目的 探究半夏白术天麻汤通过调控AngⅡ/TGF-β1/smad通路对高脂喂饲的自发性高血压病大鼠心肌纤维化的影响.方法 选取10只Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和48只自发性高血压病大鼠(SHR),将SHR大鼠随机分为6组,每组8只,分别为对照组(WKY-ND)、高血压病组(SHR-ND)、高脂高血压病组(SHR-HF)、半夏白术天麻汤低(BDL)、中(BDM)、高(BDH)剂量组和西药(Telmisartan)组.所有大鼠适应性喂养1周后,给予WKY-ND组和SHR-ND组大鼠普通饲料,其余各组给予高脂饲料,喂养8周.造模成功后,给予WKY-ND组、SHR-ND组和SHR-HF组等体积生理盐水,其余各组给予药物干预12周.之后进行大鼠心肌组织取材,采用苏木素-伊红染色(HE)观察大鼠心肌细胞形态、采用马松(Masson)染色观察心肌组织胶原纤维的含量;ELISA法检测血清中Ang Ⅱ、IL-6、TNF-α、NO、ox-LDL、LOX-1、ROS的含量;免疫组织化学方法检测心肌组织α-SMA、Col Ⅰ、Col Ⅲ的表达;采用Western blot检测心肌组织TGF-β1、p-smad2、p-smad3、MMP2、TIMP1蛋白表达水平.结果 HE、Masson染色显示,给药后心肌细胞大小更均匀,形态更完整,细胞核清晰,胶原纤维面积减少,以半夏白术天麻汤高剂量组给药后改变更为明显;与SHR-ND组相比,SHR-HF组大鼠血清中AngⅡ、IL-6、TNF-α、ox-LDL、LOX-1、ROS水平明显升高,NO水平明显降低;与SHR-HF组相比,各给药组Ang Ⅱ、IL-6、TNF-α、ox-LDL、LOX-1、ROS水平明显降低,NO水平明显升高;与SHR-ND组相比,SHR-HF组大鼠心肌组织中Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA蛋白水平显著升高;与SHR-HF组相比,各给药组ColⅠ、Col Ⅲ、α-SMA蛋白水平显著降低;与SHR-ND组相比,SHR-HF组大鼠心肌组织中p-smad2、p-smad3、MMP2的蛋白水平显著升高,TIMP1的蛋白水平显著降低.与SHR-HF组相比,BD组大鼠心肌组织中的TGF-β1、p-smad2、p-smad3、MMP2显著降低,TIMP1显著升高.结论 半夏白术天麻汤可通过调节Ang Ⅱ/TGF-β1/smad信号通路,影响高脂喂养SHR大鼠心肌纤维化.

目的:基于TGF-β1-Smads信号通路探讨活血利水复方治疗自发性高血压的潜在机制,为阐明活血利水复方治疗自发性高血压药效提供基础理论和实验依据.方法:选取14周龄雄性自发性高血压大鼠,随机分为正常对照组、模型组、卡托普利组、活血利水复方低剂量组和活血利水复方高剂量组,每组20只.采用尾动脉无创血压仪监测大鼠血压;采用苏木精—伊红(HE)染色检测大鼠主动脉超微结构.免疫组化染色检测各组主动脉转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达情况.免疫共沉淀检测各组Smad2-Smad3复合物、Smad2-Smad3-Smad4复合物的表达情况.酶联免疫吸附法(ELⅠSA)检测大鼠血清TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4、Smad7、CTGF的表达情况.结果:与正常对照组比较,模型组血压增高(P＜0.01);与模型组比较,卡托普利组从治疗后第2周开始到第4周血压降低(P＜0.01),活血利水复方低剂量组从治疗后第3周至第4周血压降低(P＜0.05,P＜0.01),活血利水复方高剂量从治疗后第1周至第4周血压显著下降(P＜0.01).经活血利水复方干预后缓解了自发性高血压大鼠的病理改变,改善了高血压血管重构.模型组TGF-β1、CTGF、TIMP1、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达显著升高,卡托普利组、活血利水方高剂量组、活血利水方低剂量组的TGF-β1、CTGF、TIMP1、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达降低,尤其卡托普利组和活血利水方高剂量组降低尤为显著.卡托普利组、活血利水复方高剂量组、活血利水复方低剂量组相对于模型组Smad2-Smad3、Smad2、Smad3、Smad4表达减少,尤其卡托普利组、活血利水复方高剂量组相对于模型组Smad2-Smad3、Smad2、Smad3、Smad4表达显著减少.与模型组对比,活血利水复方低剂量组TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4表达显著下降(P＜0.05),Smad7、CTGF表达差异无统计学意义(P＞0.05).与模型组对比,卡托普利组TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4、CTGF表达显著下降(P＜0.05或P＜0.01),Smad7表达显著升高(P＜0.05);活血利水复方高剂量组TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4、CTGF均有不同程度的降低(P＜0.05或P＜0.01),Smad7表达升高(P＜0.05).结论:活血利水复方可以通过TGF-β1-Smads信号通路干预有效治疗自发性高血压,为自发性高血压后期的临床治疗及相关研究提供了理论依据.

