-
基于线粒体形态特征与UPLC-Triple-TOF-MS整合分析的人参/三七心肌保护物质辨析研究
编辑人员丨2024/6/15
人参为补气强身之要药,三七具有散血定痛之功,常用于治疗心脉瘀阻所致的心肌缺血性疾病.线粒体功能障碍常伴随线粒体形态的异常改变,其可塑性和动态性在心血管疾病中至关重要.该研究将原代乳鼠心肌细胞缺氧培养 4 h再复氧2 h,构建心肌细胞缺氧复氧损伤模型.采用荧光探针MitoTracker Deep Red标记心肌细胞线粒体,Hoechst 33342 标记细胞核,使用高内涵荧光成像系统采集心肌细胞荧光图像,运用ImagePro Plus软件对图像自动批量处理并提取线粒体形态特征的量化参数,选取代表性参数用于评价线粒体形态功能改变进而筛选人参、三七有效组分;进一步整合UPLC-Triple-TOF-MS技术,筛选人参、三七有效成分.结果显示组分RS-2、RS-4、SQ-1、SQ-4可以同时显著提高线粒体 3 个形态参数值,增加线粒体长度、分支程度和面积,有效改善缺氧复氧损伤引起的心肌细胞线粒体形态改变.对有效组分的主要成分筛选发现 20(R)-人参皂苷Rg3、人参皂苷Re、七叶胆苷ⅩⅦ对心肌细胞线粒体保护作用最佳,进一步研究表明 20(R)-人参皂苷Rg3 可能通过上调视神经萎缩蛋白 1(optic atrophy 1,OPA1)和线粒体融合蛋白 2(mitofusin 2,MFN2)表达,人参皂苷Re和七叶胆苷ⅩⅦ通过上调OPA1 蛋白表达,促进线粒体膜融合,减轻线粒体损伤,从而发挥心肌细胞的保护作用.该研究为从人参、三七中发现创新药物提供了实验依据,也为中药心肌保护有效组分与有效成分的规模化筛选提供了新方法.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2024/6/15
-
基于液质联用技术结合化学计量法分析杜仲盐制前后差异性成分
编辑人员丨2024/5/11
目的 通过超高液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法(UPLC-Triple-TOF-MS)对杜仲盐制前后成分进行鉴定,分析差异性成分.方法 利用UPLC-Triple-TOF/MS检测杜仲中的化学成分,液相采用Waters HSS-T3色谱柱(150mm×2.1 mm,1.8 μm),以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,柱温为50 ℃;检测波长254 nm:进样量3 μL.质谱采用负离子扫描模式采集数据,根据一级准分子离子与二级碎片离子信息进行化合物的分析与鉴定.通过主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)对杜仲盐制前后进行差异成分分析.结果 共解析出杜仲中52种成分,结合OPLS-DA筛选出14个影响杜仲盐制前后质量的潜在差异性成分,分别为京尼平苷、绿原酸、杜仲醇、桃叶珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸、京尼平、eucomoside B、异绿原酸C、teuhircoside硫酸脂、橄榄素二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、中脂素二葡萄糖苷和去氢二松柏醇葡萄糖苷.结论 建立了杜仲盐制前后化学成分定性分析方法,筛选出盐制前后杜仲质量变化的潜在差异性成分,为杜仲盐制的增效物质基础的研究提供了科学依据,对杜仲质量控制提供更加全面的支撑.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2024/5/11
-
TLC联合UPLC-QQQ-MS分析天王补心丸中4种外源性污染成分
编辑人员丨2024/4/27
目的 对天王补心丸质量分析中发现的异常成分进行研究,建立薄层色谱(TLC)、超高效液相色谱—三重四极杆质谱(UPLC-QQQ-MS)同时测定天王补心丸中盐酸小檗碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀等4种外源性污染成分的分析方法.方法 采用TLC法,通过优化展开系统,对158批样品进行定性鉴别;针对异常斑点,采用HPLC-Q/TOF-MS进行成分鉴定确认;采用UPLC-QQQ-MS进行定量分析.结果 158批天王补心丸样品中有9批检出盐酸小檗碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀等4种外源性污染成分,分别在0.97~483.34、0.98~98.49、1.00~100.50、0.88~87.75 ng·mL-1内呈线性,回收率为99.30%~103.99%,平均标准偏差(RSD)为0.90%~2.62%(n=6),9批样品中上述4种成分的含量分别为20.3~104.1、1.0~17.6、0.4~30.6、3.2~24.8μg·g-1.结论 该方法简便、准确、专属性强,可为天王补心丸的质量控制提供参考.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2024/4/27
-
