目的:探讨 68Ga－环( L－精氨酰甘氨酸－ L－α－天冬氨酰－ D－酪氨酸－N6－(((4，7－双(羧甲基)－1，4，7－三唑－1－基)乙酰基))－ L－赖氨酸)(NODAGA－RGD)PET/CT评估酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗远处转移性分化型甲状腺癌(dmDTC)短期疗效的临床应用价值。 方法:回顾性收集2019年10月至2023年3月间南京市第一医院收治的13例dmDTC患者[男5例、女8例，年龄68(65，69)岁]，其中9例临床证实为放射性碘难治性分化型甲状腺癌(RAIR－DTC)、4例为存在远处转移且未行常规放射性碘治疗的分化型甲状腺癌。所有患者行 68Ga－NODAGA－RGD PET/CT评估靶病灶(TL)新生血管情况，记录SUV max及靶本底比值(T/B)，予TKI治疗(安罗替尼治疗9例、阿帕替尼治疗4例)后3个月，观察TL最大径变化率及甲状腺球蛋白(Tg)变化率。对SUV max及T/B与TL最大径变化率行Spearman秩相关分析，对T/B与TKI治疗有效性(TL最大径变化率≤－30%)行ROC曲线分析，病灶缓解率的比较采用Fisher确切概率法。 结果:68Ga－NODAGA－RGD显像示，13例患者的36个TL的SUV max为5.44(3.43，7.56)，T/B为5.25(4.50，7.23)；TKI治疗后3个月，TL最大径变化率为－30%(－39%，－21%)，Tg变化率为－68%(－96%，－52%)，T/B与TL最大径变化率呈负相关( rs＝－0.46， P＝0.005)，SUV max与TL最大径变化率无相关性( rs＝0.03， P＝0.883)。ROC曲线分析表明，T/B的最佳界值为4.95，AUC为0.698，灵敏度为87.5%，特异性为60.0%；相较于T/B<4.95的病灶，T/B≥4.95的病灶缓解率更高[2/14和63.6%(14/22)； P＝0.006]。TKI治疗后3个月，13例患者的疾病控制率(DCR)高达12/13。 结论:68Ga－NODAGA－RGD PET/CT可有效反映肿瘤新生血管情况，早期预测TKI疗效，为dmDTC患者TKI治疗提供有力的影像证据。

目的:利用核磁共振波谱技术（NMR）检测遗传代谢病患者尿液中代谢产物的种类及含量变化，探讨NMR技术在遗传代谢病诊断中的应用价值。方法:收集2019年3至6月上海交通大学医学院附属新华医院确诊的20例遗传代谢病患者尿液样本，其中包括甲基丙二酸血症（MMA）9例。利用NMR脉冲宽度定量法和气相色谱质谱（GC/MS）半定量法测定遗传代谢病患者尿中代谢物的成分，分析2种方法中异常代谢物的水平。结果:NMR技术可检测MMA、异戊酸血症、戊二酸血症、丙酸血症、3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症、鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症、希特林蛋白缺乏症、Canavan病、酪氨酸血症、赖氨酸尿蛋白不耐受症患者尿中特征性代谢物水平显著升高，平均为参考值区间上限值的8倍，最高可达545倍。相较于GC/MS，NMR技术可检测数量更多的待测物，包括有机酸、氨基酸、糖类等。在9例治疗前MMA患者中，NMR法甲基丙二酸和3-羟基丙酸水平［1 800（180~12 000）和50（0~270）mmol/mol Cr］均明显高于参考值（0~31、0~35）；GC/MS法甲基丙二酸和甲基枸橼酸水平［136.56（43.79~518.67）和4.87（1.52~7.52）］均明显高于参考值（0~4、0~0.7）。结论:NMR和GC/MS技术对有机酸血症的诊断均具有特异性，GC/MS技术检测的主要物质是有机酸，NMR技术可突破这种限制，检测尿液中多种代谢物水平。