目的:观察规律有氧运动对自发性高血压大鼠(SHR)心脏重塑的影响，并探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)解耦联在其间的作用机制。方法:采用随机数字表法将30只6周龄健康雄性SHR大鼠分为安静组和运动组，每组15只；同时选取10只鼠龄、性别相匹配的Wistar-Kyoto大鼠纳入正常对照组。将正常对照组和安静组大鼠置于鼠笼内安静饲养，运动组大鼠则给予8周中等强度跑台运动干预，每周运动5次。于末次训练结束48 h后采用超声心动图设备检测各组大鼠心脏结构及功能，分别对其心肌组织进行麦胚凝集素和天狼星红染色，观察病理学改变并获取心肌细胞横截面积(CSA)及间质胶原容积分数(CVF)，采用TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡率，采用高效液相色谱法测定心肌四氢生物喋呤(BH4)含量，采用Western blot法检测心肌组织eNOS总蛋白、eNOS二聚体及单体蛋白表达量。结果:与正常对照组比较，安静组左心室壁厚度(LVWT)、心肌CSA和CVF升高( P<0.05)，左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室射血分数(LVEF)降低，心肌细胞凋亡率增加( P<0.05)，eNOS单体上调( P<0.05)，eNOS二聚体、eNOS二聚体/单体比值以及心肌BH4含量下降( P<0.05)；与安静组比较，运动组心肌CVF降低( P<0.05)，LVEDD和LVEF升高( P<0.05)，心肌细胞凋亡率下降( P<0.05)，eNOS单体下调( P<0.05)，eNOS二聚体、eNOS二聚体/单体比值以及心肌BH4含量增加( P<0.05)，LVWT和CSA组间均无显著差异( P>0.05)。3组大鼠eNOS总蛋白含量组间均无明显差异( P>0.05)。 结论:规律有氧运动可能通过调控eNOS解耦联改善SHR大鼠心脏重塑。

目的:探讨自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat, SHR)脑缺血再灌注后血压和血清生物钟蛋白水平的变化以及两者的关联性。方法:采用大脑中动脉闭塞法在授时因子时间(zeitgeber time, ZT)0点制备SHR脑缺血再灌注模型，模型制作后连续监测24 h内收缩压。每隔3 h取大鼠尾静脉血，应用酶联免疫吸附法检测血清生物钟蛋白(CLOCK、BMAL1、PER1和CRY1)水平变化。应用Pearson相关分析判断脑缺血再灌注后血压昼夜节律模式与生物钟蛋白水平波动的关系。结果:假手术组大鼠存在多种血压模式，包括杓型(53%)、非杓型(27%)、超杓型(13%)和反杓型(7%)，以杓型模式为主。相比之下，模型组大鼠血压紊乱程度加重，以非杓型为主，比例高达40%；超杓型和反杓型比例也有所提高，分别为27%和13%；杓型血压占比降至20%。模型组血清CLOCK水平相对稳定，而BMAL1、PER1和CRY1的昼夜节律与假手术组相比出现明显改变。Pearson相关分析显示，PER1与杓型( r＝-0.565， P＝0.002)和超杓型( r＝-0.531， P＝0.001)血压模式呈负相关，与非杓型血压呈显著正相关( r＝0.620， P<0.001)。 结论:SHR脑缺血再灌注后血压昼夜节律模式发生明显紊乱，且与Per1基因的调控密切相关。

