该研究基于线粒体铁蛋白(ferritin mitochondrial,FtMt)抑制铁死亡探讨藁本内酯(ligustilide,LIG)减轻氧糖剥夺/复糖复氧(oxygen and glucose-deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导小鼠海马神经元细胞(HT22)损伤的作用及机制.体外建立OGD/R诱导HT22细胞损伤的模型,HT22细胞随机分为正常组,模型组,LIG 5、10、20 μmol·L-1组,铁死亡抑制剂(ferrostatin-1,Fer-1,2 μmol·L-1)组.CCK-8法检测细胞活力,LDH试剂盒检测乳酸脱氢酶释放量,倒置显微镜观察HT22细胞形态,透射电镜观察线粒体的超微结构,化学发光法检测细胞内Fe2+含量.为进一步探究FtMt抑制铁死亡的机制,沉默HT22细胞的FtMt,并随机分为正常组、模型组、20 μmol·L-1LIG 组、si-NC 组、si-FtMt 组、si-FtMt+20 μmol·L-1LIG 组.免疫荧光和 Western blot 法检测FtMt的表达,化学发光法检测HT22细胞内NADPH/NADP+、GSH、MDA、ATP的含量,激光共聚焦观察mtROS荧光强度,流式细胞术检测细胞内Fe2+含量,Western blot法检测铁死亡相关蛋白Ferrtin、GPX4、ASCL4的表达.研究结果表明,与模型组相比,LIG可以显著提高HT22细胞存活率,改善损伤的HT22细胞形态及线粒体超微结构,降低细胞内Fe2+含量和降低促铁死亡蛋白ACSL4的表达,增加抗铁死亡蛋白Ferrtin、GPX4的表达.沉默FtMt后,LIG促进FtMt的表达;与si-FtMt组相比,LIG可以显著提高NADPH/NADP+、GSH含量,降低mtROS的荧光强度、MDA含量,提高ATP活性,降低HT22细胞内Fe2+含量,抑制促铁死亡蛋白ACSL4的表达,提高抗铁死亡蛋白Ferrtin、GPX4的表达.综上,LIG通过上调FtMt的表达改善线粒体功能抑制铁死亡,从而减轻OGD/R诱导HT22细胞损伤.

目的:探讨铁死亡在重症急性胰腺炎(SAP)诱发急性肾损伤(AKI)的作用及其机制。方法:胰腺炎建模后24 h，将36只SD大鼠(购自青岛大学医学部实验室动物中心)采用完全随机分组法分为3组( n＝12)：假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1干预组(SAP＋Fer组)。建立SAP模型24 h后，检测血清淀粉酶(AMY)、肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN)水平；检测肾组织中铁含量、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)变化及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)活性；苏木精-伊红(HE)染色观察胰腺和肾脏组织学改变；透射电镜(TEM)观察铁死亡的形态学特征；蛋白质印迹法(Western blot)、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光染色等方法分析长链脂酰CoA合成酶4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和铁蛋白重链1(FTH1)等铁死亡相关蛋白和基因的表达。组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用LSD- t检验。 