目的:以血液为样品观察不同剂量的乙醇对血液中血红细胞特性的影响。方法:取正常的血液8份，每份1 ml，其中1份为对照组，不做任何处理，另外6份为试验组，分别加入20、40、60、80、100、120 μl的乙醇，然后观察不同浓度乙醇影响下红细胞的电泳率，渗透脆性和荧光光谱图的变化并与对照组未放入乙醇的血红细胞的各项指标相比较。组间数据比较采用单因素方差分析。结果:样本中加入的乙醇量在0～40 μl时，其电泳率逐渐增大，其中加入40 μl乙醇的血液红细胞的电泳率最高(1.192±0.280)明显高于对照组(0.803±0.180)，差异有统计学意义( t＝1.164， P<0.05)。但当其继续增大乙醇剂量时，电泳率逐渐减小，当达到80 μl时低于正常水平。加入乙醇120 μl后红细胞电泳率明显低于正常(0.415±0.300)明显低于对照组(0.803±0.180)，差异有统计学意义( t＝0.418， P<0.05)。样本中加入的乙醇量在40 μl时，其渗透脆性为(0.793±0.270)，高于对照组(0.674±0.540)差异有统计学意义( t＝0.791， P<0.05)。为激发波长为407 nm和532 nm的发射谱，发射谱的峰值出现在491 nm和608 nm处。从发射谱的强度来看，当加入的酒精量为5 μl时，其强度增大；加入酒精量为10 μl强度达到最大；当量达到20 μl时，其强度反而减小，小于没有加酒精的红细胞溶液的光谱强度。 结论:小剂量的乙醇对于红细胞膜的活性有一定的促进作用，而乙醇剂量过大时则使红细胞电泳率、渗透脆性下降，影响红细胞膜的结构，从而影响红细胞的变形性和膜的活性。

遗传性球形红细胞增多症以黄疸、贫血、脾肿大、外周血球形红细胞增多、红细胞渗透脆性增加为主要特征，但缺乏特异性，易误诊、漏诊，尤其新生儿很少有典型的球形红细胞增多、红细胞渗透脆性增加及脾肿大。本文报道1例ANK1基因新发变异导致的新生儿遗传性球形红细胞增多症患儿及其家系其他患者的诊疗过程，加强临床医生对该病的认识。

目的:评价不同电解质溶液用于体外循环心脏手术血液洗涤的效果。方法:选体外循环下心脏手术患者60例，年龄18~80岁，体重50~100 kg，预计术中需要输注库存血4~6 U。采用随机数字表法分为3组( n＝20)：复方电解质注射液组(A组)、碳酸氢钠林格液组(B组)和生理盐水组(C组)，分别采用复方电解质注射液、碳酸氢钠林格液和生理盐水对库存血和回收的自体血进行洗涤。于洗涤前和洗涤后即刻，取库存血和自体血行血气分析，采用比色法检测红细胞渗透脆性，采用ELISA法检测2，3-二磷酸甘油酸(2，3-DPG)浓度。 结果:与洗涤前比较，3组洗涤后库存血Glu、Lac、K +浓度和红细胞渗透脆性降低，Na +浓度升高，自体血Glu和Lac浓度降低，红细胞渗透脆性升高，库存血和自体血2，3-DPG浓度升高( P<0.05)；与C组比较，A组和B组洗涤后库存血和自体血Na +和Cl -浓度降低，K +浓度升高，红细胞渗透脆性降低，2，3-DPG浓度升高( P<0.05)；与A组和C组比较，B组洗涤后库存血和自体血BE升高( P<0.05)。洗涤后B组库存血和自体血可检测到Ca 2+，而A组和C组库存血和自体血无法检测到Ca 2+。 结论:复方电解质注射液和碳酸氢钠林格液用于体外循环心脏手术血液洗涤的效果明显优于生理盐水，其中碳酸氢钠林格液还能改善血液偏酸无钙的内环境。