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)核旁斑组装转录本1(NEAT1)通过调节细胞焦亡调控人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成骨分化的作用.方法 培养hBMSCs 7 d诱导细胞成骨分化,并分为对照组(常规培养)、成骨分化组(成骨分化诱导)、pcD-NEAT1组(转染NEAT1过表达质粒)、pcD-null组(转染NEAT1过表达质粒阴性对照)、成骨分化+CML组[成骨分化诱导联合NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)炎性小体激活剂(Nε)-羧甲基赖氨酸(CML)处理]、成骨分化+CML+pcD-NEAT1组(成骨分化诱导联合pcD-NEAT1与CML处理).经茜素红染色检测细胞矿化程度;碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒检测ALP活性;CCK-8检测各组细胞存活率,高倍镜下观察细胞形态变化.TUNEL实验检测细胞凋亡率.qRT-PCR检测NEAT1的表达.Western blot检测IL-1β、IL-18、NLRP3、cleaved-caspase 1(cleaved-CASP1)、gasdermin D、Runt-相关转录因子2(RUNX2)、ALP、骨桥蛋白(OPN)的表达.结果 与对照组比较,成骨分化组细胞的矿化程度增加,ALP活性升高(P<0.05),NEAT1和RUNX2、ALP、OPN蛋白表达均上调(P<0.05).与pcD-null组比较,pcD-NEAT1组细胞的矿化程度增加,ALP活性升高(P<0.05),NEAT1和RUNX2、ALP、OPN蛋白表达均上调(P<0.05).与成骨分化组比较,成骨分化+CML组细胞矿化程度减轻,ALP活性降低(P<0.05),细胞存活率降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05),细胞膜出现破裂,细胞膨大变形,NLRP3 和IL-1β、IL-18、cleaved-CASP1、gasdermin D蛋白表达均显著上调(P<0.05),而RUNX2、ALP、OPN蛋白表达均显著下调(P<0.05).与成骨分化+CML组比较,成骨分化+CML+pcD-NEAT1组细胞矿化程度增加,ALP活性升高(P<0.05),RUNX2、ALP、OPN蛋白表达均显著上调(P<0.05),细胞存活率增加(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),细胞膜较完整且细胞形态正常,NLRP3和IL-1β、IL-18、cleaved-CASP1、gasdermin D蛋白表达均显著下调(P<0.05).结论 NEAT1过表达通过抑制NLRP3炎性小体介导的细胞焦亡促进hBMSCs的成骨分化.

目的 探讨ε-羧甲基赖氨酸(CML)、可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)、内源性可溶性晚期糖基化终产物受体(esRAGE)对冠心病动脉粥样硬化的诊断价值.方法 2020年6月至2022年12月,于新疆维吾尔自治区人民医院选取冠心病患者100例作为观察组.同时选取100例在我院体检的正常人作为对照组.比较两组e-羧甲基赖氨酸(CML)、可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)和内源性分泌性晚期糖基化终产物受体(esRAGE)水平.应用受试者操作者特征(ROC)曲线评价CML、sRAGE、esRAGE的诊断水平,并联合检测冠心病动脉粥样硬化.结果 与对照组相比,观察组血清CML及sRAGE水平明显升高,而esRAGE水平呈下降趋势.血清CML、sRAGE和esRAGE可准确诊断冠心病动脉粥样硬化,联合检测灵敏度(90.91％)、特异性(68.66％)、准确性(76.00％)、阳性预测值(58.82％)、阴性预测值(93.88％)、ROC曲线下面积(AUC)(0.922)较高.结论 CML、sRAGE、esRAGE与冠心病动脉粥样硬化有关,有利于临床诊断和治疗.

