目的:研究皮肤黑素瘤细胞与血管内皮细胞间VEGF-IL-6-STAT3信号交互作用机制。方法:将血管内皮细胞EC-304分成3组：对照组，常规培养；血管内皮生长因子（VEGF）组，在含VEGF 165（50 μg/L）的内皮细胞培养基中培养；A375共培养组，与黑素瘤细胞A375共培养。24 h、48 h、72 h后收集培养液，酶联免疫吸附实验检测白细胞介素6（IL-6）的分泌量。将A375细胞分为4组：对照组，常规培养；A375+ EC-304组，与EC-304共培养；A375+ EC-304+ IL-6组：与EC-304细胞在含STAT3通路激动剂IL-6（50 μg/L）的DMEM中共培养；A375+ EC-304+ JSI-124组：与EC-304在含STAT3通路抑制剂JSI-124（1 μmol/L）的DMEM中共培养。分别在24 h、48 h、72 h后收集细胞，用Western印迹、CCK-8、Transwell侵袭实验分别检测STAT3、p-STAT3蛋白表达、细胞增殖活性及侵袭活性。采用双因素方差分析及 t检验统计分析数据。 结果:与对照组比较，VEGF组、A375共培养组EC-304培养基中IL-6分泌量均升高（ FVEGF = 29.63， P < 0.001； FA375 = 11.09， P = 0.020）。与对照组比较，A375+ EC-304组A375细胞p-STAT3蛋白表达升高（ P < 0.001），细胞活性增强（ P < 0.001），侵袭细胞数从（86.13 ± 7.24）个增加到（152.66 ± 16.04）个（ t= 4.43， P < 0.001）；与A375+ EC-304组比较，A375+ EC-304+ IL-6组细胞p-STAT3蛋白表达升高（ P < 0.001），细胞活性增强（ P < 0.001），侵袭细胞数量增加至（187.34 ± 14.38）个（ t= 2.17， P < 0.001）；与A375+ EC-304组比较，A375+ EC-304+ JSI-124组细胞的p-STAT3蛋白表达降低（ P < 0.001），细胞活性减弱（ P < 0.001），侵袭细胞数减少至（124.92 ± 8.72）个（ t=-1.86， P < 0.001）。 结论:皮肤黑素瘤A375细胞与血管内皮细胞之间存在VEGF-IL-6-STAT3信号交互作用机制，这种机制可促进A375细胞的增殖和侵袭。

目的:分析肺腺癌表皮生长因子（EGFR）基因外显子19及21突变患者的临床、病理及CT特征。方法:回顾性分析2012年12月至2020年12月重庆医科大学附属第一医院肺腺癌患者683例的临床、病理及影像资料。其中男性351例，女性332例，年龄25~89（62±11）岁。根据基因突变状态分为EGFR基因常见位点突变（外显子19、21突变）382例（突变组），包括外显子19突变者165例（外显子19突变亚组），外显子21突变者217例（外显子21突变亚组），及EGFR基因无突变301例（无突变组）。突变组与无突变组、外显子19突变亚组与外显子21突变亚组各特征的比较采用独立样本 t检验和χ 2检验。将单因素分析差异有统计学意义的指标纳入二元logistic回归分析筛选出独立预测因子并构建模型。以受试者操作特征曲线及曲线下面积（AUC）评估模型或指标的预测效能。 结果:突变组与无突变组肺腺癌患者的性别分布、吸烟史、实体生长方式为主占比、周围型分布、肿瘤最大径（3 cm为截点）分布、毛刺征、磨玻璃密度影、充气支气管征、血管集束征、胸膜凹陷征及肺内转移灶数目（10个为截点）、胸腔积液、坏死、胸内淋巴结转移差异有统计学意义（ P<0.05）。logistic回归分析示女性（OR=5.230，95%CI 3.534~7.740， P<0.001）、无吸烟史（OR=2.970，95%CI 1.986~4.443， P<0.001）、磨玻璃密度影（OR=3.092，95%CI 1.746~5.477， P<0.001）、无坏死（OR=1.754，95%CI 1.047~2.939， P=0.033）、血管集束征（OR=3.129，95%CI 1.971~4.969， P<0.001）、胸膜凹陷征（OR=2.434，95%CI 1.680~3.526， P<0.001）及肺内转移灶≥10个（OR=2.242，95%CI 1.284~3.915， P=0.005）为肺腺癌EGFR基因外显子21及19突变的独立预测因素，以其构建的logistic模型预测肺腺癌EGFR基因外显子21及19突变的AUC为0.804。