目的:探讨同型半胱氨酸（Hcy）代谢酶基因多态性与汉族多发性骨髓瘤（MM）预后不良的关系。方法:选取河北北方学院附属第一医院2018年2月至2020年3月收治的128例汉族MM患者（疾病组）和同期招募的120例汉族健康志愿者（对照组）为研究对象，两组均检测血浆Hcy水平及Hcy代谢酶基因多态性，包括亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）C677T、MTHFR A1298C、蛋氨酸合成酶还原酶（MTRR）A66G、胱硫醚β合成酶（CBS） 844ins68、蛋氨酸合成酶（MS）A2756G。疾病组采用常规方法治疗，于治疗后跟踪随访1年并统计预后不良的发生情况，采用Logistic多元回归分析Hcy代谢酶基因多态性与疾病组预后不良的关系。结果:疾病组血浆Hcy水平高于对照组[（15.01 ± 2.98）μmol/L比（8.45 ± 1.69）μmol/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）。疾病MTHFR C677T位点TT基因型频率和T等位基因频率分别为26.56%、29.30%，高于对照组的6.67%、16.25%，CT基因型频率为5.47%，低于对照组的19.17%，差异均有统计学意义（ P<0.05）。两组其余基因位点基因型分布和等位基因频率比较差异均无统计学意义（ P>0.05）。疾病组预后不良的发生率为49.22%（63/128），年龄、血小板计数和血清β 2微球蛋白、κ轻链、血浆Hcy水平及MTHFR C677T位点TT基因型均是疾病组预后不良的影响因素（ OR=7.286、0.545、6.841、6.284、8.117、8.440， P<0.05）。 结论:汉族MM患者血浆Hcy水平、MTHFR C677T位点TT基因型频率和T等位基因频率均高于健康人群，CT基因型频率低于健康人群，且汉族MM患者预后不良与血浆Hcy水平、MTHFR C677T位点TT基因型有关。

目的 探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T、A1298C及蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G基因多态性在男性无精子症患者中的分布情况.方法 选取于2020年1月至2023年8月就诊于新疆佳音医院不孕不育门诊的97名无精子症患者,所有患者进行睾丸组织活检并基因测序MTHFR C677T、A1298C及MTRR A66G基因的多态性.按照手术中是否找到精子将患者分为有精子组(n=70)和无精子组(n=27),比较两组患者的基本资料以及MTHFR C677T、A1298C及MTRRA66G基因型多态性的频率及等位基因频率分布.结果 两组患者间年龄、体质量指数(BMI)以及是否伴随精索静脉曲张的差异均无统计学意义(P＞0.05).MTHFR C677T包括CC、CT、TT三个基因型及C、T两个等位基因,A1298C包括AA、AC、CC三个基因型及A、C等位基因;MTRR A66G包括AA、AG、GG三个基因型,A、G两个等位基因.有精子组和无精子组患者的MTHFR基因677位点TT基因型频率分别为18.6％、18.5％,T等位基因频率分别为42.1％、40.7％;MTHFR基因1298位点CT基因型频率分别为4.3％、3.7％,C等位基因频率分别为20.7％、18.5％;MTRR基因66位点GG基因型频率分别为9.2％、8.0％,G等位基因频率分别为34.6％、40.0％;两组患者间MTHFR C677T、A1298C及MTRR A66G的基因型频率和等位基因频率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 MTHFR C677T、A1298C及MTRR A66G基因多态性在无精子症患者中的分布无显著变化,MTHFR基因和MTRR基因的多态性对睾丸内是否能找到精子也无显著影响.

探讨二陈汤预防非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)小鼠的作用效果,并初步探究其可能机制,为二陈汤在临床上用于预防NASH提供科学数据.将C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤低剂量组(ECD_L,6 g·kg-1)、二陈汤中剂量组(ECD_M,12 g·kg-1)、二陈汤高剂量组(ECD_H,24 g·kg-1),每组8只.正常组以蛋氨酸-胆碱补充(methionine and choline supplement,MCS)饲料饲养,其余各组均以蛋氨酸-胆碱缺乏(methionine and choline deficient,MCD)饲料饲养.各组动物均给予相应的饮食喂养,但药物干预组在MCD饲料喂养的基础上,分别给予低、中、高剂量的二陈汤(10 mL·kg-1·d-1)灌胃,连续6周,整个实验过程中小鼠可自由进食、饮水.给药结束后对其禁食不禁水12 h,使用20％乌拉坦腹腔注射麻醉小鼠,收集小鼠心脏血液和肝组织.血清用于检测谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransaminase,AST)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)及肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)的水平;肝脏组织分别用于苏木素-伊红(hematoxy-lin-eosin,HE)染色检测肝脏病理变化,实时定量反转录 PCR(real-time quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)分别用于检测核因子 E2 相关因子 2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)通路相关基因和蛋白的表达水平.结果显示,与正常组比较,模型组小鼠血清ALT、AST水平均显著升高;小鼠肝组织存在大量的脂肪空泡和明显的炎症细胞浸润;血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著升高,IL-10水平显著降低;肝组织脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、IL-1β mRNA 表达均显著上调,GPX4、Nrf2、NAD(P)H 醌氧化还原酶[NAD(P)H:quinine oxidoreductase,NQO1]mRNA表达均显著下调.与模型组比较,ECD_M组和ECD_H组小鼠血清ALT、AST水平显著降低,ECD_L组AST水平显著降低;肝组织脂肪空泡数量及炎性细胞浸润程度均有不同程度改善;血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著降低,IL-10水平仅ECD_H组显著升高;肝组织FASN、MCP-1、IL-1β mRNA表达均显著下调,GPX4、NQO1 mRNA表达均显著上调,ECD_M组、ECD_H组Nrf2 mRNA表达显著上调.Western blot结果显示,与模型组相比,各给药组Nrf2、GPX4蛋白表达水平显著升高,FASN蛋白表达水平显著降低;ECD_M组和ECD_H组NQO1蛋白表达水平显著升高.综上所述,二陈汤可减少NASH小鼠肝脏脂质堆积和氧化应激,肝脏炎症和肝损伤,其机制可能与激活Nrf2/GPX4通路有关.

