[目的]探究谷子CPP基因家族成员特征及在外源硒处理下的响应模式,为谷子富硒高叶酸新品种选育提供遗传材料.[方法]借助生物信息学工具鉴定谷子CPP家族成员,用qRT-PCR技术对CPP基因在不同组织及外源硒处理下的表达水平进行检测.[结果](1)谷子基因组中包含9个CPP基因,定位于6条染色体上,分别命名为SiCPP1-SiCPP9,所有成员均定位在细胞核,蛋白质二级结构中无规则卷曲占比最重.(2)谷子CPP蛋白可分为4个亚家族,相同亚家族之间保守基序和结构域的数目及分布相似.(3)启动子分析发现谷子CPP家族中存在大量光、生长发育、激素及胁迫响应元件.(4)谷子CPP家族成员在根、茎、叶和穗中差异表达,SiCPP5、SiCPP6、SiCPP7和SiCPP8对外源硒响应最强烈.[结论]谷子CPP家族成员具有组织表达特异性,且对外源硒存在不同程度响应.

目的:旨在结合转录组测序的结果，聚焦糖尿病视网膜病变中的氧化应激水平和炎症水平，探讨硒结合蛋白1(selenium binding protein 1，SELENBP1)在糖尿病视网膜病变中的作用。方法:对12周龄的db/m和db/db小鼠的视网膜组织进行转录组测序分析筛选差异基因。实验分为两组：db/m小鼠、db/db小鼠，对视网膜组织切片进行活性氧荧光染色，应用蛋白免疫印迹(Western-blot)检测小鼠视网膜组织中的氧化应激反应相关指标还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)2、NOX4、超氧化物歧化酶2(SOD2)和炎性反应相关指标核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β的变化趋势；用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western-blot和免疫组化(IHC)分析组织中SELENBP1的水平。在体外，应用高糖干预人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)，实验分为两组：正常糖组(NG组)、高糖干预组(HG组)检测活性氧水平及氧化应激和炎性因子的表达；在HRMEC细胞中转染SELENBP1质粒和SELENBP1小干扰RNA，分为正常糖对照组(NG＋Vector)、SELENBP1质粒组(NG＋SBP1)、高糖对照组(HG＋si-NC)、SELENBP1小干扰RNA组(HG＋si-SBP1)，分析活性氧水平及氧化应激和炎性因子的表达水平。结果:与db/m小鼠相比，db/db小鼠视网膜组织中活性氧含量升高、氧化应激相关因子表达增加、抗氧化因子表达下降、炎性因子表达增加，且SELENBP1的mRNA和蛋白水平都明显升高。体外实验表明，高糖干预HRMEC细胞后，细胞中活性氧水平、氧化应激水平和炎症水平明显升高，SELENBP1的mRNA和蛋白表达均明显升高；在HRMEC细胞中过表达SELENBP1后氧化应激水平和炎症水平明显升高；在HRMEC细胞中敲低SELENBP1后氧化应激水平和炎症水平明显下降。结论:SELENBP1通过促进视网膜的氧化应激水平和炎症水平加重了糖尿病视网膜病变，抑制该基因的表达可能会成为减轻糖尿病视网膜病变的有效治疗靶点。

目的:分析大骨节病（KBD）患者沉默信息调节因子2相关酶类1（SIRT1）的表达及其与软骨细胞凋亡的关系。方法:从青海省KBD病区贵德县选取20例KBD患者作为KBD组，同时在病区选取年龄和性别匹配的40例健康受试者作为对照组。采集研究对象的空腹肘静脉血，采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）检测外周血SIRT1及硒蛋白基因[谷胱甘肽过氧化酶（GPX）2、GPX3、硫氧还蛋白还原酶（TXNRD）1、TXNRD3、碘甲腺原氨酸脱碘酶Ⅰ（DIO1）、硒磷酸合成酶2（SPS2）]mRNA水平；并采用曲线拟合法进行KBD患者外周血SIRT1与硒蛋白基因表达关联分析。同时，体外培养人正常软骨细胞，分为对照组（未经任何处理）、单纯白藜芦醇（RES）组（验证RES对SIRT1的激活作用）、叔丁基过氧化氢（tBHP）损伤组（软骨细胞氧化损伤模型）和RES保护组（RES预保护后进行tBHP损伤），采用real-time PCR检测各组细胞SIRT1，硒蛋白基因及凋亡相关基因[B淋巴细胞瘤-2基因（BCL2）、BCL2相关X蛋白（BAX）、核转录因子κB（NF-κB）p65、肿瘤抑制基因P53]mRNA水平。结果:人群研究中，KBD组外周血SIRT1 mRNA水平（1.12 ± 0.38）低于对照组（1.87 ± 0.97），差异有统计学意义（ t = 3.31， P = 0.002）。经曲线拟合分析，KBD组外周血GPX3、TXNRD1和TXNRD3 mRNA水平随SIRT1 mRNA水平的升高均有所升高（ R2 = 0.48、0.66、0.95，均 P < 0.001）；DIO1 mRNA水平随SIRT1 mRNA水平的升高呈现先下降后上升的趋势（ R2 = 0.51， P = 0.024）；GPX2、SPS2 mRNA水平随SIRT1 mRNA水平的升高均未见显著变化趋势（ R2 = 0.16、0.12， P = 0.064、0.114）。细胞实验中，与对照组（1.00 ± 0.10）比较，单纯RES组SIRT1 mRNA水平（1.79 ± 0.07）较高（ P < 0.05）。与tBHP损伤组比较，RES保护组硒蛋白基因GPX3、TXNRD1、TXNRD3、DIO1 mRNA水平均较高（均 P < 0.05）；凋亡相关基因BAX、P53 mRNA水平及BAX/BCL2比值均较低，BCL2、NF-κB p65 mRNA水平均较高（均 P < 0.05）。 结论:KBD患者SIRT1低表达；RES激活SIRT1后可能通过上调硒蛋白基因表达来增强软骨细胞抗氧化能力，从而抑制软骨细胞凋亡。

