目的:优化芥子微波和恒温鼓风烘烤炮制工艺.方法:建立白芥子苷含量测定方法;按照析因设计试验法,通过CRITIC法计算外观性状、芥子碱硫氰酸盐和白芥子苷3个指标的权重系数,以综合评分为指标,考察微波火力、恒温鼓风烘烤温度、加热时间对炮制品的影响,选出2种炮制工艺的最佳炮制品;通过噻唑蓝(MTT)比色法考察最佳炮制品与传统文火清炒炮制品对HaCaT细胞活力的影响.结果:芥子微波大火加热2 min、150℃恒温鼓风烘烤30 min得到的炒芥子综合评分最高,芥子碱硫氰酸盐含量符合2020年版《中华人民共和国药典》要求;与传统炮制品比较,白芥子苷含量更高,在800μg/mL浓度时对HaCaT细胞均无明显毒性.结论:微波、恒温鼓风烘烤芥子炮制工艺合理、可行、易操作,可为炒芥子的规范化生产提供参考依据.

芥子碱是一种广泛存在于十字花科植物中的季铵盐型生物碱,具有多种生物活性.芥子碱可通过抑制肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭,逆转肿瘤细胞多药耐药发挥抗肿瘤作用;通过抑制RAAS的活化及改善血管内皮功能障碍发挥心血管保护作用;通过松弛支气管平滑肌、降低炎症因子水平治疗呼吸系统疾病.鉴于芥子碱在肿瘤、心血管系统疾病及呼吸系统疾病治疗中的良好的效果,其具有被开发为多种疾病治疗药物的潜力.

目的:建立强心合剂HPLC指纹图谱并进行多成分含量测定,考察制备过程提取、浓缩、离心、灭菌工艺对强心合剂质量的影响.方法:以强心合剂的提取液、浓缩液、离心液、合剂(灭菌后)为供试品,采用HPLC法建立强心合剂制备过程4个不同工艺阶段的指纹图谱,并进行相似度评价与色谱峰指认,测定方中槲皮素-3-O-β-D葡萄糖7-O-β-D龙胆双糖苷、芥子碱硫氰酸盐、芥子酸、大车前苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、车前草苷D 6个成分的含量.结果:10批强心合剂制备过程中不同工艺阶段的图谱与对照指纹图谱相比,相似度均大于0.90,表明生产工艺较稳定,提取液中标定18个共有峰,而浓缩、离心、灭菌后增至21个;含量测定结果显示制备过程不同工艺阶段对强心合剂质量均有不同程度的影响,其中浓缩过程影响最大.结论:该研究针对不同制备过程对强心合剂质量的影响进行探讨分析,可为中药制备过程中整体质量评价的共性技术提供数据依据和理论参考.

目的 建立清宁散HPLC指纹图谱检测方法,并对其质量标志物(quality markers,Q-Marker)进行预测分析,为清宁散质量控制提供参考依据.方法 基于指纹图谱和网络药理学方法,通过响应面优化法确定清宁散基准样品的最佳制备工艺;采用HPLC法建立清宁散指纹图谱,对共有峰进行归属和指认;基于可行性和可追溯性进行活性成分筛选,通过网络药理学构建"成分-靶点-通路"网络,分析清宁散潜在的Q-Marker.结果 确定了清宁散中桑白皮、赤茯苓、甘草的最佳炮制工艺,清宁散HPLC指纹图谱共标定了 39个共有峰,通过对照品色谱及质谱,指认出18个共有成分,分别为1号峰异鼠李素、2号峰甘草苷、3号峰芥子碱硫氰酸盐、4号峰β-胡萝卜苷、10号峰松苓新酸、15号峰去氢土莫酸、16号峰甘草酸铵、19号峰槲皮素、20号峰绿原酸、21号峰甘草查耳酮A、22号峰桑黄酮G、24号峰京尼平苷酸、26号峰桑皮苷A、29号峰桑辛素、31号峰槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、34号峰毛蕊花糖苷、35号峰芹菜素、38号峰茯苓新酸A,相似度均大于0.93;经网络药理学分析,筛选出桑皮苷A、桑辛素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、茯苓新酸A、京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、甘草苷、甘草酸铵8个活性成分,进行"成分-靶点-通路"网络构建分析,富集的通路包括T细胞受体信号通路、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)信号通路、磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase-protein kinase B,PI3K-Akt)信号通路等,根据连接度分析,初步预测8个活性成分可能通过调节相关信号通路达到清肺止咳的作用.结论 响应面优化结合指纹图谱和网络药理学分析预测清宁散治疗疾病的Q-Marker,所建立的方法操作简捷,结果准确,稳定性好,可用于清宁散的质量控制评价,也为进一步研究清宁散的作用机制提供参考.

