目的 探讨桂枝茯苓丸联合五子衍宗丸治疗精子顶体酶活性低下的临床效果.方法 将2021年7月—2023年2月于东莞市中医院男科就诊的80例精子顶体酶活性低下患者,按照就诊顺序随机分为对照组(40例)和观察组(40例).对照组给予左卡尼汀口服液、维生素E软胶囊治疗,观察组给予桂枝茯苓丸联合五子衍宗丸治疗,两组患者均治疗3个月.分别于治疗前后对两组患者精子浓度、前向运动精子百分率,以及顶体酶活性进行检测,根据精液的检测结果将观察组患者分为少精子症组(3例)、弱精子症组(20例)、正常组(17例).对观察组和对照组患者临床疗效及中医证候主症、次症积分进行对比,将观察组和对照组患者治疗前后精液检测参数、顶体酶活性进行对比,将少精子症组、弱精子症组、正常组治疗前后精液检测参数、顶体酶活性进行对比.结果 治疗后观察组临床总有效率为85.00%,高于对照组的65.00%(P＜0.05);治疗后对照组和观察组患者中医证候主症、次症积分均下降,且观察组低于对照组(P＜0.05);治疗前后两组患者精子浓度比较差异无统计学意义(P＞0.05),治疗后观察组与对照组患者前向运动精子百分率与精子顶体酶活性定量均高于治疗前,且观察组高于对照组(均P＜0.05);治疗后3组患者精子顶体酶活性定量、正常精子形态、精子活率均高于治疗前(均P＜0.05),正常组患者前向运动精子百分率治疗前后比较差异无统计学意义(P＞0.05),而少精子症组治疗后精子浓度高于治疗前(P＜0.05),弱精子症组治疗后前向运动精子百分率高于治疗前(P＜0.05),治疗后弱精子症组患者精子顶体酶活性定量高于少精子症组、正常组(均P＜0.05).结论 桂枝茯苓丸联合五子衍宗丸应用于精子顶体酶活性低下患者的治疗中,可有效改善精子活力、形态,有助于精子顶体酶活性的提高,尤其是对于弱精子症患者的效果较为显著.

目的:探讨完全型圆头精子症患者临床表型、精子形态特征及辅助生殖技术治疗的效率。方法:收集2019年11月至2022年5月期间在广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心就诊的完全型圆头精子症患者（完全型圆头精子症组），采集外周血进行遗传学检测，全外显子测序挖掘致病基因，并对精液常规、精子形态及超微结构进行分析；全部患者均接受了卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）联合人工卵子激活（artificial oocyte activation，AOA）治疗。选取同日取卵的行常规ICSI周期患者作为对照组，并采用时差动态监测系统监测发育全程动态参数，分析2组受精及胚胎发育效率、发育动力学参数及临床治疗结局。结果:完全型圆头精子症组4例，对照组9例。完全型圆头精子症患者均合并精子活力低下、精子DNA碎片率升高，精子形态及顶体荧光染色均显示头部呈小圆形伴顶体区缺失；透射电子显微镜下圆头精子头部顶体完全缺失且多见核质松散、空泡化等异常，颈部线粒体鞘数量减少且排列杂乱，鞭毛轴丝“9+2”结构多见异常。4例患者中1例为 DPY19L2基因纯合缺失，1例为 DPY19L2基因新发纯合移码变异。完全型圆头精子症组受精率、双原核受精率、第3天优质胚胎率、第6天囊胚形成率、第6天优质囊胚形成率与对照组差异均无统计学意义（均 P>0.05）；完全型圆头精子症组胚胎发育早期时间参数第二极体释放时间、原核消失时间，2至6-细胞各时期时间显著早于对照组且差异均有统计学意义（均 P<0.05），2组胚胎分裂模式差异无统计学意义（ P>0.05）。4例完全性圆头精子症患者中，2例新鲜胚胎移植各活产健康男婴1名，2例解冻周期移植活产健康男婴、女婴各1名。 结论:完全型圆头精子症患者精子形态学异常表型特征明显，ICSI联合AOA是有效的辅助生殖治疗手段。