目的:探索紫草素(SKN)抑制甲状腺未分化癌(ATC)细胞生长的作用及分子机制。方法:以流式细胞仪检测SKN对ATC细胞系CAL-62细胞铁死亡的影响；蛋白质印记法检测NF-κB、铁死亡相关基因谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和硒蛋白硫氧还蛋白还原酶(TXNRD1)、糖代谢相关基因丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)和葡萄糖转运蛋白(GLUT1)的表达水平变化；实时荧光定量PCR检测GPX4、PKM2和GLUT1的表达水平变化；活性氧(ROS)荧光探针检测细胞内ROS阳性率变化；葡萄糖和乳酸检测试剂盒检测糖代谢原料葡萄糖(GLU)及产物乳酸(LD)水平；建立BALB/c裸鼠皮下肿瘤模型，分析SKN对ATC在体内的抑制作用。结果:与对照组相比，SKN处理后的CAL-62细胞内：NF-κB、GPX4、TXNRD1、GLUT1、PKM2蛋白表达水平下降( P＝0.004, P＝0.012, P＝0.043, P＝0.001, P＝0.018)；GPX4、GLUT1、PKM2的mRNA表达下降( P<0.001, P＝0.029, P<0.001)；ROS产生增多( P＝0.041)；铁死亡抑制剂Liproxstain-1(L-1)处理后细胞内一定比例死亡被逆转，L-1处理后细胞死亡比例无统计学意义，细胞内发生铁死亡( P<0.001)；GLU摄取量及LD生成量减少( P<0.001)；SKN在体抑制ATC肿瘤生长( P＝0.016)。 结论:SKN促进ATC细胞内铁死亡，抑制糖酵解作用及葡萄糖摄取，抑制ATC细胞生长。

目的:观察低硒条件下T-2毒素对大鼠关节软骨及骺板软骨肝细胞生长因子（HGF）、HGF受体（C-Met）表达的影响。方法:选择24只健康雄性SD大鼠，体质量为60~80 g，按体质量采用随机数字表法分为常规饲料组（硒含量为101.5 μg/kg）和低硒饲料组（硒含量为1.1 μg/kg），每组12只。喂养30 d后，将常规饲料组分为常规组和T-2毒素组（100 μg·kg -1·d -1），低硒饲料组分为低硒组和低硒+T-2毒素组（100 μg·kg -1·d -1），每组6只。继续喂养30 d后处死大鼠，取膝关节软骨组织，采用HE染色光镜下观察膝关节软骨及骺板软骨形态学改变；免疫组织化学法检测膝关节软骨及骺板软骨HGF和C-Met表达情况，计算HGF和C-Met阳性表达率。 结果:光镜下，低硒+T-2毒素组关节软骨及骺板软骨细胞排列稀疏，深层可见坏死无结构区，区域内软骨细胞细胞外基质降解而淡染，附近可见增生的肉芽组织。低硒、T-2毒素、低硒+T-2毒素组大鼠关节软骨及骺板软骨HGF阳性表达率[（21.97 ± 6.90）%、（49.41 ± 8.24）%、（76.39 ± 5.88）%，（23.36 ± 12.49）%、（58.43 ± 14.48）%、（66.59 ± 10.83）%]高于常规组[（9.13 ± 6.01）%、（11.14 ± 4.67）%， P均< 0.05]。低硒、T-2毒素、低硒+T-2毒素组关节软骨及骺板软骨C-Met阳性表达率[（25.34 ± 7.53）%、（58.21 ± 12.54）%、（81.46 ± 7.89）%，（35.21 ± 4.71）%、（40.84 ± 2.03）%、（49.41 ± 6.29）%]高于常规组[（11.21 ± 5.11）%、（12.12 ± 4.71）%， P均< 0.05]。 结论:低硒条件下T-2毒素对大鼠关节软骨及骺板软骨HGF、C-Met表达有影响。