基于糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)/酪氨酸激酶 1(janus activated kinase 1,JAK1)/信号转导和转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)信号通路探讨红景天苷对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠肾损伤的保护作用.采用高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立小鼠DN模型,随机分为正常组、模型组、红景天苷低剂量(20 mg·kg-1)组、红景天苷高剂量(100 mg·kg-1)组、二甲双胍(140 mg·kg-1)组,每组12只.造模成功后每日灌胃相应药物或溶剂1次,持续10周,每2周测定体质量、日饮水量,检测空腹血糖(fasting blood glucose,FBG).末次给药结束后,进行口服糖耐量测试,收集24 h尿液、血清及肾组织样本.采用生化法检测 24 h 尿蛋白(24 hours urinary total protein,24 h-UTP),血清肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平;过碘酸雪夫(periodic acid-Schiff,PAS)染色观察肾组织病理形态变化;免疫组织化学染色检测肾脏α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、波形蛋白(vimentin)、糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)表达;试剂盒检测肾组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)活力以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清 AGEs、羧乙基赖氨酸(carboxyethyllysine,CEL)、羧甲基赖氨酸(carboxymethyllysine,CML)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织RAGE蛋白表达以及JAK1、STAT3蛋白的磷酸化水平.结果显示,与正常组比较,模型组小鼠FBG,血糖曲线下面积(area under the curve of glucose,AUCG),饮水量,肾脏指数,24 h-UTP,肾小管损伤评分,肾小球细胞外基质占比,血清中Scr、BUN、TG、LDL-C、AGEs、CEL、CML水平,肾组织中MDA含量,α-SMA、vimentin、AGEs、RAGE蛋白表达及JAK1、STAT3蛋白的磷酸化水平显著增加(P＜0.01);血清HDL-C水平,肾组织SOD、CAT、GSH-PX活力显著降低(P＜0.01).与模型组比较,红景天苷高剂量组小鼠上述指标变化均显著逆转(P＜0.05或P＜0.01).该研究表明,红景天苷可通过抑制AGEs介导的RAGE/JAK1/STAT3信号轴活性减轻氧化应激反应和肾脏纤维化,发挥治疗DN的作用.

目的 通过全外显子测序检测和分析乙酸甲酯中毒患者易感基因.方法 采用判断抽样方法,选择2例职业性急性重度乙酸甲酯中毒患者及与其处于同一工种、同一工位、工作时间相似的直系亲属各1人作为研究对象,采集周围静脉血进行全外显子测序;将测序数据与公共基因组数据库进行对比以筛选变异位点,找出与乙酸甲酯中毒相关的基因位点,进行可疑致病突变基因注释与解读.结果 全外显子测序结果显示,乙酸甲酯中毒患者与直系亲属对照间存在40个差异基因,包括80个单核苷酸多态性与8个插入缺失标记;其中,关联性较强的基因为羧酸酯酶1(CES1)和黏蛋白(MUC)5B.乙酸甲酯中毒患者CES1的基因位点发生c.248C>T(p.Ser83Leu)杂合突变,MUC5B的基因位点发生c.6635C>T(p.Thr2212Met)和c.7685C>T(p.Thr2562Met)的杂合突变,均为错义突变.经构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,获得证据等级较高的11对交互作用,所涉及的基因包括赖氨酸甲基转移酶2C、含E3泛素蛋白连接酶2的HECT和RLD结构域、中性粒细胞胞质因子1、还原型烟酰胺腺嘌二核苷酸磷酸氧化酶3、C末端结合蛋白2、锌指蛋白717、FSHD区域基因2家族成员C、FSHD区域基因1、MUC4、MUC6、MUC5B和MUC12.结论 乙酸甲酯中毒患者基因位点CES1与MUC5B基因多态性可能与乙酸甲酯中毒的发生发展机制存在联系.

