目的:探讨消旋山莨菪碱（654-2）对X射线诱导小鼠肺上皮细胞损伤的保护作用及潜在机制。方法:利用小鼠肺泡上皮细胞MLE-12单次大剂量X线照射建立体外放射性肺损伤（RILI）模型，细胞分组为：对照组（未照射）、照射组（16 Gy照射）、处理1组（16 Gy照射+2 μmol/L 654-2）、处理2组（16 Gy照射+10μmol/L 654-2）、抑制剂组（16 Gy照射+10 μmol/L 654-2+2 μmol/L ML385）。照射后不同时间点收集细胞进行相关检测。细胞衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色检测细胞衰老；细胞集落形成能力检测观察细胞处理后的恢复能力；蛋白质印迹法检测p21、p16、磷酸化组蛋白H2AX（γH2AX）、核因子E2相关因子2（Nrf2）、Nrf2 Ser40位点磷酸化（p-Nrf2）、p62、血红素氧合酶1（HO-1）、NAD（P）H醌脱氢酶1（NQO1）等蛋白表达；流式细胞术检测细胞凋亡及细胞内总活性氧（ROS）产生；按照相关试剂盒检测谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）；实时反转录PCR检测检测谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基（GCLC）、谷氨酸半胱氨酸连接酶修饰亚基（GCLM）等mRNA表达情况。计量资料以 xˉ±s表示，两组间比较采用独立样本 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:与照射组相比，处理1、2组细胞SA-β-Gal染色阳性细胞比例减少，细胞衰老减轻（ P均<0.001）。与照射组相比，处理2组的γH2AX蛋白表达减少（ P=0.037），细胞凋亡减少（ P=0.026），细胞增殖能力增强（ P=0.004），GSH（ P=0.002）、SOD（ P<0.001）活力提高，且ROS减少（ P=0.001）。随着654-2的作用时间延长，MLE-12细胞的总蛋白中Nrf2、p-Nrf2的表达增强，同时Nrf2下游抗氧化蛋白NQO1及HO-1的表达增强，GCLC及GCLM mRNA表达增强。当加入Nrf2小分子抑制剂ML385后，抑制剂组的SA-β-Gal染色阳性细胞数（ P=0.145）、ROS（ P=0.317）与照射组的差异无统计学意义。 结论:654-2可以激活Nrf2通路，增强细胞抗氧化能力，抑制细胞衰老，从而发挥对RILI的保护作用。

目的:探讨标本溶血对常规生化检验项目的影响。方法:选择余姚市中医医院门诊行健康体检的150例健康志愿者(2018年1－10月)进行前瞻性研究，在清晨采集健康志愿者空腹状态下的肘部静脉血液共10 mL作为检测标本，将每位健康志愿者的血液标本均分为2份，每份5 mL，分别设置为对照组标本、观察组标本，对照组血液标本未经溶血处理，直接进行生化检验，观察组血液标本经溶血处理后再进行生化检验，比较两组血液标本的常规生化检验项目检测结果。结果:观察组总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(G)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、胆碱酯酶(CHE)分别为(71.49±1.62)g/L、(48.09±0.85)g/L、(25.18±0.67)g/L、(9.31±1.14)μmol/L、(1.89±0.34)μmol/L、(23.14±1.70)μmol/L、(27.38±2.56)μmol/L、(224.53±5.68)U/L，均高于对照组( t＝9.351、9.235、8.786、9.161、9.309、8.877、9.391、9.878，均 P<0.05)。观察组血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)分别为(87.93±2.76)μmol/L、(5.43±0.47)mmol/L、(249.38±7.52)μmol/L，均高于对照组( t＝9.367、8.744、9.644，均 P<0.05)。观察组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)分别为(4.53±0.49)mmol/L、(1.02±0.26)mmol/L、(1.92±0.40)mmol/L，均高于对照组( t＝9.481、8.795、8.470，均 P<0.05)，其高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)(1.49±0.22)mmol/L，低于对照组( t＝9.085， P<0.05)。观察组的肌酸激酶(CK)、羟丁酸脱氢酶(HBD)、乳酸脱氢酶(LDH)分别为(41.27±1.85)U/L、(116.73±6.24)U/L、(198.94±6.07)U/L，均高于对照组( t＝9.433、9.610、9.890，均 P<0.05)。观察组钠(Na ＋)、钾(K ＋)、钙(Ca 2＋)、氯(Cl －)分别为(142.31±2.17)mmol/L、(4.82±0.45)mmol/L、(2.49±0.09)mmol/L、(101.89±1.45)mmol/L，均高于对照组( t＝7.412、9.040、8.593、8.359，均 P<0.05)。 结论:血液标本发生溶血反应后会对常规生化检验项目的检测结果产生影响，易导致生化检验结果误差。

