目的:探讨完全型圆头精子症患者临床表型、精子形态特征及辅助生殖技术治疗的效率。方法:收集2019年11月至2022年5月期间在广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心就诊的完全型圆头精子症患者（完全型圆头精子症组），采集外周血进行遗传学检测，全外显子测序挖掘致病基因，并对精液常规、精子形态及超微结构进行分析；全部患者均接受了卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）联合人工卵子激活（artificial oocyte activation，AOA）治疗。选取同日取卵的行常规ICSI周期患者作为对照组，并采用时差动态监测系统监测发育全程动态参数，分析2组受精及胚胎发育效率、发育动力学参数及临床治疗结局。结果:完全型圆头精子症组4例，对照组9例。完全型圆头精子症患者均合并精子活力低下、精子DNA碎片率升高，精子形态及顶体荧光染色均显示头部呈小圆形伴顶体区缺失；透射电子显微镜下圆头精子头部顶体完全缺失且多见核质松散、空泡化等异常，颈部线粒体鞘数量减少且排列杂乱，鞭毛轴丝“9+2”结构多见异常。4例患者中1例为 DPY19L2基因纯合缺失，1例为 DPY19L2基因新发纯合移码变异。完全型圆头精子症组受精率、双原核受精率、第3天优质胚胎率、第6天囊胚形成率、第6天优质囊胚形成率与对照组差异均无统计学意义（均 P>0.05）；完全型圆头精子症组胚胎发育早期时间参数第二极体释放时间、原核消失时间，2至6-细胞各时期时间显著早于对照组且差异均有统计学意义（均 P<0.05），2组胚胎分裂模式差异无统计学意义（ P>0.05）。4例完全性圆头精子症患者中，2例新鲜胚胎移植各活产健康男婴1名，2例解冻周期移植活产健康男婴、女婴各1名。 结论:完全型圆头精子症患者精子形态学异常表型特征明显，ICSI联合AOA是有效的辅助生殖治疗手段。

目的:对两个眼皮肤白化病(oculocutaneous albinism, OCA)家系进行基因变异分析，明确致病变异，并进行产前诊断。方法:联合应用高通量测序技术及Sanger测序技术，对2个家系患者进行基因检测，明确患者致病变异及家系成员携带者情况。对存在发病风险的胎儿进行产前基因检测。结果:家系1，孕妇父亲 OCA2基因c.1182＋1G>A纯合变异，母亲 TYR基因存在c.896G>A/c.929dupC复合杂合变异，孕妇 OCA2c.1182＋1G>A杂合变异和 TYRc.929dupC杂合变异；丈夫携带 OCA2c.1441G>A杂合变异。产前诊断显示胎儿此三个位点均为野生型。家系2患儿 SLC45A2基因存在c.478G>C纯合变异，夫妻均为该杂合变异携带者，胎儿该位点为野生型。 结论:明确家系中患者的致病变异是单基因病产前诊断的前提，可以提高基因诊断的效率及准确性。

目的:探究S高校附属医院重症医学专业在"十三五"期间科研效率的静态和动态趋势。方法:根据2016至2020年北京市S高校16家附属医院重症医学专业的科研数据来源，选取科研投入经费、参与科研医师人数作为投入评估指标，以科学引文索引（SCI）论文、中国科学引文数据库（CSCD）论文、硕博士培养人数作为产出评估指标，构建重症医学专业科研效率评价指标体系，运用SPSS 23.0软件进行描述性资料统计，分别运用DEAP 2.1软件的数据包络分析法（DEA）-BCC模型和DEA-Malmquist指数模型对其2016至2020年的科研效率进行静态和动态评价。结果:①在2016至2020年S高校16家附属医院的重症医学专业的科研技术效率（TE）差异很大，但纯技术效率（PTE）、规模效率（SE）均在较好的水平，且连续5年有6~11家附属医院重症医学专业保持DEA有效。②动态分析显示其2016至2020年科研全要素生产率指数（TFP）呈先上升后下降再提升的趋势，均值为0.985；技术效率变化指数（TEC）呈下降又上升趋势；技术进步变化指数（TC）呈缓慢上升又下降趋势，均值为0.953。而TEC、纯技术效率变化指数（PTEC）和规模效率变化指数（SEC）的均值均在1以上，可见科研创新TFP的增长更多地取决于技术效率指数。结论:S高校附属医院重症医学专业科研效率的"收益效应"和"追赶效应"明显，但未显现"增长效应"，虽然实现了"十三五"期间的科研效率的明显提升，但科技创新和国际学术影响力方面仍有较大的提升空间。

