目的:探讨石榴花改善脂质沉积(lipid deposition,LD)的作用机制.方法:CCK-8法测定石榴花提取物(pomegranate flower extract,PFE)及棕榈酸(palmitic acid,PA)对细胞活力的影响,采用PA诱导HepG2细胞LD模型,实验分为PFE组、空白组(NC组)和模型组(PA组),油红O染色法测定细胞内脂质含量,GPO-PAP法测定细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)和甘油三酯(triglyceride,TG)含量.UPLC-LTQ-Orbitrap-MS技术鉴定差异代谢物并进行代谢通路富集.采用网络药理学方法筛选关键成分与核心靶点,并进行GO和KEGG富集分析.利用Autodock软件对关键成分与核心靶点进行分子对接,采用q-PCR检测PIK3CA、AKT1、MAPK、STAT3 mRNA的表达.结果:与NC组比较,PA组细胞内脂质、TC、TG含量显著升高(P＜0.01),33种代谢物有显著差异(P＜0.05);与PA组比较,PFE组细胞内脂质、TC、TG含量显著降低(P＜0.05),10种代谢物显著回调(P＜0.05).33种差异代谢物富集到与LD关联性强的甘油磷脂代谢通路.网络药理学得到PF的关键成分为白桦脂酸、木犀草素等,核心靶点为MAPK1、PIK3CA、AKT1、STAT3等.交集靶点主要通过调控PI3K-AKT、HIF-1等信号通路发挥治疗作用.关键成分与核心靶点均有较好的结合能力.q-PCR实验表明PFE可抑制HepG2细胞中MAPK、PIK3CA、AKT1 mRNA表达,促进STAT3的mRNA表达.结论:石榴花可改善HepG2细胞LD,代谢组学和网络药理学发现其作用机制可能与调节甘油磷脂代谢、MAPK、STAT3基因表达及PI3K-AKT等信号通路有关.

植物-传粉者相互关系中植物形成多种多样的视觉(花色)和嗅觉(花气味)信号来影响传粉者的访花过程,促进传粉成功.石榴(Punica granatum)花瓣红色而雄蕊黄色,这种花内不同结构的颜色差异对于石榴吸引传粉者可能有不同的作用.本文比较了石榴花各部位发出的视觉信号(颜色、大小)和嗅觉信号(气味及含量)、花蜜体积、不同处理下的昆虫访花频率及坐果率,以探讨石榴花各部位颜色在传粉过程中的作用.结果发现:新疆喀什地区石榴主要传粉者为意大利蜜蜂(Apis melifera)和食蚜蝇(Syrphidae sp.),雄蕊黄色及其分泌挥发性化合物种类和相对含量是吸引传粉者昆虫的主要因素.去除花瓣处理组与其他3种处理组(对照、去雄蕊、去雄蕊去花瓣)比较,意大利蜜蜂的访花频率(P＜0.05)及停留时间(P＜0.05)均显著提高,石榴坐果率(82.33％±4.45％)也显著提高.上述结果表明,石榴黄颜色的雄蕊可能是吸引传粉者的主要结构,而红色的花瓣对其传粉成功可能有负面影响;植物花内不同结构颜色差异可能有助于在变化的环境下吸引不同的传粉者,促进繁殖成功.

中药对中枢神经系统(CNS)疾病的作用和机制是近年来研究的热点.石榴科植物石榴 Punica granatum L.对CNS疾病的作用受到广泛关注,石榴籽、石榴皮、石榴花、石榴汁等不同药用部位均被发现可用于治疗CNS疾病.因此,对石榴不同药用部位成分进行比较,并总结各个药用部位对不同CNS疾病(阿尔茨海默病、帕金森病、神经胶质瘤、创伤性脑损伤等)的作用,为进一步研究石榴治疗CNS疾病的物质基础及作用机制、发挥其药用价值提供参考.

目的:对石榴科石榴属植物石榴的干燥花瓣进行化学成分研究.方法:石榴花用60％乙醇提取,浓缩,依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,对乙酸乙酯部位浸膏,通过硅胶柱、凝胶柱、半制备柱进行分离纯化,结合波谱数据和文献数据进行结构鉴定.结果:从石榴花乙酸乙酯部位浸膏中分离得到12个化合物,分别鉴定为没食子酸(1),没食子酸乙酯(2),木犀草素(3),8-甲雷杜辛(4),7-羟基4',6,-二甲氧基异黄酮(5),刺芒柄花素(6),三粒小麦黄酮(7),蒲公英萜酮(8),齐墩果酸(9),乌苏酸(10),D-半乳糖醇(11),胡萝卜苷(12).结论:其中化合物4～8,11为首次从石榴花(即维吾尔族药古丽娜)中分离得到,5,6,8是首次从该属植物中分离得到.

该研究以‘红玉石籽’(Punica granatum cv.Hongyushizi)石榴为试验材料,采用RT-PCR和RACE技术,从石榴花中克隆得到赤霉素合成关键酶——内根贝壳杉烯氧化酶(KO)基因,命名为PgKO(GenBank登录号为MG208017).PgKO全长cDNA为1 729 bp,包含1 542 bp开放阅读框(ORF),编码513个氨基酸,相对分子量为141.16 kD,理论等电点为4.9.多重序列对比显示,PgKO与苹果MdKO、白梨PcKO、葡萄VvKO的相似性分别为61.28％、64.56％和73％,并且具有CYP450结构域(脯氨酸富含域、氧还原位点和血红素结合域).系统进化树分析表明,PgKO与其他物种的起源相同,并与桉树EgKO的亲缘关系最近.荧光定量PCR发现,在石榴蕾期和盛花期,PgKO基因的表达量均为筒状花高于钟状花,且PgKO基因在两种花型的子房、花药、花萼中均有表达,但筒状花中子房的表达量最高,花萼的表达量最低;钟状花中花药的表达量最高,子房的表达量最低.

