目的:探讨间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征（IC/BPS）模型小鼠的膀胱外周感觉神经元的兴奋性和P2X受体介导的嘌呤能信号传导的变化。方法:雄性C57小鼠50只，2月龄，体质量16~20 g。通过在膀胱壁上注射逆行示踪荧光染料3′-四甲基吲哚羰花青高氯酸盐（DiI），标记腰骶（LS：L 6~S 2）和胸腰（TL：T 13~L 2）背根神经节中的膀胱感觉神经元。两周后，在第1、3和5天腹腔注射环磷酰胺（CYP，80 mg/kg，1次/48 h）建立间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征（IC/BPS）小鼠模型（CYP组， n=25），对照组（ n=25）小鼠腹腔注射等量生理盐水。第6天取小鼠膀胱组织，使用苏木精-伊红（HE）染色法评估膀胱组织病理学改变，髓过氧化物酶（MPO）测试评估组织炎症水平，并使用全细胞膜片钳记录LS和TL背根神经节中的DiI阳性膀胱感觉神经元的兴奋性和三磷酸腺苷（ATP）诱导的P2X受体电流。 结果:与对照组相比，80 mg/kg CYP未诱发显著组织学改变或影响MPO水平，但提高了LS和TL膀胱感觉神经元的兴奋性：CYP组和对照组LS神经元基强度分别为（119±9）、（144±8）pA，TL神经元基强度分别为（123±10）、（162±17）pA；相比于对照组，CYP组LS和TL神经元基强度均显著降低，差异均有统计学意义（ t=2.025、2.047，均 P<0.05）。给予P2X受体激动剂ATP灌流后，CYP组的LS膀胱感觉神经元的P2X受体电流类型发生了显著变化：CYP组LS神经元的P2X2受体介导持续性电流比例为39.3%，显著高于对照组的9.5%；P2X2/3受体介导的慢脱敏电流比例为60.7%，显著低于对照组的90.5%，差异有统计学意义（ P=0.025），提示CYP组小鼠LS神经元中的P2X2受体功能上调；TL膀胱感觉神经元的P2X受体电流类型（主要为P2X2/3受体介导的慢脱敏电流和P2X3受体介导的快脱敏电流）占比无明显变化。 结论:IC/BPS模型小鼠的膀胱神经元兴奋性升高，并且LS神经元的P2X受体电流成分出现变化，提示膀胱神经元的兴奋性升高和P2X受体的功能上调早于器质性病理改变，感觉神经元嘌呤能信号传导变化可能是IC/BPS的重要病理机制。

目的:确定儿童体外循环(cardiopulmonarybypass，CPB)期间严重溶血的潜在危险因素，探讨超生理水平氧与CPB持续时间是否和溶血相关。设计:前瞻性观察性研究。场所:一家大学附属儿童医院的CICU。对象:因心脏手术CPB的>1月且<18岁患儿。干预措施:无。测量方法与主要结果:采集100例患儿CPB开始/结束时，以及再灌注后2/24 h的血浆样本，以评估游离血浆血红蛋白(cell-freeplasmahemoglobin，PHB)水平。CPB前及CPB期间每30 min间隔采集动脉血气。从电子病历中收集人口统计和实验室数据。PHB水平在体外循环结束时达到峰值，结合珠蛋白水平在所有时间点持续下降。重度溶血(ΔPHB>50 mg/dL)患儿44例。多因素分析显示小年龄(OR/SD 0.45，95% CI 0.25~0.81)和平均PaO 2*CPB时间值较高(31.11，1.46~664.64)是严重溶血的危险因素。严重溶血与住院/住ICU时间较长，以及发生急性肾损伤有关。 结论:本研究发现小年龄，氧气/CPB共同暴露是溶血危险因素。通过CPB输送氧气是一个容易改变的危险因素，其产生改变红细胞膜的活性氧物质的作用机制尚需更大规模的前瞻性研究。