目的 观察氢氧化镧(LH)对大鼠慢性肾功能衰竭高磷血症的治疗作用,并探讨其作用机制.方法 将30只Wistar大鼠按随机数字表分为5组各6只,对照组不制备慢性肾功能衰竭高磷血症模型,模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组制备慢性肾功能衰竭高磷血症模型,制模后低剂量组、中剂量组、高剂量组分别灌胃给予0.1、0.2、0.4 g/kg的LH,共8周;模型组和对照组不予处理.采用钙(Ca)、磷(PI)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)试剂盒检测各组血清Ca、PI、Scr、BUN,苏木精—伊红(HE)、马松三色(Masson's)染色法检测肾脏组织病理变化;另利用液相色谱质谱联用仪(LC-MS)检测对照组、模型组及低、中、高剂量组肾功能差异代谢物,并分析肾功能差异代谢物GO功能、KEGG富集.结果 给药8周后,与模型组相比,给予LH各剂量组治疗后慢性肾功能衰竭高磷血症大鼠血清PI、Scr、BUN水平降低,肾损伤、肾小管囊性扩张、炎症细胞浸润得到改善,肾小管囊性扩张、炎症细胞浸润以及纤维化程度减轻,肾损伤得到延缓,且呈剂量依赖性(P均<0.05).代偿性上调的肾功能差异代谢物分别是D-丙氨酰-D-丙氨酸、6-叔丁基磺酸、氨基二环二羧酸、1D-肌醇等;代偿性下调的肾功能差异代谢物分别是DL-瓜氨酸、2,3-前列腺素、鸟氨酸、2-磺氧基甲基、对羧基苯磺酰胺等.这些肾功能差异代谢物富集到的代谢通路有尿素循环、精氨酸和脯氨酸代谢、磷酸戊糖途径、赖氨酸降解、苹果酸-天冬氨酸循环、天冬氨酸代谢、丙氨酸代谢等.结论 LH对大鼠慢性肾功能衰竭高磷血症有治疗作用,且高剂量LH最为显著,LH可能通过尿素循环、精氨酸代谢等途径来发挥治疗作用.

目的:探究赛艇测功仪2000 m全力划过程中不同分段的血液代谢组学特征,分析不同分段与供能相关的潜在生物标志物.方法:选取12名男子赛艇运动员(一级运动员)在4天内依次进行赛艇测功仪2000 m全力划及过程中500、1000和1500 m模拟划测试,采集测试前安静状态和每次运动后即刻的肘静脉血样(分别标记为A、B、C、D和E组),基于高效化学同位素标记-液质联用(LC-MS)代谢组学技术进行分析.采用IsoMS Pro 1.2.15软件进行多元统计分析(PCA、PLS-DA)和火山图分析遴选出差异代谢物.差异代谢物通过MetaboAnalyst 5.0平台进行层次聚类分析,并结合Nova MT代谢组学数据库与HMDB在线数据库来注释潜在生物标志物和评估它们的生物学作用.结果:与A组(安静)相比,C组(500 m)运动后即刻的L-赖氨酸、鸟氨酸、丝氨酸、甘氨酸、4-羟脯氨酸和胱氨酸显著减少(P<0.01),N-甲基-L-谷氨酸、泛酸、对羟基苯乙酰甘氨酸、肌酐和腺嘌呤显著增加(P<0.01);与C组(500 m)相比,D组(1000 m)运动后即刻的4-羟脯氨酸、甘氨酸、四氢嘧啶、L-缬氨酸和5-氨基戊酸显著减少(P<0.01),泛酸、抗坏血酸、对羟基苯乙酰甘氨酸、次黄嘌呤、磷酸乙醇胺、3-亚砜-L-丙氨酸、N-甲基-L-谷氨酸、胱氨酸、高香草酸和腺嘌呤显著增加(P<0.01);与D组(1000 m)相比,E组(1500 m)运动后即刻的吲哚-3-羧酸显著减少(P<0.01),次黄嘌呤和抗坏血酸显著增加(P<0.01);与E组(1500 m)相比,B组(2000 m)运动后即刻的茶碱显著减少(P<0.01),4-羟脯氨酸、甘氨酸、次黄嘌呤、抗坏血酸、氨基己二酸和甲硫氨酸显著增加(P<0.01).结论:有氧代谢、无氧代谢和氧化应激相关的差异代谢物显著影响赛艇测功仪2000 m全力划过程中不同分段的供能和运动表现,其中,泛酸、N-甲基-L-谷氨酸、腺嘌呤和次黄嘌呤等无氧代谢产物在0～500 m分段或1500～2000 m分段发生显著变化,可作为鉴别赛艇运动员无氧供能的潜在生物标志物.

