目的 构建含miR-155的人绒毛膜滋养层细胞来源外泌体,探讨miR-155通过外泌体携带对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖及成管能力的影响.方法 2023年1月至2023年4月于西安市人民医院(西安市第四医院)收集人体正常早孕流产绒毛组织进行人绒毛膜滋养层细胞原代培养,并提取、收集细胞上清中的外泌体;通过透射电镜、纳米粒子追踪分析(NTA)、Western-blot鉴定外泌体;通过药载技术构建含miR-155模拟物(Exo-miR-155 mimics)、抑制物(Exo-miR-155 inhibitor)以及对照物(Exo-NC)的外泌体;q-PCR检测外泌体中miR-155表达;将构建好的外泌体分别与HUVECs共孵育,荧光显微镜检测外泌体摄入情况;CCK-8、成管实验检测摄取外泌体后各组HUVECs细胞增殖、成管能力;q-PCR、Western-blot检测HUVECs中CYR61、VEGF表达水平.结果 分离培养的人绒毛膜滋养层细胞能够显著表达CK-7;人绒毛膜滋养层细胞培养液中提取的外泌体具有典型的形态、粒径并表达外泌体特征性蛋白CD9、CD63;载入外泌体中的miR-155表达与抑制效果显著;与摄取Exo-NC后的HUVECs相比,摄取Exo-miR-155 mimics后的HUVECs增殖与成管能力均下降;且细胞中CYR61 mRNA、VEGF mRNA及蛋白表达水平均降低.结论 miR-155可通过滋养层细胞来源外泌体的携带影响HUVECs增殖及成管能力,以及细胞中血管形成相关蛋白CYR61、VEGF的表达,进而与PE时胎盘功能建立异常和母体全身血管内皮细胞功能障碍相关.

人类白细胞抗原-G（human leucocyte antigen G，HLA-G）作为非经典的主要组织相容性复合物Ⅰ类分子，在母-胎界面的绒毛膜外滋养层细胞上特异性表达。妊娠期间，胎儿同种异源的绒毛膜外滋养细胞侵入子宫黏膜，却免于母体来源的免疫细胞攻击，其中HLA-G起到极其关键的作用。关于HLA-G在母-胎界面特殊调控方式的研究，特别是与各类免疫细胞及膜表面受体作用的分子机制，引起学者的广泛关注。本文将着重对HLA-G在母-胎界面的表达、调节及与相关免疫细胞作用机制进行综述。

目的:探讨胚胎植入前遗传学检测（preimplantation genetic testing，PGT）中滋养外胚层细胞活检对冻融胚胎移植后妊娠早期血清β-人绒毛膜促性腺激素（β-human chorionic gonadotropin，β-hCG）水平及围产期结局的影响。方法:回顾性队列研究分析2017年1月至2021年12月期间于郑州大学第三附属医院生殖中心行冻融胚胎移植患者的临床资料，根据患者助孕方式分为两组：PGT组308例和卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）组802例。经1∶2倾向评分匹配后，得到PGT组300例和ICSI组571例。比较匹配前后两组患者一般资料、胚胎移植后第14天血清β-hCG水平及围产期结局，采用多因素线性回归校正混杂因素后，分析滋养外胚层细胞活检对冻胚移植后妊娠早期血清β-hCG水平及围产期结局的影响。结果:匹配前PGT组女方年龄［（31.2±4.1）岁］明显高于ICSI组［（30.4±4.3）岁， P=0.007］，PGT组抗苗勒管激素水平［（4.38±3.62）μg/L］及移植日内膜厚度［（9.1±1.6）mm］明显小于ICSI组［（4.87±3.78）μg/L， P=0.049；（9.6±1.6）mm， P<0.001］；匹配后两组患者一般资料差异均无统计学意义（均 P>0.05）。匹配前后两组患者临床妊娠患者、早期流产患者及活产患者的胚胎移植后第14天血清β-hCG水平差异均无统计学意义（均 P>0.05）；匹配前后两组生化妊娠率、临床妊娠率、早期流产率及活产率差异均无统计学意义（均 P>0.05）。经多因素线性回归分析显示，是否行PGT对血清β-hCG水平没有影响（ P=0.494），女方体质量指数及移植囊胚类型对β-hCG水平有影响（均 P<0.001）。两组妊娠期高血压疾病发生率、妊娠期糖尿病发生率、妊娠期甲状腺功能减退发生率、胎膜早破发生率、前置胎盘发生率、剖宫产率、早产率、低出生体质量儿率、巨大儿率、性别比、新生儿出生体质量、新生儿身长与新生儿出生缺陷率差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:冻融胚胎移植前行滋养外胚层细胞活检不影响妊娠早期血清β-hCG水平，PGT不增加母婴不良并发症发生风险。

