目的 采用超高液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术与网络药理学探讨人参黄精杏麦饮抗疲劳的药效物质及作用机制.方法 通过UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定人参黄精杏麦饮化学成分,并利用TCMSP、Swiss Target Prediction数据库预测化学成分相关靶点;利用Disgenet、Genecards数据库检索疲劳靶点,利用韦恩图绘制平台获取共有靶点,并将信息导入Cyto-scope3.7.1 软件和STRING在线分析平台,进行网络拓扑学分析,构建药物-活性成分-关键靶点网络.最后,通过DAVID数据库进行基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and gnomes,KEGG)通路富集分析.结果 通过UPLC-Q-TOF-MS分析鉴定出35 个药物活性成分,主要为黄酮类;对药物和疾病靶标集进行拓扑分析,获得 14 个关键成分和39 个核心靶点;通过KEGG富集到癌症、流体剪切应力与动脉粥样硬化通路、PI3K-Akt、脂质与动脉粥样硬化和糖尿病并发症中的AGE-RAGE等信号通路.结论 人参黄精杏麦饮的活性成分通过作用于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1、磷酸甘油醛脱氢酶、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子等靶标改善机体氧化应激反应、减轻免疫介导的炎症和感染以及调控细胞增殖、分化、凋亡等多种细胞功能发挥抗疲劳作用,初步阐明人参黄精杏麦饮抗疲劳的作用,为后续深入研究提供参考.

目的:研究纳米二氧化钛颗粒（TiO 2-NPs）职业暴露人群血清代谢谱变化，探索TiO 2-NPs健康效应的生物标志物和损伤机制。 方法:于2020年6月至2021年6月，通过典型抽样的方法选取某TiO 2-NPs生产企业职工为研究对象，从企业中选取接触TiO 2-NPs工人64人为暴露组，选取同企业后勤行政人员62人为对照组，使用非抗凝采血管收集血样。样品经甲醇沉淀蛋白后采用超高效液相色谱飞行时间质谱技术采集非靶向代谢组学数据，筛选生物标志物并进行代谢通路分析。 结果:通过 P<0.05和变量重要性投影指标（ VIP）值>1两个指标筛选出46个差异代谢物，主要包括甘油酯类、鞘磷脂类、甘油磷脂类、脂肪酰基类等；通过受试者工作曲线（ROC）分析确定3-羟基-4，5-二甲基-2（5H）-呋喃酮、4-氨基联苯、庚酰肉碱、十六烷二酸单-L-肉碱酯、伊布利特、LysoPA[18∶1（9Z）/0∶0]、LysoPC（18∶0）、PC（16∶0/16∶0）、PC[16∶0/20∶4（5Z，8Z，11Z，14Z）]、PC[P-18∶1（9Z）/P-18∶1（9Z）]10个候选生物标志物；涉及4条代谢通路的变化，分别为甘油磷脂代谢，鞘脂代谢，苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成，亚油酸代谢。 结论:TiO 2-NPs职业暴露会对血清代谢谱产生明显影响。

目的 鉴定五倍子化学成分并探究其舒张血管的作用机制.方法 建立五倍子UNIFI数据库.采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间-质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MSE)与UNIFI数据处理平台,鉴定五倍子中的化学成分.用大鼠胸主动脉环实验探究五倍子提取物舒张血管的作用和其有效的物质成分发挥作用的机制.结果 超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱技术结合UNIFI数据库快速分析鉴定五倍子化学成分60种.五倍子提取物可能通过促进血管内皮一氧化氮合酶的活性;在药理通路中,它可能影响平滑肌细胞内Ca2+的释放和外钙内流,从而发挥作用.结论 本研究首次采用UPLC-Q-TOF-MSE结合UNIFI数据库对五倍子提取物进行鉴定.从五倍子提取物中鉴定出60种化合物.酚酸类占比较大,其药理作用可能是酚酸类化合物通过内皮依赖和内皮非依赖途径激活一氧化氮合酶发挥舒张血管的作用.药理通路其可能为通过促进平滑肌细胞内钙释放和外钙内流发挥作用.