目的:探讨小鼠椎板切除术后切口血液淤积红细胞破裂释放白细胞介素33（interleukin-33，IL-33）诱导硬膜外瘢痕组织增生的机制。方法:取6~8周龄野生型小鼠12只，制作T 12~L 2椎板切除模型，随机分为假手术组、生理盐水干预手术组、单纯红细胞干预手术组、全血干预手术组。术后第30天取切口区域标本行HE染色和Masson染色，观察是否出现血液淤积；并通过免疫印迹技术检测四组术后第30天的瘢痕组织中纤连蛋白水平，采用免疫组化染色方法观察术后硬膜外瘢痕增生程度。取野生型小鼠以及IL-33敲除小鼠红细胞，按生理盐水孵育或红细胞裂解液裂解处理方法分为野生型小鼠红细胞生理盐水对照组、IL-33敲除小鼠红细胞生理盐水对照组、野生型小鼠红细胞裂解组、IL-33敲除小鼠红细胞裂解组，通过免疫印迹技术检测四组红细胞中的IL-33水平。抽取小鼠血液后进行梯度离心提取较为纯净的红细胞，按红细胞小鼠来源类型及干预措施分为野生型小鼠红细胞空白对照组、野生型小鼠相对对照组（仅加二抗，检验是否有非特异性结合）、野生型小鼠红细胞组、IL-33敲除小鼠红细胞组（检验一抗是否有抗原特异性），行免疫荧光染色以及流式细胞仪检测IL-33水平。 结果:椎板切除术后HE染色和Masson染色示手术组小鼠切口区域局部有血液淤积，全血或红细胞干预小鼠术后切口区域的硬膜外瘢痕增生程度更高，尤其是全血干预组；野生型红细胞生理盐水对照组、IL-33敲除红细胞生理盐水对照组及IL-33敲除红细胞裂解组几乎检测不到IL-33的表达，而野生型红细胞裂解组可检测到明显的IL-33表达；免疫荧光染色示野生型小鼠红细胞膜内及膜上均有IL-33表达，而其他三组几乎检测不到IL-33或极少量的非特异性表达，四组IL-33免疫荧光强度分别为0.62±0.41，60.17±4.39，16.78±7.43和0.61±0.03（ F=281.90， P<0.001），其中野生型小鼠红细胞组IL33表达量最高（ P<0.05）；流式细胞仪检测结果，除野生型小鼠红细胞组检测出微量IL-33外，其他三组的IL-33表达基本为0。四组小鼠造模区域纤连蛋白与β-actin的比值呈现逐渐升高的趋势，分别为0.79±0.09、1.26±0.23、1.79±0.05和2.29±0.58，差异均有统计学意义（ F=12.86， P=0.002）。与假手术组相比三个手术组（生理盐水对照组、红细胞干预组及全血干预组）手术区域纤连蛋白明显升高；四组小鼠造模区域纤连蛋白免疫组化染色结果与免疫印迹实验相同，纤连蛋白光密度值分别为0.09±0.01、0.18±0.01、0.22±0.01和0.24±0.01，差异有统计学意义（ F=210.7， P<0.001）。 结论:小鼠椎板切除术后手术区域有血液淤积，且一定程度上可以导致硬膜外瘢痕组织增生程度加重；红细胞膜内膜外有大量的IL-33表达，促进硬膜外瘢痕组织增生的机制可能与红细胞裂解释放IL-33有关。

酒精（乙醇）是导致横纹肌溶解发生的常见致病因素之一，可直接对肌细胞膜产生毒性作用，使得肌红蛋白大量释放入血，与肾小管上皮细胞分泌的Tamm-Horsfall蛋白结合形成管型堵塞远端肾小管导致肾功能下降和肾脏结构损伤，甚至肾功能衰竭，血液滤过联合血液灌流等模式治疗横纹肌溶解相关急性肾衰竭具有一定临床优势，有利于肾功能恢复和改善预后。

目的:研究急性高眼压诱导小鼠视网膜缺血-再灌注损伤模型中血-视网膜外屏障的破坏情况。方法:选取SPF级雄性C57BL/6J小鼠57只，采用随机数表法将小鼠随机分为对照组和高眼压组，其中对照组25只，高眼压组32只，剔除建模失败或建模不佳的小鼠后，每组最终纳入20只，均选取左眼为实验眼。高眼压组采用质量分数0.9%氯化钠溶液前房灌注法建立小鼠急性高眼压诱导的视网膜缺血-再灌注损伤模型，对照组仅作前房穿刺。采用动物光相干断层扫描法检测视网膜厚度变化；采用免疫荧光染色法检测视网膜组织中紧密连接蛋白1(ZO-1)分布变化；采用胰蛋白酶消化法检测视网膜毛细血管退化程度；采用苏木精-伊红染色法观察视网膜炎性细胞浸润情况。结果:与对照组比较，高眼压组视网膜色素上皮(RPE)层结构紊乱，伴有明显渗出，局部神经上皮层脱离、隆起。高眼压组小鼠视网膜全层厚度为(235.8±5.3)μm，较对照组的(213.3±3.9)μm明显增厚，差异有统计学意义( t＝3.427， P＝0.009)。小鼠RPE层中ZO-1主要定位在细胞膜上，少部分在细胞质中，建模后2 d，高眼压组ZO-1出现明显内化，细胞膜上ZO-1减少，细胞质中ZO-1增多，整体分布紊乱。建模后7 d，高眼压组视网膜毛细血管出现退行性变，退化的毛细血管数量明显增加，高眼压组退化的毛细血管数量为(201.0±13.2)根，明显多于对照组的(11.2±1.7)根，差异有统计意义( t＝14.280， P<0.01)。苏木精-伊红染色结果显示，高眼压组小鼠视网膜中可见炎性细胞浸润，主要是嗜中性粒细胞，浸润的炎性细胞主要位于内界膜下。 结论:急性高眼压诱导小鼠视网膜缺血-再灌注损伤使视网膜外屏障受到破坏，引起外周循环中粒细胞的浸润及视网膜水肿，视网膜毛细血管退化。

