目的:通过网络药理学探讨益肾清利颗粒对IgA肾病的作用机制。方法:通过TCMSP筛选益肾清利颗粒8味中药的相关成分及作用靶点，于Uniprot数据库将作用靶点转换成基因，使用Cytoscape 3.6.0构建药物活性成分-靶点网络；通过人类基因组数据库(GeneCards)筛选IgA肾病相关靶标，将药物及疾病靶点导入Venny 2.1软件取交集，得到的共有靶标上传于STRING平台构建蛋白质互作网络，借助生物信息资源数据库对生成结果进行GO及KEGG富集分析，并构建"益肾清利颗粒成分-靶点-信号通路"多维网络。结果:筛选得到69个活性成分，包括人参皂苷、β-谷甾醇、谷甾醇、槲皮苷等。得到益肾清利颗粒作用于IgA肾病的靶点94个，其中核心靶点30个，主要包括Jun原癌基因(JUN)、TNF、肿瘤蛋白p53(TP53)、AKT1及IL-6等。KEGG富集分析结果主要涉及3条通路，分别是PI3K-AKT通路、TNF炎症通路及MAPK通路。结论:益肾清利颗粒通过多成分、多靶点、多途径作用于IgA肾病，本研究通过网络药理学探讨益肾清利颗粒的治疗机制，为进一步实验研究奠定基础。

目的 探讨柴黄益肾颗粒对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾纤维化的作用及其机制.方法 将24只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、模型组及柴黄益肾颗粒低、高剂量组(n=6).对照组仅暴露且游离右侧肾输尿管;模型组行UUO建立UUO动物模型;柴黄益肾颗粒低、高剂量组按模型组方法建立UUO小鼠模型并分别予以3.8、7.6 g/kg柴黄益肾颗粒灌胃,7 d后麻醉处死小鼠收集肾标本.采用HE、Masson染色观察肾脏病理变化及纤维化程度,天狼星红染色观察胶原沉积情况.采用Western blotting检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、β-连环蛋白(β-catenin)相关蛋白的表达水平.采用RT-PCR检测A33 及GSK-3β、β-catenin mRNA水平的变化.同时,以正常小鼠肾小管上皮细胞(TCMK1)作为正常组,并利用转化生长因子-β(TGF-β)刺激TCMK1建立体外纤维化模型,柴黄益肾颗粒含药血清处理建立体外用药模型;并通过转染A33过表达质粒在TCMK1细胞内过表达A33,观察纤维化相关指标及A33及GSK-3β、β-catenin mRNA的表达变化.结果 RT-PCR检测结果显示,与对照组比较,模型组A33水平明显升高,而柴黄益肾颗粒高、低剂量组明显降低(P＜0.05).Western blotting检测结果显示,模型组α-SMA、FN、Col-Ⅰ等纤维化相关因子的表达水平明显高于对照组(P＜0.05);与模型组比较,柴黄益肾颗粒低、高剂量组α-SMA、FN、Col-Ⅰ的表达水平明显降低(P＜0.05).HE、Masson、免疫组化染色结果显示,与对照组比较,模型组肾脏结构损伤严重,胶原沉积明显增加,且GSK-3β、β-catenin蛋白表达水平明显升高(P＜0.01);与模型组比较,柴黄益肾颗粒低、高剂量组肾脏结构良好,肾脏损伤及纤维化均明显好转,GSK-3β、β-catenin蛋白表达水平明显降低(P＜0.05).体外实验结果证实,与正常组比较,A33过表达可促进TCMK1细胞纤维化相关因子的上调,明显增加Wnt/β-catenin信号通路下游靶点GSK-3β和β-catenin mRNA的表达(P＜0.05),且A33过表达可逆转柴黄益肾颗粒含药血清下调的细胞纤维化改变(P＜0.01).结论 柴黄益肾颗粒可通过下调A33/Wnt/β-catenin信号通路明显减缓UUO小鼠肾纤维化,且A33可能是肾纤维化的一个潜在治疗靶标.