结果:SAP组大鼠血清AMY[(6 276.5±562.2)比(1 086.6±192.3) U/L]、Cr[(98.0±16.2)比(19.5±5.2) μmol/L]、BUN[(17.1±2.8)比(7.2±1.7) mmol/L]水平明显高于SO组( t＝30.314、15.927、10.375， P值均<0.01)，差异均有统计学意义；肾组织铁[(0.65±0.13)比(0.44±0.12) mg/g]、MDA[(7.25±0.81)比(1.84±0.24) μmol/g]、ROS[(68.54±7.04)比(15.67±5.21)×10 4/mg]高于SO组( t＝3.855、22.167、11.496， P值均<0.01)，GSH[(358.38±41.59)比(518.64±55.72) nmol/g]和GPX4[(7.75±1.09)比(14.72±2.56) U/mg]明显低于SO组( t＝7.984、8.674， P值均<0.01)，差异有统计学意义；胰腺和肾组织病理损伤程度增加；线粒体出现明显萎缩；肾脏ACSL4蛋白(0.84±0.03比0.34±0.02)表达高于SO组( t＝7.876, P<0.01)，GPX4、FTH1蛋白(0.69±0.03比1.04±0.06、0.26±0.02比0.83±0.04)表达低于SO组( t＝5.651、8.134， P值均<0.01)，差异有统计学意义；ACSL4、铁响应元件结合蛋白2(IREB2) mRNA(0.87±0.06比0.24±0.03、1.23±0.05比0.32±0.02)表达高于SO组( t＝12.864、15.163， P均<0.01)，差异有统计学意义。SAP＋Fer组大鼠血清AMY[(5 124.3±483.5)比(6 276.5±562.2) U/L]、Cr[(55.2±13.7)比(98.0±16.2) μmol/L]、BUN[(9.8±2.1)比(17.1±2.8) mmol/L]水平显著低于SAP组( t＝5.287、6.989、7.359， P值均<0.01)，差异有统计学意义；肾组织铁[(0.54±0.07)比(0.65±0.13) mg/g]、MDA[(4.67±0.73)比(7.25±0.81) μmol/g]、ROS[(28.39±6.36)比(68.54±7.04)×10 4/mg]低于SAP组( t＝2.639、7.176、8.247， P值均<0.05)，GSH[(448.21±45.51)比(358.38±41.59) nmol/g]和GPX4[(11.31±1.89)比(7.75±1.09) U/mg]高于SAP组( t＝5.048、5.639， P值均<0.01)，差异有统计学意义；胰腺和肾组织病理损伤程度减轻；线粒体轻度萎缩；肾脏ACSL4蛋白(0.49±0.02比0.84±0.03)表达低于SAP组( t＝2.781， P<0.05)，GPX4、FTH1蛋白(0.69±0.03比1.04±0.06、0.26±0.02比0.83±0.04)表达高于SAP组( t＝2.427、2.876， P值均<0.05)，差异有统计学意义；ACSL4、IREB2 mRNA(0.52±0.04比0.87±0.06、0.74±0.04比1.23±0.05)表达低于SAP组( t＝5.843、6.781， P值均<0.01)，差异均有统计学意义。 结论:铁死亡参与SAP引起的AKI，抑制铁死亡能改善肾功能，减轻肾组织脂质过氧化和病理损伤。

目的:探讨乳铁蛋白对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响及其机制。方法:复苏冻存的人胶质母细胞瘤细胞株U87MG后，应用MTT法检测不同浓度(0、100、200及300 μg/mL)乳铁蛋白对U87MG细胞增殖能力的影响，以筛选最适药物浓度。将U87MG细胞分为空白对照组与乳铁蛋白(200 μg/mL)处理组，应用Edu染色、Transwell实验、Mito-Tracker染色、DCFH-DA染色检测2组细胞的增殖情况、迁移情况及线粒体活性、活性氧生成水平，应用免疫荧光化学染色检测2组细胞中自噬标志蛋白微管相关蛋白1A/1B轻链3B(LC3B)的免疫荧光染色强度，应用化学比色法检测2组细胞中氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量，应用RT-PCR法检测2组细胞中上皮-间充质转化过程相关基因(E-钙黏蛋白、纤连蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白及Snail)的表达，应用Western blotting检测2组细胞中凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)的表达。