基于炮制和配伍探究山茱萸与黄芪相关组分对糖尿病肾病大鼠血浆代谢组学的影响.SD大鼠随机分为4组,用高脂饲料联合30 mg·kg-1链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病大鼠模型.采用HE、PAS和Masson染色对各组大鼠的肾脏组织切片进行病理学观察.超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)代谢组学方法研究山茱萸酒制前后与黄芪相关组分配伍给药后对糖尿病肾病大鼠血浆代谢物的影响.给予药物治疗后,糖尿病肾病大鼠的肾组织损伤情况和间质胶原纤维沉积面积均有不同程度的改善(P＜0.001).血浆代谢组学的检测结果显示,在患病大鼠中共鉴定出71种与糖尿病肾病发病机制相关的生物标志物,主要涉及亚油酸代谢,咖啡因代谢,甘油磷脂代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,花生四烯酸代谢,苯丙氨酸代谢,视黄醇代谢,乙醚脂质代谢.经药物干预后,其中有26种发生显著性回调,以精准炮制药对(P-CG5)疗效更好.该研究从血浆代谢组学的角度阐述了 P-CG5可从苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,苯丙氨酸代谢,咖啡因代谢等途径改善糖尿病肾病的代谢紊乱,为山茱萸与黄芪相关组分配伍在中医临床上的应用提供了理论支撑和实验依据.

目的 通过超高液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法(UPLC-Triple-TOF-MS)对杜仲盐制前后成分进行鉴定,分析差异性成分.方法 利用UPLC-Triple-TOF/MS检测杜仲中的化学成分,液相采用Waters HSS-T3色谱柱(150mm×2.1 mm,1.8 μm),以0.1％甲酸水溶液-0.1％甲酸乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,柱温为50 ℃;检测波长254 nm:进样量3 μL.质谱采用负离子扫描模式采集数据,根据一级准分子离子与二级碎片离子信息进行化合物的分析与鉴定.通过主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)对杜仲盐制前后进行差异成分分析.结果 共解析出杜仲中52种成分,结合OPLS-DA筛选出14个影响杜仲盐制前后质量的潜在差异性成分,分别为京尼平苷、绿原酸、杜仲醇、桃叶珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸、京尼平、eucomoside B、异绿原酸C、teuhircoside硫酸脂、橄榄素二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、中脂素二葡萄糖苷和去氢二松柏醇葡萄糖苷.结论 建立了杜仲盐制前后化学成分定性分析方法,筛选出盐制前后杜仲质量变化的潜在差异性成分,为杜仲盐制的增效物质基础的研究提供了科学依据,对杜仲质量控制提供更加全面的支撑.

目的 分析浙南地区菰米营养成分,为开发菰米及相关产品提供依据.方法 采用随机抽样方法分别从浙南半山区的四个自然村、至少 5%地块中抽取菰米 3 kg;选择同自然村、同收割季节的普通稻米为参照品进行对比分析.按谷类食品中各种营养素的国家标准检测方法,采用液相色谱仪、电感耦合等离子体质谱仪、超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱仪等检测浙南菰米及对照稻米中一般营养成分、蛋白质及氨基酸等,分析浙南菰米与对照稻米中各类营养成分的差异.结果 被检测浙南菰米中粗蛋白含量为 13.52%,9 种必需氨基酸含量均高于对照稻米,蛋氨酸、赖氨酸分别为对照稻米的 3.9 与 3.2 倍且氨基酸比例及模式优于对照稻米;浙南稻米中被检测微量营养素均高于对照稻米;B1、B2、钾、铁、铬、锂、钴、锰、镍及磷含量高于苏北地区菰米.结论 浙南菰米营养价值较理想,建议尝试应用于慢性非传染性疾病防控.[营养学报,2024,46(1):81-85]