EGFR基因外显子19突变亚组与外显子21突变亚组的性别分布、腺泡状为主生长方式占比、周围型分布、血管集束征及胸膜凹陷征差异有统计学意义（ P<0.05）。logistic回归分析示血管集束征（OR=1.833，95%CI 1.187~2.831， P=0.006）是预测肺腺癌EGFR基因外显子21突变的独立危险因素，其鉴别腺癌EGFR基因外显子21突变与外显子19突变的AUC为0.604。 结论:肺腺癌EGFR常见位点突变与无突变、EGFR基因外显子19与外显子21突变患者的临床、病理及CT特征均存在一定差异，熟悉和掌握这些差异，有助于基因突变状态未知型肺腺癌患者的个体化治疗。

目的:探讨晚期乳腺癌应用贝伐珠单抗联合卡培他滨治疗的有效性及安全性。方法:选择2019年8月至2021年5月于中国人民解放军海军安庆医院肿瘤中心收治确诊的76例晚期乳腺癌患者，根据治疗方案不同，将患者分为对照组（采用单药卡培他滨治疗）和试验组（采用贝伐珠单抗联合卡培他滨治疗），每组38例。治疗4个周期后对比两组患者的临床疗效、无进展生存期（PFS）、总生存期（OS）和不良反应，比较治疗前后患者血管内皮生长因子（VEGF）-121、VEGF-145、VEGF-165水平、生命质量。结果:试验组的客观缓解率[57.89%（22/38）]虽高于对照组[42.11%（16/38）]，但差异无统计学意义（ χ2=1.89， P=0.169）；试验组的疾病控制率[81.58%（31/38）]优于对照组[55.26%（21/38）]，差异有统计学意义（ χ2=6.09， P=0.014）。试验组患者中位PFS（6.3个月）长于对照组（4.2个月），差异有统计学意义（ χ2=0.48， P=0.003）；试验组患者中位OS（14.8个月）与对照组（13.2个月）比较，差异无统计学意义（ χ2=0.15， P=0.704）。治疗后试验组患者血清VEGF-121[（201.25±18.37）ng/L比（276.83±20.26）ng/L]、VEGF-145[（102.24±12.16）ng/L比（170.39±15.28）ng/L]、VEGF-165[（135.08±14.32）ng/L比（210.53±16.09）ng/L]水平比对照组低，差异均有统计学意义（ t=17.03， P<0.001； t=21.51， P<0.001； t=21.59， P<0.001）。治疗后试验组健康调查简表（SF-36）生理功能[（80.18±13.96）分比（71.72±16.12）分]、生理职能[（67.19±30.62）分比（53.12±9.86）分]、躯体疼痛[（70.01±17.97）分比（61.06±17.57）分]、总体健康[（68.67±18.92）分比（57.96±20.97）分]、活力[（78.39±19.37）分比（68.26±18.52）分]、社会功能[（82.24±19.73）分比（70.92±20.31）分]、情感职能[（73.81±28.86）分比（60.23±29.19）分]、精神健康[（76.19±12.82）分比（70.31±12.54）分]评分均高于对照组，差异均有统计学意义（ t=2.45， P=0.017； t=2.03， P=0.046； t=2.19， P=0.031； t=2.34， P=0.022； t=2.33， P=0.023； t=2.46， P=0.016； t=2.04， P=0.045； t=2.02， P=0.047）。试验组患者不良反应发生率[18.42%（7/38）]低于对照组[76.32%（29/38）]，差异有统计学意义（ χ2=25.54， P<0.001）。 结论:贝伐珠单抗联合卡培他滨化疗对晚期乳腺癌具有较好的疗效，可显著降低患者VEGF水平，提高患者的生命质量，且不良反应小，具有较高的安全性。