目的:基于三阶段数据包络分析测算2009—2019年我国31个省份医院的运行效率，为提升我国医院运行效率和推动公立医院高质量发展提供参考。方法:资料来源于中国卫生健康统计年鉴、复旦大学中国综合医院排行榜等。将2009—2019年我国31个省份医院数量、卫生技术人员数和床位数作为投入指标，医院诊疗人次数、出院人次数、住院手术人次数、优势专科声誉得分和科研学术得分作为产出指标，政府卫生支出、人均国内生产总值、人口密度和三级甲等医院数占比作为环境变量，运用三阶段数据包络分析测算医院运行效率和规模收益。结果:环境变量影响我国医院运行效率( P<0.05)，剔除其影响后，2009—2019年我国31个省份医院运行综合效率、纯技术效率和规模效率均值分别为0.703、0.961和0.726。其中，4个省份的医院规模效益不变，26个省份递增，1个省份递减。 结论:纯技术效率是提升我国医院运行效率的主要因素，而规模效率偏低会影响医院运行效率的提高，多数省份医院的规模效率有较大提升空间。为进一步提升我国医院运行效率，笔者建议医院应在注重质量的基础上实现规模扩张，推动优质医疗资源均衡分布，发挥社会、经济和环境变量的积极作用。

目的:利用CRISPR/Cas9 (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeat/CRISPR-associated nuclease 9)技术构建携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)基因的单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus 2，HSV-2)。方法:利用CRISPR/Cas9技术对外源基因EGFP插入HSV-2基因组的策略进行探索，设计如下4种插入策略：(1)经典的同源重组修复模式，即环状双侧同源臂供体介导的基因敲入；(2)线性化单侧同源臂供体介导的基因敲入；(3)同源性非依赖介导的基因敲入；(4)利用稳表达Cas9和sgRNA的细胞株，进行环状双侧同源臂供体介导的基因敲入。结果:使用策略2、3和4均成功构建了携带EGFP的HSV-2，其中策略2的基因敲入效率最高，然后依次为策略3、策略4，策略1未观察到重组病毒的产生。蚀斑纯化后的重组病毒在7代内能稳定表达绿色荧光蛋白，并且和亲本株在Vero细胞上具有相似的生长特性。结论:线性化单侧同源臂供体介导的基因敲入效率更高，敲除载体的稳转细胞株能够有效地提高同源重组修复机制介导的基因敲入效率。

目的:利用超声靶向微泡破裂(UTMD)技术介导T细胞Itch基因沉默，观察T细胞免疫活性变化。方法:磁珠分选纯化T细胞，构建靶向Itch基因的短发夹RNA(shRNA)表达质粒。实验组为超声辐照＋Itch-shRNA质粒-SonoVue微泡，对照组为超声辐照＋阴性对照shRNA质粒-SonoVue微泡，空白组未处理。转染48 h，荧光显微镜和流式细胞术评估细胞转染效率，免疫印迹(Western blot)法检测Itch基因蛋白表达水平。转染72 h,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组细胞上清液中白介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)水平。采用单因素方差分析比较多组间差异，两两比较LSD- t检验。 结果:利用UTMD技术介导shRNA转染效率达到52.3%，转染后实验组、对照组和空白组Itch相对蛋白表达量分别为0.301±0.080、0.773±0.101和0.719±0.090，实验组Itch蛋白表达显著降低，差异有统计学意义( F＝24.441， P<0.01)。转染72 h，实验组、对照组和空白组IL-2浓度分别为(417.3±37.1)ng/L、(158.7±17.3)ng/L和(147.0±10.2)ng/L，差异有统计学意义( F＝118.701， P<0.001)；IFN-γ浓度分别为(168.3±12.1)ng/L、(74.3±3.7)ng/L和(74.6±7.1)ng/L，差异有统计学意义( F＝126.833， P<0.001)；实验组IL-2和IFN-γ表达水平较对照组和空白组显著升高。 结论:利用UTMD技术介导Itch-shRNA转染能明显降低T细胞Itch水平，增强T细胞免疫活性。

前瞻性纳入42例胃食管静脉曲张患者资料，分组采用内镜下胶圈套扎或联合组织黏合剂治疗，结果显示套扎联合组织黏合剂治疗后胃左静脉内径、平均流速及血流量的下降趋势均比单纯胶圈套扎治疗明显，差异均有统计学意义（ P值均< 0.05）；两组治疗后脾静脉和门静脉的内径、血流量和平均流速，以及肝脾大小、剪切波速度和肝功能分级均无明显变化（ P值均> 0.05）；套扎联合组织黏合剂治疗食管静脉曲张、胃底静脉曲张的有效率（66.67%、52.38%）均高于单纯胶圈套扎（42.85%、23.81%）（ P值均> 0.05），后者再出血率更高（9.52%和19.05%， P > 0.05）。提示联合治疗更为安全有效，且对肝功能和门静脉高压无明显影响。