结果:与空白对照组比较，乳铁蛋白处理组中Edu阳性细胞比例、细胞迁移数目、Mito-Tracker阳性细胞比例明显降低，DCFH-DA阳性细胞比例明显升高，细胞质中LC3B免疫荧光染色强度明显升高，SOD含量明显降低，MDA含量明显升高，E-钙黏蛋白mRNA表达明显降低，纤连蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白及 Snail mRNA表达明显升高，Bax蛋白表达明显升高，Bcl-2蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:乳铁蛋白可有效抑制脑胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭等生物学行为，其机制与调控线粒体活性密切相关。

目的:铁蓄积与绝经后骨质疏松症发生相关，髋部骨质疏松骨折存在骨髓造血细胞自噬异常；本研究希望了解铁蓄积导致骨量下降与造血细胞自噬功能之间相关性，探索骨质疏松症新的危险因素。方法:使用雄性小鼠腹腔注射枸橼酸铁铵构建铁蓄积小鼠模型，ELISA检测血清铁蛋白和骨生成指标I型前胶原氨基末端肽(P1NP)，micro-CT检测股骨骨密度，通过流式细胞仪分析小鼠股骨和胫骨骨髓造血干祖细胞比例和细胞凋亡，流式成像检测骨髓造血干祖细胞自噬溶酶体形成；使用造血细胞条件性敲除Atg7基因小鼠Atg7 flox/flox; Vav-Cre(本文以Atg7 -/-表示)对Atg7 -/-小鼠股骨进行micro-CT扫描、股骨和胫骨骨髓造血干祖细胞进行转录组测序。 结果:两组比较后铁蓄积组显示：血清铁蛋白升高、血清骨生成指标P1NP表达减低、股骨骨密度下降( P<0.05)，骨髓造血干祖细胞比例异常升高( P<0.05)且伴随细胞凋亡比例增加( P<0.05)，骨髓造血干祖细胞自噬溶酶体形成受抑制；在Atg7 -/-小鼠中，骨髓转录组测序结果提示：铁代谢活动增强，铁载体相关基因Lcn2、膜铁转运相关基因Tfr2，Slc40a1(Fpn1)、Steap3、线粒体亚铁血红素生成通路中酶的调控基因Cpox的mRNA表达均升高，Atg7 -/-小鼠骨量下降( P<0.05)。 结论:铁蓄积导致骨量下降可能与骨髓造血细胞自噬功能抑制相关；骨髓造血细胞自噬异常与骨量下降存在相关性。

目的:探讨应用肠内免疫营养支持治疗对二次改良营养风险筛查（NRS）2002评定结果为具有营养风险的成年烧伤患者的营养代谢、免疫功能和炎症反应的影响。方法:采用前瞻性随机对照研究方法。将2019年12月—2022年1月，于徐州医科大学附属淮海医院住院的500例经二次改良NRS 2002筛选为具有营养风险的成年烧伤患者纳入研究，按烧伤严重程度分为一般烧伤患者（450例）与严重烧伤患者（50例），按随机数字表法将一般烧伤患者分为一般烧伤膳食营养组和一般烧伤膳食+肠内免疫营养组，每组225例；将严重烧伤患者分为严重烧伤膳食+肠内非免疫营养组与严重烧伤膳食+肠内免疫营养组，每组25例。各组患者在常规烧伤救治基础上分别采用相应的营养支持治疗。伤后1、3、7、14、21 d，记录4组患者摄入总能量及总蛋白质摄入量；检测4组患者血浆前白蛋白、白蛋白、转铁蛋白，血清免疫球蛋白A（IgA）、IgG、IgM，外周血CD3阳性T细胞比例、CD4阳性T细胞计数、CD8阳性T细胞计数、CD4阳性T细胞与CD8阳性T细胞的比值、自然杀伤细胞比例，血浆白细胞介素6（IL-6）、游离线粒体DNA（mtDNA）拷贝数、可溶性髓系细胞触发受体1（sTREM-1）；计算4组患者当日氮平衡。于伤后7、14、21 d，重新对4组患者行二次改良NRS 2002评分。记录4组患者治疗期间脓毒症发生率及住院时间，严重烧伤2组患者住重症监护病房（ICU）时间。