目的:探讨髓系细胞触发受体1(Trem1)在创伤性脑损伤(TBI)后炎性反应中的调控机制。方法:将成年野生型C57雄性小鼠按随机数字表法分为假手术组和TBI组，采用电子可控皮层撞击设备构建小鼠TBI模型，每组各6只，通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)和免疫荧光检测Trem1的表达；将野生型C57雄性小鼠随机分为假手术组和TBI组，Trem1基因敲除(Trem1 －/－)雄性小鼠随机分为假手术组和TBI组，每组各6只，通过Western blot检测各组脑组织Trem1、白细胞介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、P-Syk、Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-1(Caspase-1)和ASC蛋白表达，通过干湿重量比法测定各组脑含水量；将野生型C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、TBI组、TBI＋LR12(10 mg/kg)药物干预组，每组各6只，通过改良神经缺损评分和挂线实验评估各组神经功能。两组样本比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:TBI造模后3 d后Trem1的mRNA和蛋白水平均高于假手术组(1.693±0.194比1.015±0.072， t＝5.666， P<0.01；2.840±0.295比1.033±0.134， t＝8.618， P<0.01)。免疫荧光实验显示假手术组小胶质细胞不表达Trem1，而TBI组小鼠中的Trem1与小胶质细胞共标。在野生型小鼠中，TBI组的IL-1β、IL-18、TNF-α、P-Syk、NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白相对表达量高于假手术组(2.623±0.412比1.000±0.000， t＝17.920， P<0.01；1.640±0.195比1.000±0.000， t＝7.066， P<0.01；2.307±0.284比1.000±0.000， t＝14.430， P<0.01；2.163±0.206比1.000±0.000， t＝12.840， P<0.01；2.820±0.282比1.000±0.000， t＝20.510， P<0.01；1.923±0.132比1.000±0.000， t＝10.410， P<0.01；2.170±0.149比1.000±0.000， t＝13.180， P<0.01；1.823±0.134比1.000±0.000， t＝9.278， P<0.01)；而在Trem1 －/－小鼠中，TBI组的IL-1β、IL-18、TNF-α、P-Syk、NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白相对表达量蛋白相对表达量低于野生型小鼠TBI组(1.287±0.065比1.640±0.195， t＝3.901， P<0.05；1.897±0.122比2.307±0.284， t＝4.527， P<0.05；1.760±0.104比2.163±0.206， t＝4.453， P<0.05；1.513±0.263比2.820±0.282， t＝14.730， P<0.01；1.503±0.156比1.923±0.132， t＝4.733， P<0.05；1.593±0.194比2.170±0.149， t＝6.499， P<0.01；1.420±0.171比1.823±0.134， t＝4.545， P<0.05)，且脑含水量明显减少[(76.330±1.041)%比(81.330±1.756)%， t＝4.549， P<0.05]。野生型TBI组小鼠改良神经缺损评分明显高于野生型假手术组(10.500±1.517比2.167±1.169， t＝14.850， P<0.01)，挂线实验在金属线上保持的时间明显减少(51.000±9.899比104.200±14.050， t＝10.920， P<0.01)；与创伤性脑损伤组比较，创伤性脑损伤后给予LR12治疗组小鼠改良神经缺损评分明显降低(8.000±1.414比10.500±1.517， t＝4.456， P<0.05)，在金属线上保持的时间明显增加(73.830±11.440比51.000±9.899， t＝4.692， P<0.05)。 结论:Trem1参与TBI后小胶质细胞诱导的神经炎症，使用特异性靶向Trem1的抑制剂能够改善TBI后神经功能缺损。