目的:分析中国儿童谷氨酸脱氢酶型先天性高胰岛素血症(GDH-HI)的临床特征及遗传学特征。方法:选取2008年2月至2018年12月间首都医科大学附属北京儿童医院收治并诊断为GDH-HI的10例患儿家系为研究对象，对患儿的临床特征、致病基因携带情况和后期随访等进行回顾性分析。采用聚合酶链反应DNA(PCR-DNA)直接测序法和二代测序技术对10例患儿及其亲属进行GLUD1基因测序分析。结果:10例患儿中9例出生体重正常，1例为巨大儿。9例患儿伴有无症状性高氨血症，1例患儿血氨正常。9例患儿曾试用二氮嗪治疗，均有效。10例患儿均携带GLUD1基因突变，其中5例携带GLUD1基因c.965C>T(p.R322H)突变，其余5例分别携带c.1388A>T(p.N463I)、c.1495C>A(p.G499C)、c.1493C>T(p. S498L)、c.1519G>A(p.H507Y)、c.1388A>G(p.N463S)突变；9例(90%)为新生突变，1例为父系常染色体显性遗传。8例患儿经长期随访，其中1例于确诊8年后自行缓解，7例需长期口服二氮嗪维持正常血糖水平，其中2例合并癫痫。结论:中国GDH-HI患儿出生体重多为正常，少数患儿血氨正常；GLUD1基因突变多为新生突变，其中GDH p．R322H突变为中国儿童GDH-HI的热点突变。GDH-HI患儿多对二氮嗪治疗有效，随着病程的进展，部分患儿可出现癫痫，少数患儿有自行缓解倾向。

目的:总结分析风湿免疫性疾病合并内分泌腺损伤患儿的临床特点、治疗及转归。方法:回顾性分析自2014年1月至2020年12月首都儿科研究所附属儿童医院风湿免疫科就诊的风湿免疫性疾病合并内分泌腺损伤的13例患儿的性别、年龄等一般资料，临床表现、体格检查、实验室检查、治疗及随访等临床资料。结果:13例患儿（男3例，女10例）发病年龄（10±4）岁，平均病程4.1个月，均无相关疾病家族史；13例患儿中系统性红斑狼疮8例，幼年特发性关节炎2例，儿童血管炎1例，儿童系统性硬化症1例，幼年皮肌炎1例；10例以风湿免疫性疾病相关表现为首发症状，2例以多饮多尿为首发症状，1例因甲状腺肿大就诊；13例患儿均存在多系统受累；10例存在甲状腺损伤，4例存在胰腺损伤，其中1例同时存在甲状腺及胰腺损伤；10例甲状腺损伤患儿促甲状腺激素为19.6（5.2~34.0）mU/L，总甲状腺素为75.3（45.2~105.4）nmol/L，7例存在甲状腺过氧化物酶抗体或甲状腺球蛋白抗体阳性；4例胰腺损伤患儿血糖为25.0（17.0~33.0）mmol/L，C肽0.4（0.3~0.5）mg/L，2例存在谷氨酸脱氢酶抗体及蛋白酪氨酸磷酸酶抗体、锌转运体8抗体阳性。13例患儿经免疫抑制剂联合糖皮质激素或非甾体抗炎药，人免疫丙种球蛋白联合糖皮质激素，以及左甲状腺素或胰岛素治疗后随访超过6个月，风湿免疫性疾病及合并的内分泌疾病病情均平稳。结论:儿童风湿免疫性疾病可以合并内分泌腺损伤，以甲状腺和胰腺多见。儿童风湿免疫性疾病合并甲状腺损伤多隐匿起病，预后良好，但是合并胰腺损伤进展迅速，可危及生命，需在内分泌科医师指导下长期胰岛素替代治疗。