对数据行 χ2检验、Fisher确切概率法检验、Mann-Whitney U检验、独立样本 t检验、重复测量方差分析、Bonferroni校正。 结果:476例患者顺利完成试验，其中一般烧伤膳食营养组213例［男112例、女101例，年龄（37±19）岁］、一般烧伤膳食+肠内免疫营养组218例［男115例、女103例，年龄（42±16）岁］、严重烧伤膳食+肠内非免疫营养组22例［男女各11例、年龄（35±8）岁］、严重烧伤膳食+肠内免疫营养组23例［男12例、女11例，年龄（35±8）岁］。与一般烧伤膳食营养组相比，一般烧伤膳食+肠内免疫营养组患者伤后1 d摄入总能量明显更高（ t=6.06， P<0.01），伤后7 d摄入总能量、伤后1 d总蛋白质摄入量均明显更低（ t值分别为6.17、4.59， P<0.01）。严重烧伤膳食+肠内免疫营养组患者伤后21 d摄入总能量明显低于严重烧伤膳食+肠内非免疫营养组（ t=2.70， P<0.01）。严重烧伤2组患者伤后各时间点总蛋白质摄入量均相近（ P>0.05）。与一般烧伤膳食营养组相比，一般烧伤膳食+肠内免疫营养组患者伤后3、7、14、21 d前白蛋白均明显更高（ t值分别为2.05、2.33、2.45、2.11， P<0.05），伤后7、14、21 d白蛋白均明显更高（ t值分别为2.30、2.56、2.15， P<0.05），伤后7、14 d转铁蛋白均明显更高（ t值分别为1.99、2.27， P<0.05），伤后14、21 d氮平衡均明显更高（ t值分别为2.51、2.07， P<0.05），伤后21 d二次改良NRS 2002评分明显更低（ t=1.99， P<0.05）。与严重烧伤膳食+肠内非免疫营养组相比，严重烧伤膳食+肠内免疫营养组患者伤后3、7、14、21 d 前白蛋白均明显更高（ t值分别为2.50、2.64、2.18、2.39， P<0.05），伤后7、14、21 d白蛋白均明显更高（ t值分别为2.27、2.39、2.69， P<0.05），伤后14、21 d转铁蛋白和氮平衡均明显更高而二次改良NRS 2002评分均明显更低（ t值分别为2.30、2.35，2.41、2.16，2.31、2.73， P<0.05）。与一般烧伤膳食营养组相比，一般烧伤膳食+肠内免疫营养组患者伤后7、14、21 d IgA、IgG均明显更高（ t值分别为2.19、2.36、2.17，2.49、1.97、2.24， P<0.05），伤后21 d IgM明显更高（ t=2.06， P<0.05），伤后3、7、14、21 d CD3阳性T细胞比例、CD4阳性T细胞与CD8阳性T细胞的比值均明显更高（ t值分别为2.49、2.25、2.33、2.41，2.39、2.24、2.46、2.18， P<0.05），伤后14、21 d CD4阳性T细胞计数均明显更高（ t值分别为2.15、2.27， P<0.05）而CD8阳性T细胞计数均明显更低（ t值分别为2.58、2.35， P<0.05），伤后7、14、21 d自然杀伤细胞比例均明显更高（ t值分别为2.53、2.21、2.36， P<0.05）。与严重烧伤膳食+肠内非免疫营养组相比，严重烧伤膳食+肠内免疫营养组患者伤后7、14 d IgA均明显更高（ t值分别为2.15、2.03， P<0.05），伤后7、14、21 d IgG均明显更高（ t值分别为2.09、2.56、2.15， P<0.05），伤后21 d IgM明显更高（ t=2.08， P<0.05），伤后14、21 d CD3阳性T细胞比例、CD4阳性T细胞计数和自然杀伤细胞比例均明显更高（ t值分别为2.52、2.14，2.14、2.39，2.56、2.19， P<0.05），伤后7、14、21 d CD8阳性T细胞计数均明显更低而CD4阳性T细胞与CD8阳性T细胞的比值均明显更高（ t值分别为2.27、2.81、2.01，2.11、2.69、2.05， P<0.05）。