目的 探讨育龄期女性亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、蛋氨酸合成酶(MS)基因多态性与不良妊娠及子代出生缺陷的关系.方法 选取2014年9月至2016年9月本院收治的200例有不良妊娠结局病史妇女为研究对象,其中子代出生缺陷者52例,同期选取127例体检健康正常育龄期妇女作为对照,采集所有受试者外周血并提取DNA,利用限制性内切酶片段长度多态性PCR(PCR-RFLP)技术检测分析MTHFR、MS基因多态性,分析MTHFR基因C677T、A1298C多态性位点及MS基因A2756G多态性位点与不良妊娠及子代出生缺陷之间的关系.结果 不良妊娠组、出生缺陷组MTHFR C677T位点C/C型基因频率、C等位基因频率明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),C/T、T/T基因型频率及T等位基因频率明显高于对照组(P＜0.05);不良妊娠组、出生缺陷组MTHFR A1298C位点A/A型基因频率、A等位基因频率明显低于对照组(P＜0.05),A/C、C/C基因型频率及C等位基因频率明显高于对照组(P＜0.05);不良妊娠组、出生缺陷组CC/AA、CC/AC基因型频率明显低于对照组(P＜0.05),CT/AA、CT/CC、TT/AA、TT/AC基因型频率明显高于对照组(P＜0.05);不良妊娠组、出生缺陷组与对照组MS基因A2756G位点等位基因频率及基因型频率分布比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 叶酸代谢酶MTHFR基因多态性与不良妊娠及子代出生缺陷关系密切,MS基因多态性与不良妊娠及子代出生缺陷无关.

目的 研究槲皮素对高同型半胱氨酸血症(HHcy)大鼠甲基代谢相关酶活性的影响.方法 48只Wistar大鼠,按照血清Hcy水平将动物分成4组,分别为对照组(AIN-93饲料)、1％蛋氨酸组(1％ Met)、0.5％槲皮素组(0.5％Q)、1％蛋氨酸±0.5％槲皮素组(1％ Met±0.5％ Q),每组12只,雌雄各半,单笼饲养.用相应饲料喂养6周后,乙醚麻醉,球后静脉丛采血,离心取血清,处死后取肝脏.检测血清同型半胱氨酸(Hcy)、S-腺苷蛋氨酸(SAM)、S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)、血清和肝脏槲皮素及其甲基化产物含量以及肝脏儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)、蛋氨酸合成酶(MS)、5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)、二氢叶酸还原酶(DHFR)活性.采用RT-PCR法检测肝脏COMT mRNA的表达情况.结果 1％ Met组血清Hcy水平显著升高;0.5％Q组血清SAM水平显著升高,肝脏COMT活性和mRNA表达显著降低;1％ Met±0.5％Q组血清Hcy水平与对照组无统计学差异,MS、MTHFR和SHMT活性显著增强.结论 槲皮素可增强HHcy大鼠肝脏MTHFR和SHMT的活性,这可能是槲皮素降低Hcy的重要靶点.