目的:探讨NOD样受体家族3（NOD-like receptors3，NLRP3）炎症小体介导的炎症反应与抑郁症发病的相关性，并研究氟西汀对该过程的影响。方法:选取雄性 C57BL/6J（野生型）小鼠120只，采用随机数字表法将其随机分为对照1组、对照2组、慢性不可预知性温和刺激（chronic unpredictable mild stress，CUMS组）及CUMS+氟西汀组。另取雄性 C57BL/6J（NLRP3基因敲除，NLRP3-/-）小鼠30只，作为NLRP3-/-组。对照1组及对照2组：不做处理；CUMS组、CUMS+氟西汀组及NLRP3-/-组给予慢性不可预知性温和刺激，连续6周。造模后，对照2组、CUMS+氟西汀组小鼠经腹腔注射氟西汀［10 mg/（kg·d）］，其他3组小鼠每天注射等量生理盐水，连续4周。各组小鼠在应激前即刻及应激后每周进行1次行为学测试。应激前即刻、应激后3周、应激后6周抽取尾静脉血，3 000 r/min离心10 min，留取上清液冻存备用，采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-18（interleukin-18，IL-18）水平。各组小鼠在给予药物干预［10 mg/（kg·d）氟西汀或等量生理盐水］后每周进行1次行为学测试，包括糖水偏好实验、强迫游泳实验（forced swimming test，FST）及悬尾实验（tail suspension test，TST），每组小鼠在给药后1、3、4周抽取尾静脉血，离心留取上清液冻存备用，采用酶联免疫吸附法检测血清IL-1β及IL-18水平，并分别于上述时间点每次每组处死5只小鼠，收集新鲜海马组织低温冻存备用，采用Western-Blot检测海马脑区NLRP3、胱冬肽酶-1（caspase-1）、诱导转录因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）、IL-1β及IL-18的表达。结果:（1）造模情况：CUMS 6周后，与对照1组和对照2组相比，CUMS组及CUMS+氟西汀组小鼠糖水消耗量明显降低，FST及TST不动时间明显延长，造模成功。NLRP3-/-组小鼠经CUMS后，在FST、糖水偏好实验及TST中均未表现出抑郁样改变，造模失败。（2）经腹腔注射氟西汀后，对照2组小鼠与对照1组小鼠相比，糖水消耗量、FST及TST不动时间的差异均无统计学意义（ P>0.05），CUMS+氟西汀组小鼠相较CUMS组小鼠糖水消耗量明显增加（ P<0.05），FST及TST不动时间明显缩短（ P<0.05）。（3）酶联免疫吸附实验检测结果显示，给予CUMS后，与对照1组及对照2组相比，CUMS组及CUMS+氟西汀组小鼠血清 IL-1β、IL-18水平显著升高（ P<0.05），NLRP3-/-组小鼠则变化不明显（ P>0.05）。给药后，CUMS+氟西汀组小鼠血清中IL-1β、IL-18较CUMS组下降（ P<0.05）。（4）蛋白免疫印迹检测结果显示，给予CUMS后，与对照1组及对照2组相比，CUMS组及CUMS+氟西汀组小鼠海马脑区NLRP3的表达、胱冬肽酶-1的活化及诱导转录因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）、IL-1β、IL-18的表达增加（ P<0.05），氟西汀治疗后，CUMS+氟西汀组小鼠海马脑区NLRP3的表达、胱冬肽酶-1的活化及NF-κB、IL-1β、IL-18的表达显著下降（分别恢复至对照1组的99%、91%、97%、95%及97%）。 结论:（1）CUMS可引起小鼠海马区NLRP3、胱冬肽酶、NF-κB、IL-1β、IL-18蛋白表达增加以及血清上述炎症指标水平升高，而NLRP3基因敲除小鼠未发现此现象；（2）氟西汀治疗可显著降低抑郁症模型小鼠NLRP3、胱冬肽酶-1、NF-κB、IL-1β、IL-18蛋白表达及血清水平，改善小鼠抑郁样表现。