目的:探讨儿童遗传性口形红细胞增多症(DHSt)的临床特征。方法:回顾性分析1例DHSt患儿的临床资料。结果:患儿，男，5岁6个月，既往2次因"溶血性贫血"住院治疗，但未确诊溶血原因。患儿以皮肤苍白、乏力为主要症状，呼吸道感染后乏力加重。入院时除发热、咳嗽等呼吸道症状外，以贫血、脾大、黄疸为主要表现，考虑为溶血性贫血、呼吸道感染。患儿呈重度正细胞性贫血，间接胆红素升高，电解质、血脂均正常，尿常规正常。骨髓穿刺示：增生性贫血骨髓象。腹部B超示：胆囊结石(直径约4 mm)；脾脏增大，脾实质回声增加。基因检测：患儿及其父亲均携带 PIEZO1基因的错义突变基因，确诊为DHSt。经输血、抗感染、碱化尿液等综合治疗，患儿好转出院。 结论:儿童DHSt是一组以红细胞膜的离子渗透功能异常和成熟红细胞形态改变为特征的罕见遗传性溶血病。起病急，临床表现轻重差异较大，与其他非免疫性溶血病不易鉴别，易造成误诊。早期识别、及早综合治疗是治疗成功的关键。脾脏切除治疗在儿童被视为禁忌。

目的:探讨瞬时受体电位M8（TRPM8）对间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征（IC/BPS）小鼠疼痛症状及神经元增殖的影响。方法:将雌性野生型C57BL/6小鼠（8~10周龄）按随机数字表法分为对照组、IC/BPS模型组和IC/BPS模型+薄荷醇组（各6只）；TRPM8基因敲除小鼠随机分为TRPM8基因敲除组和TRPM8基因敲除模型组（各6只）。IC/BPS模型组、IC/BPS模型+薄荷醇组和TRPM8基因敲除模型组小鼠皮下注射尿路斑块蛋白65-84氨基酸残基（UPK3A65-84）多肽；IC/BPS模型+薄荷醇组继续注射薄荷醇。建模成功后，通过机械敏感性评估各组疼痛阈值的差异；膀胱壁注射细胞膜红色荧光探针（Dil），10 d后采集背根神经节（DRG）组织，利用Western蛋白印迹法和实时定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）分别检测各组TRPM8和生长相关蛋白43（GAP43）的蛋白质和mRNA含量的差异；免疫荧光技术检测DRG组织中TRPM8表达与GAP43或Dil的分布情况。分析TRPM8与IC/BPS小鼠疼痛症状的关系及在神经元增殖中的作用。结果:模型均构建成功。与对照组相比，IC/BPS模型组和IC/BPS模型+薄荷醇组小鼠的疼痛阈值均降低［分别为（8.50±1.22）、（5.50±1.05）比（11.67±2.16），均 P<0.001］。与对照组相比，IC/BPS模型组和IC/BPS模型+薄荷醇组TRPM8的表达量均升高，而在TRPM8基因敲除组小鼠中TRPM8未表达［分别为（3.16±0.05）、（6.46±0.21）、0比（1.00±0.06），均 P<0.001］。各组小鼠TRPM8蛋白表达量与mRNA表达趋势相同（ P<0.001）。与对照组相比，IC/BPS模型组和IC/BPS模型+薄荷醇组DRG中GAP43 mRNA的表达增加，而TRPM8基因敲除模型组的表达下降（均 P<0.001）。GAP43蛋白表达与mRNA表达趋势相同（ P<0.001）。免疫荧光结果显示，与对照组相比，IC/BPS模型组和IC/BPS模型+薄荷醇组DRG中GAP43阳性神经元的数量增加，TRPM8基因敲除组下降（均 P<0.001）。与对照组相比，IC/BPS组和IC/BPS模型+薄荷醇组DRG Dil阳性感觉神经元数量增加，而TRPM8基因敲除组下降（均 P<0.001）。 结论:TRPM8可加剧IC/BPS小鼠的疼痛症状，其机制可能与诱导DRG水平的感觉神经增殖有关。