目的:探讨携带人血管内皮生长因子165（vascular endothelial growth factor 165, VEGF 165）的重组腺病毒（Ad-hVEGF 165）和携带人组织基质金属蛋白酶抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinase 1, TIMP-1）的重组腺病毒（Ad-hTIMP-1）对心肌梗死大鼠的作用及可能机制。 方法:健康雄性清洁级8周龄Wistar大鼠30只，采用随机数字表法随机分为5组，假手术组（Sham），空载病毒对照组（Ad-Track），Ad-hVEGF 165组，Ad-hTIMP-1和双基因组（hVEGF 165+hTIMP-1），每组6只。除Sham组外，各组大鼠均结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型，以心电图出现ST段弓背抬高，Q波或T波倒置，局部心肌变白为模型成功。分别在心肌梗死区域四点注射相应重组腺病毒病毒生理盐水稀释液100 μL（1×10 10 VP/100 μL）；Sham组未予任何处理。4周后实验动物完成超声心动图检测后处死取心脏组织。免疫组织化学检测大鼠心肌组织hVEGF 165和hTIMP-1基因表达；实时荧光定量PCR检测各组大鼠心肌组织凋亡相关因子mRNA表达；免疫组织化学检测各组大鼠心肌组织凋亡相关因子蛋白表达。正态分布计量资料多组间均数比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:超声心动图检测结果显示：Ad-Track组心率（heart rate，HR）（480.83±24.09）次/min、左室舒张末径（left ventricular end-diastolic dimension，LVEDD）（6.88±0.44）mm、左室收缩末径（left ventricular end-systolic dimension，LVESD）（4.85±0.42）mm均较Sham组（433.16±17.86)次/min、（6.20±0.45）mm、（4.06±0.70），增加（ P<0.05），左室射血分数（left ventricular ejection fraction，LVEF）（62.70±3.17）、左室短轴缩短率（left ventricular fractional shortening，LVFS）（29.52±1.88）%均较Sham组（72.78±5.44）%、（37.20±4.71）%显著降低（ P<0.01）；hVEGF 165-hTIMP-1组LVEF（71.50±6.23）%、LVFS（36.17±5.27）%均显著高于Ad-Track组（ P<0.01），LVEDD（6.22±0.39）mm、LVESD（4.13±0.23）mm均低于Ad-Track组（ P<0.05）；hVEGF 165-hTIMP-1组LVEF、LVFS均高于Ad-hVEGF 165组（64.65±4.00）%、（30.95±2.57）%（ P<0.05）。实时荧光定量PCR结果显示：hVEGF 165-hTIMP-1组心肌组织Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、Bal-xl/Bcl-2相关死亡促进因子（Bad）mRNA表达均较Ad-Track组降低（ P<0.01或 P<0.05），B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）mRNA表达均较Ad-Track组升高（ P<0.01）；hVEGF 165-hTIMP-1组心肌组织Bax、Caspase-3 mRNA表达较Ad-hVEGF 165组降低（ P<0.05）。hVEGF 165-hTIMP-1组心肌组织Bax、Caspase-3、Bad、Bcl-2 mRNA表达与Sham组差异无统计学意义（均 P>0.05）。免疫组织化学结果显示：hVEGF 165-hTIMP-1组Bax和Caspase-3蛋白表达较Ad-hVEGF 165组、Ad-hTIMP-1组及Ad-Track组显著降低（均 P<0.01），Bcl-2蛋白表达较Ad-hVEGF 165组、Ad-hTIMP-1组及Ad-Track组升高（均 P<0.05）。与Sham组比较，hVEGF 165-hTIMP-1组Bax、Caspase-3、Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:联合hVEGF 165和hTIMP-1基因过表达可改善大鼠心肌梗死后心脏收缩功能，其机制可能与抑制心肌细胞凋亡相关，且hVEGF 165和hTIMP-1联合可能具有协同作用。