目的:探讨两面神激酶2-信号传导及转录激活蛋白3(JAK2-STAT3)信号转导通路在先天性巨结肠相关性小肠结肠炎发病中的作用。方法:2019年2月至11月选择21 d龄内皮素受体B(Ednrb)基因敲除小鼠(先天性巨结肠模型鼠)作为实验组(12只)，相应日龄野生型小鼠作为对照组(12只)。基因敲除小鼠(背景B6：129)由美国俄亥俄州立大学全国儿童医院捐赠，并在华中科技大学同济医学院动物实验中心培育、繁殖。收集结肠标本，依据形态将实验组小鼠结肠分为狭窄段及扩张段，对照组小鼠肠管相应分为结肠远、近段。苏木精-伊红(HE)染色法判断肠管炎症程度；酶联免疫吸附法(ELISA)进行定量分析各组结肠标本中白细胞介素(IL)-10的表达量；蛋白质印迹法(Western blot)检测各组结肠标本磷酸化两面神激酶2(p-JAK2)、JAK2、磷酸化信号传导及转录激活蛋白3(p-STAT3)、STAT3的蛋白表达水平；实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测JAK2、STAT3的mRNA水平。组间比较采用 t检验。 结果:Western blot结果发现先天性巨结肠模型鼠(Ednrb －/－小鼠)狭窄段肠管JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3表达水平较扩张段明显升高，差异有统计学意义(狭窄段：0.791±0.108、0.438±0.059、0.327±0.028、0.858±0.091，扩张段：0.479±0.109、0.206±0.024、0.297±0.013、0.579±0.102， t＝7.074、12.679、3.428、7.096， P值均<0.05)。RT-qPCR检测显示Ednrb －/－小鼠结肠狭窄段JAK2、STAT3的mRNA表达水平高于扩张段，差异有统计学意义(狭窄段：0.427±0.042、0.272±0.044，扩张段：0.234±0.031、0.127±0.014， t＝12.820、10.836， P值均<0.05)。ELISA显示Ednrb －/－小鼠扩张段肠管的IL-10的表达量下降，而狭窄段肠管升高，差异有统计学意义(狭窄段：2.540±0.710，扩张段：1.330±0.350， t＝5.284， P<0.05)。 结论:先天性巨结肠小鼠模型扩张段炎症重，而狭窄段炎症较轻，其机制与JAK2-STAT3信号转导通路被抑制和激活有关。

目的:探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9（CARD9）在C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘气道损伤和炎症中的作用。方法:采用随机数字表法，将6~8周龄无特定病原体（SPF）级C57BL/6雌性小鼠分为A组（对照组）、B组（模型组）和C组（地塞米松治疗组），每组6只，B组及C组利用卵清白蛋白（OVA）/完全弗氏佐剂（CFA）腹部皮下注射，OVA雾化激发构建小鼠模型，C组每次致敏前30 min给予地塞米松，末次激发24 h后检测其病理变化及支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数，进行肺组织炎症浸润情况评分，Western blot检测造模前后CARD9蛋白的变化；然后将雌性6~8周龄C57BL/6野生型小鼠12只和CARD9基因敲除型小鼠12只分为4组，每组6只，其中D组为野生型对照组，E组为野生型模型组，F组为CARD9基因敲除对照组，G组为CARD9基因敲除模型组，造模如上述对照组和模型组。苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化，ELISA法检测BALF中白细胞介素（IL）-4、IL-5和IL-17，RT-PCR法检测CXC趋化因子配体10（CXCL-10）和IL-17 mRNA水平。结果:B组炎症浸润评分［（3.33±0.82）比（0.67±0.52）分］和BALF总细胞计数［（10.13±4.83）×10 5个/ml比（3.76±0.84）×10 5个/ml］均高于A组（均 P<0.05）；C组炎症浸润评分［（2.83±0.75）分］和BALF总细胞计数［（9.80±3.19）×10 5个/ml］与B组差异无统计学意义（ P>0.05）；B组CARD9蛋白表达高于A组（0.245±0.090比0.047±0.014， P=0.004）；肺组织病理结果显示，与E组及F组相比，G组的肺组织炎症细胞浸润及组织结构破坏程度加重。与E组及F组相比，G组炎症细胞总数、中性粒细胞数量和嗜酸粒细胞数量均升高（均 P<0.05）；IL-4、IL-5及IL-17表达水平均升高（均 P<0.05）；支气管肺组织中IL-17及CXCL-10 mRNA表达水平亦均升高（均 P<0.05）。 结论:CARD9基因的缺失可能通过升高IL-17及CXCL-10等中性粒细胞趋化因子，增加中性粒细胞的浸润，从而加重C57BL/6小鼠激素抵抗型哮喘。

