目的:观察超高龄老年感染患者循环血微粒（MPs）的变化趋势，探讨MPs对感染的早期预警作用。方法:选择2018年12月至2019年3月解放军总医院第二医学中心收住院的年龄≥85岁的感染患者为观察组，选择同期年龄≥85岁的健康体检者作为对照组。于患者发热2 h、第2天和第7天取静脉血，检测白细胞计数（WBC）、中性粒细胞比例（NEUT）、C-反应蛋白（CRP）和降钙素原（PCT）等炎症指标；采用流式细胞仪检测MPs水平，以膜联蛋白Ⅴ标记CD11b阳性MPs（AnnexinⅤ +/CD11b + MPs）代表白细胞微粒（LMPs），以AnnexinⅤ标记CD66b阳性MPs（AnnexinⅤ +/CD66b + MPs）代表中性粒细胞微粒（NMPs）。比较组间不同时间点各指标的差异；采用受试者工作特征曲线（ROC）分析各指标对老龄患者感染的预测价值。 结果:共纳入38例研究对象，其中观察组28例，对照组10例。观察组发热2 h时LMPs、NMPs即达峰值，且明显高于对照组〔LMPs（个/μL）：55.0（28.8，197.2）比19.0（13.5，28.3），NMPs（个/μL）：226.5（123.3，516.5）比26.5（22.0，48.8），均 P<0.01〕；随着对病情的控制，LMPs、NMPs逐渐下降，第2天时NMPs显著低于发热2 h时〔个/μL：106.0（40.0，309.0）比226.5（123.3，516.5）， P<0.05〕，第7天时LMPs、NMPs均显著低于第2天时〔LMPs（个/μL）：17.0（12.5，43.8）比42.0（13.0，117.0），NMPs（个/μL）：30.0（15.8，62.0）比106.0（40.0，309.0），均 P<0.05〕，且第7天LMPs、NMPs水平与对照组比较差异均无统计学意义。在各项炎症指标中，观察组发热2 h时NEUT明显高于对照组（0.70±0.09比0.59±0.04， P<0.01），而WBC、CRP及PCT与对照组差异无统计学意义；第2天时观察组各炎症指标升至高峰，且均明显高于对照组〔WBC（×10 9/L）：9.33±2.44比6.37±1.28，NEUT：0.78±0.08比0.57±0.04，CRP（mg/L）：5.67±2.99比0.33±0.18，PCT（μg/L）：0.80±0.67比0.07±0.03，均 P<0.01〕；而第7天时观察组各炎症指标明显下降，且与对照组比较差异无统计学意义。ROC曲线分析显示，发热当天的LMPs和NMPs预警超高龄老年患者发生感染的ROC曲线下面积（AUC）及95%可信区间（95% CI）均高于WBC、NEUT、CRP、PCT〔0.888（0.763～1.000）、0.973（0.931～1.000）比0.679（0.346～0.811）、0.829（0.700～0.958）、0.607（0.404～0.811）、0.554（0.358～0.749）〕。 结论:LMPs和NMPs在发热早期即明显升高，可以预测超高龄老年患者感染的发生。

目的:探讨大鼠脑冲击伤（bTBI）早期是否启动神经元焦亡的发生及可能机制。方法:选取雄性SD大鼠52只，按随机数字表法分为空白对照组和bTBI组，bTBI组又根据观察时间分为1，6，12 h三个亚组，各组13只大鼠。bTBI组麻醉后将颈部以下保护，用BST-Ⅰ型激波管致头部冲击伤。空白对照组除不致伤外，其他操作与bTBI组一致。伤后6，12 h进行改良神经功能严重程度评分（mNSS）检测，观察大鼠神经功能障碍程度。伤后1，6，12 h行MRI T2WI扫描观察异常信号影；解剖大鼠头部进行大体观察；HE染色观察脑组织病理改变；电镜下观察神经元超微结构改变；ELISA检测炎症因子［白细胞介素（IL）-1β、IL-18］的表达水平；免疫荧光共染检测蛋白［凋亡相关微粒蛋白（ASC）、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）］在神经元上的表达情况。结果:（1）bTBI 6 h组mNSS［3（3.0，3.0）分］高于空白对照组［0（0，0）分］（ P<0.05），bTBI 12 h组mNSS［2（2.0，2.0）分］高于空白对照组［0（0，0）分］（ P<0.05）；bTBI 6 h组mNSS与bTBI 12 h组比较，差异无统计学意义（ P>0.05）。（2）与空白对照组比较，bTBI组MRI T2WI序列均发现脑组织体积增大，整体T2信号影增高，扣带回增宽变扁，大脑皮质、第三脑室较周围存在高信号影，但各bTBI亚组间无明显差异。（3）bTBI组大体观察发现脑组织出现不同程度的水肿和充血；HE染色显示各bTBI亚组脑组织皮质区部分细胞出现肿胀变形和血管管腔收缩，血管周围间隙增宽。（4）电镜下发现bTBI组神经元肿胀主要发生在线粒体，且在伤后12 h内肿胀程度逐步加深。（5）bTBI 1，6，12 h组IL-18水平分别为（4.12±0.42）pg/ml、（5.20±0.29）pg/ml、（6.82±0.61）pg/ml，较空白对照组的（2.94±0.49）pg/ml均明显升高（ P均<0.01）；bTBI 1，6，12 h组IL-1β水平分别为（2.48±0.15）pg/ml、（4.10±0.38）pg/ml、（5.04±0.28）pg/ml，较空白对照组的（1.86±0.32）pg/ml均明显升高（ P均<0.01）；各bTBI亚组血清中IL-18及IL-1β蛋白在伤后12 h内均呈不同程度的升高（ P均<0.05）。（6）ASC和NLRP3蛋白在脑皮质神经元阳性细胞的胞质上表达，且随时间延长表达均呈上升趋势。 结论:大鼠在bTBI早期启动脑皮质神经元发生焦亡。bTBI大鼠神经功能的缺失可能是冲击波作用于头部导致神经元焦亡引起。