基于UPLC-Q-TOF-MS的参芪扶正注射液主要成分鉴定及其治疗三阴性乳腺癌的网络药理学研究
编辑人员丨2024/3/16
目的 应用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)技术和网络药理学方法,鉴定参芪扶正注射液的主要成分,探究其治疗三阴性乳腺癌(TNBC)的作用机制,为其药效物质基础研究提供依据.方法 ①参芪扶正注射液主要成分鉴定:采用UPLC-Q-TOF-MS技术,结合天然产物高分辨质谱数据库及相关文献,明确参芪扶正注射液的主要成分.②网络药理学研究:基于中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中草药化合物蛋白质靶标数据库(HIT)、有机小分子生物活性数据库(PubChem)、化合物靶点预测平台(Swiss Target Prediction)、本草组鉴数据库(HERB)获取参芪扶正注射液主要成分的潜在靶点,利用人类基因综合数据库(GeneCards)、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、治疗靶点数据库(TTD)获得TNBC疾病潜在靶点,二者相结合得到参芪扶正注射液治疗TNBC的潜在靶点;运用蛋白互作关系数据库(STRING)平台、Cytoscape 3.9.1软件构建蛋白互作网络图并进行网络拓扑分析,获得参芪扶正注射液治疗TNBC的关键靶点;运用R语言进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.③动物实验验证:制备异种移植瘤乳腺癌小鼠模型,分为模型组与参芪扶正注射液低、中、高剂量(20、40、60 mL/kg)组,干预4周后取肿瘤组织,运用Western blot方法检测肿瘤组织中磷酸化磷脂肌醇3激酶(p-PI3K)、磷脂肌醇3激酶(PI3K)、P-糖蛋白(P-gp)、乳腺癌耐药蛋白(ABCG2)表达情况,并对预测潜在靶点进行实验验证.结果 ①参芪扶正注射液的主要成分为党参炔苷、鸟苷、毛蕊异黄酮苷、壬二酸、黄芪甲苷、美迪紫檀苷等.②网络药理学研究结果显示,参芪扶正注射液的主要成分主要作用于肿瘤蛋白p53(TP53)、白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、己糖激酶2(HK2)、缺氧诱导因子1亚基α(HIF1A)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(CASP9)、ABCG2、ATP结合盒转运体B1(ABCB1)、原癌基因(MYC)等关键靶点,调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)、T细胞受体等信号通路.③动物实验验证结果显示,参芪扶正注射液降低了实验动物肿瘤组织中p-PI3K水平,抑制了P-gp和ABCG2的表达.结论 参芪扶正注射液中的主要成分为党参炔苷、鸟苷、毛蕊异黄酮苷、壬二酸、黄芪甲苷、美迪紫檀苷等,其抗TNBC的作用机制与其通过调控PI3K信号通路和调节耐药相关蛋白表达有关.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2024/3/16
-
基于超高效液相色谱-三重四极杆飞行时间串联质谱技术分析厚朴花中化学成分
编辑人员丨2023/8/6
目的:通过超高效液相色谱-三重四极杆飞行时间串联质谱技术对厚朴花中的化学成分进行分析鉴定.方法:采用反相C18色谱柱(250mm×4.6mn,5μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱.质谱使用ESI离子源,负离子模式下采集数据.依据高分辨质谱提供的准分子离子峰和碎片离子的精确分子质量信息,结合标准品对照与参考相关文献数据,对厚朴花进行成分鉴定.结果:初步鉴定出酚酸类、黄酮类和苯乙醇苷类共16种化学成分.结论:本研究为进一步探究厚朴花的药效物质基础和质量调控机制提供基础资料.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
基于UPLC-Triple TOF MS/MS技术比较高良姜根中髓及皮层间的差异
编辑人员丨2023/8/6
目的:建立高良姜主要成分的UPLC-Triple TOF MS/MS定性与定量检测方法.方法:利用UPLC-Triple TOF MS/MS技术对8批高良姜根中的髓与皮层进行测定分析.在电喷雾负离子及TOF MS触发TOF MS/MS的模式下检测,以一级离子质量准确度、一级离子同位素分布、二级碎片与文献匹配等手段确保准确定性分析,以TOFMS提取离子的峰面积定量分析.结果:高良姜根中髓及皮层间均含黄酮类与二苯基庚烷类成分,但皮层含二苯基庚烷类成分种类较少.髓中高良姜素含量(18.78 mg/g)约为皮层含量(9.01 mg/g)的2倍;二苯基庚烷A含量(3.56 mg/g)约为皮层含量(2.25 mg/g)的1.5倍.结论:该检测方法具有准确、高效的特点;同时可为高良姜药材商品规格等级划分及标准制订提供理论依据.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
韩信草UPLC指纹图谱及LC-MS化学成分分析
