目的:建立和评价基于三氯化铁-聚偏氟乙烯（FeCl 3-PVDF）膜滤器富集自然水体中噬菌体的方法。 方法:基于絮凝浓缩原理，利用铁离子絮凝结合膜过滤器建立从水样中回收噬菌体的方法。利用琼脂双层法测定噬菌体滴度、噬菌体荧光染色观察和实时荧光PCR反应等方法检测噬菌体的回收效率。采集不同来源的水体标本进行模拟实验评价富集效果，同时以医院排出污水作为实际水样，利用临床常见的耐药菌作为宿主指示菌，进一步分析FeCl 3-PVDF膜滤器富集方法对自然实际水样中噬菌体的富集效果。 结果:建立了铁离子浓度50 mg/L，采用PVDF膜滤器富集自然水体中噬菌体的方法。该方法对噬菌体的回收率为93%~100%；在多功能显微镜下观察发现富集后水样的噬菌体明显增多，酶标仪测定富集后水样荧光值约为富集前的13倍；对医院外排水实际水样浓缩处理后，浓缩组和未浓缩组噬菌体的分离阳性率分别为23%和4%，浓缩组荧光值为未浓缩组的2~24倍。结论:FeCl 3-PVDF膜滤器方法可简便、高效快速地富集不同水体样本中噬菌体。

目的:探讨氧化石墨烯-壳聚糖改性的钛酸钡纳米颗粒(BCG-NPs)与聚偏氟乙烯-三氟乙烯(P(VDF-TrFE))复合压电材料对人脐带间充质干细胞(hWJ-MSC)成骨分化的影响.方法:采用滴涂法在钛表面制备BCG-NPs/P(VDF-TrFE)涂层(BCGP-Ti),对其表面形貌、物相组成、亲水性和压电性能进行表征.通过模拟体液浸泡实验检测样本体外矿化的能力.将hWJ-MSC接种在样本表面,采用CCK-8检测细胞活力,细胞骨架染色观察hWJ-MSC铺展情况,碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色分别评估ALP活性和矿化水平,实时荧光定量PCR和免疫荧光染色检测成骨分化相关基因和蛋白表达.将Ti棒与BCGP-Ti棒分别植入SD大鼠股骨,Micro-CT和组织学染色观察骨整合效果.结果:扫描电镜和X射线衍射分析证实BCGP-Ti涂层成功构建.极化后BCGP-Ti具有良好的压电响应,其亲水性优于Ti和未极化的BCGP-Ti(P＜0.01),体外矿化的能力高于Ti和未极化的BCGP-Ti(P＜0.01).hWJ-MSC在极化后BCGP-Ti表面铺展的面积较Ti组增加(P＜0.05).与Ti相比,极化后BCGP-Ti促进hWJ-MSC矿化水平、ALP以及Ⅰ型胶原蛋白(COL1)、Runt相关转录因子(RUNX2)、骨钙素(OCN)等成骨分化相关基因和蛋白的表达(P＜0.05),在体内实现更好的骨整合.结论:在钛基表面构建BCG-NPs/P(VDF-TrFE)涂层可诱导hWJ-MSC成骨分化促进骨整合.

目的 探讨基于偏氟乙烯(vinylidene fluoride,VDF)和三氟乙烯(trifluoroethylene,TrFE)的共聚物[poly(VDF-TrFE),P(VDF-TrFE)]构建的复合压电纳米粒子在脑胶质瘤细胞中治疗和成像的效能.方法 对P(VDF-TrFE)压电材料进行晶型重塑和亲水性改善,通过点击化学反应将精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸合成肽(Arg-Gly-Asp,RGD)连接到二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺脂[1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-poly(ethylene glycol)-maleimide,DSPE-PEG-Mal]上;同时以DSPE-PEG-四氮杂环配体(DSPE-PEG-tetranitroheterocyclic ligand,DSPE-PEG-DOTA)为底液,加入一定量醋酸钆溶液,通过螯合获得 DSPE-PEG-DOTA-钆造影剂(DSPE-PEG-DOTA-Gd);按比例将重塑后的 P(VDF-TrFE)、DAPE-PEG-Mal-RGD 和DSPE-PEG-DOTA-Gd混合,最后获得复合压电纳米粒子P(VDF-TrFE)@DOTA-Gd@RGD,对其进行表征以及用于细胞层面实验研究.结果 P(VDF-TrFE)@DOTA-Gd@RGD复合压电纳米粒子具有优异的稳定性,尤其是在达尔伯克氏必需基本培养基(Dulbecco's modified eagle medium,DMEM)中,其粒径随时间变化保持在 160 nm左右;经过晶型重塑后,P(VDF-TrFE)@DOTA-Gd@RGD的压电性能明显提高,表面电势约为 4.2 mV;该纳米粒子可作为磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)显像剂,而且在超声激发下,P(VDF-TrFE)@DOTA-Gd@RGD复合压电纳米粒子能产生大量活性氧,抑制了胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力,同时还促进其凋亡.结论 P(VDF-TrFE)@DOTA-Gd@RGD复合压电纳米粒子作为MRI显像剂可以用于脑胶质瘤的定位,且可以作为一种声敏剂用于脑胶质瘤细胞的声动力治疗.