精子鞭毛多发形态异常(multiple morphological abnormalities of the sperm flagella，MMAF)是一种遗传缺陷导致的畸形精子症。由于精子鞭毛缺失、短小、卷曲、弯折或不规则，以及不同畸形的组合，患者的精子活力低下，超微结构呈现以鞭毛轴丝中心微管缺失为主要特征的鞭毛组装异常，以及纤维鞘、外周致密纤维、线粒体鞘和动力蛋白臂等结构的缺陷。MMAF男性无法自然生育，需借助辅助生殖技术获得后代。由于MMAF分子病因的异质性，导致患者的辅助生殖结局不尽相同。本文总结了已发现的MMAF候选基因及其功能机制，为MMAF的临床诊疗和研究提供参考。

目的:观察圆头精子症患者的临床特征及生育结局。方法:收集2016年7月至2020年3月山西省妇幼保健院及山西省人民医院生殖中心5例圆头精子症患者和20例正常健康体检男性信息，其中夫妻中女方均健康，收集男方外周血染色体、AZF基因、精液常规及形态、性激素系列的检测结果，并观察患者配偶单精子显微注射辅助生殖技术结局。结果:5例圆头精子症患者不育年限为(4.4±1.8)年，5例患者圆头精子均>95%(其中1例圆头精子率为99%，3例圆头精子率98%，1例圆头精子率96%)。5例圆头精子症患者染色体和AZF基因均正常。圆头精子症患者精子活动率(PR+NP)明显低于健康对照组( P<0.05)，性激素、精子数、精子密度、前向运动率(PR)和精子DNA碎片率与健康对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。5例患者配偶均进行了单精子显微注射辅助生殖技术治疗，2例患者配偶怀孕，其中1例患者配偶流产，1例患者配偶单胎。 结论:圆头精子症患者除了具有圆头精子形态和精子活力低下外，无其他异常表型，辅助生殖技术可能是一种有效的助孕方式。

目的 探讨2例少数民族(P1回族、P2维吾尔族)圆头精子症患者的临床表型、精子特点、遗传学病因以及辅助生殖结局.方法 分析2例少数民族圆头精子症患者的临床资料和各种精液检查参数,观察精子超微结构,并利用全外显子检测技术和qPCR检测分析患者的遗传学病因,采用卵胞质内单精子注射联合卵母细胞激活技术(ICSI+AOA)进行辅助生殖治疗,并观察其助孕结局.结果 2例患者均存在DPY19L2基因109 681 bp纯合缺失,其中P2患者的DPY19L2基因缺失来源于近亲结婚的父母.P1患者精子活力低下,精子DNA碎片率高,精子形态为100％圆头精子,电镜下发现精子顶体缺失,同时存在质膜、线粒体和微管等超微结构缺陷;P2患者精子活力及精子DNA碎片率均正常,精子形态为100％圆头精子,电镜下观察发现精子主要缺陷为头部小而圆伴随顶体缺失,质膜、线粒体和微管等细胞器结构损伤与超微结构缺陷少见.2例患者夫妇均接受ICSI+AOA助孕,ICSI受精率P1患者夫妇为62.5％,P2患者夫妇为75％,均成功获得临床妊娠.结论 DPY19L2 基因异常在不同民族背景的圆头精子症患者中都是主要的致病遗传学原因.圆头精子可同时存在质膜、线粒体和微管等细胞器结构损伤与超微结构缺陷.ICSI+AOA是圆头精子症患者的有效辅助生殖治疗.