目的:探讨长期暴露柴油机尾气(DEE)对肺部炎症的影响以及潜在的机制。方法:30只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为DEE组和对照组，每组15只。DEE组暴露于含有3 mg/m 3柴油机排气微粒的DEE中12周，对照组暴露于净化空气中12周。使用酶联免疫吸附试验或高效液相色谱-串联质谱法检测尿液中2-羟基菲、9-羟基菲、8-羟基-2-脱氧鸟苷、丙二醛水平，血液和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素8(IL-8)、IL-6和肿瘤坏死因子α水平；肺组织病理切片观察肺炎症和重塑变化；荧光定量聚合酶链反应测定肺组织中miR-155水平；蛋白质印迹测定肺组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)表达；通过双荧光素酶报告实验和免疫共沉淀实验验证miR-155与SIRT1的相互作用。 结果:DEE组大鼠尿中2-羟基菲、9-羟基菲、8-羟基-2-脱氧鸟苷、丙二醛水平，血清和BALF中IL-8、IL-6和肿瘤坏死因子α水平，BALF中白细胞总数、中性粒细胞、嗜酸粒细胞和淋巴细胞数均显著高于对照组( P值均<0.001)，肺组织切片中气道炎症及重塑加重。与对照组比较，DEE组大鼠肺组织中miR-155水平升高( t＝21.854， P<0.001)，SIRT1表达下降( t＝25.580， P<0.001)。miR-155模拟物下调SIRT1野生型细胞的荧光强度，而SIRT1在miR-155组中优先富集。 结论:DEE暴露加重大鼠气道炎症和氧化应激，可能与miR-155下调靶标SIRT1表达水平有关。

目的:探究树突状细胞相关的C型凝集素-1(Dectin-1)在小鼠肾缺血再灌注损伤中的作用及其机制。方法:C56BL/6雄性小鼠60只，随机数字表法分为假手术组、肾缺血再灌注损伤(RIRI)组、生理盐水组、昆布多糖(LAM)低剂量组(20 mg/kg)、LAM中剂量组(40 mg/kg)、LAM高剂量组(80 mg/kg)。采集小鼠血液标本，测定血清肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)水平；苏木精-伊红(HE)染色评估各组小鼠肾组织病理学改变；原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测细胞凋亡数量；定时定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测白细胞介素(IL)-1β、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-1、核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)、凋亡相关微粒蛋白(ASC)的mRNA水平；蛋白质印迹法(Western blot)检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化真核细胞翻译启始子2α(p-eIF2α)/真核细胞翻译启始子2α(eIF2α)、C/EBP同源蛋白(CHOP)的蛋白水平。组间比较采用 t检验。 结果:RIRI组小鼠BUN及Cr水平明显高于假手术组(Cr 157.23±15.90比15.97±0.70， t＝23.963， P<0.05；BUN 16.66±0.87比4.34±0.49， t＝28.217， P<0.05)，LAM组小鼠BUN及Cr水平明显低于假手术组(Cr 123.70±9.66比103.33±3.95比79.90±4.04比157.23±15.90， t＝6.653、7.159、12.861， P值均<0.05；BUN 11.56±0.80比9.37±0.81比7.13±0.63比16.66±0.87， t＝5.427、13.593、34.028， P值均<0.05)，差异均有统计学意义；LAM组小鼠凋亡细胞明显低于RIRI组(14.44±1.91比40.89±4.53， t＝10.137， P<0.05)；LAM组小鼠IL-1β、Caspase-1、NLRP3、ASC的信使RNA(mRNA)水平明显低于RIRI组，差异有统计学意义(IL-1β为2.56±0.09比4.98±0.44， t＝7.932， P<0.05；Caspase-1为1.77±0.12比4.00±0.22， t＝12.160， P<0.05；NLRP3为2.43±0.28比4.71±0.28， t＝16.474， P<0.05；ASC为1.99±0.16比3.14±0.17， t＝15.977， P<0.05)；LAM组小鼠GRP78、p-eIF2α/eIF2α、CHOP蛋白水平明显低于RIRI组，差异均有统计学意义(GRP78为0.472±0.026比1.215±0.073， t＝26.501， P<0.05；eIF2α/p-eIF2α为0.697±0.016比0.871±0.028， t＝9.877， P<0.05；0.621±0.035比1.086±0.115， t＝5.419， P<0.05)。 结论:Dectin-1拮抗剂Laminarin可减轻小鼠肾缺血再灌注损伤，其机制可能与抑制细胞凋亡、焦亡及内质网应激有关。