目的:通过观察脂多糖(LPS)诱导的Toll样受体4(TLR4)对载脂蛋白E基因敲除(ApoE -/-)小鼠动脉粥样硬化斑块内质网应激通路蛋白表达水平的影响，探讨内质网应激对小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性的影响。 方法:2015年10月至2016年2月选择ApoE -/-小鼠24只，高脂喂养10周后数字抽签随机分为对照组、LPS组、TLR4的特异性抑制剂TAK(TAK组)，各8只。干预10周后取眼球血检测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)。处死小鼠留取颈动脉和主动脉标本。免疫组化法检测颈动脉斑块巨噬细胞(MOMA-2)、平滑肌肌动蛋白(α-actin)、TLR4、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNFα)及κ基因结合核因子(NFκB)的表达。免疫印迹法检测PKR样真核起始因子2α激酶(PERK)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、糖调节蛋白78(GRP78)的水平。 结果:LPS组小鼠与对照组和TAK组小鼠比较，TC(25.0±2.3)mmol/L比(20.2±1.6)mmol/L、(20.8±2.6)mmol/L、TG(1.3±0.1)mmol/L比(1.3±0.1)mmol/L、(1.0±0.1)mmol/L、ox-LDL(17.4±1.3)mmol/L比(15.8±1.6)mmol/L、(12.1±1.1)mmol/L水平升高( P<0.05)；斑块形态学及病理学比较，LPS组小鼠动脉粥样硬化斑块范围大，巨噬细胞含量增多( P<0.05)，平滑肌细胞含量减少( P<0.05)，斑块TLR4、IL-1β、IL-6、TNFα及NFκB的表达水平较其他两组增加( P<0.05)；PERK、CHOP、GRP78的表达水平增加( P<0.05)。与对照组比较，TAK组PERK、CHOP、GRP78的表达水平减少( P<0.05)。LPS组TLR4，质网应激通路蛋白PERK、CHOP、GRP78的表达水平增加。 结论:LPS诱导的TLR4可上调内质网应激通路蛋白的表达，且引起内质网应激下游炎性细胞因子分泌增加，加重脂质代谢紊乱，增加动脉硬化斑块的不稳定性。

目的:探索Toll样受体4(TLR4)在小鼠皮肤缺损创面愈合及早期瘢痕形成的作用。方法:将36只购自南京大学动物模式研究所的小鼠分为野生型组(WT)和TLR4基因敲除组(TLR4KO)切除部分背部全层皮肤建立模型，每组18只，观察小鼠创面愈合及瘢痕形成变化。实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测造模后7、14、21、28 d TLR4，11 d和33 d白细胞介素(IL)-6、IL-10 mRNA水平，苏木精-伊红(HE)和天狼星红染色评估33 d创面及变化。组间比较采用 t检验。 结果:在创面愈合过程中，TLR4KO创面闭合时间高于WT[(25.91±2.81) d比(19.55±2.42) d， t＝5.690， P<0.01]，TLR4KO IL-10 mRNA指标低于WT(0.005比1.000， t＝37.070， P<0.01)，TLR4KO IL-6 mRNA指标高于WT(2.650比1.000， t＝19.290， P<0.01)。在瘢痕形成早期，TLR4KO表皮厚度高于WT[(45.83±1.61) μm比(22.79±2.07) μm， t＝7.645， P<0.01]，TLR4KOⅠ型/Ⅲ型胶原比值高于WT(24.54±1.27比7.93±1.76， t＝10.820， P<0.01)，TLR4KO IL-6 mRNA指标高于WT (3.190比1.000， t＝9.865， P<0.01)，TLR4KO与WT IL-10 mRNA指标差异无统计学意义(1.108比1.000， t＝0.960， P>0.05)。 结论:TLR4功能完全丧失导致皮肤创面延迟愈合，进而导致TLR4基因敲除小鼠早期瘢痕明显，可能与炎性反应失调有关。

