目的:探讨海南省关节炎症状患者的莱姆病感染状况，为莱姆病的防控提供依据。方法:采用抽样调查方法，2013至2018年在海南省8个市（县）（海口市、三亚市、儋州市、东方市、文昌市、琼海市、琼中县、五指山市）的医疗机构，对其进行抽样调查，收集2 311例关节炎症状就诊的患者血清标本，并对临床资料进行描述性研究。采用间接免疫荧光法（IFA）对血清标本进行莱姆病抗体初筛检测，并采用免疫印迹法（WB）对IFA检测阳性的血清标本进行确诊实验。采用χ2检验进行统计分析。结果:IFA方法检测血清样本2 311份，166份阳性，阳性率7.18%。进一步用 WB方法确认，62份阳性， 莱姆病抗体阳性率为2.68%（62/2 311）。海南省不同地区关节炎症状患者的莱姆病抗体阳性率差异有统计学意义（ χ2 =40.636， P<0.001），琼中县阳性率最高，为8.81%（14/159）；儋州市阳性率次之，为5.62%（5/89）；东方市阳性率最低，为0.51%（2/394）。莱姆病血清抗体阳性率男性及女性分别是2.79%（33/1 182）和2.57%（29/1 129）；各年龄组间的抗体阳性率在1.74%~3.64%，在性别和年龄间差异无统计学意义（ χ2=0.110， P=0.740 ； χ2=1.938， P=0.747）。 结论:海南省8个市（县）均存在伯氏疏螺旋体感染导致的关节炎症状患者，但莱姆病抗体阳性率各市（县）存在差异，以琼中县最高。

目的:探讨布鲁杆菌等感染合并抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白免疫球蛋白G抗体相关疾病（MOGAD）的临床特点及预后。方法:报道郑州大学第一附属医院神经内科2022年4月诊断的1例布鲁杆菌病合并MOGAD患者的临床资料，回顾并总结文献报道的感染合并MOGAD的相关病例。结果:本例患者为44岁男性，主要表现为间断发热、食欲不振，后突发双下肢无力、麻木、疼痛伴排尿困难，随后出现右颈部疼痛。磁共振成像示脊柱及脊髓病变。脑脊液及血清髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体阳性，血培养示布鲁菌属（+）。诊断为布鲁杆菌病合并MOGAD。予以抗布鲁杆菌治疗及激素治疗后，症状好转。回顾感染合并MOGAD的相关文献，共纳入22例患者，感染源包括新型冠状病毒、莱姆病螺旋体等，未发现布鲁杆菌感染合并MOGAD的报道。22例患者的主要临床表现为脊髓炎（63.6%，14/22）、视神经炎（40.9%，9/22）、急性播散性脑脊髓炎（18.2%，4/22）、多相播散性脑脊髓炎（4.5%，1/22）及脑膜脑炎（4.5%，1/22）。20例患者行磁共振检查，其中存在脊髓病灶者12例（60.0%，12/20）、颅内病灶10例（50.0%，10/20）、视神经病灶6例（30.0%，6/20）。19例患者行脑脊液检查，其中13例（13/19）细胞数增加，10例（10/18）蛋白增加。22例患者行激素治疗，95.5%（21/22）的患者有效，95.5%（21/22）的患者预后良好。结论:布鲁杆菌及其他多种病原体感染后均可能合并MOGAD，临床表现相似，激素治疗有效。

目的:克隆并表达中国莱姆病螺旋体基因型代表菌株伽氏疏螺旋体( Borrelia garinii， B. garinii)PD91外膜蛋白A(OspA)的126～274 aa肽段，并对其免疫保护性进行初步研究。 方法:采用聚合酶链反应(PCR)扩增 B. garinii PD91的126～274 aa OspA肽段基因，克隆至原核表达载体pET-30a上，构建pET-30a-OspA-pep重组质粒，转入大肠埃希菌感受态细胞BL21(DE3)中，利用IPTG诱导表达，表达产物用Ni-IDA树脂层析纯化，采用Western blot分析其免疫原性。将不同剂量的重组OspA-pep(rOspA-pep)蛋白(20、30、40、50、60、80、100 μg)免疫新西兰家兔，采用间接免疫荧光法(IFA)检测免疫前后的抗体滴度，选取产生抗体滴度最高的剂量组为最佳剂量组。用最佳剂量组的免疫兔血清进行体外中和试验以检测rOspA-pep蛋白免疫后血清抗体的体外杀菌能力，同时用最佳剂量的rOspA-pep蛋白免疫新西兰家兔，观察其抗体滴度变化。 结果:重组质粒pET-30a-OspA-pep构建成功并在宿主菌体内高效表达。Western blot表明rOspA-pep蛋白与 B. garinii PD91的多抗有明显的免疫应答。IFA检测结果表明rOspA-pep蛋白免疫后的兔血清IgG抗体滴度明显升高(最高可达1∶2 480)，40 μg为rOspA-pep的最佳免疫剂量。体外中和试验结果表明该剂量rOspA-pep蛋白免疫家兔后产生的抗体对10 6个/ml的 B. garinii和阿弗西尼疏螺旋体( Borrelia afzelii， B. afzelii)型代表菌株PD91和FP1的中和率达100%，对10 7个/ml的FP1的中和率为100%，对10 7个/ml的PD91的中和率为60%。用40 μg rOspA-pep在1 d和30 d免疫新西兰家兔2次后，其抗体达到高峰，持续时间为3～4个月，之后抗体滴度逐渐下降。 结论:中国莱姆病螺旋体基因型代表菌株 B. garinii PD91的126～274 aa OspA肽段具有较好的免疫原性，其诱导的抗体有较好的体外中和能力，可作为中国二代亚单位疫苗的候选成分。