目的 采用代谢组学与网络药理学方法探讨羟基红花黄色素A(HSYA)治疗脓毒症急性肝损伤作用机制.方法 将50只C57BL/6小鼠随机分为假手术组(10只)、脓毒症组(20只)和HSYA组(20只),采用盲肠结扎穿刺法构建脓毒症急性肝损伤小鼠模型,HSYA组造模后2 h皮下注射HSYA(2.25 mg/kg).检测小鼠血清炎症因子含量及肝功能,HE染色观察肝组织病理变化,超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)对肝组织进行代谢组学分析,多元数据统计方法筛选差异代谢物,采用网络药理学预测HSYA治疗脓毒症急性肝损伤潜在靶点,并对潜在靶点进行GO和KEGG通路富集分析,用Metabo Analyst 5.0数据库对模型组和HSYA组差异代谢物与潜在靶点进行匹配,构建靶点-代谢物-代谢通路网络,使用AutoDock Vina软件对HSYA与核心靶点进行分子对接,最后采用RT-qPCR验证核心基因表达.结果 HSYA能降低模型小鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,恢复肝功能,减轻肝组织病理损伤.代谢组学筛选出26个向假手术组回调的差异代谢物,包括氟芬那酸、白叶藤碱、邻苯二甲酸、甲氰菊酯等,主要涉及不饱和脂肪酸的生物合成、α-亚麻酸代谢等5条代谢通路.网络药理学分析得到HSYA治疗脓毒症急性肝损伤潜在靶点81个,涉及2 735个GO条目、124条信号通路;联合分析共匹配到5个差异代谢物,对应IL1B、STAT3、PTGS2、TP53等14个靶点参与HSYA对脓毒症急性肝损伤代谢紊乱的调控.分子对接结果显示,HSYA与IL1B、STAT3、PTGS2、TP53有良好的结合活性.RT-qPCR结果显示,HSYA能抑制肝组织IL1B、STAT3、PTGS2基因表达.结论 HSYA可能通过调节IL1B、STAT3、PTGS2基因表达抑制炎症因子释放,维持机体代谢稳态,从而减轻脓毒症急性肝损伤.

目的 从内源性代谢物变化途径探讨金水尘肺方改善二氧化硅(SiO2)诱导的矽肺纤维化的作用机制.方法 将 32 只SPF级雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、金水尘肺方组(9.72 g·kg-1·d-1)、汉防己甲素组(27 mg·kg-1·d-1).采用一次性非暴露式气管滴注SiO2 混悬液(250 mg/kg)的方法制备矽肺模型大鼠;制模后 5～8 周给予相应药物灌胃.第 8 周末,检测各组大鼠用力肺活量(FVC)、潮气量(TV)以及肺动态顺应性(Cydn)的变化;采用苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色观察各组肺组织病理学改变,并采用Szapiel评分标准和Ashcroft评分标准评价病灶肺泡炎、纤维化程度;采用免疫组化法检测Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(COLⅢ)的阳性染色;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达水平.进一步采用超高压液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)技术对大鼠血清样本进行差异代谢物筛选,并基于代谢分析网站MetaboAnalyst 5.0 进行通路分析.结果 与正常对照组比较,模型组大鼠肺组织出现明显病理学损伤,表现为肺泡结构完整性被破坏,纤维结节包裹SiO2 颗粒,肺泡炎评分和肺纤维化评分均明显升高[肺泡炎评分(分):2.62±0.27 比 0.20±0.15,肺纤维化评分(分):5.42±0.66 比 0.50±0.84,均P＜0.01],肺功能指标Cydn、FVC和TV均明显降低[Cdyn(mL/cmH2O):0.26±0.03 比 0.33±0.03,FVC(mL):8.09±0.47 比 10.99±0.38,TV(mL):1.95±0.19 比 2.53±0.26,均P＜0.01];肺组织COLⅠ、COLⅢ阳性染色和α-SMA、FN、TGF-β1 的蛋白表达水平均明显升高[COLⅠ(A值):13.47±1.76 比 5.77±0.45,COLⅢ(A值):10.39±0.47 比 6.19±0.77,FN蛋白表达(FN/GAPDH):0.33±0.02 比 0.21±0.07,α-SMA蛋白表达(α-SMA/GAPDH):1.78±0.16比1.11±0.24,TGF-β1蛋白表达(TGF-β1/GAPDH):0.52±0.10比0.11±0.46,均P＜0.01].与模型组比较,金水尘肺方组和汉防己甲素组肺组织病理形态明显改善,肺泡炎和肺纤维化评分明显降低[肺泡炎评分(分):1.10±0.15、1.33±0.31 比 2.62±0.27,肺纤维化评分(分):3.50±0.45、4.33±0.98 比 5.42±0.66,均P＜0.01];肺功能指标Cydn、FVC、TV均明显升高[Cdyn(mL/cmH2O):0.32±0.05、0.31±0.04 比 0.26±0.03,FVC(mL):9.41±0.85、8.70±0.92 比 8.09±0.47,TV(mL):2.70±0.19、2.27±0.15 比 1.95±0.19,均P＜0.05];肺组织COLⅠ、COLⅢ阳性染色和FN、α-SMA、TGF-β1 蛋白表达均明显降低[COLⅠ(A值):7.09±0.67、8.13±0.64 比 13.47±1.76,COLⅢ(A值):8.19±0.66、8.52±0.22 比 10.39±0.47,FN蛋白表达(FN/GAPDH):0.19±0.06、0.24±0.03比0.33±0.02,α-SMA蛋白表达(α-SMA/GAPDH):0.89±0.41、0.88±0.08比1.78±0.16,TGF-β1蛋白表达(TGF-β1/GAPDH):0.04±0.03、0.06±0.01比0.52±0.10,均P＜0.05].代谢组学分析显示,正常对照组、模型组、金水尘肺方组之间鉴定的主要差异代谢物共有 10 种,包括花生四烯酸、棕榈酸、吲哚-3-乙酸、丙酰肉碱、(S)-4-羟基扁桃腈、萘啶酮酸、苯佐卡因、芦竹碱、4-乙基苯酚、N-苄基甲酰胺.金水尘肺方可回调矽肺大鼠的部分异常代谢,包括不饱和脂肪酸的生物合成、花生四烯酸代谢、色氨酸代谢、脂肪酸伸长率、脂肪酸的降解与生物合成.结论 金水尘肺方可以有效改善SiO2 诱导的矽肺纤维化,其作用机制主要与调节不饱和脂肪酸的生物合成、花生四烯酸代谢、色氨酸代谢、脂肪酸伸长率、脂肪酸的降解与生物合成有关.