目的:研究子痫前期（PE）产妇胎盘组织中长链非编码RNA（lncRNA）的差异表达及其中之一MIR210HG对绒毛膜滋养层细胞系HTR8/SVneo细胞生物学特性的影响，并对MIR210HG进行功能分析。方法:选取2018年7月至2019年7月青岛大学附属医院收治的PE产妇39例（PE组）和同期正常妊娠产妇39例（对照组）。（1）采用转录组测序（RNA-seq）技术分析两组产妇胎盘组织中差异表达的lncRNA；实时荧光定量PCR技术方法检测两组产妇胎盘组织中差异表达的lncRNA之一MIR210HG的表达水平，并分析MIR210HG表达水平与收缩压、舒张压和新生儿出生体重的相关性。（2）构建小分子干扰RNA（siRNA），转染HTR8/SVneo细胞以敲低MIR210HG的表达，实验分为两组，即MIR210HG敲低（KD）组（HTR8/SVneo细胞转染siRNA敲低了MIR210HG的表达）和阴性对照（NC）组（HTR8/SVneo细胞转染NC siRNA），采用活细胞计数（CCK-8）法、穿膜小室（transwell小室）体外实验检测两组HTR8/SVneo细胞增殖和迁移能力的变化。（3）采用RNA相互作用百科全书（ENCORI）数据库预测与MIR210HG相互作用的RNA，并采用基因本体（GO）功能注释、京都基因和基因组百科全书（KEGG）和BioCarta通路富集方法对MIR210HG的功能进行分析。结果:（1）RNA-seq技术共检测出显著差异表达的lncRNA 26个，其中表达上调21个、下调5个。MIR210HG在PE组产妇胎盘组织中的表达水平显著高于对照组（分别为9.30 ±1.90、1.10 ±0.20； t=4.425， P<0.01）；MIR210HG的表达水平与收缩压（ r2=0.234， P<0.05）和舒张压（ r2=0.190， P<0.05）均呈线性正相关关系，与新生儿出生体重呈线性负相关关系（ r2=0.157， P<0.05）。（2）与NC组相比，KD组HTR8/SVneo细胞的增殖和迁移能力均显著增强（ P均<0.05）。（3）ENCORI数据库分析共预测出可能与MIR210HG相互作用的RNA 38个。GO功能注释分析显示，MIR210HG可能参与免疫应答分子中介物产生的调控等27条通路的功能；KEGG通路富集显示，MIR210HG可能参与同种异体移植物排斥等8条通路的功能；BioCarta通路富集显示，MIR210HG可能参与翻译起始因子通路等8条通路的功能。 结论:lncRNA MIR210HG在PE产妇的胎盘组织中表达上调，降低MIR210HG的表达水平可促进HTR8/SVneo细胞的增殖和迁移，MIR210HG可能是滋养层细胞生物学行为的调节因子。

目的:探讨妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）并发子痫前期（preeclampsia，PE）孕妇血清和胎盘组织中的miR-142-3p和雌激素受体1（estrogen receptor，ER1）在疾病发生、发展中的意义及调控机制。方法:选择2019年6月至2020年6月在临沂市人民医院产科就诊的198位孕妇作为研究对象，包括66例GDM孕妇（GDM组），60例GDM并发PE孕妇（GDM+PE组）和72例正常孕妇（对照组）。检测临床指标，收集妊娠结局资料；采用定量实时聚合酶联反应法测定研宄对象血清和胎盘组织中miR-142-3p和ER1 mRNA的相对表达量；采用western blot法检测胎盘组织中的ER1蛋白表达水平；使用miR-142-3p对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo处理。结果:GDM+PE组的血清和胎盘组织中miR-142-3p表达量显著低于GDM组和对照组（ P均<0.05）；GDM+PE组的血清和胎盘组织中ER1 mRNA表达量显著高于GDM组和对照组（ P均<0.05）。GDM+PE组孕妇的血清和胎盘组织中miR-142-3p和ER1 mRNA相对表达量存在显著负相关关系（ r=-0.589和-0.643， P=0.006和<0.001）。使用miR-142-3p对HTR-8/SVneo细胞转染后，mimic组的ER1 mRNA表达量为（1.09±0.14），显著低于mimic NC组（2.14±0.52）、inhibitor组（3.69±0.88）和inhibitor NC组（2.26±0.43）的表达量（ P<0.001），而inhibitor组的DNMT1表达量均显著高于其他3组（ P<0.001）。 结论:GDM并发PE患者miR-142-3p水平降低，调控ER1水平上升，参与到疾病的发生、发展中。

