目的:探究苦瓜多糖( Momordica charantia polysaccharide，MCP)对右旋糖酐硫酸钠(dextran sulfate sodium，DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)的保护作用及机制。 方法:提取MCP，用其治疗DSS诱导的UC。将小鼠随机分为对照组、DSS组和DSS＋MCP组，每组5只，每天监测小鼠的体重和疾病活动指数(disease activity index，DAI)。收集小鼠结肠组织和血清，采用HE染色、ELISA、RT-qPCR和流式细胞术分析肠道组织、炎症因子、CD4 ＋T细胞、中性粒细胞和巨噬细胞变化。 结果:MCP通过恢复小鼠体重和大便黏稠度降低DAI，减少出血，从而改善DSS诱导的UC。另外，MCP能够修复结肠组织的黏膜屏障功能，降低炎症细胞浸润，减轻黏膜层和肌肉层水肿，保护UC小鼠的肠道。MCP处理后小鼠结肠组织中炎症因子TNF-α和IL-1β的表达水平降低，CD4 ＋T细胞水平也降低。 结论:MCP通过抑制小鼠体重下降、修复结肠组织损伤、改善免疫系统紊乱、抑制DSS诱导的炎症细胞因子水平升高等途径改善DSS诱导的UC。本研究为MCP作为UC治疗的一种潜在饮食干预提供了参考。

目的:探讨苦瓜皂苷L对内皮祖细胞(EPC)增殖能力和内皮功能的作用及机制.方法:体外分离、培养、鉴定外周血EPC.使用不同浓度苦瓜皂苷 L处理EPC 24 h后,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞活力.使用AutoDock Tools 5.6软件,分别以磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)和蛋白激酶 B(AKT)为受体,以药物分子苦瓜皂苷L为配体采用盲对接法进行分子对接.使用PI3K/AKT抑制剂 LY294002和最佳使用浓度的苦瓜皂苷 L单独或同时处理 EPC 24 h后检测各组细胞活力和磷酸化 PI3K(p-PI3K)、磷酸化 AKT(p-AKT)及磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS)表达水平.结果:与对照组比较,苦瓜皂苷 L呈剂量依赖性地促进 EPC增殖,且40μmol/L的苦瓜皂苷L是最佳药物浓度.与对照组比较,LY294002可下调EPC细胞活力,苦瓜皂苷L可上调细胞活力.与苦瓜皂苷 L组比较,共同使用苦瓜皂苷 L和 LY294002可降低细胞活力.分子对接结果显示,苦瓜皂苷 L与 PI3K和 AKT均存在直接作用,形成稳定的锁钥结构.与对照组比较,LY294002可显著下调 p-PI3K、p-AKT和 p-eNOS蛋白水平;苦瓜皂苷L可上调p-PI3K、p-AKT和p-eNOS蛋白水平.与苦瓜皂苷 L组比较,使用苦瓜皂苷 L和 LY294002可降低 p-PI3K、p-AKT和 p-eNOS蛋白水平.结论:苦瓜皂苷 L通过 PI3K/AKT信号通路靶向调节 EPC的增殖能力,进而上调内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活化水平以促进 EPC内皮功能.

南亚果实蝇Zeugodacus tau(Walker)是一种世界性的重要检疫害虫,严重危害多种水果和瓜菜.为明确寄主植物对南亚果实蝇耐寒性的影响,本文利用过冷却点仪,对取食苦瓜Momordica charantia L.、黄瓜Cucumis sativus L.、丝瓜Luffa aegyptiaca Miller和忙果Mangifera indica L.的南亚果实蝇5个发育阶段的过冷却点和体液冰点进行了测定.结果显示:每一组寄主植物上的5个发育阶段中,南亚果实蝇5日龄蛹的过冷却点和体液冰点均为最低,显著低于1日龄蛹、幼虫和成虫;不同寄主南亚果实蝇同一发育阶段的过冷却点和体液冰点存在显著差异,均值分别为-23.97～-8.06℃和-14.02～-0.59℃,其中取食苦瓜的南亚果实蝇5日龄蛹过冷却点和体液冰点最低,均值分别为-23.97 ℃和-14.02℃,但与黄瓜无显著差异;4种寄主中老熟幼虫、1日龄蛹、1日龄雌成虫和5日龄雌成虫过冷却点均为取食黄瓜最低;杧果种群1日龄雌成虫过冷却点最高,均值为-7.47℃,苦瓜种群老熟幼虫体液冰点最高,均值为-0.59℃.本研究有助于了解寄主对南亚果实蝇耐寒力的影响,这对其越冬种群动态监测及防控具有重要指导意义.