目的:评价碳酸氢钠林格液用于心脏手术体外循环(CPB)的效果。方法:选取CPB下行心脏瓣膜置换术患者60例，性别不限，年龄55~75岁，采用随机数字表法分为2组( n＝30)：复方电解质注射液组(A组)和碳酸氢钠林格液组(B组)。A组预充晶体液为复方电解质注射液1 500 ml，B组预充晶体液为碳酸氢钠林格液1 500 ml，2组预充胶体液均为琥珀酰明胶1 000 ml。于复温阶段进行零平衡超滤，A组置换液为复方电解质注射液2 000 ml，B组置换液为碳酸氢钠林格液2 000 ml。CPB过程中静脉贮血罐内持续滴注碳酸氢钠溶液，根据血气分析结果纠正酸碱平衡紊乱。分别于CPB转流前、转流30 min、开放升主动脉补充钙剂后5 min、零平衡超滤结束即刻和停机后5 min时，抽取外周静脉血或氧合器内氧和静脉血行血气分析。于零平衡超滤开始前和结束后抽取氧合器内氧和静脉血，检测红细胞渗透脆性和2，3-二磷酸甘油酸浓度。 结果:与A组比较，B组转流30 min和零平衡超滤结束时PaCO 2、Ca 2+和HCO 3-浓度升高( P<0.05)，pH值、BE、Glu、Lac、血清Na +、Cl -和K +浓度、红细胞渗透脆性和2，3-二磷酸甘油酸浓度比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:碳酸氢钠林格液可安全有效地用于心脏手术CPB。

目的:探讨遗传性球型红细胞增多症(HS)的临床特点及相关基因突变。方法:选择2017年1月1日至2019年7月31日，于昆明市儿童医院门诊及住院诊断为HS的10例患儿为研究对象。其中，女性患儿为3例，男性为7例，平均年龄为4.5岁。收集这10例HS患儿一般临床资料，采用高通量测序技术对其进行HS相关基因突变检测。回顾性分析HS患儿的临床特征、相关基因突变及疗效。本研究遵循的程序符合2013年修订版《世界医学协会赫尔辛基宣言》的要求。结果:①本研究10例患儿均以贫血、黄疸、脾大为临床表现。贫血以小细胞性贫血为主，重度贫血为4例，中度贫血为4例，轻度贫血为2例。患儿脾大以轻、中度为主，轻度脾大为4例，中度脾大为6例，无一例为重度脾大。患儿输血次数不一。3例患儿外周血球形红细胞比例增多，其余7例正常。4例红细胞渗透脆性增加，其余6例正常。患儿地中海贫血基因、铁蛋白及红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)水平均正常。②高通量基因测序结果显示，10例患儿中，6例存在ANK1、2例存在SPTA1、1例存在SPTB基因突变，1例存在SPTB基因2～3号外显子疑似重复。其中，ANK1基因c.4585C>T(p.R1529X)、c.3877C>T(p.R1293X)突变在人类基因突变数据库(HGMD)专业版中，已有文献报道与球形红细胞增多症相关。ANK1基因c.1471C>T(p.Q491X)、c.1817delT(p.L606Cfs*31)、c.4390＋5G>T(IVS36dsG-T＋5)、c.4189C>T(p.L1397F)突变，在HGMD专业版中未见报道。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)指南，考虑ANK1基因c.1471C>T(p.Q491X)、c.1817delT(p.L606Cfs*31)突变为新发可疑致病突变。SPTA1基因c.4766G>A(p.W1589X)、c.5432G>A(p.R1811Q)突变，SPTB基因2～3号外显子疑似重复未见文献报道。其中，考虑SPTA1基因c.4766G>A(p.W1589X)突变为新发可疑致病突变。SPTB基因c.4735C>T(p.R1579X)突变已有文献报道。SPTB基因c.797_798del(p.I266Nfs*28)未见文献报道，并且考虑为新发可疑致病突变。③本研究4例接受部分脾动脉栓塞术的患儿中，2例术后未再接受输血治疗；1例术后6个月内，未再接受输血治疗，6个月后每2～3个月接受1次输血治疗，1例失访。其余6例未接受部分脾动脉栓塞术的患儿中，1例每2个月接受输血治疗1次；5例血红蛋白(Hb)值>90 g/L。结论:对于临床特征不典型的患者可以采用高通量测序技术辅助诊断HS。本研究发现4个未见文献报道的ANK1及SPTA、SPTB基因突变。