目的:探讨益肾化湿颗粒通过miR-339-5p靶向调控转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad通路对慢性肾小球肾炎模型大鼠的肾脏保护作用及其机制.方法:将SD大鼠分为假手术组、模型组、益肾化湿颗粒组、贝那普利组、益肾化湿颗粒+an-tagomir阴性对照(NC)组、益肾化湿颗粒+miR-339-5p antagomir组、益肾化湿颗粒+SRI-011381组.全自动生化分析仪检测大鼠24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;qRT-PCR检测肾组织中miR-339-5p表达;免疫组化检测大鼠肾组织中核因子E2相关因子2(NRF2)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达;HE、Masson染色分别检测大鼠肾组织病理变化、纤维化程度;Western blot检测肾组织中TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7蛋白表达;验证miR-339-5p与TGF-β1的关系.结果:与假手术组比较,模型组大鼠肾功能异常,氧化应激增强,肾组织病理损伤及纤维化严重,炎性因子、TGF-β1、p-Smad2/3蛋白表达升高,miR-339-5p表达、Smad7蛋白表达降低(P＜0.05);与模型组比较,益肾化湿颗粒组、贝那普利组对应指标变化趋势与上述相反(P＜0.05);miR-339-5p antagomir或SRI-011381减弱了益肾化湿颗粒对慢性肾小球肾炎模型大鼠的肾脏保护作用.miR-339-5p靶向调控TGF-β1表达.结论:益肾化湿颗粒可能通过上调miR-339-5p靶向抑制TGF-β1/Smad通路对慢性肾小球肾炎模型大鼠肾脏发挥保护作用.

目的: 观察益肾清利和络方颗粒剂治疗慢性肾脏病3 期的临床疗效.方法: 采用随机双盲对照的研究方法,选择2014 年4 月～2016 年8 月江苏省中医院门诊和住院患者随机纳入观察组和对照组,观察组给予西医基础治疗+益肾清利和络方颗粒剂,对照组给予西医基础治疗+益肾清利和络方颗粒安慰剂,随访24 周,比较两组间实验室指标和疗效.结果: 共纳入88 例,观察组和对照组各44 例,两组患者的年龄、性别、病程、血压、尿蛋白定量、肾功能、肝功能差异无统计学意义(P>0. 05).观察24 周后,观察组血肌酐水平显著低于对照组(P<0. 05),观察组总有效率为69. 23％,对照组为35. 90％,组间差异有统计学意义(P<0. 05),且观察组总体及3a、3b 期逆转恢复率显著高于对照组(P<0. 05).结论: 益肾清利和络方可降低血肌酐升高速率,延缓慢性肾脏病3 期进展.

目的:观察中药验方新益肾清利方治疗肾虚湿热型特发性弱精子不育症的临床疗效.方法:选择2015年1月至2017年2月上海中医药大学附属第七人民医院诊治的符合纳入标准的60例患者作为研究对象,采用随机、双盲、对照试验方法,以1:1比例按照随机数字分入治疗组或对照组,每组30例患者,对受试者、干预措施实施者和结果测量者实施盲法;治疗组患者予以新益肾清利配方颗粒,对照组患者予以五子衍宗丸配方颗粒.两组疗程均为3个月,观察临床疗效,比较患者精子浓度、精子活动率、A级精子、A+B级精子及血清睾酮、泌乳素水平的变化情况.结果:(1)治疗组和对照组患者临床总有效率分别为86.7％和70.0％,其差异具有统计学意义(P＜0.05).(2)治疗前后组内比较,两组患者精子浓度、精子活动率、A级精子、A+B级精子差异均有统计学意义(均P＜0.01);治疗后组间比较,两组患者精子活动率(P＜0.01)、A级精子改善存在明显差异,具有统计学意义(P＜0.05),治疗组优于对照组,精子浓度、A+B级精子改善差异均无统计学意义(均P＞0.05).(3)治疗前后组内比较,血清泌乳素与血清总睾酮差异无统计学意义(P＞0.05);治疗后两组间比较,血清总睾酮与泌乳素差异无统计学意义(P＞0.05).两组患者治疗过程中均未发生不良事件.结论:中药验方新益肾清利方治疗肾虚湿热型特发性弱精子不育症的效果满意,能够明显改善精子活动率,尤其是提高A级精子比例.