山苦瓜Momordica charantia var.abbreviata是苦瓜的野生变种,属于药食同源物质,具有重要的食用与保健功能,常被用作保健食品和民间医药.现代药理学表明,山苦瓜的活性成分和药理作用比苦瓜显著,主要化学成分包括皂苷类、酚类、脂肪酸和丰富的微量元素与矿物质,具有抗糖尿病、抗炎、抗菌、抗癌和抗氧化等多种药理作用.全面概述山苦瓜的化学成分和药理作用,为山苦瓜的开发利用提供理论基础,以期获得更好的实用价值.

探索加味二妙颗粒安慰剂的制备工艺并开展模拟效果评价,为加味二妙颗粒临床试验提供合格的安慰剂样品,也为中药颗粒剂型安慰剂的制备与质量评价提供参考.在加味二妙颗粒综合分析结果的基础上利用正交试验进行其安慰剂制备的味道模拟和颜色模拟小试,并通过初步人工评价确定安慰剂处方:糊精 10 g,党参浸膏 5.0 g,苦瓜提取物 1.6 g,乌梅提取物0.3 g,甜菊糖苷 0.1 g,蔗糖八乙酸酯 0.004 g,靛蓝 0.004 g,柠檬黄 0.003 1 g,日落黄 0.001 8 g,乔木苦茶粉 0.001 8 g,焦糖0.001 3 g.根据安慰剂处方进行中试.对安慰剂的模拟效果进行独立性、对比性人工评价及电子鼻、电子舌客观化检测,结果显示此安慰剂处方在独立性人工评价中错误率较高,在对比性人工评价中与加味二妙颗粒得分差距不大,相似度为 99.61%;电子鼻检测安慰剂处方与加味二妙颗粒气味相似度为 99.19%,电子舌检测结果显示两者口味差距不大,相似性较高.因此,加味二妙颗粒安慰剂模拟效果较好,与加味二妙颗粒相似度高,应用于临床试验时不易破盲.此研究为中药颗粒剂型安慰剂的制备及质量评价提供了参考,对促进中药颗粒剂型安慰剂生产的规模化,推动中药安慰剂的临床应用,提高中药疗效的说服力及认可度起到一定的积极作用.

为了解苦瓜(Momordica charantia)果实品质差异的原因,以厚肉型种质'LX1-3'和薄肉型种质'ZK54'为材料,对果实发育过程中细胞壁组分含量及相关酶活性进行了分析.结果表明,花后17 d,'LX1-3'果实的横径(FD)、腔径(FLD)、果肉厚度(PT)、单瓜鲜质量(FFW)和干质量(FDW)均超过'ZK54'.细胞壁组分和酶活性表现品种间差异,水溶性果胶含量整体水平表现为厚肉型高于薄肉型,且与PT、FFW和FDW呈显著正相关;花后17～23 d'LX1-3'的半纤维素(HCE)和纤维素(CE)含量均高于'ZK54';花后3 d,两种质的β-半乳糖苷酶(β-Gal)和β-木糖苷酶(β-Xyl)活性显著高于其他3个时期,多聚半乳糖醛酸酶(PG)、β-Gal和果胶酶变化趋势与离子型果胶和共价型果胶含量的变化一致.β-Gal、β-Xyl和纤维素酶活性与 5 个生长性状间呈极显著/显著负相关,PG与FD、FLD和PT呈极显著/显著负相关.因此,细胞壁组分和酶活性与果实发育密切相关,β-Xyl和β-Gal在苦瓜早期发育中发挥主要效应,而HCE和CE对果实中后期发育影响较大.

目的 研究苦瓜酸水解产物的化学成分及其抗肝纤维化活性.方法 用正、反相柱层析等色谱手段进行分离纯化,用波谱技术与文献数据对照鉴定其结构;并用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)法测定部分化合物体外对大鼠肝星状细胞(t-HSC/Cl-6)增殖的抑制作用.结果 共分离出 10个葫芦烷型三萜类化合物,分别鉴定为:5β,19-epoxy-3β-hydroxy-19(R)-methoxy-27-norcucurbita-6,23(E)-dien-25-one(1);5β,19-epoxy-3β-hydroxy-19(S)-methoxy-27-norcucurbita-6,23(E)-dien-25-one(2);5β,19-epoxy-25-methoxycucurbita-6,23(E)-dien-3β-ol(3);karavilagenin A(4);(23E)-5β,19-epoxycucurbita-6,23,25-triene-3β-ol(5);23E-5β,19-epoxy-cucurbita-6,23-dien-3β,25-diol(6);25-O-methylkaravilagein D(7);(23E)-3β-hydroxy-7β,25-dimethoxycucurbita-5,23-dien-19-al(8);karavilagenin B(9);(19S,23E)-5β,19-epoxy-19-methoxycucurbita-6,23-diene-3β,25-diol(10).体外活性筛选发现化合物1和化合物2对t-HSC/Cl-6有一定的抑制细胞增殖作用,IC50 分别为(25.92±2.63)、(26.22±2.77)μmol·L-1.结论 化合物1和化合物2为首次从该植物中分离得到,其对肝纤维化细胞增殖有一定的抑制作用.