慢性游走性红斑（erythema migrans，EM）是莱姆病皮肤损害的特征性表现，罕有累及皮下脂肪组织的报道。本例莱姆病合并脂膜炎患者无其他感染、自身免疫病及肿瘤等所致脂膜炎的确切证据，临床上考虑脂膜炎可能与螺旋体感染相关。本病需与结节性红斑、硬红斑、深部红斑狼疮、皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤等鉴别，治疗方法与预后尚不清楚，值得临床重视。

莱姆病(Lyme disease)又名伯氏疏螺旋体病,是20世纪70年代发现的以蜱为传播媒介,由不同基因型伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi sensu lato)感染所致的人兽共患自然疫源性疾病,主要流行于温带和亚热带地区,犬、猫、马、牛、鹿等多种动物易感,人也是该病原菌的易感宿主.人患莱姆病时的主要症状为游走性红斑、关节炎和其他神经系统症状.患病动物常表现的症状是蜱叮咬部位被毛脱落、发热、蹄叶炎、跛行等.莱姆病流行广泛,但是诊断较为困难并极易造成误诊和漏诊.为避免莱姆病对畜牧业以及宠物行业造成不利影响,亟需提高对莱姆病的关注.因此,本文对动物莱姆病及其诊断和防治技术的研究进展进行综述,以期为动物莱姆病的准确、快速诊断和防治提供参考.

目的 建立莱姆病螺旋体中国株5种基因型(巴伐利亚疏螺旋体、伽氏疏螺旋体、阿弗西尼疏螺旋体、狭义伯氏疏螺旋体和扬子疏螺旋体)的标准菌株,为菌株鉴定、诊断试剂和疫苗研发提供基础.方法 依据《病原微生物菌(毒)种国家标准株评价技术标准》(WS/T 812-2022),针对中国莱姆病螺旋体5种主要基因型,选取5株菌株(PD91、MD86、FP1、CS4和QX-S13).首先接种到BSK Ⅱ培养基中培养,暗视野显微镜下观察菌株的形态学特点.提取全基因组DNA,聚合酶链式反应扩增莱姆病螺旋体5S～23S rRNA基因间隔区并测序,将每株菌株不同代次培养物的产物序列分别进行比对分析.随后使用多位点序列分析(MLSA)方法鉴定菌株基因型,同时将不同代次菌株MLSA聚类分析结果进行比对,验证菌株遗传学稳定性.通过Illumina NovaSeq平台进行全基因组测序分析菌株基因组特征.结果 5株菌株均具有莱姆病螺旋体典型形态学特征.经特异性基因检测及MLSA分型鉴定,依次为巴伐利亚疏螺旋体(PD91),伽氏疏螺旋体(MD86),阿弗西尼疏螺旋体(FP1),狭义伯氏疏螺旋体(CS4)和扬子疏螺旋体(QX-S13)基因型,聚类分析显示与相应基因型国际参考菌株位于同一分支.稳定性实验结果显示5株菌株不同代次培养物5S～23S rRNA基因间隔区序列相似性达到100.00％,5株菌株10代次和20代次培养物MLSA聚类分析结果一致,遗传学稳定性良好.全基因组测序结果显示,基因组大小为1.26Mbp～1.80 Mbp,G+C含量为27.63％～28.20％,基因组功能和生物代谢模块分布基本相同,主要为维持细菌生长、繁殖、运动和应激等相关成分.结论 PD91、FP1、MD86、CS4和QX-S13共5株菌株具有莱姆病螺旋体典型生物学、形态学特征,基因型及分子特征稳定,可作为中国莱姆病螺旋体5种基因型的标准菌株.本研究可为建立中国莱姆病螺旋体标准化菌株体系提供基础,同时为菌株鉴定、莱姆病诊断试剂和疫苗研发提供相关资源.