本研究共纳入35例抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）相关性血管炎（ANCA-associated vasculitis，AAV）患者，其中6例合并栓塞，同时纳入膜性肾病、慢性肾炎及健康对照组各25例，应用流式细胞术检测血浆内皮细胞微粒（endothelial microparticle，EMP）和血小板微粒（platelet microparticle，PMP）水平。结果发现AAV栓塞组EMP、PMP水平显著高于未栓塞组（均 P<0.01），活动期AAV组EMP、PMP水平显著高于缓解期组、膜性肾病组、慢性肾炎组及健康对照组（均 P<0.05），且缓解期AAV组EMP、PMP水平亦高于慢性肾炎组及健康对照组（均 P<0.05）。Spearman相关性分析结果显示，EMP和PMP与伯明翰血管炎活动性评分、红细胞沉降率、C反应蛋白、 D-二聚体均呈正相关（均 P<0.05）。研究结果提示，EMP、PMP反映了免疫炎症介导的血管内皮损伤和血小板活化程度，可能与AAV疾病炎性反应和血栓形成有关。

观察经内镜逆行胰胆管造影术(endoscopic retrograde cholangiopancreatography, ERCP)术前使用吲哚美辛栓剂100 mg对ERCP术后胰腺炎(post-ERCP pancreatitis，PEP)患者的血小板微粒(platelet microparticles，PMPs)水平的影响。采用随机数字表法，将2019年6月—2020年10月在安徽医科大学第一附属医院行ERCP的191例患者分为吲哚美辛组( n＝96)与对照组( n＝95)，吲哚美辛组ERCP术前吲哚美辛栓剂100 mg纳肛，对照组采用等质量安慰剂纳肛。采用流式细胞仪检测术前、术后3 h与术后24 h的血液标本的PMPs水平，同时检测患者术前、术后3 h、术后24 h血液标本中白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。吲哚美辛组PEP发生率为5.21%(5/96)，对照组PEP发生率为13.68%(13/95)，差异有统计学意义( P＝0.044)。吲哚美辛组术前PMPs水平(1 910.01个/μL)略低于对照组(2 351.87个/μL， P>0.05)；吲哚美辛组术后3 h和24 h的PMPs水平(1 671.47个/μL，862.74个/μL)明显低于对照组同时间点PMPs水平(2 443.75个/μL，2 536.76个/μL， P均<0.05)。患者血浆中IL-1、IL-6和TNF-α水平出现相同趋势的改变。吲哚美辛降低PEP的发生率，可能与减少PMPs形成有关。