与一般烧伤膳食营养组相比，一般烧伤膳食+肠内免疫营养组患者伤后14、21 d IL-6（ t值分别为2.34、2.32， P<0.05）、游离mtDNA拷贝数均明显更低（ Z值分别为-2.28、-2.34， P<0.05），伤后7、14、21 d sTREM-1均明显更低（ t值分别为2.02、2.94、3.72， P<0.05）。与严重烧伤膳食+肠内非免疫营养组相比，严重烧伤膳食+肠内免疫营养组患者伤后7、14、21 d IL-6和sTREM-1均明显更低（ t值分别为2.15、2.29、2.47，2.43、2.07、2.32， P<0.05），伤后14、21 d游离mtDNA拷贝数均明显更低（ Z值分别为-2.49、-2.21， P<0.05）。治疗期间，一般烧伤2组患者脓毒症发生率相近（ P>0.05），严重烧伤2组患者脓毒症发生率相近（ P>0.05）。严重烧伤膳食+肠内免疫营养组患者住ICU时间为（11±3）d，明显短于严重烧伤膳食+肠内非免疫营养组的（14±3）d（ t=3.12， P<0.01）。一般烧伤膳食+肠内免疫营养组患者住院时间明显短于一般烧伤膳食营养组（ t=3.11， P<0.01），严重烧伤2组患者住院时间相近（ P>0.05）。 结论:对二次改良NRS 2002评定为具有营养风险的成年烧伤患者应用肠内免疫营养支持治疗可以更好地改善患者的营养状况和免疫功能，降低机体炎症反应，缩短一般烧伤患者住院时间和严重烧伤患者住ICU时间。

目的:观察三重脑震荡模型(multiple cerebral concussion，MCC)大鼠海马神经元铁死亡(ferroptosis)的情况。方法:90只清洁级雄性Wistar大鼠，体质量(250±10)g ，按照随机数字表法分为对照组(12只)和模型组(78只)，模型组采用自由落体法撞击大鼠额颞叶部(每天1次，连续3 d)制备大鼠MCC模型。将造模成功的大鼠随机分为12 h组、24 h组、48 h组、72 h组、7 d组、14 d组，每组12只。采用平衡木实验检测大鼠运动协调功能；ELISA法检测大鼠血清谷胱甘肽(glutathione，GSH)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase，NSE)及炎性因子白介素-1β(interleukin，IL-1β)、白介素-6(interleukin-6，IL-6)含量；比色法检测海马组织铁离子含量；RT-PCR法和Western blot法检测海马组织谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4，GPX4)、铁蛋白重链(ferritin heavy，FTH)和铁蛋白轻链(ferritin light，FTL)mRNA水平和蛋白含量；普鲁士蓝染色观察脑组织内铁沉积情况；透射电子显微镜法(transmission electron microscope，TEM)观察海马神经元及线粒体超微结构的变化。采用SPSS 24.0软件统计软件进行统计分析，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD检验。结果:平衡木实验中各组大鼠平衡木通过时间和运动协调能力评分均差异有统计学意义( F＝30.08，60.34，均 P<0.05)，其中48 h组大鼠[(87.00±4.74)s，(4.75±0.43)分]通过时间和运动协调能力评分明显高于对照组[(35.13±6.99)s，(0.75±0.23)分](均 P<0.05)。各组大鼠铁离子总含量、Fe 2+含量和Fe 3+含量均差异有统计学意义( F＝25.20，94.42，40.25，均 P<0.05)，其中48 h组海马组织Fe 2+含量明显高于对照组[(10.17±0.05)ng/μL，(8.65±0.01)ng/μL]( P<0.05)。