目的:观察规律有氧运动对自发性高血压大鼠肾脏纤维化及细胞凋亡的影响。方法:采用随机数字表法将30只6周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)分为高血压安静组(简称安静组)及高血压运动组(简称运动组)，每组15只。同期选取10只年龄、性别相匹配的Wistar-Kyoto大鼠纳入正常血压对照组(简称正常对照组)。运动组大鼠给予12周游泳运动(每天运动60 min，每周运动5 d)，安静组及正常对照组大鼠均在鼠笼内安静饲养。于训练前及末次训练结束后检测各组大鼠尾动脉血压；于末次训练结束后测定各组大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮及血清肌酐含量，利用Masson染色观察肾脏间质纤维化程度并计算胶原容积分数(CVF)，采用TUNEL染色法记录肾小管上皮组织凋亡细胞数量并计算细胞凋亡率，利用Western blot法检测肾脏转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2/3、Smad7、Bax和Bcl-2蛋白表达量。结果:与干预前比较，干预后安静组收缩压、舒张压及平均动脉压均显著升高( P<0.05)，运动组收缩压、舒张压及平均动脉压均显著降低( P<0.05)，正常对照组血压无明显变化( P>0.05)。与正常对照组比较，干预后安静组血压、24 h尿蛋白、血尿素氮及血清肌酐含量、细胞凋亡率、TGF-β1、Smad2/3和Bax蛋白表达量均明显增加( P<0.05)，Smad7及Bcl-2蛋白表达量均明显降低( P<0.05)；与安静组比较，干预后运动组大鼠血压、24 h尿蛋白、血尿素氮及血清肌酐含量、细胞凋亡率、TGF-β1、Smad2/3和Bax蛋白表达量均显著下降( P<0.05)，Smad7及Bcl-2蛋白表达量均显著增加( P<0.05)。 结论:规律有氧运动能通过抑制肾脏纤维化及细胞凋亡改善自发性高血压大鼠肾功能障碍。

目的:探究自发性高血压大鼠（SHR）高盐饮食合并慢性单侧颈内动脉闭塞模型的组织病理、单核细胞功能表型、脑组织动脉硬化相关血管因子转录改变。方法:21只6周龄SHR按照简单随机法直接抽样分成正常饮食组（SHR-ND， n=7）、高盐饮食组（SHR-HSD， n=14，予以8%高盐饲料喂养），在高盐饮食诱导20周后按照简单随机法直接抽样分配一半SHR-HSD予以施行单侧颈内动脉闭塞术（SHR-HSD-UCAO， n=7）并维持10周以模拟慢性局灶性低灌注，比较三组间脑组织病理学、外周血单核细胞亚型、脑组织中动脉硬化相关血管因子mRNA转录水平改变。 结果:SHR-HSD收缩压[（246±12）mmHg比（220±16）mmHg， P=0.029 1，1 mmHg=0.133 kPa]和舒张压[（189±15）mmHg比（164±12）mmHg， P=0.014 3]均明显高于SHR-ND。在组织病理学上，SHR-ND、SHR-HSD和SHR-HSD-UCAO三组均可见小动脉脂质玻璃样变性、管壁增厚、管腔缩窄、多发扩大的血管周围间隙、胼胝体神经纤维结构疏松和髓鞘空泡化改变。SHR-HSD外周血中CD11b +CD68 +单核细胞比例明显高于SHR-ND和SHR-HSD-UCAO（ P=0.000 8），而SHR-HSD-UCAO中促炎亚型标志物CD86（ P=0.018 7）和抗炎亚型标志物CD206（ P=0.016 8）的平均荧光强度（MFI）均低于SHR-HSD；在脾脏中，SHR-HSD-UCAO的CD11b +CD68 +单核细胞CD86的MFI明显高于SHR-ND和SHR-HSD（ P=0.000 5）。SHR-HSD-UCAO脑组织中促血管新生因子血小板衍生的内皮细胞生长因子（PD-ECGF）（ P=0.004 6）和血管生成素（ANG）（ P=0.000 2）的mRNA转录水平较SHR-ND和SHR-HSD下调，而转化生长因子（TGF-β）（ P<0.000 1）和血管内皮生长因子（VEGF-A）（ P=0.045）的mRNA转录水平均较SHR-ND和SHR-HSD显著上调。 结论:高盐合并局灶性低灌注的SHR可诱导大鼠小动脉硬化、血管周围间隙扩大、脑白质疏松等病理改变，并伴随循环单核细胞免疫表型失衡、促血管新生因子转录下调，SHR-HSD-UCAO值得作为中晚期小动脉硬化型脑小血管病（aCSVD）疾病动物模型进一步探索。