目的:评价氢气对创伤性颅脑损伤（TBI）大鼠大脑皮质NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体的影响。方法:按随机数字表法将120只成年雄性SD大鼠分为假手术组（S组）、TBI组（T组）、TBI+NLRP3抑制剂MCC950组（T+M组）、TBI+氢气组（T+H组）、TBI+氢气+MCC950组（T+H+M组）5组，每组24只。采用控制型皮质撞击法建立TBI大鼠模型；T+M组和T+H+M组大鼠于制模前14 d连续腹腔注射MCC950（10 mg/kg）；T+H组和T+H+M组大鼠分别于制模后1 h和3 h吸入2%氢气1 h。制模后6 h取各组大鼠脑挫伤周围皮质组织，测定伊文思蓝（EB）含量以反映血脑屏障通透性；计算脑组织含水量；用原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测细胞凋亡并计算神经元凋亡指数；蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测Bcl-2、Bax、NLRP3、凋亡相关微粒蛋白（ASC）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1 p20（caspase-1 p20）表达；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测白细胞介素（IL-1β、IL-18）水平。结果:与S组相比，T组大鼠大脑皮质EB含量、脑组织含水量、凋亡指数以及Bax、NLRP3、ASC、caspase-1 p20表达明显增高，Bcl-2表达明显降低，IL-1β、IL-18水平明显升高〔EB含量（μg/g）：87.57±6.89比10.54±1.15，脑组织含水量：（83.79±2.74）%比（74.50±1.19）%，凋亡指数：（62.66±5.33）%比（4.61±0.96）%，Bax/β-actin：4.20±0.44比1，NLRP3/β-actin：3.55±0.31比1，ASC/β-actin：3.10±0.26比1，caspase-1 p20/β-actin：3.28±0.24比1，Bcl-2/β-actin：0.23±0.03比1，IL-1β（ng/g）：221.58±19.15比27.15±3.27，IL-18（ng/g）：87.26±7.17比12.10±1.85，均 P<0.05〕。与T组相比，T+M组、T+H组和T+H+M组大鼠大脑皮质EB含量、脑组织含水量、凋亡指数以及Bax、NLRP3、caspase-1 p20表达明显降低，Bcl-2表达明显增高，IL-1β、IL-18水平明显降低，而ASC表达差异无统计学意义。与T+H组相比，T+H+M组大鼠大脑皮质EB含量、脑组织含水量、凋亡指数以及Bax、NLRP3、caspase-1 p20表达进一步降低，Bcl-2表达进一步增高，IL-1β、IL-18水平进一步降低〔EB含量（μg/g）：40.49±3.15比51.96±4.69，脑组织含水量：（76.58±1.04）%比（78.76±1.16）%，凋亡指数：（32.22±3.44）%比（38.54±3.89）%，Bax/β-actin：1.92±0.16比2.56±0.21，NLRP3/β-actin：1.94±0.14比2.37±0.24，caspase-1 p20/β-actin：1.97±0.17比2.31±0.19，Bcl-2/β-actin：0.82±0.07比0.52±0.04，IL-1β（ng/g）：86.23±7.09比110.44±10.48，IL-18（ng/g）：40.18±3.22比46.23±4.02，均 P<0.05〕。而T+M组与T+H组各指标比较差异均无统计学意义。 结论:氢气吸入减轻大鼠TBI的机制可能与抑制大脑皮质NLRP3炎症小体有关。

目的:探讨封闭负压引流（VSD）联合自体微粒皮移植治疗慢性难愈性创面的临床效果。方法:采用前瞻性研究，连续性纳入2020年1月至2022年12月金华市第五医院普外科诊断的慢性难愈性创面患者共90例，采用随机数字表法分为对照组和观察组各45例。对照组采用VSD联合常规植皮术，观察组采用VSD联合自体微粒皮移植。比较两组VSD后7 d肉芽成熟率、移植成活率、术后14 d创面愈合率和完全愈合时间、总住院时间和并发症发生率、术后6个月温哥华瘢痕评估量表评价瘢痕程度、术后3 d和7 d疼痛视觉模拟量表（VAS）评分以及血清细胞因子［包括超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、表皮生长因子（EGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）］水平。结果:两组患者均顺利完成手术和临床随访，两组基线资料（包括性别、年龄、创面面积和分布、疾病类型）差异均无统计学意义（均 P > 0.05）。观察组VSD后7 d肉芽成熟率88.89%（40/45）、术后14 d创面愈合率84.44%（38/45），均高于对照组的71.11%（32/45）和64.44%（29/45）（χ 2=4.44、4.73，均 P < 0.05）；观察组供区和受区的创面完全愈合时间分别为（7.83±1.64）d、（17.92±4.57）d，均显著短于对照组的（10.21±2.32）d、（22.34±6.83）d（ t=5.62、3.61，均 P < 0.001）；观察组术后6个月供区和受区的瘢痕评分分别为（2.35±0.40）分、5.69±0.91）分，均低于对照组的（5.44±0.88）分、（9.85±1.56）分（ t=21.44、15.45，均 P < 0.001）。术后3 d和7 d观察组疼痛评分分别为（3.57±0.83）分、（1.38±0.25）分，均显著低于对照组的（6.62±1.18）分、（3.64±0.49）分（ t=14.18、27.56，均 P < 0.001）；观察组hs-CRP、IL-6和TNF-α分别为（5.51±0.67）mg/L、（7.69±0.84）mg/L、（3.44±0.45）mg/L，均低于对照组的（3.54±0.33）mg/L、（3.97±0.56）mg/L、（1.68±0.20）mg/L；观察组EGF和bFGF分别为（15.64±4.53）mg/L、（30.26±6.92）mg/L，均高于对照组的（31.25±7.82）mg/L、（45.67±9.84）mg/L（ t=17.42、24.72、23.98、11.59、8.59，均 P < 0.001）。观察组总并发症发生率为6.67%（3/45），低于对照组的22.22%（10/45）（χ 2=4.41， P < 0.05）。 结论:VSD联合自体微粒皮移植治疗慢性难愈性创面有较好的安全性和临床疗效，能够显著提高创面愈合质量，降低供区创面的瘢痕风险，与多种细胞因子的改善有关。