目的:探讨抑制星形胶质细胞丝裂原活化蛋白激酶14（MAPK14）表达对减轻谷氨酸兴奋性毒性进而发挥神经元保护的作用机制。方法:慢病毒介导MAPK14干扰载体由上海吉凯基因化学技术有限公司合成，星形胶质细胞从出生48 h的SD大鼠获取，通过慢病毒介导转染体外培养的星形胶质细胞，按照随机数字表法分为三组：（1）未转染组，为正常星形胶质细胞，细胞加入杜氏培养液（DMEM）进行培养；（2）阴性对照组，转染MAPK14空载干扰载体；（3）慢病毒转染组，转染MAPK14干扰载体。转染72 h后星形胶质细胞与神经元共培养48 h，随后构建谷氨酸兴奋性毒性环境作用2 h。检测指标包括：慢病毒载体转染星形胶质细胞最佳转染指数（MOI）；rPCR检测转染72 h后MAPK14和谷氨酸转运蛋白1（GLT-1）mRNA表达水平；Western blot检测转染72 h后MAPK14及GLT-1蛋白表达水平；分光光度法和流式细胞术分别检测谷氨酸兴奋性毒性环境作用2 h后神经元乳酸脱氢酶（LDH）水平和神经元死亡率。结果:（1）慢病毒转染星形胶质细胞最佳MOI值为30，转染后的星形胶质细胞生长良好。（2）转染72 h后，与未转染组（0.013 1±0.001 1）和阴性对照组（0.013 9±0.001 0）比较，慢病毒转染组MAPK14 mRNA表达水平（0.005 7±0.000 6）显著下降（ P<0.01）；与未转染组（0.008 7±0.000 3）和阴性对照组（0.008 9±0.001 1）比较，慢病毒转染组GLT-1 mRNA表达水平（0.009 1±0.001 2）未见明显变化（ P>0.05）。（3）转染72 h后，与未转染组（0.61±0.05）和阴性对照组（0.63±0.01）比较，慢病毒转染组MAPK14蛋白表达水平（0.29±0.04）显著下降（ P<0.01）；与未转染组（0.20±0.03）和阴性对照组（0.23±0.09）比较，慢病毒转染组GLT-1蛋白表达水平（0.73±0.06）显著上升（ P<0.01）。（4）谷氨酸兴奋毒性作用2 h后，慢病毒转染组LDH水平［（109.67±2.40）U/L］较未转染组［（141.52±3.88）U/L］和阴性对照组［（141.29±3.61）U/L］显著降低（ P<0.01），慢病毒转染组神经元死亡率［（38.72±0.26）%］较未转染组［（52.94±1.36）%］和阴性对照组［（54.30±1.23）%］显著降低（ P<0.01）。 结论:慢病毒介导MAPK14干扰载体转染星形胶质细胞后能上调GLT-1表达水平、促进谷氨酸重摄取，从而减轻神经元谷氨酸兴奋性毒性，可为进一步利用星形胶质细胞基因调节减轻创伤性脑损伤后谷氨酸兴奋性毒性神经元损伤提供新的实验依据。

目的:评价归脾汤加减联合奥美拉唑治疗急性非静脉曲张性上消化道出血（ANVUGIB）脾不统血证的临床疗效。方法:前瞻性队列研究。将符合入选标准的2018年1月－2021年12月太和县中医院120例ANVUGIB脾不统血证住院患者，按随机数字表法分为2组，每组60例。对照组予以大剂量质子泵抑制剂（先予以注射用奥美拉唑静脉注射，后改服奥美拉唑肠溶片）治疗，观察组在对照组基础上服用归脾汤加减。2组均治疗7 d。分别于治疗前后进行中医证候评分，采用比色法测定血红蛋白（Hb）和红细胞压积（HCT）水平，尿素酶-谷氨酸脱氢酶法检测BUN，免疫比浊法测定凝血酶原时间（PT），活化部分凝血活酶时间（APTT）和纤维蛋白原（FIB）水平，记录治疗期间的不良反应，评价临床疗效。结果:研究期间，2组各有2例患者退出研究，最终各有58例纳入疗效统计。观察组治疗后主症、次症评分及总评分均低于对照组（ t值分别为10.73、4.45、7.98， P<0.05）。观察组治疗后HCT［（41.25±5.03）%比（38.19±5.26）%， t=2.95］、Hb［（81.09±5.23）g/L比（78.39±5.37）g/L， t=2.74］水平高于对照组（ P<0.01），BUN［（4.38±0.96）mmol/L比（5.39±1.13）mmol/L， t=5.19］水平低于对照组（ P<0.01）；PT［（12.48±0.67）s比（13.22±0.73）s， t=5.69］、APTT［（24.66±2.29）s比（27.78±2.04）s， t=7.75］低于对照组（ P<0.01），FIB［（3.68±0.62）g/L比（3.41±0.74）g/L， t=2.13］水平高于对照组（ P<0.05）。观察组总有效率为93.1%（54/58）、对照组为79.3%（46/58），2组比较差异有统计学意义（ χ2=4.64， P=0.031）。治疗期间，对照组不良反应发生率为3.4%（2/58）、观察组为1.7%（1/58），2组比较差异无统计学意义（ χ2=0.34， P=0.559）。 结论:在大剂量奥美拉唑治疗基础上服用归脾汤加减可明显改善ANVUGIB脾不统血证患者的凝血功能，纠正体循环血容量不足的相关症状、体征，提高止血效率，减少再出血风险，且不增加患者用药安全性风险。