目的 建立三氯乙酸诱导蛋白沉淀净化-超高效液相色谱-串联质谱快速定量检测牛奶中8种硝基咪唑类药物及其代谢物的方法.方法 牛奶样品经三氯乙酸蛋白沉淀后高速离心分层,中间层清液过0.22μm聚四氟乙烯滤膜,Hypersil GOLD C18柱(100 mm×2.1 mm,1.9 μm)分离,电喷雾离子化,选择反应监测(SRM)模式检测,基质匹配内标法定量.结果 在0.3～10.0 ng/ml浓度范围内,硝基咪唑类药物及其代谢物呈良好的线性关系,相关系数达到0.998 5以上;以3倍信噪比对应的浓度为检出限,方法检出限可达0.1～0.2μg/kg;在0.5、2.0和5.0 μg/kg的加标水平,方法回收率为83.6％～ 111.8％,日内相对标准偏差为2.7％ ～9.1％,日间相对标准偏差为1.0％～9.3％.结论 该检测方法准确、快速、高效、低成本、易操作,能满足牛奶中硝基咪唑类药物及其代谢物残留高通量检测要求.

背景:课题组前期研究证实,含体积分数5％钛酸钡纳米颗粒的钛酸钡/聚偏氟乙烯三氟乙烯压电纳米复合膜可明显促进骨髓间充质干细胞的黏附、生长、成骨分化及骨缺损修复,然而针对临床应用,该材料作为引导组织再生膜与现有临床上不可降解膜产品的骨修复效果有何差异尚不清楚.目的:对比考察钛酸钡/聚偏氟乙烯三氟乙烯压电纳米复合膜材料与商用聚四氟乙烯膜修复大鼠颅骨临界尺寸缺损的效果.方法:采用溶液浇铸法制备出含体积分数5％钛酸钡纳米颗粒的钛酸钡/聚偏氟乙烯三氟乙烯压电纳米复合膜,经过电晕极化处理后使其表面带电.通过扫描电镜、原子力显微镜和水接触角测量仪检测钛酸钡/聚偏氟乙烯三氟乙烯压电纳米复合膜与聚四氟乙烯膜的表面形貌、表面粗糙度及表面亲疏水性.在SD大鼠(购自北京大学口腔医学院实验动物中心)颅骨矢状缝两侧制作直径为5 mm的全厚骨缺损,左侧覆盖聚四氟乙烯膜(对照组),右侧覆盖钛酸钡/聚偏氟乙烯三氟乙烯压电纳米复合膜(实验组),术后4,12周,利用Micro-CT和组织学方法评价材料覆盖大鼠颅骨缺损的骨修复情况.实验已经通过北京大学口腔医学院实验动物伦理委员会讨论批准.结果与结论:①钛酸钡/聚偏氟乙烯三氟乙烯压电纳米复合膜表面平整致密,钛酸钡纳米颗粒均匀分布在基体内;聚四氟乙烯膜由疏松的粗大纤维组成;钛酸钡/聚偏氟乙烯三氟乙烯压电纳米复合膜的表面粗糙度低于聚四氟乙烯膜(P<0.001),亲水性优于聚四氟乙烯膜(P<0.001);②Micro-CT和组织学检测显示,术后4周时,两组缺损处均有新骨生成,但实验组缺损中央有明显的新骨生成;术后12周时,两组缺损均已愈合,但实验组新骨成熟程度高于对照组;③结果表明,钛酸钡/聚偏氟乙烯三氟乙烯压电纳米复合膜可能作为引导组织再生膜.