目的:以血液为样品观察不同剂量的乙醇对血液中血红细胞特性的影响。方法:取正常的血液8份，每份1 ml，其中1份为对照组，不做任何处理，另外6份为试验组，分别加入20、40、60、80、100、120 μl的乙醇，然后观察不同浓度乙醇影响下红细胞的电泳率，渗透脆性和荧光光谱图的变化并与对照组未放入乙醇的血红细胞的各项指标相比较。组间数据比较采用单因素方差分析。结果:样本中加入的乙醇量在0～40 μl时，其电泳率逐渐增大，其中加入40 μl乙醇的血液红细胞的电泳率最高(1.192±0.280)明显高于对照组(0.803±0.180)，差异有统计学意义( t＝1.164， P<0.05)。但当其继续增大乙醇剂量时，电泳率逐渐减小，当达到80 μl时低于正常水平。加入乙醇120 μl后红细胞电泳率明显低于正常(0.415±0.300)明显低于对照组(0.803±0.180)，差异有统计学意义( t＝0.418， P<0.05)。样本中加入的乙醇量在40 μl时，其渗透脆性为(0.793±0.270)，高于对照组(0.674±0.540)差异有统计学意义( t＝0.791， P<0.05)。为激发波长为407 nm和532 nm的发射谱，发射谱的峰值出现在491 nm和608 nm处。从发射谱的强度来看，当加入的酒精量为5 μl时，其强度增大；加入酒精量为10 μl强度达到最大；当量达到20 μl时，其强度反而减小，小于没有加酒精的红细胞溶液的光谱强度。 结论:小剂量的乙醇对于红细胞膜的活性有一定的促进作用，而乙醇剂量过大时则使红细胞电泳率、渗透脆性下降，影响红细胞膜的结构，从而影响红细胞的变形性和膜的活性。

红细胞和血小板在血液中广泛存在，易于从血液中分离，且性质相对稳定，是一种理想的药物递送载体。近年来，大量研究利用红细胞和血小板递送抗肿瘤药物以实现高效的药物递送，其在优化药物体内行为、增加疗效以及减少给药剂量方面表现出了优异的效果。此外，其细胞膜可用作包膜材料以改善纳米药物递送系统的性质，实现仿生功能的同时减少纳米粒的毒副作用。介绍了红细胞和血小板及其膜材料的特性和制备方法，以及其在抗肿瘤药物递送中的研究进展。

目的:研究脐带间充质干细胞改善卵巢早衰家兔卵巢功能的潜在机制。方法:将10只家兔按随机数表法分为治疗组和模型组各5只，均采用腹腔注射环磷酸酰胺（50 mg·kg -1·d -1，连续2 d）构建卵巢早衰模型。造模1周后，治疗组予以耳缘静脉注射人脐带间充质干细胞（2 mL/d，连续3 d），模型组予以注射等量无菌水。第28日后采集两组家兔卵巢组织标本，通过苏木精-伊红染色法观察两组家兔卵巢组织形态结构，并采用蛋白免疫印迹法、实时荧光定量PCR及免疫组织化学技术检测两组家兔卵巢组织内基质金属蛋白酶组织抑制物1（tissue inhibitor of metalloproteinases 1，TIMP1）、纤连蛋白（fibronectin，FN）、纤维形成相关因子基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinases 9，MMP9）在蛋白及mRNA水平上的表达。 结果:①模型组家兔卵巢组织内原始卵泡数量少，闭锁卵泡多，各级卵泡颗粒层排列紊乱，卵细胞核出现固缩，发生凋亡，卵巢间质出现纤维化；而治疗组家兔卵巢组织内原始、初级卵泡数量多，闭锁卵泡少，各级卵泡颗粒细胞排列规则。②与模型组相比较，治疗组家兔卵巢组织内TIMP1蛋白（0.546±0.021比0.820±0.085）和FN蛋白表达量增多（0.221±0.065比0.516±0.064）（ P均<0.001），而MMP9蛋白表达量减少（0.504±0.049比0.204±0.066， P<0.001）。③与模型组相比较，治疗组家兔卵巢组织内 TIMP1 mRNA（0.217±0.024比0.470±0.039）和 FN mRNA的表达量增多（0.039±0.006比0.125±0.012， P均<0.001），而 MMP9 mRNA的表达量减少（0.009±0.000比0.002±0.000， P<0.001）。④TIMP1和FN主要表达在颗粒细胞和卵细胞膜，TIMP1还表达在卵巢间质组织，治疗组TIMP1和FN的表达多于模型组，差异均具有统计学意义（ P<0.001， P=0.005）。MMP9主要表达在颗粒细胞和卵巢间质组织，治疗组MMP9的表达少于模型组，差异具有统计学意义（ P<0.001）。 结论:脐带间充质干细胞能够通过调节卵巢组织内TIMP1、FN和MMP9水平来改善卵巢功能。