目前关于油茶多酚对植物病原真菌抑制作用的报道十分匮乏.本文通过分析不同条件下油茶叶多酚的提取率,确定了最佳的提取条件;分析了不同浓度多酚对常见植物病原真菌的抑制效果并对抑菌机理进行了初步研究.研究结果表明:1∶30的液料比、60％的乙醇浓度、60 min的超声波处理后,多酚提取率最高,达14.01％.每克油茶叶中加入0.80 gβ-环糊精,可使多酚提取率提升至22.92％.10％的多酚对新月弯孢霉、假禾谷镰刀菌、链格孢、草莓多主棒孢霉、大丽轮枝菌、葡萄座腔菌、尖孢镰孢菌苦瓜专化型具有一定的抑制作用,对大丽轮枝菌的抑制率高达78.52％.多酚处理对植物病原真菌体内的可溶性蛋白的代谢过程产生了较大的影响,这是植物病原真菌对化学胁迫适应过程的一种自我调节方式.本研究结果为油茶的综合开发以及植物病害的绿色防控提供了理论依据.

目的 α-苦瓜素(α-momorcharin,α-MMC)能受体依赖性靶向作用于单核细胞,调节其细胞因子表达而发挥免疫调节作用,但对巨噬细胞是否具有选择性调节作用尚不清楚.本实验通过细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的M1型炎性巨噬细胞模型,观察α-MMC对其炎性细胞因子风暴的抑制作用,并探讨其可能的靶向作用机制.方法 West-ern blot法检测WIL2-S B淋巴细胞、H9 T淋巴细胞、THP-1单核细胞和MO巨噬细胞LRP1受体蛋白表达;CCK-8法检测4种细胞的生存率;ELISA检测M1巨噬细胞炎性细胞因子的表达水平;Western blot法检测M1巨噬细胞TLR4信号通路相关蛋白的表达.结果 巨噬细胞具有与单核细胞一致的高密度LRP1受体;α-MMC在4个细胞上的存活率与该受体的密度呈正相关;α-MMC以剂量和时间依赖性抑制M1巨噬细胞的炎性细胞因子TNF-α、IL-1 β、IL-6、IL-8、MIP-1 α和MCP-1表达;α-MMC对TLR4信号通路的TAK1/p-TAK1、p-JNK、p-AP1和p-p65信号蛋白有明显的抑制作用,这种抑制作用能被LRP1受体阻断剂阻断.结论 α-MMC通过LRP1受体介导,抑制TLR4信号通路的TAK1,进而抑制下游NF-κB和MAPK通路,从而选择性抑制巨噬细胞炎性细胞因子表达.α-MMC对巨噬细胞的选择性免疫抑制作用可能使其成为治疗急性感染巨噬细胞激活综合征(macrophage activation syndrome,MAS)的非常有前途的药物.

为探索瓜实蝇Zeugodocus cucurbitae不同寄主种群对杀虫剂的敏感性,本研究在室内通过药膜法测定了瓜实蝇节瓜、黄瓜、丝瓜和苦瓜种群4日龄成虫对4种杀虫剂的敏感性,随后将瓜实蝇不同寄主种群致死中浓度LC50进行比较,计算抗性倍数.结果表明,4个寄主种群对甲维盐的敏感性为节瓜＞苦瓜＞丝瓜＞黄瓜,其中节瓜、苦瓜种群对甲维盐最敏感,其次是丝瓜、黄瓜,LC50值分别为0.250、0.391、0.809和1.035 mg/L.4个寄主种群对灭多威的敏感性表现为节瓜＞黄瓜＞苦瓜＞丝瓜,LC5o值分别为0.302、0.318、0.652和0.804 mg/L.对多杀菌素的敏感性大小依次为黄瓜、节瓜、丝瓜、苦瓜,LC50值分别为1.157、1.198、1.232和2.029 mg/L.对啶虫脒的敏感性为苦瓜＞节瓜＞黄瓜＞丝瓜,LC50值分别为17.946、20.166、20.190和21.986 mg/L,其中对甲维盐的敏感性差异幅度最大,为4.140倍,其次是灭多威,为2.654倍,对啶虫脒的敏感性差异幅度最小,为1.225倍.表明寄主植物可引起瓜实蝇对杀虫剂的敏感性变化.