目的 探索白细胞介素10(IL-10)对Borrelia疏螺旋体基础膜蛋白A(BmpA)致炎作用的抑制效应,并观察IL-10对抗炎信号通路关键分子-细胞因子信号传送阻抑物3(SOCS3)表达影响.方法 培养小鼠RAW264.7细胞,分为对照组、20 μg/mLBmpA组、20 μg/mL BmpA联合10 ng/mL IL-10处理组、20 μg/mL BmpA联合20 ng/mL IL-10处理组.于分组刺激后12、24h,收集细胞上清液,ELISA检测上清液IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,实时荧光定量PCR检测各组细胞SOCS3 mRNA相对表达水平.结果 两时间点IL-10处理组,上清液IL-6、TNF-α剂量均较BmpA组明显下降.与对照组相比,其他各组SOCS3mRNA相对表达量均明显升高,且IL-10处理组SOCS3 mRNA相对表达量较BmpA组升高更明显.结论 IL-10通过上调SOCS3降低BmpA的致炎作用,减少小鼠巨噬细胞炎性因子的分泌.

目的 了解满洲里口岸地区蜱传、鼠传疾病病原体携带情况.方法 2016年在中国-俄罗斯边境满洲里口岸地区采集蜱和鼠,采用PCR和RT-PCR法检测莱姆病螺旋体(Borrelia burgdorferi)、嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum)、巴贝西原虫(Babesia spp.))、斑点热群立克次体(spotted fever group Rickettsiae,SFGR)、汉坦病毒(Hantaan virus)和鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis).结果 共采集到132只蜱,斑点热群立克次体检出率为37.88％(50/132),嗜吞噬细胞无形体检出率为0.76％(1/132),莱姆病螺旋体检出率为25％(33/132),中华革蜱中同时检测到斑点热群立克次体和莱姆病螺旋体,存在复合感染的情况,未检出巴贝西原虫和汉坦病毒.17只鼠中,斑点热群立克次体检出率为41.18％(7/17),莱姆病螺旋体检出率为5.88％ (1/17),未检出鼠疫耶尔森菌、嗜吞噬细胞无形体、汉坦病毒和巴贝西原虫.结论 满洲里口岸地区蜱、鼠样本中检出多种病原体,应有针对性地加强当地蜱、鼠及其传播疾病的监测和防控.

为了解莱姆病Lyme disease在北京地区的感染状况,应用ELISA的方法检测了2013 ～2015年度首都医科大学附属北京友谊医院收集的1 890例莱姆病疑似患者血清中的抗莱姆病螺旋体IgG抗体,并对抗体阳性病例的临床资料进行了回顾性分析.综合分析各抗体阳性病例的流行病学史和具体临床表现,65例抗体阳性病例中57例确诊为莱姆病患者.本研究中莱姆病抗体的检出率为3.44％,临床诊断符合率为87.69％.不同性别、年龄段患者之间莱姆病的阳性率之间无差别,不同年份和季节莱姆病的阳性率之间差异显著.本文将加深医务工作者对莱姆病的认识,提高临床医师对该病的诊治水平.

为掌握云南贡山地区野生小型兽类的种类和主要细菌性病原体的携带情况,于2014—2015年在该地区诱捕野生小型兽类,进行种类鉴定,解剖取肺、 脾等组织.采用巢式PCR对无形体Anaplasmataceae、 恙虫病东方体Orientia tsutsugamushi、 斑点热群立克次体(Spotted fever group rickettsiae,SFGR)以及莱姆病螺旋体Lyme disease spirochete等4类病原体进行检测.结果共捕获小兽759只,涉及14属35种,优势属为姬鼠属(29.1％)和绒鼠属(17.4％).对其中541份标本进行无形体PCR检测,结果显示:12份新埃立克体(Candidatus Neoehrlichia mikurensis)阳性,来自姬鼠、 绒鼠、 鼩鼱和白腹鼠;2份沃尔巴克氏体Wolbachia阳性,来源于鼩鼱和灰腹鼠;3份巴尔通体Bartonella阳性,来源于绒鼠和大足鼠.采用56 kDa基因片段引物对恙虫病东方体进行检测,发现4份阳性标本.其中2份与Boryong血清型菌株同源性最高,均为97.0％;1份与Karp血清型同源性最高,为86.0％;另一份与Kato-related血清型同源性最高,为86.0％,系统发生树显示,其与Kato-related位于同一分支.提示这两份标本可能是恙虫病东方体Karp血清型和Kato-related血清型菌株的变异株.