目的 建立一种超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)分析方法对压片糖果中的非法添加药物美托拉宗进行快速筛查与定量检测.方法 使用乙腈提取待测组分,Captiva EMR-Lipid净化柱进行净化,经Agilent RRHD Eclipse Plus C18(100 mm × 2.1 mm,1.8 μm)色谱柱进行分离,运用 UPLC-Q-TOF/MS的Targeted MS/MS模式进行检测分析.结果 美托拉宗在浓度范围50～1 000 ng·mL-1内线性良好(r=0.999 0);检测限为1.0 ng·g-1;定量限为2.5μg·g-1,平均回收率为98.15％,RSD为2.2％(n=18).结论 该方法具有操作简易快速、定性定量准确等特点,能应用于日常样品的检验检测.

目的 阐明侗药"马镫艾"(Madeng'ai,MDA)根部水提物抑制炎症的潜在药效物质及机制.方法 首先采用质谱技术对MDA水提物的化学成分进行鉴定,再利用Swiss Target Predict数据库和Omim、Disgenet及Genecards数据库分别筛选出疾病和药物靶点,取交集后获得药物-疾病共同靶点;通过软件Cytoscape 3.9.1构建"药物-成分-疾病-靶点"网络并筛选出核心组分;通过String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用网络(protein-protein interaction networks,PPI);使用David数据库进行基因本体论(gene ontology,GO)分析与京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;最后,采用RT-qPCR和Western blot的方法在体外研究MDA水提物对几种典型炎症因子mRNA水平的影响及可能的信号通路.结果 质谱法在MDA水提物中一共鉴定出了 29种化合物,排名前五位的分别为:委陵菜酸、鞣花酸、原花青素C1、儿茶素和原花青素B1.通过数据库检索并去重后共获得104个药物-疾病共同靶点,其中TNF-α、IL-6、AKT1及ALB等可能是其核心作用靶点.GO功能富集分析一共获取到761个条目,其中与生物学过程相关的共600条,涉及到细胞组分的共52条,涉及到分子功能的共109条;KEGG通路富集分析共得到160条相关信号通路,其中包含NF-κB、MAPK、PI3K-AKT等信号通路.与正常对照组相比,模型组(LPS组)TNF-α、IL-6、IL-1 β及CCL2的含量显著升高(P＜0.05),p38、ERK及JNK的磷酸化水平显著上调(P＜0.05);与模型(LPS)组相比,MDA处理组TNF-α、IL-6、IL-1β及CCL2的含量显著降低(P＜0.05),p38、ERK及JNK的磷酸化水平显著下调(P＜0.05).结论 本研究预测了侗药MDA水提物具备多种抗炎活性成分,并且可通过MAPK等多条信号通路发挥抗炎作用.