目的 明确疏肝补肾毓麟汤畅通自噬流,通过PTEN诱导假定激酶1(PTEN-induced putative kinase 1,PINK1)/帕金蛋白(Parkin)通路,调节线粒体功能,提高精子活力的作用机制.方法 通过随机数字表法将SD大鼠分为正常组、模型组、疏肝补肾毓麟汤高剂量组、疏肝补肾毓麟汤低剂量组、五子衍宗丸对照组.采用腺嘌呤(0.05 g·kg-1)灌胃14 d,复制少弱精症大鼠模型.正常组与模型组给予等容0.9％氯化钠溶液,疏肝补肾毓麟汤高、低剂量组给药32.4 g/(kg·d)、8.1 g/(kg·d),五子衍宗丸对照组给药2.6 g/(kg·d).全自动精子分析仪检测精子活力,透射电镜观察睾丸组织中线粒体自噬的超微结构变化、JC-1线粒体膜电位检测试剂盒与流式细胞仪检测线粒体膜电位水平变化、免疫荧光标记线粒体外膜易位酶20(Translocase of the outer membrane of mitochondrion 20,TOMM20)与微管相关蛋白 1 轻链3Ⅱ(Microtubule-associat-ed protein 1 light chain 3Ⅱ,LC3Ⅱ)的共定位、PCR 与 Western Blot 检测睾丸组织 PINK1、Parkin、选择性自噬接头蛋白 62(Se-lective autophagy adaptor protein 62,P62)、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3Ⅱ/Ⅰ)的表达.结果 与正常组相比,模型组的精子活动力下降(P＜0.05),线粒体膜电位比例下降(P＜0.05),线粒体超微结构出现核周聚集,嵴受损或丢失,除了碎裂外,还有暗基质,以及外膜不规则,并且受损的线粒体与包括线粒体吞噬体在内的线粒体空泡相关,免疫双染中发现LC3Ⅱ的存在量明显增多,LC3Ⅱ与TOMM20的双重标记也增加,自噬相关指标PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62的基因与蛋白表达增加(P＜0.05).与模型组相比,疏肝补肾毓麟汤高剂量组、疏肝补肾毓麟汤低剂量组、对照组的精子活动力升高(P＜0.05),线粒体膜电位比例增加(P＜0.05),超微结构下正常形态的线粒体比例明显增多,且线粒体溶酶体的数量也减少,免疫双染中发现LC3Ⅱ的存在量明显减少,LC3Ⅱ与TOMM20的双重标记减少,自噬相关指标PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62的基因与蛋白表达减少(P＜0.05).与对照组相比,高剂量组的线粒体膜电位比例增加(P＜0.05);疏肝补肾毓麟汤高剂量组、疏肝补肾毓麟汤低剂量组超微结构下正常形态的线粒体比例明显增多,且线粒体溶酶体的数量也减少,免疫双染中发现LC3Ⅱ的存在量明显减少,LC3Ⅱ与TOMM20的双重标记减少,自噬相关指标PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62的基因与蛋白表达减少(P＜0.05).结论 疏肝补肾毓麟汤能改善精子活力低下症模型大鼠的精子活动力,可能是通过提高模型大鼠的线粒体膜电位水平,保护线粒体功能,下调PINK1、Parkin、LC3 Ⅱ/Ⅰ、P62的表达,并畅通自噬流,减轻线粒体的过度自噬来发挥作用.

目的:弱精子症可见于40％的不育男性,其特征是精子活力低下.微小RNA(MicroRNAs,miRNAs)在精子发生中发挥重要作用,但关于精子中miRNAs在弱精子症中的作用知之甚少.本研究试图初探miRNAs在弱精子症的分子机制.方法:收集了重度弱精子症患者和健康男性的精子样本,采用高通量序列技术来识别差异表达的miRNAs,并对差异显著的miRNAs进行生物信息学分析.通过qRT-PCR证实了 2个特异性改变的miRNA及其靶基因表达情况.结果:重度弱精子症患者与正常男性相比,共有146个miRNAs(P＜0.05;|log2 Fold Change|＞1)发生改变,其中表达上调的52个,下调的94个;预测上下调幅度最显著的前10个miRNAs的靶基因,同时在miRDB和TargetScan数据库存在的靶基因共有1407个.富集分析结果显示,miRNAs的靶基因富集于精子细胞的生物过程,还参与精子细胞的氧化代谢、刺激反应、增殖和分化以及凋亡等生物过程.通路分析显示,靶基因可能参与细胞自噬、细胞衰老、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、HIF-1信号通路、mTOR信号通路等.其中,在弱精子症精子中特异性上调的hsa-miR-371a-5p和hsa-miR-2355-5p,预测靶基因分别为自噬效应蛋白Beclinl和线粒体内膜蛋白抑素2(prohibitin2,PHB2),二者直接参与线粒体自噬过程.qRT-PCR结果显示随着精子活力的降低,精子中hsa-miR-371a-5p和hsa-miR-2355-5p的表达量升高.结论:本研究发现弱精子症患者精子中特异性失调的miRNAs及其靶基因,为后续深入研究低活力精子中miRNAs参与调控线粒体自噬功能的机制提供新思路和理论依据.