在RT-PCR和Western blot结果中，各组海马组织GPX4、FTH、FTL mRNA水平和蛋白水平均差异有统计学意义( F＝37.94，82.09，49.01，71.63，28.94，15.78，均 P<0.05)，其中24 h组GPX4[(1.09±0.01)，(0.23±0.01)]和FTL[(1.60±0.03)，(0.64±0.02)]mRNA表达和蛋白含量明显高于对照组[GPX4：(1.00±0.02)、(0.17±0.01)，FTL：(1.00±0.04)，(0.32±0.01)] (均 P<0.05)，24 h组FTH[(0.24±0.03)，(0.07±0.01)]mRNA表达和蛋白含量明显低于对照组[(1.00±0.01)，(0.67±0.03)] (均 P<0.05)。在透射电子显微镜结果中，MCC后不同时间点大鼠海马神经元细胞缩小，核仁破裂，核膜不同程度皱缩，线粒体肿胀变形且有空泡存在，线粒体内嵴结构减少或消失。 结论:三重脑震荡模型大鼠的炎性反应和氧化应激水平升高，海马神经元出现铁死亡特征，尤其在24 h、48 h时最明显。

目的:探讨在脓毒症模型中信号转导与转录激活因子6（STAT6）对骨骼肌细胞铁死亡的影响及潜在机制。方法:将24只8周龄雄性SPF级昆明小鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、脓毒症模型组、STAT6抑制剂预处理组，每组6只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）构建小鼠脓毒症模型；假手术组开腹暴露盲肠后关腹。STAT6抑制剂预处理组于制模前1 h腹腔注射AS1517499溶液10 mg/kg；假手术组及模型组腹腔注射等量生理盐水。正常对照组小鼠不予任何手术及药物干预。于制模后24 h处死小鼠取后肢肌肉组织，苏木素-伊红（HE）染色后，光镜下观察组织病理学改变；醋酸铀-枸橼酸铅双染后，透射电镜下观察线粒体形态变化；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测肌肉组织中铁死亡标志物蛋白几丁质酶-3样蛋白1（CHI3L1）、环氧合酶-2（COX-2）、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（ACSL4）、铁蛋白重链1（FTH1）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPx4）的表达水平。结果:光镜下显示，正常对照组和假手术组小鼠骨骼肌形态结构正常；模型组骨骼肌结构疏松，肌纤维变小及萎缩，炎症细胞浸润，甚至出现肌纤维缺失；与模型组比较，STAT6抑制剂预处理组骨骼肌结构紧密，骨骼肌萎缩情况有所改善。透射电镜下显示，正常对照组和假手术组骨骼肌细胞超微形态正常；模型组骨骼肌超微形态学特征显示，细胞膜断裂和出泡，线粒体变小、膜密度增高、线粒体嵴减少或消失、线粒体外膜断裂，细胞核大小正常但缺乏染色质凝聚；与模型组比较，STAT6抑制剂预处理组肌细胞超微结构损伤有所改善。与正常对照组和假手术组比较，模型组小鼠肌肉组织中CHI3L1、COX-2、ACSL4、FTH1的蛋白表达均明显升高，GPx4蛋白表达明显下降，说明脓毒症小鼠模型骨骼肌细胞出现特征性线粒体损伤，同时铁死亡标志物蛋白表达异常；与模型组相比，STAT6抑制剂预处理组CHI3LI、COX-2、ACSL4、FTH1的蛋白表达均明显下降〔CHI3L1蛋白（CHI3L1/GAPDH）：0.70±0.08比0.97±0.09，COX-2蛋白（COX-2/GAPDH）：0.61±0.03比0.83±0.03，ACSL4蛋白（ACSL4/GAPDH）：0.75±0.04比1.02±0.16，FTH1蛋白（FTH1/GAPDH）：0.49±0.06比0.76±0.13，均 P<0.05〕，GPx4蛋白表达明显升高（GPx4/GAPDH：1.14±0.29比0.53±0.03， P<0.05）。 结论:脓毒症可诱导小鼠骨骼肌细胞铁死亡；STAT6可能通过调控COX-2、ACSL4、FTH1及GPx4表达介导脓毒症小鼠骨骼肌细胞铁死亡，由此诱导脓毒症骨骼肌细胞损伤。