目的 建立强心合剂HPLC指纹图谱,并测定槲皮素-3-O-β-D葡萄糖 7-O-β-D龙胆双糖苷(QGG)、芥子碱硫氰酸盐、芥子酸、大车前苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、车前草苷D、毛蕊异黄酮、黄芩素、芒刺柄花素、白术内酯Ⅲ、甲基麦冬二氢高异黄酮B的含量.方法 该药物甲醇提取液的分析采用 Agilent Eclipse XDB-C18 色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相乙腈-0.01 mol/L磷酸,梯度洗脱;体积流量 1.0 mL/min;柱温 40℃;检测波长 230 nm.结果 15 批样品指纹图谱中有 20 个共有峰,相似度均大于 0.930.11 种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 1),平均加样回收率 98.47%～102.85%,RSD 0.76%～1.74%.结论 该方法准确稳定,可用于强心合剂的质量控制.

目的:探究芥子碱硫氰酸盐(sinapine thiocyanate,ST)抑制胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)小鼠血脂血糖升高、动脉粥样硬化及肝细胞脂肪变性的机制.方法:ApoE-/-雄性小鼠60只随机分成对照组、生理盐水组、罗格列酮组和ST低、中、高剂量治疗组,每组10只.除对照组常规饲料喂养外,其余各组以高脂饲料饲养12周,ST低、中、高剂量组同时给予ST(10、30和90 mg·kg-1·d-1)灌胃,罗格列酮组给予罗格列酮(1.33 mg·kg-1·d-1)灌胃.最后3周,除对照组腹腔注射生理盐水外,其余各组腹腔注射地塞米松(0.8 mg·kg-1·d-1)诱导IR.每周断尾采血检测空腹血糖水平,第12周末禁食12 h后处死动物取样,检测空腹胰岛素、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、甘油三酯、总胆固醇及肝脂质等水平;将肝组织和主动脉固定包埋切片,HE染色.Western blot测定肝脂质代谢与骨骼肌MAPK信号通路相关蛋白表达.结果:ST呈剂量依赖性降低血脂、血糖及TNF-α等代谢相关指标的水平(P<0.05),延缓肝细胞脂肪变性和动脉粥样硬化;并呈剂量依赖性调控肝脂质代谢信号通路(HMGR和SREBP-2等)及MAPK信号通路(ERK和p38等)蛋白表达(P<0.05).结论:ST抑制IR模型小鼠血脂血糖升高、动脉粥样硬化及肝细胞脂肪变性的机制可能与调控肝脂质代谢和骨骼肌MAPK信号通路相关蛋白表达有关.

目的 建立医院制剂抗痨散中芥子碱硫氰酸盐含量测定的方法.方法 依据《中国药典》2015年版一部通则高效液相色谱法(HPLC),以乙腈-0.08 mol/L磷酸二氢钾溶液(12∶88)为流动相;色谱柱:岛津inertsustain C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);检测波长326 nm;进样量20μl.在此色谱条件下,检测抗痨散中芥子碱硫氰酸盐含量,并进行精密度、重复性、稳定性、回收率试验.结果 在0.00509～0.08129 mg/ml范围内,芥子碱硫氰酸盐含量与峰面积呈良好的线性关系,精密度、重复性RSD分别为0.57％、1.53％;样品平均回收率为95.58％,RSD为1.70％.结论 HPLC法能准确监测抗痨散中芥子碱硫氰酸盐的含量.