1例63岁女性患者因腱鞘炎口服木瓜丸30丸、2次/d，追风透骨丸6 g、2次/d。服药10 d后，患者出现恶心、呕吐，并进行性加重；服药22 d后，患者发热、恶心、干呕、上腹轻度疼痛、全身浮肿、皮肤瘙痒，精神、食欲、睡眠状况不佳。实验室检查示丙氨酸转氨酶（ALT）454 U/L，天冬氨酸转氨酶（AST）946 U/L，碱性磷酸酶（ALP）133 U/L，γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）170 U/L，直接胆红素（DBil）12.8 μmol/L，谷氨酸脱氢酶17.3 U/L。实验室和影像学检查排除病毒性肝炎和胆道梗阻性疾病，诊断为药物性肝损伤。停用木瓜丸、追风透骨丸，给予复方二氯醋酸二异丙胺注射液、复方甘草酸苷片等治疗。患者肝功能逐步好转。12 d后，患者ALT 62 U/L、AST 49 U/L、γ-GT 38 U/L、DBil 7.2 μmol/L。调整用药为复方甘草酸苷3片、3次/d（服药2周）。4周后复查，患者ALT 31 U/L，AST 26 U/L，γ-GT 30 U/L，DBil 5.0 μmol/L。

目的:探讨早发性白内障与年龄相关性白内障患者房水中代谢物及代谢通路的差异。方法:代谢组学研究。收集2020年8月至2022年9月就诊于天津医科大学眼科医院的16例（17只眼）白内障患者。其中早发性白内障8例（8只眼），年龄相关性白内障8例（9只眼）。收集患者年龄、性别、术前裸眼视力、眼压、晶状体功能失调指数和眼轴长度等一般临床资料，并于白内障摘除术中留取房水和前囊膜组织标本，采用液相色谱-串联质谱法非靶向检测房水中的代谢物，进一步使用主成分分析、差异分析、聚类分析、相关性分析筛选差异代谢物，并根据代谢物的变化倍数（FC）对差异代谢物进行排名。使用受试者工作特征（ROC）曲线分析和代谢富集分析来筛选两组间的差异通路，并鉴定早发性白内障的生物标志物。前囊膜组织行免疫组织化学染色。采用比色法检测丙酮酸含量验证代谢组学分析结果。结果:8例早发性白内障患者中男性7例，女性1例，年龄（37.50±4.90）岁；8例年龄相关性白内障患者中男性7例，女性1例，年龄（73.44±5.22）岁；基线资料除年龄外差异均无统计学意义（ P>0.05）。差异分析共鉴别出347种差异代谢物，其中10种经ROC曲线分析确定为潜在的早发性白内障生物标志物（均 P<0.05），其中阳离子（POS）模式5种，分别是丙氧卡因（log 2FC=7.26）、2-甲基-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并氧氮杂卓-4-酮（log 2FC=6.35）、 l-焦谷氨酸（log 2FC=-1.72）、亮氨酰脯氨酸（log 2FC=-0.77）和胆碱（log 2FC=-0.56），阴离子（NEG）模式5种，分别是N-苯乙酰谷氨酰胺（log 2FC=-1.84）、丙酮酸（log 2FC=1.07）、抗坏血酸（log 2FC=0.92）、假尿嘧啶核苷（log 2FC=-0.68）和棕榈酸（log 2FC=-0.51）。代谢富集分析共富集到72条差异通路（POS模式32条，NEG模式40条），其中谷胱甘肽代谢及半胱氨酸和蛋氨酸代谢、糖酵解或糖异生、丙酮酸代谢、三羧酸循环两组间的差异有统计学意义（ P<0.05）。验证结果显示早发性白内障患者房水中乳酸脱氢酶减少，丙酮酸升高（ P<0.05）。 结论:丙酮酸等10种代谢物可能是潜在的早发性白内障生物标志物；谷胱甘肽代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、糖酵解或糖异生、丙酮酸代谢和三羧酸循环代谢通路在早发性白内障患者中明显失调。