目的 为了研发一种具骨免疫调节性能的屏障膜,本研究制备电活性生物膜并明确其对巨噬细胞极化分型的调控作用,再进一步探究电活性生物膜介导的巨噬细胞极化对成骨分化的影响.方法 制备带电的聚偏氟乙烯-三氟乙烯[Poly(vinylidene fluoride trifluoroethylene),P(VDF-TrFE)]薄膜.构建P(VDF-TrFE)膜、巨噬细胞、大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)共培养体系,不带电P(VDF-TrFE)膜作为对照组,应用流式细胞术、PCR技术检测带电P(VDF-TrFE)膜上巨噬细胞的极化表型.在膜-巨噬细胞条件培养基的刺激下,应用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、茜素红染色等技术检测BMSCs的成骨活性.结果 带电P(VDF-TrFE)膜具良好的电学稳定性.巨噬细胞在带电膜上表现为M2型特征蛋白CD206的高表达,PCR结果也显示了Arg-1、IL-10在带电膜上有较高的表达(P<0.05).带电薄膜-巨噬细胞环境下,rBMSCs分泌的ALP及矿化结节较对照组多.结论 电活性P(VDF-TrFE)膜可有效促进巨噬细胞向M2表型极化,在其介导的巨噬细胞环境下,rBMSC显示出较高的成骨活性,这对骨缺损区的再生修复具有重要意义.

背景:课题组前期研究发现,极化聚偏氟乙烯-三氟乙烯生物膜体外具有调控成骨细胞增殖分化的作用,然而其体内促进骨缺损愈合的作用尚未明确.目的:建立大鼠下颌骨临界骨缺损的动物模型,评价极化聚偏氟乙烯-三氟乙烯在体内促进骨缺损愈合的作用.方法:采用流延法制备聚偏氟乙烯-三氟乙烯生物膜,经由电晕极化处理后使其获得良好且稳定的压电性能,表征极化前后生物膜的物理化学性能、电学性能与生物相容性.在18只Wistar大鼠双侧下颌角制备直径4 mm的临界全厚骨缺损,随机分为3组(n=6),实验组植入极化生物膜,对照组植入未极化生物膜,空白对照组不做处理,术后4,8周取材,采用Micro-CT扫描分析各组的骨形成量,采用组织染色观察各组骨形成情况.实验方案经南方医科大学动物实验伦理委员会批准,伦理批件号:第00225515号.结果 与结论:①聚偏氟乙烯-三氟乙烯生物膜极化后的表面形貌、水接触角、弹性模量及最大拉伸强度无明显变化,电学常数为-10 pc/N,表面电势为-83 mV;②细胞增殖-毒性检测结果显示,极化生物膜促进了骨髓间充质干细胞的增殖,未对细胞产生毒性反应;③术后4,8周的Micro-CT结果显示,实验组骨缺损区骨形成量显著高于对照组、空白对照组(P<0.05);④术后4,8周的苏木精-伊红染色显示,实验组骨组织愈合速度与质量明显优于对照组、空白对照组;⑤术后4,8周的免疫组化染色显示,实验组骨缺损区的Runx2表达高于对照组、空白对照组(P<0.05);⑥结果表明,极化生物膜具有良好的理化性能、生物相容性与体内促成骨性能.

目的 探讨基于结构式鼻整形亚单位原理进行自体肋软骨联合膨体聚四氟乙烯(expanded polytetrafluoroethylene,e-PTFE)在单侧唇裂继发鼻畸形整复中的治疗效果.方法 自 2016 年 8 月至 2022 年 12 月,北京大学第三医院成形外科收治25 例单侧唇裂继发鼻畸形患者,采用自体肋软骨联合PTFE矫正单侧唇裂继发鼻畸形.采用Face-Q量表评估患者手术前后鼻部美学的满意度以及鼻塞症状评估(nasal obstruction symptom evaluation,NOSE)量表评估术后鼻塞通气功能情况,同时记录患者术后并发症的发生情况.结果 25 例患者术后切口均一期愈合.术后获随访 3 个月至 6 年,鼻部形态良好,鼻尖及鼻小柱基本居中,鼻背较术前增高,鼻翼塌陷较术前减轻,双侧鼻孔间差异缩小,患侧鼻基底较术前抬高,无感染、鼻中隔偏曲、移植物外露等并发症发生.Face-Q量表评估结果提示,患者术后鼻部美学满意度明显提升;NOSE量表结果表明,患者通气功能在术后得到改善,评分差异具有统计学意义(P<0.05).结论 基于结构式鼻整形亚单位原理采用自体肋软骨联合e-PTFE修复单侧唇裂继发鼻畸形可以获得良好的术后效果.