目的 基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术,建立一种血清白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)的检测方法.方法 采用双抗体夹心法,分别用吖啶酯标记完整抗体和生物素标记酶切片段抗体,并与待测物IL-6形成夹心复合物,其中生物素再与链霉亲和素包被的磁性固相微粒特异反应发光,通过测量发光信号值进行定量分析;并对其标记抗体稀释缓冲液、标记抗体浓度、样本加样量等进行条件优化;对空白限(LOB)、检出限(LOD)、中间精密度、可报告范围、干扰实验、钩状(HOOK)效应等性能指标进行评价;选择145例血清样本,采用线性回归分析与罗氏电化学发光法进行方法学比对.结果 成功建立一种基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术检测血清IL-6的方法.该方法选择MES-BSA作为标记抗体稀释缓冲液,标记抗体浓度选择0.2 μg/ml,样本加样量选择50μl.该方法的LOB为0.2 pg/ml,LOD为0.5 pg/ml,可报告范围为0.5～30 000 pg/ml,中间精密度＜5.3％.在IL-6达到200 000 pg/ml浓度水平时,未出现HOOK效应现象.在三酰甘油(TG)30 000 μg/ml,血红蛋白(HGB)9 000 μg/ml,胆红素(TBIL)330 μg/ml,类风湿因子(RF)1 500 IU/ml浓度范围内,干扰物质对检测结果无影响.与电化学发光法测定IL-6比对,线性回归方程为Y=0.980 2X-3.487 9,r=0.997 7,两种方法试剂测定结果呈高度相关(P＜0.05).结论 建立了基于吖啶酯化学发光检测血清IL-6的方法,各项指标均符合临床应用要求,适宜在临床实验室推广应用.

目的 研究微小RNA-126(miR-126)-内皮祖细胞(EPC)-微粒(MPs)改善心肌细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤的分子机制.方法 采用心肌细胞建立对照(control)和OGD/R损伤模型,并分别给予EPC-MPs和miR-126 mimic EPC-MPs处理.通过透射电子显微镜评估心肌细胞细胞器的结构变化.采用ELISA检测心肌细胞中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达水平.采用Western blot和实时荧光定量PCR(qPCR)检测不同处理后心肌细胞中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-6(caspase-6)、一氧化氮合酶(eNOS)、叉头框蛋白O1(FOXO1)、髓过氧化物酶(MPO)、核因子-κB(NF-κB)、细胞外信号调节激酶1(ERK1)、肝激酶B1(LKB1)、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、130×103高尔基体基质蛋白(GM130)和过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)的蛋白和mRNA表达水平.结果 OGD/R+miR-126 mimic EPC-MPs组部分心肌细胞线粒体结构完整,部分线粒体大小增大,内质网表面核糖体较少,高尔基体部分囊泡聚集.与OGD/R+EPC-MPs组比较,OGD/R+miR-126 mimic EPC-MPs组IL-6、TNF-α和HMGB-1的表达水平下调.与OGD/R+EPC-MPs组比较,OGD/R+miR-126 mimic EPC-MPs组AngⅡ、caspase-6、p-ERK1/2和GRP78的蛋白表达水平下调,p-LKB1、GM130和PGC-1α的蛋白表达水平上调.qPCR结果显示,与OGD/R+EPC-MPs组比较,OGD/R+miR-126 mimic EPC-MPs组AngⅡ、MPO和GRP78的mRNA表达水平下调,eNOS、GM130和PGC-1α的mRNA表达水平上调.结论 当心肌细胞发生OGD/R损伤时,miR-126 mimic EPC-MPs调节PGC-1α/GM130表达,抑制AngⅡ诱导的应激损伤反应,减少心肌细胞的OGD/R损伤.