目的 建立面包中两种典型晚期糖基化终末产物(AGEs)的超高效液相色谱-串联质谱检测方法.方法 以结合型羧甲基赖氨酸(CML)和羧乙基赖氨酸(CEL)为检测对象,面包样品经还原孵育、蛋白沉淀、加同位素内标、酸水解、氮吹、九氟戊酸水溶液复溶后,多反应监测定性及定量分析.结果 方法的检出限CML为4.5ng/g,CEL为0.5 ng/g;定量限CML为20 ng/g,CEL为2 ng/g;CML加标回收率为89.62％～95.65％,CEL的加标回收率为86.38％～97.17％;标准曲线线性范围为CML 2.5～800 ng/mL和CEL 0.25～80 ng/mL,决定系数均大于0.999.结论 该方法准确且灵敏,能够满足面包中AGEs的检测需求.

目的 探讨清道夫受体CD36在羧甲基赖氨酸(CML)抑制泡沫细胞迁徙中的作用.方法 (1)首先观察CML对RAW264.7巨噬细胞脂质蓄积和细胞迁移的影响,继之观察泡沫细胞中CML与CD36的相互作用,实验分为:对照组、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)组(40 mg/L ox-LDL)、CML组(40 mg/L ox-LDL+10 μmol/L CML);(2)观察CD36在CML抑制泡沫细胞迁移中的作用.实验分两部分:首先观察CD36抑制剂SSO对RAW264.7泡沫细胞迁移的影响,分对照组(40 mg/L ox-LDL+ 10 μmol/L CML)和SSO组(40 mg/L ox-LDL+ 10μmol/L CML+25μmol/L SSO);其次观察不同受体阻断对CML抑制泡沫细胞迁移的影响,分对照组(40 mg/L ox-LDL+10 μmol/L CML),anti-CD36组(40 mg/L ox-LDL+10 μmol/L CML+2μmol/L anti-CD36),anti-RAGE组(40 mg/Lox-LDL+ 10 μmol/L CML+2μmol/L anti-RAGE),malBSA组(40 mg/L ox-LDL+ 10 μmol/L CML+ 400 nmol/LmalBSA).连续24 h 1％BSA的培养基培养干预后进行相关检测(油红0染色、Transwell细胞迁移实验、免疫共沉淀实验、CD36免疫荧光染色等).结果 胆固醇氧化酶法定量及油红0染色定性显示CML可以有效促进RAW264.7巨噬细胞脂滴的蓄积并形成动脉粥样硬化斑块的关键组分泡沫细胞.Transwell细胞迁移实验和定量分析结果显示:与对照组相比,ox-LDL组中迁移泡沫细胞数减少43.5％(P＜0.05);与ox-LDL组相比,CML使泡沫细胞迁移数目减少49.2％ (0.287±0.031比0.565±0.061,P＜0.05),表明CML抑制RAW264.7源性泡沫细胞迁移.免疫共沉淀实验及免疫荧光染色结果显示泡沫细胞中CML-CD36存在显著的相互作用.进一步的,用SSO或中和性抗体anti-CD36阻断CD36和清道夫受体抑制剂malBSA阻断所有清道夫受体情况下,迁移的细胞数均较对照组显著增加(P＜0.05).统计学分析显示,anti-CD36组细胞迁移指数为malBSA组的81.3％(2.35±0.39比2.89±0.41,P＜0.05).结论 清道夫受体CD36是CML抑制RAW264.7泡沫细胞迁移的关键受体.