目的:探讨毛蕊花糖苷(VB)对脑出血(ICH)小鼠的脑保护作用及其是否与抑制Toll样受体4(TLR4)介导的急性炎性反应有关。方法:采用8周龄C57BL/6雄性小鼠进行研究，其中野生型40只，TLR4基因敲除(TLR4 －/－)20只。按照完全随机方法将野生型小鼠分为假手术组、ICH组，ICH后VB治疗组(ICH＋VB 15 mg/kg或30 mg/kg)，将TLR4 －/－组小鼠分为TLR4 －/－＋ICH组和TLR4 －/－＋ICH＋VB(30 mg/kg)组，每组小鼠均为10只。采用右侧纹状体注射细菌胶原酶Ⅶ的方法构建ICH模型。模型建立成功(改良Garcia评分≤10分)后分别于小鼠腹腔注射VB(15 mg/kg或30 mg/kg)或等体积生理盐水，1次/d，连续3 d。采用改良Garcia评分评价脑功能损伤情况；取脑组织切片后计算脑血肿面积以评估出血量，采用干湿比法计算脑组织含水量；采用TUNEL染色法检测脑组织细胞凋亡率；采用免疫荧光染色(IF)法检测脑组织Iba-1的相对表达量；采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验和蛋白质免疫印迹法(WB)检测TLR4及其下游炎症介质[核因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)1β及IL-6]的表达。比较野生型小鼠组间及TLR4 －/－小鼠组间上述指标的差异。取出生2 h内的TLR4 －/－乳鼠皮质组织培养原代神经元，采用Transwell小室将神经元与小鼠小胶质细胞株(BV2细胞)共培养，并分别用红细胞裂解物及红细胞裂解物＋VB(50 μmol/L)处理24 h，采用IF法观察神经元NeuN蛋白的表达。 结果:与ICH组相比，VB治疗组(尤其是ICH＋VB 30 mg/kg组)小鼠的致良Garcia评分均显著升高(均 P<0.05)；假手术组、ICH组、ICH＋VB 15 mg/kg组、ICH＋VB 30 mg/kg组脑出血量分别为0 mm 3、(7.33±1.99)mm 3、(3.19±0.47)mm 3、(1.66±0.26)mm 3，脑组织含水量分别为(79.00±0.50)%、(85.00±0.75)%、(81.50±0.50)%、(80.25±0.25)%，神经元的凋亡率分别为(4.8±2.0)%、(38.7±6.8)%、(21.5±6.9)%、(9.8±4.2)%，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。IF结果显示，ICH组脑组织Iba-1的相对表达量明显高于VB治疗组(均 P<0.05)。qRT-PCR和WB结果显示，与ICH组比较，VB治疗组的TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA和蛋白的相对表达量均降低(均 P<0.05)。TLR4 －/－＋ICH＋VB组与TLR4 －/－＋ICH组比较，改良Garcia评分、脑组织含水量、神经元凋亡率的差异均无统计学意义(均 P>0.05)。与BV2细胞共培养的TLR4 －/－乳鼠神经元加入红细胞裂解物与加入红细胞裂解物＋VB处理后NeuN蛋白的表达差异无统计学意义( P＝0.872)。 结论:VB可改善ICH后小鼠的神经功能缺损，减少ICH量、减轻脑水肿程度及抑制细胞凋亡，其机制可能与通过抑制TLR4信号通路，减少小胶质细胞的激活以及促炎细胞因子的释放有关。

目的:研究髓系Notch1特异性敲除抑制干扰素刺激基因（STING）信号调控肝细胞脂噬作用机制。方法:通过高脂饮食（HFD）构建小鼠非酒精性脂肪性肝炎（NASH）模型，分离小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMMs）和原代肝细胞以构建共培养体系。12只Notch1 FL/FL小鼠随机分成2组：Notch1 FL/FL +正常饮食（NCD）组、Notch1 FL/FL + HFD组；12只Notch1 M-KO小鼠随机分成2组：Notch1 M-KO + NCD组、Notch1 M-KO + HFD组。分别留取小鼠血清标本进行血清丙氨酸转氨酶（ALT）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）检查，取肝组织样本进行HE染色、免疫荧光（IF）、免疫印迹、qRT-PCR检测，酶联免疫吸附法（ELISA）检测上清液肿瘤坏死因子（TNF）α水平。组间数据比较采用 t检验。 结果:成功构建小鼠NASH模型，及小鼠BMMs和原代肝细胞共培养体系。与Notch1 FL/FL + HFD组相比，Notch1 M-KO + HFD组血清ALT [（250.02±58.21）U/L与（370.70±54.57）U/L, t = 3.705， P = 0.004]、TG [（29.90±3.54）mg/g与（43.83±8.56）mg/g, t = 3.685， P = 0.004]和TC [（33.70±8.43）mg/g与（90.53±12.53）mg/g， t = 9.917， P < 0.001]，明显升高；肝组织HE染色显示肝细胞气球样变明显，IF染色显示巨噬细胞浸润增加（ t = 7.346， P < 0.001）。