目的:比较特应性皮炎患者与健康对照皮肤样本的单细胞转录组测序数据，探讨特应性皮炎皮损中炎症性树突状表皮细胞（IDEC）的免疫代谢特征。方法:对既往发表的8例特应性皮炎患者和7例健康对照的单细胞测序数据进行深入挖掘，利用标记基因筛选出IDEC，获取两组IDEC的差异表达基因，并对差异表达基因进行京都基因组百科全书富集分析，使用Seurat中的"AddModuleScore"功能对两组IDEC的炎症通路和代谢通路进行评分，Mann-Whitney秩和检验进行统计分析；通过上述评分以及R语言中的"cor"和"cor.test"函数来评估IDEC的代谢通路与炎症通路之间的相关性。结果:特应性皮炎患者皮损中大量浸润的IDEC高表达Th2趋化因子（CCL17）、抗原提呈相关基因（CD1B）、内皮生长相关基因（TYMP、AREG）、炎症相关基因（S100A8、S100A10、LGALS1）、基质纤维化相关基因（MMP12、ADAM19）、代谢相关基因（乳酸脱氢酶、脂肪酶A、谷氨酰胺合成酶）、危险信号传导相关基因（HSPA1B、HSP90AA1、HSPB1、HSPH1）。特应性皮炎患者IDEC的葡萄糖能量代谢、糖酵解代谢、核苷酸代谢、谷氨酸和谷氨酰胺代谢、氨基酸代谢活性显著上调，并且与Th2炎症水平呈正相关；氧化磷酸化和脂代谢活性显著下调，其中脂代谢活性与Th2炎症水平呈负相关。谷氨酰胺代谢和葡萄糖能量代谢活性与Th22炎症水平呈正相关；Th1炎症水平和Th17炎症水平与磷酸戊糖代谢、核苷酸代谢、糖酵解代谢和氨基酸代谢等活性呈负相关。结论:特应性皮炎患者皮损中IDEC的炎症和代谢相关基因调节异常，多条代谢通路显著上调，其中糖酵解代谢活性与Th2炎症水平相关性最强。

目的:评价细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2在谷氨酸诱导PC12细胞铁死亡中的作用。方法:PC12细胞采用随机数字表法分为6组( n＝21)：对照组(C组)、谷氨酸组(Glu组)、谷氨酸＋ERK1/2过表达组(Glu＋ERK1/2-OE组)、谷氨酸＋ERK1/2质粒空载体组(Glu＋Vec组)、谷氨酸＋ERK1/2敲减组(Glu＋si-ERK1/2组)和谷氨酸＋ERK1/2 SiRNA阴性对照组(Glu＋si-NC组)。Glu组使用终浓度为6 mmol/L的谷氨酸处理72 h，C组加入等量PBS缓冲液处理72 h，Glu＋ERK1/2-OE组转染ERK1/2过表达质粒、Glu＋Vec组转染质粒空载体、Glu＋si-ERK1/2组转染ERK1/2 si-RNA、Glu＋si-NC组转染siRNA阴性对照后48 h再使用终浓度为6 mmol/L的谷氨酸处理72 h。采用酶标仪测定细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)活性、谷胱甘肽(GSH)、铁离子及丙二醛(MDA)含量，流式细胞仪测定线粒体膜电位(MMP)和脂质活性氧(Lip-ROS)水平。 结果:与C组比较，Glu组细胞存活率、GSH含量和MMP下降，LDH活性、铁离子、MDA含量和Lip-ROS水平升高( P<0.05)；与Glu＋Vec组比较，Glu＋ERK1/2-OE组细胞存活率，GSH含量及MMP升高，LDH活性、铁离子、MDA含量及Lip-ROS水平降低( P<0.05)；与Glu＋si-NC组比较，Glu＋si-ERK1/2组细胞存活率、GSH含量及MMP降低，LDH活性、铁离子、MDA含量和Lip-ROS水平升高( P<0.05)。 结论:ERK1/2参与了谷氨酸诱导PC12细胞铁死亡的过程。