目的:了解甘肃省成人大骨节病患者个体化治疗模式。方法:2021年3月，对符合《大骨节病诊断》（WS/T 207-2010）标准、有明显关节疼痛及功能障碍且愿意接受治疗的甘肃省成人大骨节病患者开展个体化治疗，分析治疗模式及效果。结果:甘肃省6 711例大骨节病患者个体化治疗后，显效率、有效率、无效率分别为9.76%（655/6 711）、74.70%（5 013/6 711）、15.54%（1 043/6 711），总有效率为84.46%（5 668/6 711）。不同临床分度患者治疗总有效率比较，差异有统计学意义（χ 2 = 16.95， P < 0.001）。选择口服药物治疗的患者最多（98.26%，6 594/6 711），物理疗法次之（23.60%，1 584/6 711），局部药物治疗（15.48%，1 039/6 711）、针灸（15.45%，1 037/6 711）、按摩（14.39%，966/6 711）的患者相对较少。患者多采用单一方法治疗（59.48%，3 992/6 711）或2种方法联合治疗（20.73%，1 391/6 711）；不同治疗方法总有效率比较，差异有统计学意义（χ 2 = 283.51， P < 0.001），以3种方法联合治疗总有效率最高（92.73%，816/880）。药物治疗与中医适宜技术+药物治疗的总有效率相对较高，分别为86.43%（3 765/4 356）和81.13%（1 887/2 326）；而中医适宜技术治疗的总有效率相对较低（55.17%，16/29）。59.29%（3 979/6 711）的患者单纯采用口服药物治疗，其中80.32%（3 196/3 979）使用消炎镇痛类药物，63.94%（2 544/3 979）使用中成药，52.25%（2 079/3 979）使用软骨保护剂类药物，39.86%（1 586/3 979）使用维生素类辅助治疗药物。消炎镇痛类药物中，双氯酚酸钠（50.46%，2 008/3 979）和布洛芬（29.20%，1 162/3 979）使用相对较多；服用布洛芬不良反应发生率（24.96%，290/1 162）高于双氯酚酸钠（2.49%，50/2 008）。 结论:甘肃省成人大骨节病患者个体化治疗规模大、方法多、药物选择性强、效果明显，可有效改善患者的生存质量。

目的:改良人主动脉平滑肌细胞的原代提取培养方法。方法:采用改良过的组织块贴壁法提取人主动脉平滑肌原代细胞，无多聚左旋赖氨酸(Poly-L-Lysine，PLL)包被为阴性对照组，PLL包被为实验组。采用免疫荧光技术鉴定细胞纯度；蛋白印迹法判断细胞表型变化；细胞计数仪计算传代后细胞的贴壁率；CCK8法鉴定两组细胞生长活力的差别。结果:实验组细胞爬出率及成活率明显高于阴性对照组( P<0.05)；倒置显微镜及免疫荧光显示两组细胞形态与标志蛋白表达差异无统计学意义；蛋白印迹法显示两组细胞表型改变差异无统计学意义；细胞贴壁率比较，实验组细胞明显高于阴性对照组( P<0.05)；CCK8法显示实验组细胞于48、60、72 h时活性明显高于阴性对照组( P<0.05)。 结论:预包被PLL能够提高人主动脉平滑肌细胞的提取效率、贴壁效率和生长活力，同时不会改变细胞表型。

目的:评价某三级医院学科科研效率现状及动态变化，提出学科科研发展建议。方法:采用数据包络分析方法中的BCC模型及Malmquist指数模型对某三级医院35个学科2015—2017年的科研效率进行静态及动态分析。结果:某三级医院2015—2017年每年DEA有效的学科分别为10个、16个和10个，内科、外科和医技学科3年平均科研效率分别为0.62、0.71和0.74。与2015年相比，2017年全要素生产率指数为1.30，提高30%，以纯技术效率上升为主；3年科研效率整体上升的学科23个，下降的学科12个。结论:某三级医院科研效率整体呈上升趋势，学科科研效率参差不齐，对科研效率无效或呈下降发展趋势的学科，重点从提高管理、培养人才、提升科研技术和增加产出等角度提升科研效率。