与Notch1 FL/FL BMMs共培养的肝细胞组相比，BODIPY探针显示，Notch1 M-KO组中肝细胞内脂滴（LDs）沉积明显增多（ t = 3.835， P < 0.001）；溶酶体相关膜蛋白1（LAMP1）和LDs共定位减少（ t = 7.103， P < 0.001），微管相关蛋白轻链3（LC3）-II/LC3-I:（ t = 5.0， P = 0.007)、自噬相关基因12（Atg12）（ t = 28.36， P < 0.001）表达下降，p-62表达上升（ t = 3.253， P = 0.03）；且LC3和LDs共定位减少（ t = 5.24， P = 0.000 3）。与Notch1 FL/FL组相比，Notch1 M-KO组小鼠BMMs中p-STING（ t = 5.318， P = 0.006）、p-TANK1结合激酶1（TKB1）（ t = 6.467， P = 0.002）、p-干扰素调节因子3（IRF3）（ t = 14.61， P < 0.001）、p-P65（ t = 12.7， P = 0.002）蛋白表达上升，同时伴有干扰素（IFN）-β（ t = 7.978， P < 0.001）、TNFα（ t = 8.496， P < 0.001）、白细胞介素1β（IL-1β）（ t = 4.7， P < 0.001）、趋化因子配体-10（ t = 4.428， P = 0.001）炎性介质的mRNA表达明显上升。使用CRISPR/Cas9敲除Notch1 M-KO小鼠BMMs中STING基因，与CRISPR-Control组相比，STING-KO组BMMs中p-TKB1（ t = 2.909， P = 0.044）、p-IRF3（ t = 10.96， P < 0.001）、p-P65（ t = 7.091， P = 0.002）蛋白表达下降，上清液中TNFα[（732.3±129.35）pg/ml与（398.17±47.15）pg/ml， t = 4.204， P = 0.014]释放减少。而与STING-KO BMMs共培养的肝细胞中LC3-II/LC3-I（ t = 7.546， P = 0.001）上升，p-62（ t = 10.96， P < 0.001）表达下降，且LC3和LDs共定位增多。 结论:髓系Notch1特异性敲除通过激活巨噬细胞STING信号，增加炎性介质基因表达，抑制肝细胞自噬流及脂噬的发生，加重LDs沉积和促进NASH的进展。

目的:探讨S100A10蛋白在银屑病皮损的表达以及对咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮炎的影响。方法:2020年1月至2022年6月在新乡医学院第一附属医院皮肤科通过外科手术收集28例银屑病患者皮损，同期于普通外科及眼科收集18例健康人皮肤作为对照组。通过免疫组化检测S100A10蛋白在银屑病患者皮损和健康对照皮肤的表达。分别选取10只野生型（WT）C57BL/6J雌性小鼠及10只S100A10 -/- C57BL/6J雌性小鼠，建立咪喹莫特（IMQ）诱导的银屑病样皮炎小鼠模型，采用随机数字表法分为基因敲除（KO）/IMQ组、WT/IMQ组、KO/凡士林（VAS）组及WT/VAS组，每组5只，背部剃毛后，KO/IMQ及WT/IMQ组每日涂抹IMQ乳膏（62.5 mg）于背侧皮肤建立银屑病样皮炎小鼠模型，KO/VAS及WT/VAS组每日涂抹凡士林乳膏（62.5 mg），连续7 d，每日观察小鼠背部皮损情况，于第7天采用颈椎脱臼法处死，切取背部皮肤组织。每日通过银屑病皮损面积及严重程度指数（PASI）评价IMQ诱导的小鼠银屑病样皮炎，HE染色观察皮损病理表现，免疫组化染色检测小鼠皮损中S100A10、Ki-67的表达，Western印迹观察STAT3、IL-17A等细胞因子的表达，实时荧光定量PCR（qPCR）检测IL-17 mRNA的表达。采用独立样本 t检验、非参数检验（ U检验）、 χ2检验等进行统计学分析。 结果:免疫组化结果显示，寻常型银屑病患者皮损区S100A10蛋白表达低于健康对照皮肤组织（ Z = -3.47， P < 0.001）。在小鼠模型中，WT/IMQ组皮损区S100A10蛋白表达较WT/VAS组降低（ t = 3.64， P = 0.007），KO/IMQ组Ki-67蛋白表达较WT/IMQ组升高（ t = 2.97， P = 0.041）。KO/IMQ组小鼠较WT/IMQ组出现更严重的鳞屑、浸润等临床表现。Western印迹结果显示，KO/IMQ组p-STAT3/STAT3（ t = 3.27， P = 0.031）、IL-17A（ t = 3.48， P = 0.025）蛋白表达均较WT/IMQ组升高，qPCR显示，KO/IMQ组IL-17A mRNA水平也较WT/IMQ组升高（ t = 2.73， P = 0.029）。 结论:S100A10蛋白在银屑病患者皮损中低表达；S100A10蛋白的缺失可能通过上调表皮STAT3磷酸化加重IMQ诱导的小鼠银屑病样皮炎。