目的:探讨硫氧还蛋白结合蛋白（thioredoxin-interacting protein，TXNIP）/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLR family pyrin domain containing 3，NLRP3）通路在妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）患者胎盘组织中的表达及其在胎盘滋养层细胞迁移和侵袭中的作用。方法:收集25例GDM孕妇（GDM组）和25例糖耐量正常孕妇（正常组）的胎盘组织，将体外培养的人绒毛膜滋养层细胞分为对照组（未转染）、siNC组（转染阴性对照）、siTXNIP组（转染siRNA-TXNIP）、siTXNIP+pcDNA组（共转染siRNA-TXNIP和pcDNA3.1空载体质粒）和siTXNIP+NLRP3组（共转染siRNA-TXNIP和pcDNA3.1-Flag-NLRP3过表达质粒），采用实时荧光定量PCR检测TXNIP和NLRP3 mRNA表达水平，免疫印迹法检测TXNIP和NLRP3蛋白表达水平，噻唑蓝法检测细胞活力，划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell小室实验检测细胞侵袭。结果:与正常组比较，GDM组患者胎盘组织中TXNIP和NLRP3在mRNA和蛋白水平上的表达均明显升高（ P<0.05）；与对照组或siNC组比较，siTXNIP组细胞中TXNIP在mRNA和蛋白水平上的表达明显降低，而细胞活力和迁移率均明显升高，且穿膜细胞数明显增多（ P<0.05）；而siNC组和对照组比较，上述各指标差异均无统计学意义（ P>0.05）；与siTXNIP组或siTXNIP+pcDNA组比较，siTXNIP+NLRP3组细胞中NLRP3在mRNA和蛋白水平上的表达明显升高，而细胞活力和迁移率均明显降低，且穿膜细胞数明显减少（ P<0.05）；但siTXNIP+pcDNA组和siTXNIP组之间差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:TXNIP/NLRP3通路与GDM发生发展密切相关，TXNIP可通过激活NLRP3抑制胎盘滋养层细胞迁移侵袭。

目的:观察长链非编码RNA（lncRNA）钾电压门控通道亚家族Q成员1反向转录物1（KCNQ1OT1）和微小RNA（miR）-146a-3p在子痫前期（PE）胎盘组织中的表达，并初步探索两者相互调控后对滋养细胞生物学特性的影响及作用机制。方法:（1）选择2017年7月—2018年7月在海南省人民医院住院的PE孕妇45例为PE组，选择同期正常孕妇55例为对照组，采用实时荧光定量PCR技术检测两组胎盘组织中KCNQ1OT1 mRNA、miR-146a-3p的表达，并分析两者的相关性。（2）采用绒毛膜滋养细胞层细胞系HTR8/SVneo细胞，先分为空白对照组和脂多糖（LPS）组，经LPS处理24 h的HTR8/SVneo细胞再进一步分为短发夹状RNA（sh）-KCNQ1OT1组（即沉默KCNQ1OT1的表达）、miR-146a-3p抑制物（inhibitor）组和sh-KCNQ1OT1+miR-146a-3p inhibitor组，共5组。应用生物信息学软件预测KCNQ1OT1和miR-146a-3p的靶向关系，并采用双荧光素酶报告基因实验加以验证；分别采用活细胞计数（CCK-8）法、划痕实验、穿膜（transwell）小室实验检测HTR8/SVneo细胞的增殖、迁移、侵袭能力，实时荧光定量PCR技术检测细胞中KCNQ1OT1 mRNA、miR-146a-3p的表达，蛋白印迹（western blot）法检测细胞中趋化因子12（CXCL12）和趋化因子受体4（CXCR4）蛋白的表达。结果:（1）PE组胎盘组织中KCNQ1OT1 mRNA的表达水平低于对照组（分别为0.23±0.03、0.51±0.04），miR-146a-3p的表达水平高于对照组（分别为0.49±0.03、0.31±0.03），两组分别比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；PE组胎盘组织中KCNQ1OT1 mRNA的表达水平与miR-146a-3p的表达水平呈负相关（ r=-0.79， P=0.031）。（2）生物信息学软件预测并经双荧光素酶报告基因实验验证显示，KCNQ1OT1与miR-146a-3p存在靶向关系。与空白对照组相比，LPS组细胞中KCNQ1OT1 mRNA的表达水平下降（分别为0.91±0.03、0.35±0.03），miR-146a-3p的表达水平升高（分别为0.22±0.03、0.63±0.04），细胞的增殖、侵袭、迁移能力及CXCL12、CXCR4蛋白的表达均下降，分别比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；sh-KCNQ1OT1组细胞中KCNQ1OT1 mRNA的表达水平（0.23±0.03）进一步下降，miR-146a-3p的表达水平（0.85±0.03）进一步上升，细胞的增殖、侵袭、迁移能力及CXCL12、CXCR4蛋白的表达均进一步下降，分别比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）；而miR-146a-3p inhibitor组、sh-KCNQ1OT1+miR-146a-3p inhibitor组分别与sh-KCNQ1OT1组比较，KCNQ1OT1 mRNA的表达水平（分别为0.78±0.04、0.50±0.03）升高，miR-146a-3p的表达水平（分别为0.42±0.03、0.46±0.03）下降，细胞的增殖、侵袭、迁移能力及CXCL12、CXCR4蛋白的表达均增高，分别比较，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:KCNQ1OT1负调控miR-146a-3p的表达，激活CXCL12/CXCR4信号通路后，可促进滋养细胞的增殖、迁移和侵袭，可能参与了PE的发病。