目的 探究益肾化湿颗粒对糖尿病大鼠肾损伤的保护作用,并初步探究作用机制.方法 复制糖尿病肾损伤大鼠模型,设立正常组、糖尿病肾损伤组、益肾化湿颗粒低、中、高剂量组、厄贝沙坦组(阳性对照),每组12只大鼠.益肾化湿颗粒各组每日灌胃0.15,0.30,0.60 g/kg益肾化湿颗粒;厄贝沙坦组每日灌胃0.02 g/kg厄贝沙坦,正常组、糖尿病肾损伤组灌胃等量蒸馏水,连续给药8 w后取材.采集尾静脉血检测血糖血脂水平;收集大鼠24 h尿液利用考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)水平;获取肾组织,测定肾重指数;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织形态学变化;透射电镜观察肾组织超微结构变化;Tunel染色法检测大鼠肾组织细胞凋亡情况;West-ern印迹检测大鼠肾组织中10号染色体上缺失的磷酸酯酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)、磷脂酰肌醇激酶-3(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、B淋巴细胞癌(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3蛋白表达.结果 与正常组相比,糖尿病肾损伤大鼠血清空腹血糖(FBG)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平显著升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著降低,BUN、Scr、24 h尿蛋白量显著升高,肾重、肾重指数显著升高,体重显著降低,肾组织损伤评分显著升高,细胞凋亡率显著升高,肾组织中PTEN蛋白表达显著降低,PI3K蛋白表达及Akt磷酸化水平显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax、caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05).与糖尿病肾损伤组相比,益肾化湿颗粒各组、厄贝沙坦组大鼠血清FBG、TG、TC水平显著降低,HDL-C水平显著升高,BUN、Scr、24h尿蛋白量显著降低,肾重、肾重指数显著降低,体重显著升高,肾组织损伤评分显著降低,细胞凋亡率显著降低,肾组织中PTEN蛋白表达显著升高,PI3K蛋白表达及Akt磷酸化水平显著降低,Bcl-2蛋白表达显著升高,Bax、caspase-3蛋白表达显著降低(均P<0.05).结论 益肾化湿颗粒能够通过抑制PI3K/Akt信号通路活化,减轻糖尿病大鼠肾损伤、降低肾组织细胞凋亡,进而发挥对糖尿病大鼠肾功能的保护作用.

目的 探讨六味补肺益肾颗粒对支气管哮喘(BA)患者疗效及对T淋巴细胞亚群、炎症因子的影响.方法 选择88例BA患者按照随机数表法分为对照组与治疗组,各44例.患者均采用舒利迭治疗,治疗组在此基础上联合六味补肺益肾颗粒治疗.比较2组临床疗效、症状积分、哮喘控制情况、血清炎症因子水平及T淋巴细胞亚群水平.结果 用药后,治疗组总有效率(93.18％,41/44)高于对照组(72.73％,32/44)(P<0.05);治疗后2组症状积分均降低,哮喘控制测试(ACT)评分均增高(P<0.05),治疗组均优于对照组(P<0.05);2组血清白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症因子水平、T淋巴细胞亚群水平与用药前相比均有改善(P<0.05),且治疗组改善情况均优于对照组(P<0.05).结论 对支气管哮喘患者进行六味补肺益肾颗粒治疗,疗效明显,可有效控制哮喘病症,明显减轻炎症反应,改善T淋巴细胞亚群水平.