患者，男，15岁。主因"发现皮肤黄染、尿色深2个月"就诊。查体：全身皮肤及巩膜轻度黄染，无皮疹及出血点，浅表淋巴结无肿大。腹部平坦，肝脾肋缘下未触及。双下肢无水肿。血常规：WBC 5.6×10 9/L、RBC 4.0×10 12/L、HGB 119 g/L、PLT 261×10 9/L，平均红细胞体积（MCV）98.1 fl、平均血红蛋白量32.0 pg、平均血红蛋白浓度（MCHC）326 g/L、网织红细胞（Ret）比例5.2%；骨髓象：增生明显活跃，粒红比为0.98∶1，粒系比例减低，红系比例增高，以中、晚幼红细胞为主，淋巴细胞比例正常，全片巨核细胞78个。血小板易见。外周血涂片红细胞无形态异常。尿常规：尿胆原17 μmol/L。肝炎病毒及自身免疫性肝炎检测均阴性。丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶正常。溶血指标：总胆红素77.6 μmol/L，间接胆红素69.3 μmol/L，直接胆红素8.3 μmol/L；乳酸脱氢酶正常；Coombs试验阴性；Flaer、CD59正常；抗碱血红蛋白、血红蛋白A2、微量血红蛋白电泳、异丙醇、红细胞渗透脆性试验、H包涵体、变性珠蛋白小体、葡萄糖-6-磷酸酶活性均正常；高铁血红蛋白还原试验：58%（参考值>75%）。血浆游离血红蛋白：37.5 mg/L（参考值<40 mg/L）；铜蓝蛋白：正常。腹部超声：肝胆脾胰肾未见明显异常。采用二代测序（NGS）对患者血样进行全外显子基因组测序，检测内容覆盖Gilbert综合征UGT1A1基因，未发现相关致病性位点的变异，检出先证者ATP11C基因存在一处半合子变异：c.1003C>T（p.R335*），Sanger测序验证显示该变异其父母均未携带，为患者新生变异。经查询千人基因组数据库、Exac数据库，该变异在东亚人群中的携带率均为0；GERP++分数为5.63，预测为有害。诊断：X连锁先天性溶血性贫血。

目的:分析儿童遗传性球形红细胞增多症(HS)的临床表型及分子遗传学特点。方法:收集2014年6月至2018年6月郑州大学附属儿童医院HS患儿的临床病例资料，进行回顾性分析。采集20例患儿及其父母外周血样本，应用二代测序技术进行靶向捕获或全外显子组测序，对可疑突变位点应用Sanger测序进行验证。结果:共43例患儿纳入研究(男23例，女20例)，中位发病年龄1岁11个月(1个月～10岁)。面色苍白(27/43例，62.79%)是主要的发病症状，典型临床表现为贫血(36/43例，83.72%)、黄疸(35/43例，81.40%)、脾大(33/43例，76.74%)、肝大(27/43例，62.79%)。外周血及骨髓血涂片球形红细胞比例≥0.1的患儿分别为23例(23/43例，53.49%)、17例(17/43例，39.53%)，红细胞渗透脆性试验阳性20例(20/43例，46.51%)。29例患儿输血前后比较：输血后血红蛋白(Hb)[(88.69±11.22) g/L比(78.24±14.47) g/L]、平均红细胞体积(MCV)[(89.37±7.15) fL比(84.08±7.49) fL]、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)[(29.12±2.70) pg比(27.36±1.95) pg]、平均血红蛋白浓度(MCHC)[(361.79±32.27) g/L比(356.31±31.43) g/L]均升高，总胆红素(TB)水平较输血前下降[(33.27±16.42) μmol/L比(41.58±15.40) μmol/L]，差异均有统计学意义( t＝－3.538、－5.187、－5.412、－7.404、2.527，均 P<0.05)。7例患儿行脾切除术：术后Hb[(116.00±5.54) g/L比(75.71±9.96) g/L]、MCH[(29.87±1.62) pg比(24.61±1.65) pg]、MCHC[(391.14±12.99) g/L比(315.14±51.99) g/L]均升高，差异均有统计学意义( t＝－9.234、－4.330、－4.031，均 P<0.05)。手术组患儿Hb较输血组升高明显，治疗效果更显著( t＝－9.247， P<0.05)。13例患儿在3种基因( ANK1、SPTB及 SPTA1)检出13种致病变异(11种是未报道的新变异)，8例为 ANK1变异，4例为 SPTB变异，1例为 SPTA1变异。13例变异中，除1例遗传自母亲外，余12例为新生变异(de novo)。 结论:儿童HS多以贫血、面色苍白为首发症状，输血可暂时改善贫血、黄疸症状，脾切除是有效的根本治疗手段。13例患儿获得基因诊断，为下一胎遗传咨询提供依据；在 ANK1、SPTB、SPTA1基因中共发现11种新变异，扩展了HS的基因突变谱。