目的 研究三伏贴中芥子碱硫氰酸盐(SPT)及细辛挥发油(AEO)促进角质形成细胞HaCaT摄取延胡索乙素(THP)的作用及其机制.方法 采用MTT法检测SPT、AEO和THP对HaCaT细胞活力的影响;根据方中THP自发荧光的特点,采用激光共聚焦扫描显微镜可视化观察SPT及AEO促进HaCaT细胞摄取THP的作用,并用HPLC法测定HaCaT细胞中THP的量;以1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)为荧光探针,利用荧光偏振技术研究SPT、AEO及THP对HaCaT细胞的细胞膜流动性的影响.结果 SPT及AEO均能显著促进THP被HaCaT细胞摄取,且AEO的促进作用优于SPT.SPT、THP、AEO分别作用于DPH标记的HaCaT细胞后,AEO组HaCaT细胞的荧光偏振度和细胞膜微黏度均显著降低,细胞流动性增加,证明AEO是通过提高细胞膜流动性从而促进HaCaT细胞摄取THP,而THP、SPT均不能增加细胞膜流动性.结论 三伏贴中SPT及AEO均可促进HaCaT细胞摄取THP,AEO促进机制与其提高细胞膜流动性相关,而SPT的促进作用不是通过增加细胞膜流动性实现,其具体机制有待进一步探明.

目的:建立芥子、莱菔子炒制前后以及芥子不同品种饮片的UPLC图谱,分析3种中药饮片炒制前后化学成分的变化规律.方法:采用UPLC,ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×50mm,1.8 μm),流动相乙腈(A)-含0.08 mol·L-1甲酸铵的0.1％甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0～5 min,5％ ～ 20％A;5～7 min,20％A;7～ 25 min,20％ ～25％ A;25～30 min,25％ ～90％A),柱温35℃,进样量10 μL,流速0.3 mL·min-1,检测波长254 nm.结果:白芥子与炒白芥子饮片共检出7个共有峰,白芥子炒制后主要色谱峰的峰面积发生显著变化,新生成1个色谱峰a,但其原有色谱峰8～10均消失.黄芥子生品与炒制品有10个共有峰,黄芥子炒制后部分色谱峰的峰面积显著降低,色谱峰11几乎消失.莱菔子与炒菜菔子有6个共有峰,莱菔子炒制后主要色谱峰的峰面积变化显著,色谱峰a消失,新生成2个色谱峰.通过比较白芥子、黄芥子和莱菔子的UPLC图谱,发现3种中药饮片中均归属出其共性成分芥子碱硫氰酸盐,但在主要色谱峰峰面积及数量方面存在显著差异.结论:UPLC建立芥子不同品种及莱菔子生、炒饮片的图谱能全面反映出饮片的物质基础内涵以及炮制前后物质基础的变化规律,为揭示这3种中药饮片炮制原理和进一步诠释含硫代葡萄糖苷类中药饮片炒制共性原理的科学内涵提供实验依据.

目的 优化肝宝胶囊浸膏微波真空干燥工艺.方法 在单因素试验基础上,以浸膏相对密度、微波功率、干燥时间为影响因素,芥子碱硫氰酸盐、虎杖苷、大黄素含有量及含水量为评价指标,正交试验优化微波真空干燥工艺.结果 最佳条件为浸膏相对密度1.15 g/mL,微波功率8 kW,干燥时间60 min,3种成分含有量分别为2.168、10.931、1.850 mg/g,含水量为2.95％.结论 该方法稳定可行,可用于微波真空干燥肝宝胶囊浸膏.