定能降低癫痫大鼠的癫痫发作以及抑制海马神经元的凋亡,减轻大鼠炎症反应,其机制可能与抑制BDNF/TrκB信号通路的激活有关.

目的 探讨microRNA(miR)-146在肝移植排斥反应中的调控作用及其机制.方法 采用"二袖套法"建立两组原位肝移植模型,同种异体移植模型组(实验组)以Lewis大鼠为供体,BN大鼠为受体;同系移植模型组(对照组)以Lewis大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,每组3只大鼠.移植术后7 d取肝脏组织进行病理组织学检测以及microRNA高通量测序;利用生物信息学网站对microRNA靶基因进行GO以及KEGG信号通路分析.结果 病理学检测显示实验组肝脏组织排斥活动指数(RAI)为8.4±0.5,诊断为重度急性排斥反应;对照组RAI为1.5±0.5,诊断为无排斥反应.高通量测序显示可能与排斥反应高度相关的22种microRNA,其中21种microRNA在实验组表达均较对照组上调.21种上调的microRNA中有2种microRNA属于miR-146家族的成员,分别是miR-146a-5P和miR-146b-5P,其在实验组的表达量分别是对照组的1.1倍和2.3倍.GO和KEGG信号通路分析显示,miR-146a-5P和miR-146b-5P通过靶基因中白介素-1受体相关激酶1(IRAK1)、活化T细胞核因子5(NFAT5)和肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)参与多条和免疫相关的信号通路.结论 miR-146a-5P和miR-146b-5P的上调与同种异体肝移植大鼠排斥反应发生相关,其机制可能是通过调控IRAK1、NFAT5和TRAF6的表达介导多条免疫相关信号通路而发挥作用.

目的:观察银屑I号对肿瘤坏死因子α (TNF-α) 诱导的人永生化角质形成细胞 (Hacat) 炎症反应的影响并探讨其机制.方法:采用低、中、高浓度的银屑I号含药血清干预Hacat细胞, ELISA法检测细胞上清液25HVD3、IL-1、IL-17、IL-22浓度, Western-blot法检测维生素D受体 (vitamine D receptor, VDR) 蛋白表达量, RT-PCR检测VDRmRNA相对表达量.结果:与空白组比较, 模型组VDR蛋白、VDRmRNA、25HVD3表达量明显降低, IL-1、IL-17、IL-22明显升高 (P＜0.01);与模型组比较, 银屑I号各组VDR蛋白、VDRmRNA、25HVD3表达量明显升高, IL-1、IL-17、IL-22明显降低 (P＜0.05), 且呈剂量依赖性.讨论:银屑I号可能通过促进VDR蛋白、VDRmRNA及25HVD3因子信号表达发挥对银屑病的治疗作用.

目的:应用mRNA表达谱芯片技术探究有氧运动对肥胖小鼠棕色脂肪组织(BAT)炎症反应相关差异基因和通路表达的影响.方法:30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为普通饮食对照组(NC,n=8)和高脂饮食组(HD,n=22),高脂饮食组饲喂8周建立肥胖模型后再随机分为肥胖安静对照组(HC,n=8)和肥胖运动组(HE,n=8).NC组饲喂普通饲料;HC组饲喂高脂饲料;HE组饲喂高脂饲料的同时进行10 m/min,1 h/d,6d/w的跑台训练.4周后,测试血中甘油三酯、总胆固醇和血糖水平;取肩胛处BAT进行mRNA表达谱分析,分别对比HC与NC组、HE与HC组的差异表达基因,并对其进行基因功能注释(GO)和信号通路(Pathway)富集度统计分析.结果:(1)HE组较HC组体重和血糖水平显著下降(P＜0.05);(2)差异基因筛选和GO分析结果显示,HC组较NC组上调的基因有802个,包含的生物学过程(BP)主要为炎症反应等过程;下调的基因有1157个,BP主要为脂质代谢等过程;HE与HC组相比上调的基因有859个,BP主要为糖脂代谢等过程,下调的基因有576个,BP主要为转录调节等过程.巨噬细胞表达基因1(Mpeg1)、单核细胞向巨噬细胞转化基因(Mmd)、趋化因子配体28(Cc128)、白介素-6受体仅(IL6ra)、肿瘤坏死因子受体超家族成员1b(Tnfrsf1b)、瘦素受体(Lepr)6个与免疫细胞及炎症因子相关的关键差异基因在运动后出现下调或有下调趋势;(3) Pathway分析结果显示,与HC组相比,HE组Jak-STAT信号通路、ErbB信号通路和TGF-β信号通路显著下调,Insulin信号通路显著上调.结论:有氧运动可通过调节肥胖机体BAT中一系列生物学过程和信号通路而抑制免疫细胞和炎症因子相关基因表达,改善肥胖机体慢性炎症状态.