目的:探讨淫羊藿苷通过Cx32-Nox4信号通路对高血压肾纤维化和损伤的影响.方法:在自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHRs)上建立高血压肾病(hypertensive ne-phropathy,HN)大鼠模型.实验分为4组:正常对照组(WKY大鼠)、模型组(SHR)、淫羊藿苷10 mg·kg-1·d-1组(每天灌胃淫羊藿苷一次)、淫羊藿苷30 mg·kg-1·d-1组(每天灌胃淫羊藿苷一次),每组10只.在体内检测纤维化相关蛋白的表达.选择暴露于血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的NRK-52E细胞来观察淫羊藿苷对肾损伤的影响.用蛋白质免疫印迹法和免疫组化检测细胞外基质(extracellu-lar matrix,ECM)的水平,包括α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ 型胶原(colla-gen Ⅰ,Col-Ⅰ)和纤连蛋白(fibronectin,FN)的表达.试剂盒检测氧化应激标记物超氧化物歧化酶(su-peroxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialde-hyde,M DA)表达的变化.结果:淫羊藿苷在体内显著降低SHR大鼠的肾脏纤维化.淫羊藿苷下调α-SMA、FN和Col-Ⅰ的表达(P＜0.05),并保护高血压损伤的肾组织免受进行性纤维化的影响.淫羊藿苷可以显著提高SHR大鼠肾脏和血清中的总SOD活性,显著降低MDA水平(P＜0.05).此外,淫羊藿苷显著提高SHR大鼠肾脏中Cx32的表达,并显著减少Nox4的表达(P＜0.05).淫羊藿苷对AngⅡ介导的NRK-52E细胞损伤和纤维化具有保护作用.结论:淫羊藿苷可以改善肾小管间质纤维化并延缓HN的进展.肾脏保护可能归因于Cx32-Nox4信号通路介导的氧化应激的调节来实现.

目的 探究平肝益肾方治疗自发性高血压大鼠靶器官损害的效应机制.方法 使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)测定平肝益肾方的化学成分,结合网络药理学方法对平肝益肾方的化学成分进行靶标分析、功能富集,预测平肝益肾方治疗高血压及其靶器官损害的潜在作用机制.将自发性高血压大鼠随机分为模型组、平肝益肾方低剂量组(2 g·kg-1)、平肝益肾方高剂量组(5 g·kg-1)和缬沙坦组(7.2 mg·kg-1),每组 6 只.Wistar-Kyoto大鼠作为对照组,对照组和模型组大鼠灌胃生理盐水,连续灌胃 8 周.采用HE和Masson染色,观察大鼠心脏和胸主动脉的病理学损伤和纤维化程度.采用免疫组织化学染色和Western blot检测大鼠心脏、肝脏和肾脏中EGFR的表达水平.采用免疫荧光染色检测大鼠心脏、肝脏和肾脏中EGFR和EEA1 共定位情况.结果 通过UPLC-Q-TOF/MS检测出平肝益肾方中的 26 种化学成分.网络药理学揭示EGFR、PIK3R1 和EP300 等可能是平肝益肾方治疗高血压及其靶器官损害的关键治疗靶点,平肝益肾方治疗高血压及其靶器官损害可能与EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性、血脂与动脉粥样硬化和HIF-1 信号通路等密切相关.平肝益肾方高剂量组可显著降低大鼠的收缩压和平均动脉压(P<0.05,P<0.01),减轻心脏和胸主动脉的病理学损伤和纤维化程度(P<0.01,P<0.001),显著降低大鼠肝脏和肾脏中EGFR的表达水平(P<0.01),改善肝脏与肾脏的纤维化,显著降低肾脏中EGFR和EEA1 的共定位水平(P<0.001),调节EGFR在早期内体的堆积,改善肾脏的纤维化.结论 整合UPLC-Q-TOF/MS、网络药理学和自发性高血压大鼠模型初步探索平肝益肾方治疗高血压及其靶器官损害的效应机制,为平肝益肾方治疗高血压进一步的机制研究和临床应用提供科学依据.