目的:特殊类型畸精子症是男性不育中罕见病和单基因遗传疾病,本文探讨其卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)的治疗结局.方法:回顾性分析 2011 年 1 月至 2021 年 1 月于江苏省人民医院生殖医学中心实施ICSI治疗的特殊类型畸精子症患者,根据精子形态分为三组(圆头精子症、无头精子症和精子鞭毛多发形态异常),三组患者基因检测均发现致病或可能致病的基因突变.比较三组患者间的临床和实验室数据(年龄、BMI、精子参数、成熟卵子数、受精率、优质胚胎率、临床妊娠率、活产率和自然流产率)差异.结果:三组共34 对患者夫妇,三组患者间年龄,BMI,MII卵子数差别无统计学意义(P＞0.05),圆头精子症的精子浓度和精子活力显著高于其他两组(P＜0.01),圆头精子症组的受精率显著低于其他两组(P＜0.01).三组共 34 个取卵周期,其中 4 个取卵周期未形成可移植胚胎,形成可移植胚胎的30 个取卵周期在第一个胚胎移植周期中获得 22 例临床妊娠,最终活产 20例,自然流产2 例.无头精子症和精子鞭毛多发形态异常两组的临床妊娠率和活产率显著高于圆头精子症组(P＜0.01),三组间自然流产率没有统计学差异(P＞0.05).结论:圆头精子症患者实施人工卵母细胞激活依然有部分患者完全不受精或受精率低下.精子鞭毛多发形态异常和无头精子症患者可以通过ICSI取得相对较好的妊娠结局.

目的:系统评价微波辐射对男性生殖系统和生殖内分泌的影响.方法:计算机检索CNKI、VIP、万方数据库、Pubmed、Speringer、Web of Science数据库,两名研究者根据纳入排除标准独立筛选文献,对7篇有关微波辐射对男性生殖系统影响的病例对照研究进行综合分析,应用Revman5.3进行Meta分析.结果:与对照组比较,微波辐射作业的男性A级精子活力的加权均数差值为-18.97％(95％ CI:-33.46％,-4.47％),差异性显著;B级精子活力的加权均数差值为-9.24％(95％ CI:-14.46％,-4.01％);C级精子活力的加权均数差值为OR=-1.68％ (95％ CI:0.57％,2.80％);D级精子活力的加权均数差值为20.10％ (95％ CI:11.42％,28.77％);辐射组精液密度的加权均数差值为-10.77×109/L(95％ CI:-16.99×109,-4.55×109)精液密度显著降低;孕激素的加权均数差值为0.25pg/mL(95％ CI:0.08,0.41),辐射组孕激素较对照组组显著性升高;而对照组与辐射组之间的精液量、精子存活率、T、FSH、LH、PRL、E2无统计学差异.结论:微波辐射使男性精液质量低下,扰乱生殖内分泌,降低男性生育能力.

目的:研究男性不育症患者谷胱甘肽-S-转移酶(GS T)基因多态性与精子质量、氧化应激、细胞凋亡的相关性.方法:纳入本院首次诊断为男性不育症伴少弱精子症的患者作为不育组并根据GST基因GSTM1及GSTT1亚型缺失的多态性分为GSTM1/T1[+ /+]、GSTM1/T1[+ /-]、GSTM1/T1 [-/+]、GSTM1/T1[-/-],测定精液质量的参数以及精液中氧化应激指标、细胞凋亡指标的含量.结果:GSTM1/T1[+ /-]、GSTM1/T1[-/+]、GSTM1/T1[-/-]患者的精子浓度、精子活力以及精液中 Nme5、PKC、ERK、TA、Bcl-2的含量均显著低于 GSTM1/T1[+ /+]患者,精液中 MDA、AOPP、AIF、Caspase-9、Caspase-3的含量高于 GSTM1/T1[+ /+]患者(P < 0.05);GSTM1/T1 [-/-]患者的精子浓度、精子活力以及精液中 Nme5、PKC、ERK、TA、Bcl-2的含量均显著低于GSTM1/T1[+ /-]、GSTM1/T1[-/+]患者,精液中MDA、AOPP、AIF、Caspase-9、Caspase-3的含量高于GSTM1/T1[+ /-]、GSTM1/T1[-/+]患者(P<0.05).结论:男性不育症患者GST 基因GSTM1及GSTT1亚型的缺失会造成精子质量低下并激活氧化应激及细胞凋亡.