目的:观察穴位贴敷对支气管哮喘（bronchial asthma，BA）小鼠皮肤、肺组织中瞬时受体电位阳离子通道香草酸亚家族成员1（TRP cation channel subfamily V member 1，TRPV1）表达及血清中IFN-γ、IL-4水平的影响，探讨穴位贴敷治疗哮喘的机制。方法:将75只BALB/c小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、穴位贴敷组、假贴敷组、地塞米松组，每组15只。采用屋尘螨滴鼻法制备BA小鼠模型。造模结束后，取小鼠双侧“肺俞”“心俞”“膈俞”进行穴位贴敷，穴位贴敷组贴敷药物为芥子、延胡索、细辛、甘遂药物组方，假贴敷组给予凡士林贴敷，1次/d，共贴敷14次；地塞米松组灌胃10 g/kg地塞米松，1次/d，连续干预14 d。运用EMKA-WBP肺功能检测系统检测小鼠气道阻力；天狼星红染色法、HE染色法观察小鼠肺组织病理形态改变，免疫组化法检测肺组织、皮肤组织中TRPV1表达，ELASA法检测肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-4水平。结果:在浓度为12.5、25.0、50.0 mg/ml的氯化乙酰甲胆碱溶液激发后，与模型组比较，穴位贴敷组、地塞米松组小鼠气道高阻力Penh值下降（ P<0.05）；肺组织HE染色和天狼猩红染色显示气管内炎性浸润和胶原纤维增生情况改善（ P<0.05）；与模型组比较，穴位贴敷组、地塞米松组肺组织TRPV1［（0.28±0.06）、（0.28±0.05）比（0.31±0.08）］表达降低（ P<0.05）；肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-4水平降低（ P<0.05）。 结论:穴位贴敷可通过诱发皮肤反应治疗哮喘，其作用机制可能与激活肺组织、皮肤组织中TRPV1，降低IFN-γ、IL-4水平有关。

目的:优化芥子微波和恒温鼓风烘烤炮制工艺.方法:建立白芥子苷含量测定方法;按照析因设计试验法,通过CRITIC法计算外观性状、芥子碱硫氰酸盐和白芥子苷3个指标的权重系数,以综合评分为指标,考察微波火力、恒温鼓风烘烤温度、加热时间对炮制品的影响,选出2种炮制工艺的最佳炮制品;通过噻唑蓝(MTT)比色法考察最佳炮制品与传统文火清炒炮制品对HaCaT细胞活力的影响.结果:芥子微波大火加热2 min、150℃恒温鼓风烘烤30 min得到的炒芥子综合评分最高,芥子碱硫氰酸盐含量符合2020年版《中华人民共和国药典》要求;与传统炮制品比较,白芥子苷含量更高,在800μg/mL浓度时对HaCaT细胞均无明显毒性.结论:微波、恒温鼓风烘烤芥子炮制工艺合理、可行、易操作,可为炒芥子的规范化生产提供参考依据.

目的:探讨白芥子涂方在哮喘治疗中的免疫调剂作用机制.方法:构建SD大鼠哮喘模型,随机分为正常对照组、模型组、白芥子涂方敷贴非穴位组、白芥子涂方敷贴肺俞穴组、阳性对照组(氨茶碱敷贴肺俞穴),给药14 d,收集血清、肺、脾、胸腺、肝脏及肾脏组织.评估淋巴细胞增殖及巨噬细胞活化,检测血清细胞因子水平,分析器官指数、形态学及皮肤树突状细胞(dendritic cells,CD)细胞数,检测CD90及H2-Ab1表达改变.结果:与模型组相比,白芥子涂方敷贴穴位组及氨茶碱敷贴可以诱导T淋巴细胞增殖(P＜0.01),增加IgA、IgG、IgM、IFN-γ及IL-2(P＜0.01),但降低IL-4及MBP水平(P＜0.01).此外,白芥子涂方敷贴肺俞穴组贴及氨茶碱敷贴肺俞穴组皮肤组织中淋巴细胞浸润减少,细胞肿胀数降低,支气管管腔内黏液分泌降低,气道水肿及闭塞减少,肺间质炎性浸润伴充血情况减少.皮肤组织中CD1a+CD83-未成熟DC细胞减少,而CD1a+CD83+成熟DC细胞增加,皮肤组织中CD90及H2-Ab1表达显著性增加.结论:白芥子涂方穴位敷贴治疗可促进皮肤组织中髓系树突状细胞发生形变、迁移,并促进抗原的呈递作用,可以激活机体免疫功能,且对机体不良反应低,能发挥调节机体Th1/Th2的失衡的作用.

芥子碱是一种广泛存在于十字花科植物中的季铵盐型生物碱,具有多种生物活性.芥子碱可通过抑制肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭,逆转肿瘤细胞多药耐药发挥抗肿瘤作用;通过抑制RAAS的活化及改善血管内皮功能障碍发挥心血管保护作用;通过松弛支气管平滑肌、降低炎症因子水平治疗呼吸系统疾病.鉴于芥子碱在肿瘤、心血管系统疾病及呼吸系统疾病治疗中的良好的效果,其具有被开发为多种疾病治疗药物的潜力.