目的:探讨遗传性球形红细胞增多症(HS)患者的临床特点、基因突变检查结果及诊疗方法，并且进行相关文献复习。方法:选择2021年10月24日重庆医科大学附属儿童医院血液肿瘤科收治的1例8岁3个月男性HS合并室间隔缺损患儿为研究对象。采用回顾性分析方法，收集患儿病史、家族史资料，以及实验室及影像学检查结果，对患儿的临床表现、基因突变与诊疗过程进行分析。对患儿的随访截至2022年4月30日。进一步采集患儿及其父母外周血样进行基因测序，对检出的 SLC4A1突变采用SIFT、PolyPhen-2、REVEL等遗传变异有害性预测工具评估蛋白结构功能的保守性。利用Swiss Model在线工具分析预测突变对于蛋白质结构的影响。以"遗传性球形红细胞增多症"" SLC4A1基因""hereditary spherocytosis"" SLC4A1"为中、英文关键词，在中国知网数据库、万方数据知识服务平台及PubMed数据库中检索HS相关文献，并对文献报道的HS患者进行分析和总结。文献检索时间设定为2019年1月1日至2022年4月29日。本研究获得重庆医科大学附属儿童医院伦理委员会审批(批准文号：2021.457)，并与患儿家属签署临床研究知情同意书。 结果:①本例患儿因"面色苍黄加重2个月 +"就诊。患儿面色苍黄，病程中间断出现茶色尿，中度贫血，肝、脾大合并先天性室间隔缺损(膜周融合型)。血常规检查结果示，白细胞计数为7.06×10 9/L，红细胞计数为2.41×10 12/L，血红蛋白(Hb)值为64 g/L，平均红细胞体积(MCV)为94.6 fL，平均血红蛋白浓度(MCHC)值为281 g/L，网织红细胞百分比为11.47%。外周血涂片检查结果示，患儿外周血球形红细胞比例为18.3%。生化全项检查结果示，总胆红素水平为53.1 μmol/L，直接胆红素水平为15.7 μmol/L，间接胆红素水平为37.4 μmol/L，乳酸脱氢酶水平为439 U/L。红细胞渗透脆性增加。基因测序结果示，患儿携带 SLC4A1基因12号外显子c.1387G>A(p.Gly463Ser)罕见杂合错义突变，该突变来源于其父，预测为有害致病基因突变。患儿父亲未表现出贫血、溶血相关症状，仅外周血涂片可见少量球形红细胞。Swiss Model在线工具分析预测结果示，突变型SLC4A1蛋白的三级结构未因氨基酸替换受到影响。②根据患儿临床表现及基因检查结果，本例患儿被诊断为HS。患儿接受红细胞成分血输注及脾切除术，治疗后患儿临床症状基本消失，处于部分缓解状态。截至随访结束，患儿一般情况良好，拟择期行后续心室间隔缺损手术。③根据本研究设定的文献检索策略，共检索出5篇HS文献，报道6例HS患者，加上本研究1例，共纳入7例HS患者。其中，1例患者临床表现为皮肤黄染并远端肾小管酸中毒(dRTA)，无HS家族史， SLC4A1错义突变致病。1例患者伴反复低血钾，外周血细胞形态学检查结果可见大量球形红细胞，有HS家族史， SLC4A1错义突变致病。1例患者伴反复不明原因贫血，有HS家族史， SLC4A1缺失突变致病。2例患者面色苍白、黄疸， SLC4A1新发错义突变致病。1例伴黄疸、胆石症，有HS家族史， SLC4A1错义突变致病。本例患儿面色苍黄，有HS家族史， SLC4A1错义突变致病。 结论:本例HS患儿家系为 SLC4A1基因12号外显子c.1387G>A(p.Gly463Ser)罕见杂合错义突变致病。基因突变检查有助于HS的确诊。