目的 测定新疆不同产地石榴花中总鞣质、没食子酸和鞣花酸的含量.方法 采用紫外-可见分光光度法测定总鞣质的含量,HPLC法测定没食子酸和鞣花酸的含量.结果 不同产地石榴花中总鞣质(38.44～113.98 mg·g-1)、没食子酸(2.39～3.81 mg· g-1)和鞣花酸(2.37～5.34 mg·g-1)含量差别均较大,和田皮山县石榴花中3种成分含量相对较高.结论 该方法准确、专属性强,可用于石榴花药材的质量控制.

目的 研究石榴Punica granatum L.花的化学成分.方法 石榴花60％乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS、半制备液相、重结晶等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果 从中分离得到12个化合物,分别鉴定为β-1,4,6-三-O-没食子酰基葡萄糖(1)、butylbrevifolin carboxylate(2)、短叶苏木酚酸甲酯(3)、短叶苏木酚(4)、β-1,6-二-O-没食子酰基葡萄糖(5)、鞣花酸(6)、鹰嘴豆芽素 A(7)、retusin-8-methylether(8)、蒲公英赛醇(9)、谷甾醇(10)、β-谷甾醇棕榈酸酯(11)、crispin A(12).结论 化合物1～3、7～12为首次从石榴属植物中分离得到,化合物1～4、7～12为首次从该植物中分离得到.

目的 研究石榴花不同萃取部位提取物改善胰岛素抵抗的作用.方法 高脂饮食结合链脲佐菌素(35 mg·kg-1)建立大鼠2型糖尿病模型,分别灌胃二甲双胍、石榴花不同萃取部位提取物4周,测定血清胰岛素含量及其他生化指标;测定石榴花各萃取部位提取物对胰岛素抵抗的3 T3-L 1脂肪细胞葡萄糖摄取量及相关蛋白表达的影响.结果 给药4周后,2型糖尿病大鼠空腹血糖、血清胰岛素、血脂水平、机体氧化损伤程度和胰岛素抵抗指数降低,胰岛素敏感指数提高;石榴花各萃取部位能不同程度地提高胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖摄取量,提高p-Akt、PI3K、Glut4蛋白表达,水部位提取物提高PPARγ蛋白的表达.结论 石榴花各萃取部位能改善2型糖尿病大鼠和胰岛素抵抗模型的3T3-L1脂肪细胞的胰岛素抵抗,其机制为活化PI3K/Akt信号通路,水部位提取物还可通过激活PPARγ受体提高胰岛素敏感性.

为了研究石榴花中抗糖尿病活性成分,采用MCI、反向ODS、Sephadex LH-20凝胶、HPLC等色谱技术从石榴花乙酸乙酯相中分离得到了 8个可水解单宁类化合物,经多种波谱数据分析和文献比对,分别鉴定为1-O-galloyl-6-O-feruloyl-β-D-glucose(1)、1,2,3,4,6-penta-O-gally-β-D-glucopyranose(2)、punicafolin(3)、柯里拉京(4)、tellimagrandin Ⅰ(5)、1,2-di-O-galloyl-4,6-O-(S)-HHDP-β-D-glucose(6)、heterophylliin A(7)、eugeniin(8).其中,化合物 1 为新化合物,化合物 5～8 为首次从石榴中分离得到.并对这8个化合物进行了抑制α-葡萄糖苷酶活性与抑制DPP-Ⅳ酶活性测定.结果显示化合物2、3、5～8对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用显著,化合物1和4对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制活性.化合物5、7、8对DPP-Ⅳ酶具有一定的抑制活性.同时对化合物5进行了酶抑制类型的确定.

探究石榴SPL家族基因PgSPL2(XP_031375027.1)在石榴花发育中的作用,为进一步研究石榴花发育的机制奠定基础.以'突尼斯'软籽石榴为试材,采用同源克隆技术克隆SPL家族基因PgSPL2,分析该基因的理化性质,以及在石榴不同组织中的表达差异,利用RT-qPCR分析生长调节剂处理时该基因的时空表达特性,转化拟南芥,验证该基因在花发育中的作用.结果表明,该基因包含一个长为591 bp开放阅读框,编码196个氨基酸,多重序列比对发现,该基因含有一个保守的SBP结构域和核定位信号,属于SBP转录因子基因家族;系统进化树分析表明,PgSPL2与拟南芥AtSPL3、AtSPL4和AtSPL5聚为一簇.RT-qPCR结果表明,PgSPL2在果实和花蕾中的表达量相对较高,且生长调节剂喷施处理后,该基因在完全花中表达显著下调,同时,石榴完全花比率同步显著提高,初花、盛花期延迟.过量表达PgSPL2拟南芥出现早花现象,花序下游调控基因表达量显著提高.PgSPL2在石榴花发育中起调控开花时间的功能.