干眼在全球的患病率日益升高，发病机制复杂，疾病呈慢性过程且治疗效果欠佳。目前认为干眼是多因素导致的眼表疾病，不同致病因素所致的泪膜不稳定和泪液高渗透压、眼表炎症反应、眼表组织神经感觉异常是其主要自然病理过程，由于多种因素参与致病及病情多样化的特点，因此单一的治疗方法疗效不佳。研究发现氧化应激与干眼的发生密切相关，互为因果。当泪膜稳定性下降时，氧化应激系统产生的活性氧分子可损伤眼表神经髓鞘和破坏泪膜脂质层稳态，从而诱发或加重眼表的炎症反应。抗氧化疗法旨在靶向干眼发病的关键因素，阻断干眼炎症反应各环节的恶性循环，缓解患者的病情。目前，国际上的抗干眼创新药物研究已逐渐聚焦于抗炎、抗氧化药物的研发，且在靶向氧化应激生物标志物、线粒体靶向药物、黏液素分泌促进剂、糖蛋白硒和乳铁蛋白等抗氧化酶以及多功能纳米制剂等方面取得了一定进展，其中基于纳米材料开发的抗氧化滴眼液具有更好的优势，预测抗氧化治疗是干眼临床研究的未来方向之一。眼科医师和研究者应充分认识和关注干眼抗氧化治疗的研究进展及其新药的研发，并积极参与相关研究。

目的:观察Apelin-13对高铁环境中骨骼肌细胞C2C12细胞铁死亡的影响并探讨其可能的机制。方法:C2C12细胞培养在改良Eagle培养基(DMEM)中，实验分为对照组、柠檬酸铁胺(FAC)组、Apelin-13组、Apelin-13+FAC组、铁死亡诱导剂RSL3组和Apelin-13+FAC+RSL3组。细胞活力采用二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测；采用比色法检测细胞内总铁离子和二价铁离子浓度，酶联免疫法检测细胞中谷胱甘肽(GSH)水平，可见分光光度法检测细胞中丙二醛(MDA)水平，化学荧光法检测细胞内活性氧(ROS)水平；透射电镜检测C2C12细胞超微结构。蛋白质印迹分析检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX-4)、铁蛋白重链-1(FTH-1)、血红素加氧酶(HO)-1和核因子E2相关因子-2(Nrf-2)蛋白的表达水平。结果:与FAC组比较，FAC+Apelin-13组细胞活力显著增加(光密度值0.52±0.06比0.28±0.04， t＝7.837、 P＝0.007)，细胞中GSH的浓度显著增加[(2.41±0.35)μmol/g Pro比(0.91±0.12)μmol/g Pro， t＝9.778， P＝0.003]，细胞中ROS[(22.06±5.79)a.u./mg Pro比(52.71±7.28)a.u./mg Pro， t＝8.064， P＝0.006]、MDA[(4.63±0.51)mmol/mg Pro比(9.11±0.84)mmol/mg Pro， t＝8.642， P＝0.006]、总铁离子[(1.53±0.24)μmol/g Pro比(3.17±0.55)μmol/g Pro， t＝6.135、 P＝0.013]和二价铁离子[(0.75±0.08)μmol/g Pro比(1.94±0.36)μmol/g Pro， t＝5.068、 P＝0.027]的水平降低，细胞内铁沉积明显减少。对照组和Apelin-13组线粒体结构清晰，形态正常；FAC组细胞内线粒体出现膜密度增加，膜皱缩及破裂，线粒体内部存在空泡变性，出现明显线粒体损伤，符合铁死亡的形态学特征；与FAC组比较，FAC+Apelin-13组内线粒体损伤情况明显改善。与FAC+Apelin-13组比较，FAC+Apelin-13+RSL3组细胞活力显著降低(光密度值0.23±0.04比0.48±0.06， t＝7.642、 P＝0.007)。与FAC组比较，FAC+Apelin-13组细胞中GPX-4(相对表达水平0.96±0.14比0.31±0.07， t＝7.712、 P＝0.008)和FTH-1(相对表达水平0.57±0.08比0.27±0.05， t＝6.944、 P＝0.011)蛋白的表达水平显著上调，Nrf-2在C2C12细胞核中的表达(相对表达水平0.42±0.04比0.19±0.05， t＝7.114、 P＝0.008)及Nrf-2在细胞核中表达与Nrf-2总蛋白表达水平的百分比[(58.36±5.24)%比(36.58±5.32)%， t＝5.858、 P＝0.015]以及HO-1的蛋白表达水平(相对表达水平0.49±0.07比0.28±0.05， t＝6.472、 P＝0.012)均显著升高。 结论:Apelin-13抑制了高铁环境诱导的C2C12细胞铁死亡，其机制可能涉及到Nrf-2/HO-1信号通路。