目的:探究血管内皮生长因子(VEGF)对脊髓性肌萎缩症(SMA)中运动神经元变性的作用。方法:采用SMA小鼠模型，同窝杂合子为对照组，检测小鼠出生后1、5、9 d脊髓腰椎1~2段运动神经元的数量，通过转录组测序分析脊髓中基因变化，采用实时定量聚合酶链反应法(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测脊髓组织中VEGF、Kdr等表达，最后采用反义核苷酸药物治疗SMA小鼠，运用qRT-PCR和Western blot检测VEGF基因和蛋白的表达水平。组间比较采用 t检验和单因素方差分析。 结果:出生后5 d和9 d脊髓性肌萎缩症小鼠脊髓L1~L2段运动神经元数量(15.60±1.66、13.0±2.0)少于对照组(25.33±1.18、26.0±2.0)，差异有统计学意义( t＝11.37、13.35， P<0.05)。转录组测序结果通过KEGG分析得到在脊髓性肌萎缩症组中，与血管新生相关的240个基因发生显著变化。通过qRT-PCR验证显示VEGF其中一个与运动神经元死亡密切相关剪接本VEGF165表达(0.56 ±0.07)低于对照组(1.00±0.06)，差异有统计学意义( t＝5.251， P<0.05)，且VEGF受体Kdr、Flt1和Flt2(0.17±0.05、0.36±0.09、0.50±0.08)低于对照组(1.00±0.09、1.00±0.10、1.00±0.07)，差异有统计学意义( t＝4.251、3.247、5.124， P<0.05)。在脊髓性肌萎缩症中VEGF及下游受体Kdr蛋白水平(0.5±0.08、0.35±0.04)低于对照组(1.00±0.12、1.00±0.07)，差异有统计学意义( t＝3.214、3.167， P<0.05)。 结论:在SMA中VEGF的下调对运动神经元死亡具有重要作用。

目的:分析老年非小细胞肺癌（NSCLC）患者中血管内皮生长因子受体（EGFR）突变、程序性死亡配体1（PD-L1）、细胞增殖相关抗原（Ki-67）表达及其与患者性别、组织学类型、TNM分期等临床参数间的相关性。方法:收集2020年1月至12月在复旦大学附属华东医院就诊的340例老年NSCLC患者组织标本，其中男性195例，女性145例，年龄（68.9±6.0）岁。按性别、组织学类型及TNM分期等临床参数对患者进行分组。采用超级突变扩增阻滞系统（Super-ARMS）方法及免疫组化方法检测老年NSCLC患者中EGFR突变、PD-L1及Ki-67的表达情况，对EGFR突变、PD-L1及Ki-67的表达与临床参数间的相关性进行统计学分析，采用Pearson相关分析EGFR突变与PD-L1及Ki-67表达间的相关性。结果:在老年NSCLC患者组织标本中，EGFR突变阳性率为48.53%（165/340），以L858R和19del突变最为常见，分别为56.36%（93/165），30.30%（50/165）。其中EGFR的突变率在女性、肺腺癌、高分化、Ⅰ+Ⅱ分期患者中较高，分别为65.52%（95/145）、53.77%（164/305）、56.75%（143/252）、52.53%（135/257）。此外，PD-L1表达阳性率在老年肺非腺癌患者和中/低分化腺癌中较高，分别为37.14%（13/35），24.53%（13/53）。PD-L1表达阴性率在Ⅰ+Ⅱ期、淋巴结未转移及Ki-67弱阳性老年NSCLC患者中较高，分别为89.11%（229/257）、87.63%（248/283）、94.71%（197/208）。相关性分析显示，EGFR突变与PD-L1及Ki-67的表达呈负相关（PD-L1： r=-0.22， P<0.001；Ki-67： r=-0.32， P<0.001）。 结论:老年NSCLC患者中EGFR突变与PD-L1及Ki-67表达呈负相关，EGFR突变与PD-L1表达联合检测对指导老年NSCLC患者的靶向用药和免疫治疗具有重要的意义。

目的 探究前列腺穿刺术后不同时机行腹腔镜前列腺癌根治术(LRP)对治疗效果的影响.方法 前瞻性选取2022年1月至2023年8月新乡医学院第一附属医院收治的165例前列腺癌(PCa)患者作为研究对象,按照随机数表法分为超早期组、早期组、晚期组各55例.超早期组于前列腺穿刺术后7d内行LRP,早期组于前列腺穿刺术后6周内行LRP,晚期组于前列腺穿刺术后6～8周行LRP.比较三组患者的切缘阳性率、手术相关指标以及术前和术后1d、3d的创伤指标[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)],术前与术后7d的尿流动力学[最大尿流率状态下逼尿肌压力(Pdetat Qmax)、残余尿量(PVR)、最大尿流率(Qmax)],术前与术后3个月、6个月的肿瘤因子[血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、前列腺特异性抗原(PSA)]水平,术后3个月、6个月的尿失禁和勃起功能异常率.