目的:建立强心合剂HPLC指纹图谱并进行多成分含量测定,考察制备过程提取、浓缩、离心、灭菌工艺对强心合剂质量的影响.方法:以强心合剂的提取液、浓缩液、离心液、合剂(灭菌后)为供试品,采用HPLC法建立强心合剂制备过程4个不同工艺阶段的指纹图谱,并进行相似度评价与色谱峰指认,测定方中槲皮素-3-O-β-D葡萄糖7-O-β-D龙胆双糖苷、芥子碱硫氰酸盐、芥子酸、大车前苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、车前草苷D 6个成分的含量.结果:10批强心合剂制备过程中不同工艺阶段的图谱与对照指纹图谱相比,相似度均大于0.90,表明生产工艺较稳定,提取液中标定18个共有峰,而浓缩、离心、灭菌后增至21个;含量测定结果显示制备过程不同工艺阶段对强心合剂质量均有不同程度的影响,其中浓缩过程影响最大.结论:该研究针对不同制备过程对强心合剂质量的影响进行探讨分析,可为中药制备过程中整体质量评价的共性技术提供数据依据和理论参考.

目的 建立清宁散HPLC指纹图谱检测方法,并对其质量标志物(quality markers,Q-Marker)进行预测分析,为清宁散质量控制提供参考依据.方法 基于指纹图谱和网络药理学方法,通过响应面优化法确定清宁散基准样品的最佳制备工艺;采用HPLC法建立清宁散指纹图谱,对共有峰进行归属和指认;基于可行性和可追溯性进行活性成分筛选,通过网络药理学构建"成分-靶点-通路"网络,分析清宁散潜在的Q-Marker.结果 确定了清宁散中桑白皮、赤茯苓、甘草的最佳炮制工艺,清宁散HPLC指纹图谱共标定了 39个共有峰,通过对照品色谱及质谱,指认出18个共有成分,分别为1号峰异鼠李素、2号峰甘草苷、3号峰芥子碱硫氰酸盐、4号峰β-胡萝卜苷、10号峰松苓新酸、15号峰去氢土莫酸、16号峰甘草酸铵、19号峰槲皮素、20号峰绿原酸、21号峰甘草查耳酮A、22号峰桑黄酮G、24号峰京尼平苷酸、26号峰桑皮苷A、29号峰桑辛素、31号峰槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、34号峰毛蕊花糖苷、35号峰芹菜素、38号峰茯苓新酸A,相似度均大于0.93;经网络药理学分析,筛选出桑皮苷A、桑辛素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、茯苓新酸A、京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、甘草苷、甘草酸铵8个活性成分,进行"成分-靶点-通路"网络构建分析,富集的通路包括T细胞受体信号通路、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)信号通路、磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase-protein kinase B,PI3K-Akt)信号通路等,根据连接度分析,初步预测8个活性成分可能通过调节相关信号通路达到清肺止咳的作用.结论 响应面优化结合指纹图谱和网络药理学分析预测清宁散治疗疾病的Q-Marker,所建立的方法操作简捷,结果准确,稳定性好,可用于清宁散的质量控制评价,也为进一步研究清宁散的作用机制提供参考.

目的 建立强心合剂HPLC指纹图谱,并测定槲皮素-3-O-β-D葡萄糖 7-O-β-D龙胆双糖苷(QGG)、芥子碱硫氰酸盐、芥子酸、大车前苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、车前草苷D、毛蕊异黄酮、黄芩素、芒刺柄花素、白术内酯Ⅲ、甲基麦冬二氢高异黄酮B的含量.方法 该药物甲醇提取液的分析采用 Agilent Eclipse XDB-C18 色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相乙腈-0.01 mol/L磷酸,梯度洗脱;体积流量 1.0 mL/min;柱温 40℃;检测波长 230 nm.结果 15 批样品指纹图谱中有 20 个共有峰,相似度均大于 0.930.11 种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 1),平均加样回收率 98.47%～102.85%,RSD 0.76%～1.74%.结论 该方法准确稳定,可用于强心合剂的质量控制.

目的:研究并建立南葶苈子药材超高效液相色谱法(UPLC)特征图谱,并对北葶苈子及混伪品进行对比研究.方法:采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP18 色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm);以乙腈-0.3%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为 254 nm;流速为 0.30 mL·min-1;柱温为 35℃.结果:建立了南葶苈子药材UPLC特征图谱共有模式,标定了 12 个共有峰,指认了其中 7 个,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(峰 3)可区分南葶苈子和北葶苈子;芥子碱(峰 2)可区分南葶苈子和菥蓂子;异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(峰 6)可区分南葶苈子和荠菜子.结论:建立的UPLC特征图谱能有效区分南葶苈子、北葶苈子及其混伪品荠菜子、菥蓂子,为控制葶苈子药材质量提供了参考.

目的:建立测定麻黄宣肺止咳糖浆指纹图谱的方法.方法:采用HPLC-梯度洗脱法测定麻黄宣肺止咳糖浆的指纹图谱,色谱柱Waters XTerraMSC(250mm×4.6mm,5μm),、0.2%磷酸溶液为流动相A,乙睛为流动相B,梯度洗脱;流速:1.0 ml·min-1,检测波长:277 nm,柱温:30℃,进样量:10μl.结果:测得指纹图谱的精密度、重复性、稳定性均符合规定;10批样麻黄宣肺止咳糖浆的指纹图谱标示出24个共有峰,并确证其中8个峰分别为芥子碱、绿原酸、咖啡酸、连翘酯苷A、木犀草苷、牛蒡子苷、哈巴俄苷、次野鸢尾黄素.结论:该法建立的麻黄宣肺止咳糖浆指纹图谱重复性好,信息量大,为该制剂的全面质量控制提供科学依据.

芥子碱是油菜籽中最重要的简单酚类物质,其在菜籽饼中的含量约1.2％ ～2.3％,具有重要药理作用.现参考相关文献,综述了近年来芥子碱的提取纯化工艺、鉴定方法及生物活性等方面的研究进展,可为菜籽饼中芥子碱的研究开发提供新的途径和思路.