目的 研究高原环境下红细胞生理性增多、红细胞增多症及贫血患者红细胞渗透脆性变化.方法 纳入2020 年 10 月西藏自治区人民医院门诊、住院患者及体检人群共 174 名,按照血红蛋白水平分为 4 组:红细胞增多症组(n=42)、红细胞生理性增多组(n=48)、贫血组(n=29)、健康对照组(n=55),并与同期北京协和医院检验科贫血患者及健康人群各 67 名作为平原对照组,采用经典的红细胞渗透脆性试验方法,比较各组样本的红细胞渗透脆性结果,包括开始溶血的NaCl溶液浓度(STH)和完全溶血的NaCl溶液浓度(CTH),采用SPSS 软件对数据进行统计学分析.结果 高原人群中,健康人群汉族 CTH 与藏族差异有统计学意义(P＜0.05);高原红细胞增多症组(0.52)STH高于高原健康对照组(0.48)(P＜0.001);高原和平原比较,高原贫血组(0.36)、高原健康对照组(0.36)CTH中位数明显高于平原贫血组(0.28)、平原对照组(0.28)(P＜0.001).通过多因素Logistic回归分析显示,高原地区、女性红细胞增多症、贫血为STH升高的危险因素.结论 本研究显示高原地区人群、红细胞增多症患者红细胞渗透脆性增高.本研究为高原地区常见红细胞疾病及输血相关政策研究提供了依据.

目的 观察冰冻解冻去甘油红细胞悬浮于MAP 添加液中对保存效果的影响,探索最佳保存方式.方法 本研究将采集后d3 的 400 mL全血,离心制备成浓缩红细胞,使用ACP 215 全自动血细胞仪,加入 40%复方甘油溶液,置于-65℃超低温冰箱中保存 30 d,解冻去甘油洗涤后,等量分离成两袋,以添加 0.9%氯化钠溶液为对照组;添加MAP为实验组,两组保存于 2～6℃冷藏条件下,分别于 0、1、3、5、7、14d取样检测血液学参数指标、溶血指标、细胞代谢指标,观察两组在 14d保存期内的质量变化情况.结果 研究发现两组红细胞在解冻去甘油后 6 项质控项目包括容量、血红蛋白含量、游离血红蛋白含量、白细胞残留量、甘油残留量、无菌试验的检测值均符合《全血及成分血质量要求》(GB18469-2012);压积、红细胞计数、Hb洗涤后回收率、MCV符合《冰冻红细胞质量评价指标专家共识》检测限值,血小板残留量超过检测限值(≤1%);在 14d 保存期内,两组的RBC、Hct、MCV和血红蛋白含量值无统计学意义;两组游离血红蛋白、溶血率和K+值随保存时间延长而增加,分别于 3、5、7、14 d;3、5、7、14 d;14d组间有统计学意义(P<0.05),两组红细胞渗透脆性于 14d组间有统计学意义(P<0.05);两组ATP、pH值随保存时间延长而下降,分别于 3、5、7d;1、3、5、7、14d组间有统计学意义(P<0.05).结论 悬浮于MAP添加液中的冰冻解冻去甘油红细胞可将血液保存期延长至 7d,本研究为相关标准的制定提供参考依据.