本文报道1例胆总管腺癌伴卵黄囊瘤和绒毛膜癌分化的病例。患者女，52岁。胆总管肿瘤根治标本，肿瘤大部分区域呈管状、乳头状、筛状、微囊性结构，偶见Schiller-Duval小体，细胞呈柱状、立方状，细胞质透明，内含有嗜酸性小体，部分区域呈滋养层细胞形态，诊断胆总管腺癌伴卵黄囊瘤和绒毛膜癌分化。免疫组织化学肿瘤成分均表达细胞角蛋白（CK）7、CK18、CK19，部分表达CK20、CD10、CDX2；p53弥漫强阳性，MSH2、MSH6、MLH1、PMS2均阳性。卵黄囊瘤成分部分表达SALL4、Glypican3，灶性表达甲胎蛋白。绒毛膜癌成分弥漫表达SALL4、人绒毛膜促性腺激素（HCG）。二代测序显示TP53、SMARCA4、U2AF1基因的突变，CDKN2A基因拷贝数缺失，微卫星稳定。术后短期肿瘤进展并伴有肝、肺转移，血清HCG水平显著增高（>12 000 IU/L），肝转移肿瘤穿刺结果为绒毛膜癌，患者术后随访7个月，化疗7个周期，生存。

妊娠的建立依赖于胚胎的胎盘绒毛膜外细胞滋养细胞合适的侵袭、母胎间的血管重铸及母胎免疫耐受。近年来，特洛细胞（telocytes，TCs）作为一种新型的间质细胞被广泛报道，它可与同种细胞或其他类型细胞相互连接，参与组织再生和修复过程、信号转导、肌肉收缩协调的起搏、分泌功能和局部微环境的免疫调节、免疫监测，从而形成复杂的三维网络，发挥重要的作用。其中它在妊娠及相关疾病中的研究也是热点之一。本文通过对TCs在妊娠中的作用及可能机制进行综述，为探究TCs在胚胎着床及妊娠维持中的作用提供更多依据。

目的:研究不同妊娠时期Mas1受体在健康孕妇胎盘中的表达变化，分析Mas1受体在子痫前期（PE）患者胎盘中的表达水平，及在滋养层细胞中的生物学功能。方法:收集孕早期、孕中期、孕晚期正常孕妇胎盘绒毛组织，并从孕早期绒毛组织中分离培养人滋养层干细胞，通过免疫荧光化学和实时荧光定量PCR检测不同妊娠时期胎盘中Mas1受体表达情况；采用病例对照研究方法，选择足孕PE患者作为病例组，同期健康足孕产妇为对照组，收集两组产妇胎盘绒毛组织，利用免疫荧光化学和免疫蛋白印迹，研究PE时Mas1受体表达变化；采用HTR8/Svneo和BeWo细胞，Mas1受体激动剂和阻断剂干预，通过CCK8增殖实验和划痕实验检测Mas1受体对滋养层细胞增殖和迁移功能的影响。结果:孕早期纳入8例，孕中期纳入7例，孕晚期纳入6例，正常胎盘绒毛组织中Mas1受体主要表达于人滋养层干细胞膜和胞质，且绒毛组织中Mas1受体m RNA孕晚期表达量明显高于孕中期；病例组纳入24例，对照组纳入12例。与对照组相比病例组胎盘绒毛中Mas1受体表达显著降低；激活/抑制Mas1受体对HTR8/Svneo细胞和BeWo细胞增殖活性无影响；激活Mas1受体对HTR8/Svneo细胞迁移能力无影响。结论:Mas1受体在胎盘绒毛组织中存在表达且表达量随孕期发生变化，子痫前期患者Mas1受体表达减少，但其不影响滋养层细胞的增值和迁移功能。