目的 探讨大麻素受体激动剂WIN55212-2对百草枯(paraquat,PQ)中毒模型小鼠肺损伤的保护作用.方法 健康成年雄性C57BL/6小鼠35只,随机(随机数字法)分为4组:百草枯中毒组(PQ组,n=10),PQ+WIN55212-21 mg干预组(WIN 1 mg组,n=10),PQ+WIN55212-22 mg干预组(WIN 2 mg组,n=10),对照组(control组,n=5).PQ组、WIN 1 mg组、WIN 2 mg组建立百草枯中毒模型,于实验第1天和第3天腹腔注射PQ 20 mg/kg.WIN 1 mg组和WIN 2 mg组分别于PQ染毒前1 h按1 mg/kg和2 mg/kg的浓度经腹腔注射WIN55212-2(含Tween 80助溶剂),PQ组和control组注射等容量的生理盐水和Tween 80液.从第2周开始,干预药物每周注射两次.急性期(14 d)随机处死PQ组、WIN 1 mg组、WIN 2 mg组各5只小鼠,对照组处死3只,取血标本,离心得血浆,取肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和肺组织.剩余存活小鼠均在28 d时处死,再次留取上述组织标本.肺组织行HE染色、Masson染色,观察PQ中毒后小鼠的肺组织变化.酶联免疫吸附法(ELISA)测定急性期小鼠血浆和BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)及慢性期血浆和BALF中TNF-α 和转化生长因子 β(TGF-β)的含量变化.结果 急性期:PQ组、WIN 1 mg组、WIN 2 mg组小鼠肺组织病理切片均呈现弥漫性炎症,予WIN55212-2干预后炎症有所改善,尤以WIN 1 mg组更为明显.PQ组、WIN 1 mg组、WIN 2 mg组,对照组BALF中IL-6水平(U/L)分别为1024.77±124.74、620.48±99.76、823.29±157.88、180.42±20.22;WIN 1 mg组和WIN 2 mg组均较PQ组下降,且差异有统计学意义(P=0.021,P=0.016),但两干预组间差异无统计学意义(P=0.114).急性期BALF和血浆中TNF-α 水平与上述情况相似.慢性期:PQ组、WIN 1 mg组、WIN 2 mg组小鼠肺组织HE及Masson染色可见明显纤维化,予WIN55212-2干预后可见炎症情况有所改善,以WIN 1 mg组更为明显.慢性期PQ组、WIN 1 mg组、WIN 2 mg组小鼠BALF中TNF-α 水平(U/L)分别为321.64±50.54、260.23±48.19、278.89±29.40、89.76±10.87,WIN 1 mg组与对照组及WIN 2 mg组间差异有统计学意义.相似的情况可见于慢性期血浆TNF-α,但TGF-β 未见这种差异.结论 小剂量WIN55212-2可以改善PQ中毒小鼠的一般状况,降低PQ中毒小鼠炎症和纤维化相关细胞因子水平,WIN55212-2可能对百草枯中毒模型小鼠肺损伤具有保护作用.