目的 探究微囊蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)通过调节铁死亡介导的线粒体稳态来对2型糖尿病(T2DM)伴发高血压大鼠肾功能损伤的改善作用.方法 于2021年5月至2022年5月采用自发性高血压大鼠(SHR)建立T2DM大鼠模型,将大鼠按随机数字表法分为对照组、SHR+T2DM组、pCDNA3.1(+)-NC组和pCDNA3.1(+)-Cav-1组,每组10只.测定大鼠收缩压、空腹血糖值(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(GHbA1C)浓度、评价胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血肌酐、尿素氮含量,并计算尿清蛋白与肌酐比值(UACR)HE染色检测肾组织病理学变化;检测肾组织中亚铁离子(Fe2+)、丙二醛含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;二氢乙锭(DHE)荧光染色法检测肾组织中活性氧水平;线粒体膜电位荧光探针(JC-1法)检测肾组织中线粒体膜电位(MMP)水平;蛋白质印迹法检测肾组织中谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、x-CT蛋白表达.结果 SHR+T2DM组收缩压(189.46±7.51)mmHg、FBG(23.46±1.28)mmol/L、FINS(1.62±0.15)mU/L、HOME-IR(1.52±0.13)、GHbA1C(689.31±45.81)nmol/L、血肌酐(83.69±4.25)mmol/L、尿素氮(19.32±2.54)mmol/L、UACR(76.51±8.09)、Fe2+(0.45±0.05)mg/g、丙二醛(58.32±3.26)nmol/L、活性氧含量23.46±1.84均高于对照组[(110.34±5.26)mmHg、(5.12±0.94)mmol/L、(0.68±0.07)mU/L、0.31±0.04、(310.48±23.26)nmol/L、(32.08±3.61)mmol/L、(6.89±1.86)mmol/L、8.31±0.94、(0.13±0.02)mg/g、(15.68±2.15)nmol/L、1.31±0.23],SOD活性(11.56±1.62)U/mg、MMP水平0.25±0.03、GPX4(0.35±0.04)和x-CT蛋白0.51±0.06表达均低于对照组[(35.61±2.17)U/mg、0.62±0.08、1.00±0.10、1.00±0.09](P<0.05);和SHR+T2DM组相比,pCDNA3.1(+)-Cav-1组收缩压(136.27±6.09)mmHg、FBG(10.37±1.05)mmol/L、FINS(0.91±0.10)mU/L、HOME-IR(0.64±0.08)、GHbA1C(426.17±25.94)nmol/L、血肌酐(51.36±3.87)mmol/L、尿素氮(10.71±2.18)mmol/L、UACR(38.62±4.18)、Fe2+(0.18±0.03)mg/g、丙二醛(21.39±2.64)nmol/L、活性氧含量5.47±1.06均明显降低,SOD活性(29.83±1.94)U/mg、MMP水平0.51±0.06、GPX4(0.86±0.09)和x-CT蛋白0.91±0.08表达升高(P<0.05).结论 Cav-1可通过抑制铁死亡来维持线粒体功能的稳态,进而对T2DM合并SHR大鼠的肾组织发挥保护作用.

目的:优化射血分数保留型心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)大鼠模型构建方法,为研究HFpEF提供实验模型.方法:10周龄,Zucker糖尿病脂肪/自发性高血压心力衰竭肥胖(obese zucker diabetic fatty/spontaneously hypertensive heart failure F1 hybrid,ZSF1-obese)大鼠和ZSF1瘦型(ZSF1-lean)大鼠分为三组,分别为实验组[(ZSF1-obese大鼠,饮水中给予一氧化氮合酶抑制剂(inhibition of constitutive nitric oxide synthase,L-NAME),n=6]、经典模型组(ZSF1-obese大鼠,普通水,n=3)、空白对照组(ZSF1-lean大鼠,普通水,n=4).三组均以普通饲料饲养.实验组给药10周后采集三组的血压、葡萄糖耐量、心脏超声、心脏磁共振成像、生化指标数据.结果:实验组在给药10周后收缩压和舒张压分别达到(155.0±6.6)mmHg(1mmHg=0.133kPa)和(119.4±10.9)mmHg,比起经典模型组明显升高(分别为P=0.0001和P-0.0143),达到高血压标准,而经典模型组和对照组均没有达到高血压标准.心脏超声结果显示三者均呈现射血分数保留(均P＞0.05),实验组和经典模型组有相似的舒张功能障碍、心肌肥厚和糖耐量受损(P＞0.05).生化指标也显示实验组和经典模型组存在相似的脂肪肝、肾功能减退.结论:与传统的ZSF1大鼠直接作为HFpEF模型相比,联合L-NAME的ZSF1大鼠作为HFpEF模型能更全面呈现HFpEF的疾病特征,包括高血压,舒张功能障碍、糖耐量受损等表型.