结果 三组患者的切缘阳性率与手术相关指标比较差异均无统计学意义(P>0.05);术后1d,超早期组患者的CRP和IL-6水平分别为(12.25±1.68)mg/L、(33.18±6.22)ng/L,明显高于早期组的(10.71±1.41)mg/L、(28.51±5.19)ng/L和晚期组的(10.53±1.25)mg/L、(28.39±5.37)ng/L,差异均有统计学意义(P<0.05);三组患者术后7d的尿流动力学比较差异无统计学意义(P>0.05);三组患者术后3个月、6个月的血清PSA、TGF-β1、VEGF水平、术后尿失禁、勃起功能异常率比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 前列腺穿刺术后不同时机行LRP对手术效果无明显影响,但穿刺术后越早手术机体的创伤应激越明显,实践中需根据患者耐受力合理选择手术时机.

目的 观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)预防表皮生长因子2(Her-2)阳性乳腺癌接受蒽环类联合曲妥珠单抗治疗中发生心脏毒性事件的效果,并分析影响心脏毒性的相关因素.方法 前瞻性病例对照研究.纳入2015年1月至2020年12月在丽水市中医院接受蒽环类联合曲妥珠单抗治疗Her-2阳性的267例乳腺癌患者,根据随机数字表法分为ACEI组(134例)和对照组(133例).两组均给予乳腺癌放化疗治疗,而ACEI组还给予依那普利.随访截止时间为2023年8月1日,主要观察指标是随访期间心脏毒性事件,包括心血管死亡、心肌梗死、心力衰竭住院或恶性心律失常.次要观察指标是随访2年和5年时的心功能变化.比较两组的基线临床资料,Kaplan-meier生存分析和Log-rank检验比较心脏毒性事件发生率,单因素和多因素Cox回归分析影响心脏毒性事件发生的相关因素.结果 267例患者中,左侧乳腺癌为165例(61.8％),平均年龄为(55.7± 19.3)岁.ACEI组和对照组的基线资料相似,差异均无统计学意义(均为P＞0.05).随访5年后,与对照组比较,ACEI组的N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)水平更低,左心室射血分数更高,左心室收缩末期内径和舒张末期内径更小,左心室整体纵向应变绝对值更高,左心室质量指数更低,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).平均随访(4.7±2.6)年,共有51例(19.1％)心脏毒性事件,包括6例心血管死亡,12例心肌梗死,15例心力衰竭住院和18例恶性心律失常.ACEI组和对照组分别有22例(16.4％)和29例(21.8％)心脏毒性事件.Kaplan-meier生存分析结果显示,ACEI组的心脏毒性事件(HR=0.774,95％CI:0.611～0.981,x2=2.123,P=0.034)、心力衰竭住院(HR=0.683,95％CI:0.502～0.929,x2=2.427,P=0.015)和恶性心律失常(HR=0.829,95％CI:0.715～0.961,x2=2.485,P=0.013)均显著低于对照组.多因素Cox回归分析结果显示,年龄(HR=1.521,95％CI:1.046～2.223,P=0.028)、陈旧性心肌梗死(HR=1.801,95％CI:1.122～2.891,P=0.015)、心房颤动(HR=1.384,95％CI:1.051～1.823,P=0.021)、左侧乳腺病变(HR=1.613,95％CI:1.115～2.333,P=0.012)、NT-proBNP(HR=2.217,95％CI:1.204～4.082,P=0.11)、整体纵向应变(HR=1.483,95％CI:1.052～2.091,P=0.025)是影响心脏毒性事件的独立危险因素,ACEI(HR=0.872,95％CI:0.771～0.986,P=0.029)是影响心脏毒性事件的独立保护因素.结论 ACEI可降低Her-2阳性乳腺癌接受蒽环类联合曲妥珠单抗治疗患者长期随访的心脏毒性事件发生风险.