目的 研究5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T和A1298C位点,蛋氨酸合成酶(MS) A2756G位点,以及蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G位点的单核苷酸多态性(SNPs)和先天性心脏病(CHD)的关联.方法 采用病例-对照研究,限制相应条件于2016年1月-2017年4月在河北省儿童医院心脏外科收集了200名CHD患儿作为病例组,200名正常体检儿童作为对照组.通过聚合酶链式反应(PCR)后Sanger测序的分析方法检测两组儿童的MTHFR C677T和A1298C位点、MS A2756G位点以及MTRR A66G位点的基因型及其分布,分析上述4个SNP位点与整体CHD和单一以及多发畸形型CHD发病风险之间的关系.结果 MTHFRC677T位点等位基因T携带者相对于等位基因C携带者发生CHD的OR=2.47(95％ CI1.86～3.29,P＜0.001).与纯合子CC型比较,杂合子CT个体患CHD的OR =2.32(95％ CIl.35～3.98,P＜0.05),而突变型纯合子TT个体患CHD的风险是CC个体的5.37倍(95％ CI3.01 ～9.60,P＜0.001);MTHFR A1298C位点等位基因C携带者相比于等位基因A携带者发生CHD的OR=0.53(95％ CI0.36～0.77,P＜0.05).杂合子AC个体患病风险低于野生型纯合子AA个体(OR =0.41,95％ CI0.26～ 0.64,P＜0.001);在分类后的单一及多发畸形型CHD中,以上两个位点的等位基因频率及基因型频率依然具有统计学意义(P＜0.05).以上两位点的组合基因型分析显示:相比于携带双野生型CC/AA的个体,携带CT/AA个体的患病风险增加到了4.65倍(95％CI2.16～10.02),TT/AA型个体增加到了7.05倍(95％ CI3.37 ～ 14.79).统计结果表明MS A2756G和MTRR A66G位点对整体CHD以及对分类后的单一及多发畸形型CHD的发生均无影响(P＞0.05).结论 MTHFR C677T位点的突变型等位基因T可能为CHD的危险因素,A1298C位点的突变型等位基因C可能是CHD的保护因素,这两个位点对CHD的发生可能存在联合作用.

子痫前期是妊娠期女性出现的高血压、蛋白尿等多种症状并存的一组疾病,是导致孕产妇和围生儿死亡率增高的重要原因.同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是一种含硫氨基酸,是蛋氨酸的中间代谢物,血浆Hcy水平受孕妇亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性、叶酸以及维生素B12等因素的影响.正常妊娠女性血浆Hcy浓度较未孕女性降低.血浆Hcy水平升高可能通过氧化应激、血浆一氧化氮/内皮素水平失衡、胱硫醚b合成酶/胱硫醚g裂解酶/硫化氢通路等多种机制损伤血管内皮细胞,参与子痫前期的发生发展过程.妊娠期动态监测孕妇血浆Hcy水平可能为子痫前期的早期预测和干预提供新的手段.

目的 探讨蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR) 66A＞G基因多态性与精子活力低下和精子数量低下的原发性男性不育的相关性.方法 通过PCR-直接测序分析对389例河南汉族健康已生育男性和410例河南汉族原发性不育男性(少弱精子症167例、弱精子症103例、无精子症113例、少精子症11例、隐匿精子症16例)的外周血基因组DNA的MTRR 66A＞G多态性位点进行基因型测序分析.结果 MTRR 66A＞G多态性位点仅与精子活力低下(弱精子症和少弱精子症)的原发性男性不育的发生有关(P＜0.05),而与精子数量低下(少精子症、隐匿精子症和无精子症)的原发性男性不育无相关性(P＞0.05).结论 MTRR 66A＞G突变可能是造成精子活力低下的遗传易感因素但并不是精子数量低下的遗传易感因素.

目的 探讨土家族亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因677、1298位点及蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因66位点单核苷酸多态性(SNP)及其与血清同型半胱氨酸水平的关系.方法 选取土家族脑卒中住院患者92例作为卒中组,同期140例土家族健康体检人群作为对照组.采用PCR法检测两组MTHFR基因677、1298位点及MTRR基因66位点SNP及基因型,高效液相色谱法检测血浆同型半胱氨酸水平.比较MTHFR基因677、1298位点及MTRR基因66位点不同基因型脑卒中患者同型半胱氨酸水平,分析MTHFR、MTRR基因上述位点SNP与脑卒中的关系.结果 两组MTHFR基因677位点CC、TT、CT基因型及C、T等位基因,1298位点CC、AA、AC基因型及C、A等位基因分布比较差异无统计学意义(P均>0.05);与对照组相比,卒中组MTRR基因66位GG基因型比率上升,AG基因型比率下降(χ2分别为15.13、5.58,P均<0.05).MTHFR基因677位点TT基因型同型半胱氨酸水平高于CC、CT型(P均<0.05).MTHFR基因677、1298位点及MTRR基因66位点SNP与脑卒中发生无明显相关性(P均>0.05).结论 土家族脑卒中患者MTRR基因66位点GG基因型比率上升,AG基因型比率下降;MTHFR基因677位点TT基因型与脑卒中患者高同型半胱氨酸水平有关.

该文总结分析大量文献、 国内大型学术会议报告了解以叶酸代谢基因导向的个体化给药在药学服务中的发展现状及前景,确定个体化用药方案的制定思路.叶酸代谢相关基因亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR) C677T 和蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR) A66G 不但与多种疾病的发生相关, 而且根据其多态性可以指导临床个体化给药, 从而增加药效或减少不良反应.