目的:研究虫草益肾颗粒对高糖培养下人肾小球系膜细胞(HMCs)的氧化应激及p47phox表达水平的影响,探讨其防治糖尿病肾病(DKD)的作用机制.方法:将HMCs随机分为6组:正常组、高糖组、福辛普利组和虫草益肾颗粒低、中、高剂量组,分别给予相应的动物含药血清处理后,收集48 h和72 h细胞上清液,用流式细胞术检测各组细胞的活性氧簇(ROS)水平,用比色法分别检测各组超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量.用Western Blot和Real-time PCR法分别检测p47phox蛋白和mRNA表达.结果:48h、72 h时,与正常组比较,各组SOD活性均明显下降(P＜0.01),各组ROS及MDA含量均明显上升(P＜0.01),HMCs p47phox mRNA及蛋白表达量明显升高(P＜0.01);与高糖组比较,福辛普利组、虫草益肾颗粒低、中、高剂量组SOD活性明显上升(P＜0.05或P＜0.01),ROS、MDA含量明显下降(P＜0.01),p47phox mRNA及蛋白表达量均明显下降(P＜0.05或P＜0.01).结论:虫草益肾颗粒可通过增强SOD活性,降低ROS、MDA含量,改善HMCs氧化应激状态,延缓DKD进程.

目的:观察益肾消结方对阿霉素肾病综合征大鼠TGF-β1、SMAD3表达的影响.方法:选取雄性SD大鼠100只,适应性喂养1周后,随机分为健康组(20只)和模型组(80只),采用阿霉素注射法建立肾病综合征大鼠模型,去除造模后死亡大鼠9只,将造模成功大鼠随机分为模型对照组、治疗组、中药组各20只.健康组和模型对照组予生理盐水灌胃,治疗组予强的松+卡托普利片灌胃,中药组在治疗组的基础上加用益肾消结方颗粒灌胃,给药四周后,取尿液测量尿蛋白排出量,测量血清肝肾功、血脂等指标,取出大鼠肾组织行HE染色及PAS染色,分别观察肾小管及肾小球的组织形态结构变化,采用免疫组织化学检测大鼠肾小球中转化生长因子-β1(TGF-β1)及信号转导蛋白3(SMAD3)的变化及分布情况.结果:造模成功后,与健康组比较,模型组大鼠体质量均减轻,大鼠尿蛋白排出量均不同程度增加,光镜下可见模型组大鼠肾脏部分肾小球节段性硬化,肾脏皮质和髓质区域小管管腔内均可见蛋白管型的蓄积.灌胃4周后,与模型对照组比较,镜下可见治疗组及中药组大鼠损伤肾小球数量有所降低,小管内蛋白管型的蓄积均所减少;中药组大鼠尿蛋白排出量显著减少(P＜0.05);中药组大鼠血清白蛋白显著升高(P＜0.05),血清总胆固醇显著降低(P＜0.01);与模型对照组比较,治疗组大鼠仅TGF-β1表达显著下调(P＜0.05),SMAD3的表达无明显差异,而中药组大鼠TGF-β1、SMAD3表达较模型对照组则显著降低(P＜0.01).结论:益肾消结方具有减少尿蛋白排出、调节血脂及改善肾脏微循环的功效,可多途径参与下调TGF-β1、Smad3水平,达到延缓肾脏纤维化进程的作用.

免疫性不孕是临床常见疑难病,中医在治疗本病方面具有显著优势.免疫性不孕病机属本虚标实,以肾阴亏虚为本,湿热瘀血为标,且男女病机具有同一性.治疗本病应重视"男女同治",且提倡"三同",即在同一时间、同一科室男女双方接受同一医生的诊疗.治疗时当分清四诊主次,明辨病机特点,以益肾养阴、化瘀利湿为大法,多选用全国名中医徐福松教授的验方精泰来颗粒为基础方,标本同治以达到调整免疫系统、促进受孕之目的.附验案1则以佐证.