目的:观察盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的脓毒症小鼠肝损伤时不同途径铁死亡的发生，探讨线粒体乙醛脱氢酶2（ALDH2）是否通过抑制铁死亡减轻脓毒症肝损伤。方法:选取60只8周龄雄性C57BL/6J小鼠，按随机数字表法分为假手术（Sham)组、CLP组、铁死亡抑制剂铁抑素-1（Fer-1）组、ALDH2特异性激动剂Alda-1组、铁螯合剂右雷佐生（DXZ）组、二甲基亚砜（DMSO）组，每组10只。采用CLP法建立小鼠脓毒症肝损伤模型；Sham组仅开腹不结扎和穿刺盲肠。DMSO组、Fer-1组、DXZ组和Alda-1组分别于CLP术前1 h腹腔注射10 mL/kg 5% DMSO、5 mg/kg Fer-1、50 mg/kg DXZ和10 mg/kg Alda-1。术后24 h，麻醉小鼠取眼球血及肝组织。苏木素-伊红（HE）染色，镜下观察肝脏结构和炎症浸润情况；检测各组血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平及肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、活性氧（ROS）水平；蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测肝组织ALDH2、铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、铁死亡抑制蛋白1（FSP1）和转铁蛋白受体1（TFR1）的蛋白表达。结果:与Sham组相比，CLP组小鼠术后24 h肝脏可见不同程度淤血、肝细胞排列紊乱及炎症细胞浸润；与CLP组相比，Fer-1组、DXZ组和Alda-1组小鼠肝脏形态学有改善，损伤减轻，炎症细胞浸润减少。与Sham组相比，CLP组血清ALT、AST水平及肝组织MDA、ROS含量和TFR1蛋白表达显著升高，肝组织SOD活性及ALDH2、GPX4和FSP1蛋白表达显著降低。与CLP组相比，Fer-1组、DXZ组和Alda-1组血清ALT、AST水平显著降低〔ALT（U/L）：45.76±10.81、37.30±2.98、36.40±12.75比73.06±12.20，AST（U/L）：61.57±2.69、52.41±6.92、56.05±8.29比81.59±5.46，均 P<0.05〕，肝组织MDA、ROS含量及TFR1蛋白表达显著降低〔MDA（μmol/L）：0.60±0.10、0.57±0.18、0.83±0.39比1.61±0.30，ROS（荧光强度）：270.34±9.64、276.02±62.33、262.05±18.55比455.38±36.07，TFR1/GAPDH：0.90±0.04、1.01±0.09、0.55±0.08比1.18±0.06，均 P<0.05〕，肝组织SOD活性及ALDH2、GPX4、FSP1蛋白表达显著升高〔SOD（kU/g）：88.77±8.20、88.37±4.47、93.43±7.24比50.27±3.57，ALDH2/GAPDH：1.10±0.15、1.02±0.07、1.14±0.07比0.70±0.04，GPX4/GAPDH：1.02±0.12、0.99±0.08、1.05±0.19比0.71±0.10，FSP1/GAPDH：1.06±0.24、1.02±0.08、0.93±0.09比0.66±0.03，均 P<0.05〕。DMSO组各指标与CLP组差异无统计学意义。 结论:GPX4和FSP1介导的铁死亡均参与脓毒症小鼠肝损伤，激动ALDH2、抑制铁死亡可减轻肝损伤，ALDH2可能通过调控GPX4和FSP1介导的铁死亡发挥保护作用。