编辑人员丨2023/8/6
目的:建立韩信草UPLC指纹图谱,并采用LC-MS技术对韩信草中化学成分进行结构推断.方法:采用UPLC法,运用Agilent Poroshell 120 SB-C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.7 μm),以0.1%甲酸溶液(A)-乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱;检测波长275 nm;流速0.4 mL/min;柱温35C;进样量2μL.采用Triple TOF 5600检测器,运用ESI源,在正、负离子模式下确定质谱参数为:质量范围m/z 50~1 250 Da;源温度500℃;雾化气55 psi;辅助气55 psi;气帘气35 psi;离子扫描电压5 500 V(正离子模式)、-4 500 V(负离子模式).结果:运用12批韩信草样品建立了UPLC指纹图谱,并标定32个共有峰.结合对照品、文献报道以及根据对应的碎片进行裂解规律推断,标定出27个黄酮类成分.结论:建立了韩信草的UPLC指纹图谱并进一步通过高分辨质谱对化学成分进行鉴别,从定性角度控制韩信草质量.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
基于UPLC-Triple TOF-MS/MS技术分析同基源何首乌和首乌藤中差异化学成分
编辑人员丨2023/8/6
基于超高效液相-串联四极杆飞行时间高分辨质谱法(UPLC-Triple TOF-MS/MS)结合多元统计分析技术分析同基源何首乌和首乌藤中化学成分的差异.何首乌样品用甲醇在室温下超声提取后进样,通过二级串联质谱分析,对采集的图谱进行峰匹配、峰对齐、滤噪处理等进行特征峰提取;用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)进行数据处理;根据一级质谱精确质荷比和二级质谱碎片信息,结合软件数据库搜索及相关文献进行成分鉴定.结果显示,同基源何首乌和首乌藤样品间的化学组成得到明显区分;初步筛选并鉴定出42种同基源何首乌和首乌藤差异显著的化学成分,其中12种为共有差异化学成分,且呈现出不同的变化规律.该结果可为揭示同基源何首乌和首乌藤中次生代谢产物合成积累的差异性提供基础资料,亦为何首乌和首乌藤资源的综合开发利用提供了科学依据.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
3个辽东楤木三萜皂苷同分异构体的电喷雾质谱区分
编辑人员丨2023/8/6
该研究采用超高效液相色谱串联三重飞行时间质谱(UPLC-Triple-TOF-MS)对3个辽东楤木三萜皂苷同分异构体(Ⅵ,Ⅶ和B)进行质谱区分.通过分析楤木皂苷Ⅵ(1)和楤木皂苷Ⅶ(2)的[M+Na]+的二级质谱(CE =90 eV),二者在m/z981.502 5[Y0α+Na]+,819.443 3[Y0α-Glc+ Na]+,527.157 2[C3β+Na]+,509.150 4[B3β+ Na]+和365.106 5[C3β-Glc+Na]+处产生了相同的碎片离子峰,而楤木皂苷B(3)的[M+Na]+二级质谱在m/z 671.198 2和689.208 7处产生了2个明显不同的碎裂离子峰,其分别归属于[B4β+ Na]+和[C4β+Na]+.因此,[B4β+ Na]+和[C4β+Na]+可作为化合物3区分其他两个异构体(1和2)的特征性的诊断离子.进一步分析楤木皂苷Ⅵ(1)和楤木皂苷Ⅶ(2)的[M+NH4]+或[M+H]+的二级谱图(CE =40 eV),二者在m/z 455.350 7和437.341 2处产生相同的苷元脱水碎片离子峰,其分别归属于[苷元-H2O+H]+和[苷元-2H2O+H]+.楤木皂苷Ⅵ(1)的苷元类型是刺囊酸,其[苷元-2H2O+H]+和[苷元-H2O+H]+的离子强度比值<1,而楤木皂苷Ⅶ(2)的苷元类型是常春藤,其[苷元-2H2O+H]+和[苷元-H2O +H]+的离子强度比值>1,基于此可以有效区分梅木皂苷Ⅵ(1)和楤木皂苷Ⅶ(2).以上研究表明,利用电喷雾二级质谱法可以快速、简便、准确地区分3种楤木皂苷(Ⅵ,Ⅶ和B)异构体.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
江苏地产太子参代谢物的动态积累分析
编辑人员丨2023/8/6
目的 分析不同采收时间江苏地产太子参代谢产物的动态积累变化.方法 采用UPLC-Triple TOF-MS/MS技术对样品进行测定,结合Mass数据等对总离子流图主要分子离子峰进行归属,用SIMCA-P软件进行主成分分析.HPLC法测定太子参中指标性成分(主要代谢差异标志物)环肽A、B的含量.结果 共鉴定出12种化合物.主成分得分图显示,不同采收时间太子参样本能较明显地分开;通过载荷图筛选出差异显著的10种标志物,且这10种标志物呈现出不同的变化规律.太子参环肽A(HA)和环肽B(HB)分别在7月下旬和8月上旬含量较高.结论 为揭示不同采收时间太子参中代谢物积累动态规律及确定其药材合理采收期提供基础资料.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