目的:探讨硒对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的AC16心肌细胞炎性损伤的影响。方法:将体外培养的AC16心肌细胞分为对照组、硒预处理组（100 μg/L亚硒酸钠预处理4 h）、50 μg/L TNF-α组、硒预处理+ 50 μg/L TNF-α组、100 μg/L TNF-α组、硒预处理+ 100 μg/L TNF-α组。各组分别培养24 h后，收集细胞培养液和细胞进行检测。Griess法检测细胞培养液一氧化氮（NO）含量；荧光倒置显微镜观察细胞Hoechst 33342核染色，分析核固缩比例；实时荧光定量PCR检测B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（Bax）及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达水平，蛋白质印迹法检测核因子-kappa B（NF-κB）p65、NF-κB抑制蛋白-α（IκB-α）蛋白表达水平。结果:对照组、硒预处理组、50 μg/L TNF-α组、硒预处理+ 50 μg/L TNF-α组、100 μg/L TNF-α组和硒预处理+ 100 μg/L TNF-α组细胞培养液NO含量分别为（10.58 ± 2.32）、（9.07 ± 0.73）、（15.53 ± 3.97）、（12.05 ± 1.11）、（30.65 ± 4.16）、（19.02 ± 3.72）μmol/L。硒、TNF-α对细胞培养液NO含量均存在主效应（ F = 37.71、99.07，均 P < 0.001），且二者间存在交互效应（ F = 11.80， P < 0.001）。硒、TNF-α对核固缩比例，Bcl-2、Bax mRNA表达水平均存在主效应（ F = 56.37、462.81，18.04、32.85，18.38、170.77，均 P < 0.05），且硒、TNF-α对核固缩比例，Bax mRNA表达水平均存在交互效应（ F = 21.48、19.96，均 P < 0.001）。硒、TNF-α对iNOS mRNA表达水平均存在主效应（ F = 129.98、1 051.76，均 P < 0.001），且二者间存在交互效应（ F = 53.28， P < 0.001）。硒、TNF-α对NF-κB p65、IκB-α蛋白表达水平均存在主效应（ F = 73.65、145.49，710.20、105.66，均 P < 0.001），且二者间均存在交互效应（ F = 26.73、197.59，均 P < 0.001）。 结论:硒可能通过NF-κB信号系统抑制iNOS表达，保护心肌细胞免受TNF-α诱导的炎性损伤。

目的:从基因和蛋白水平探讨硒蛋白P（selenoprotein P，Sepp1）与布鲁菌感染的关联性。方法:采用病例-对照研究方法，选择2019年6 - 9月在包头市九原区和白云鄂博矿区疾病预防控制中心就诊的32例慢性期布鲁菌病（简称布病）患者作为布病组，同时在当地选取30例与布病组有相同流行病学环境的健康人群作为对照组，两组人群均为汉族。采用PCR扩增阻碍突变系统（ARMS-PCR）检测两组人群血液Sepp1基因rs7579位点单核苷酸多态性（SNP），酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血浆Sepp1蛋白含量。结果:32例布病组患者，女性6例、男性26例，年龄为（50.312±5.035）岁；30例对照组人群，女性4例、男性26例，年龄为（49.994±5.098）岁。两组性别比例、年龄比较，差异均无统计学意义（χ 2=0.336， t=1.744， P均> 0.05）。布病组和对照组Sepp1基因rs7579位点G、A等位基因和GG、GA、AA基因型总的频率分布比较，差异均无统计学意义（χ 2 = 0.263、0.942， P均> 0.05）。分层分析，女性布病组基因型频率（GG：0/6，GA：2/6，AA：4/6）与对照组（GG：4/4，GA：0/4，AA：0/4）比较，差异有统计学意义（ P < 0.05）。布病组Sepp1蛋白水平低于对照组（13.71±0.32比19.26±0.69， t=20.316， P < 0.05），低Sepp1蛋白水平是布病的危险因素（ OR = 1.512，95% CI：1.290 ~ 1.687）。 结论:布鲁菌感染与Sepp1基因rs7579位点SNP有关联，G等位基因可能是女性保护因子；布病还可能与低Sepp1含量有关。