目的:探究肺泡表面活性蛋白A(surfactant protein A，SP-A)能否通过调控滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cell，Tfh)的分化参与调节哮喘病理过程。方法:6～8周的雌性野生型(wild-type，WT)及SP-A基因敲除( Sp- a-/-)型C57BL/6J小鼠，利用鸡卵白蛋白(ovalbumin，OVA)和氢氧化铝免疫构建哮喘模型(WT哮喘小鼠：8只， Sp- a-/-哮喘小鼠：8只)，并分别设立磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline，PBS)处理的对照组(WT对照小鼠：6只， Sp- a-/-对照小鼠：4只)。HE染色观察小鼠肺部病理改变，流式细胞术检测脾脏和纵隔淋巴结中Tfh细胞及其亚群的组成，Tfh亚群根据其胞内干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)、白细胞介素(interleukin，IL)-17和IL-4的表达情况，分别定义为IFN-γ ＋Tfh、IL-17 ＋Tfh和IL-4 ＋Tfh细胞。酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)用于检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)E的水平。将T-B细胞共培养，检测培养体系中IgE抗体的水平。在体外，给予人肺泡表面活性蛋白A(human SP-A，hSP-A)处理并设立对照组，培养5 d后检测体系中Tfh亚群的分布情况。 结果:OVA激发后小鼠BALF中和肺组织内有大量炎症细胞浸润，WT及 Sp- a-/-哮喘小鼠BALF中炎症细胞总数显著高于其相对应对照组小鼠[(11.38±1.43)×10 4比(6.40±0.68)×10 4，(14.38±1.52)×10 4比(6.25±0.48)×10 4， t值分别为2.61和3.64， P值均<0.05]，差异具有统计学意义。另外，OVA激发后，WT和 Sp- a-/-哮喘小鼠BALF中IgE的水平明显高于其相应的对照组小鼠[(16.85±2.50)pg/mL比(4.94±2.01)pg/mL，(25.52±3.17)pg/mL比(8.05±2.90)pg/mL， t值分别为3.63和3.58， P值均<0.05)]，且 Sp- a-/-哮喘小鼠BALF中IgE抗体的水平明显高于WT哮喘小鼠( t＝2.20， P<0.05)，差异具有统计学意义。进一步研究显示，Tfh亚群组成在哮喘模型的WT和 Sp- a-/-小鼠中存在不同，表现为 Sp- a-/-哮喘小鼠IL-4 ＋Tfh细胞比例高于WT哮喘小鼠，IFN-γ ＋Tfh细胞比例降低，但差异并不具有统计学意义( P>0.05)。Tfh细胞的亚群组成发生变化，其中IL-4 ＋Tfh比例与肺泡灌洗液中IgE水平呈正相关( r＝0.50， P<0.05)，而IFN-γ ＋Tfh比例与肺泡灌洗液中IgE水平呈负相关( r＝-0.56， P<0.05)。脾脏中IFN-γ ＋Tfh/IL-4 ＋Tfh的比值在 Sp- a-/-哮喘小鼠中显著低于WT小鼠( t＝2.31， P<0.05)，且与肺泡灌洗液中IgE呈负相关( r＝-0.55， P<0.05)。T-B细胞共培养实验发现， Sp- a-/-小鼠脾脏来源Tfh细胞具有更强的辅助B细胞合成IgE抗体的能力( t＝3.18， P<0.05)。后续的体外T细胞刺激实验证实，hSP-A处理可以上调培养体系中IFN-γ ＋Tfh细胞比例与IFN-γ ＋Tfh/IL-4 ＋Tfh的比值( t值分别为6.34和3.16， P值均<0.05)，但并未明显改变IL-4 ＋Tfh细胞比例( P>0.05)。 结论:异常的Tfh细胞亚群分布与哮喘的发生相关，SP-A可能通过稳定Tfh细胞亚群的分布，从而缓解哮喘气道炎症反应。