目的 探讨老年小鼠缺血组织中骨髓(BM)源性CD11b+巨噬细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)-A165b抑制老年小鼠新血管形成的作用机制.方法 制备 8 周龄小鼠(对照组)和>72 周龄小鼠(观察组)后肢缺血模型,每组 6 只,分别于术前、术后第 0、4、7、14 天用激光散斑血流成像(LSBFI)评估血流恢复状态.采用免疫组织化学染色方法于术后第 4 天,对巨噬细胞(Mac-3)进行染色,计算巨噬细胞数量,于第 14 天对CD31+巨噬细胞进行染色检测两组缺血后肢肌肉中毛细血管密度.采用Western印迹,于术后第 4 天检测两组缺血肌肉组织中VEGF-A、丝氨酸精氨酸蛋白剪接因子(SC35)、Wnt5a蛋白表达水平.采用实时荧光聚合酶链反应(RT-qPCR)于术后第 4 天检测两组缺血肌肉组织中BM源性CD11b+巨噬细胞裂解物及缺血肌肉中VEGF-A165b、Wnt5a mRNA水平.采用含有观察组BM源性CD11b+巨噬细胞的特殊培养液在缺氧条件下培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24 h,计算每个板口的 6 个区域中出芽数量和长度评估CD11b+巨噬细胞分泌的VEGF对血管生成的影响.结果 LSBFI显示,观察组后肢缺血呈现低灌注信号(深蓝色),而对照组呈现高灌注信号(红色).与对照组相比,观察组缺血后肢肌肉中毛细血管密度明显降低(P<0.05).与对照组相比,观察组缺血肌肉组织中VEGF-A、SC35、Wnt5a蛋白表达水平明显升高,观察组BM源性CD11b+巨噬细胞中及缺血肌肉组织中VEGF-A165b、Wnt5a mRNA表达水平明显升高(P<0.05).HUVEC芽的数量和长度,与不含有观察组小鼠BM源性的CD11b+巨噬细胞的培养液相比,其生长明显受到抑制(P<0.05).结论 衰老可通过VEGF-A165b机制损害缺氧组织的新血管形成,其机制可能由Wnt5a-SC35 信号通路介导.

目的 本研究以根尖周囊肿为疾病模型,根据其临床特点确定骨破坏速率,并利用免疫组织化学方法观察间质中微血管密度;同时原代培养囊壁成纤维细胞,检测其中各种VEGF异构体对微血管增生及破骨细胞诱导效率的影响,探讨VEGF可变剪接在牙源性囊肿骨破坏过程中的作用.方法 选取19例根尖周囊肿,以CD34抗体免疫组化染色凸显血管内皮细胞,并计算血管腔面积,曲面断层影像进行病变面积的测量,并选取其中13例新鲜手术标本进行根尖周囊肿囊壁成纤维细胞培养,制备条件培养基和诱导破骨细胞,并进行RNA的提取及realtimePCR检测VEGF异构体的相对表达量.x2检验用于评估CD34阳性的血管腔面积和临床特点.血管腔面积、各种异构体相对表达量、囊肿进展速率和破骨细胞诱导效率的关系由线性回归及Spearman's等级相关评估.结果 VEGF-121a/总VEGF和VEGF-165a/总VEGF正相关于微血管管腔面积,后者则与囊肿骨破坏速率正相关;而VEGF和VEGF-189a的相对表达量正相关于破骨细胞诱导效率,VEGF-165b/总VEGF和VEGF-189b/总VEGF则与破骨细胞诱导效率成负相关.结论 提示VEGF-xxxa型可能主要促进囊肿的骨坏过程,而VEGF-xxxb型则可能有抑制效果.