我们报道国内首例由硒半胱氨酸插入序列结合蛋白2(SECISBP2)基因复合杂合变异致甲状腺激素代谢缺陷男童的病例并复习文献，以提高临床医生对甲状腺激素代谢缺陷的认识。临床上对生长迟缓、运动发育落后的患儿，如甲状腺功能检测示TSH正常或轻度升高、T 4升高而T 3下降，应考虑甲状腺激素代谢缺陷。

目的:探讨硒抑制长链非编码RNA HOXB cluster antisense RNA1(HOXB-AS1)表达调控胃癌增殖的作用及其机制。方法:对人胃癌HGC-27、SNU-1，KATO Ⅲ细胞和人胃黏膜上皮细胞使用实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平；根据亚硒酸钠添加的浓度将高表达HOXB-AS1基因的细胞分为空白组、5 μmol/L组、10 μmol/L组、15 μmol/L组、20 μmol/L组、25 μmol/L组、30 μmol/L组，分别培养24、48、72 h后采用细胞计数试剂(CCK-8)检测各组细胞活力，筛选亚硒酸钠的最佳作用浓度；用30 μmol/L亚硒酸钠干预人胃癌HGC-27细胞，采用RT-qPCR检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平，采用CCK-8检测细胞活力，采用流式细胞术检测细胞凋亡比例变化，运用蛋白质印迹法(Western blot)法检测蛋白激酶B(Akt)及雷帕霉素的哺乳动物靶标蛋白(mTOR)的表达水平。组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:RT-PCR检测结果表明，与其他细胞株比较，人胃癌HGC-27细胞HOXB-AS1基因的表达水平最高(5.37±0.14， F＝386.913， P<0.05)；CCK-8结果显示30 μmol/L亚硒酸钠组的平均细胞抑制率都显著高于其他5组( F24 h＝178.105， F48 h＝1 093.759， F72 h＝473.833， P<0.05)；RT-PCR检测结果表明，亚硒酸钠干预后的HGC-27人胃癌细胞的HOXB-AS1表达水平(0.11±0.01)显著低于对照组( t＝43.895， P<0.05)，而细胞凋亡率[(36.36±0.46)%]则显著高于对照组( t＝－26.737， P<0.05)；Western blot结果显示亚硒酸钠组的Akt(1.02±0.00)、磷酸化Akt(p-Akt，0.32±0.02)、mTOR(0.79±0.00)和磷酸化mTOR(p-mTOR，0.49±0.02)的相对表达量都显著低于对照组( tAkt＝27.951， tp-Akt＝47.666， tmTOR＝37.898， tp-mTOR＝25.307， P<0.05)。 结论:硒能够通过抑制人胃癌细胞的lncRNA HOXB-AS1表达来影响Akt/mTOR通路，从而促进人胃癌细胞的凋亡来抑制胃癌的增殖。

目的 探讨虫草多糖功能化纳米硒(Cs4-SeNPs)对脂多糖(LPS)诱导BV2小胶质细胞炎症反应的作用及其可能机制.方法 以不同浓度(0.01、0.10、1.00 μmol/L)Cs4-SeNPs作用LPS诱导的BV2小胶质细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测BV2小胶质细胞活力,免疫印迹技术检测BV2小胶质细胞硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达,荧光定量PCR技术检测不同时间(4、8、12 h)BV2小胶质细胞促炎因子环氧化酶-2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达.结果 0.01、0.10、1.00 μmol/L的Cs4-SeNPs对BV2细胞活力无明显影响.与对照组相比,LPS组GPX4蛋白表达降低(F=25.47,q=6.43,P＜0.01);0.01、0.10和1.00 μmol/L的 Cs4-SeNPs 处理组 GPX4 蛋白表达较 LPS 组明显升高(q=5.72～14.07,P＜0.01),且 1.00 μmol/L Cs4-SeNPs作用效果最好(q=6.04～8.35,P＜0.01).LPS组COX-2与iNOS mRNA表达较对照组显著上调(F=25.00、37.34,q=12.18、12.06,P＜0.001).1.00 μmol/L Cs4-SeNPs 预处理 12 h 可显著抑制 COX-2 基因表达(q=6.10,P＜0.05);预处理 8 和 12 h 可显著抑制 iNOS mRNA 表达(q=4.71、6.97,P＜0.05).结论 Cs4-SeNPs 对 LPS 诱导的BV2小胶质细胞炎症反应具有抑制作用,其机制可能与硒蛋白GPX4的调控有关.