目的:探讨他达拉非肠溶缓释新剂型对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)引起的肾脏纤维化模型小鼠的治疗作用.方法:C57BL/6J雄性小鼠(8周龄)随机分为假手术(sham)组、UUO模型组、他达拉非新剂型治疗(1 mg/kg)组和他达拉非原研药治疗(5 mg/kg)组,每组6只.采用手术构建UUO模型,造模后连续7 d灌胃治疗.应用全自动生化分析仪检测各组小鼠血清中肌酐(serum creatinine,SCr)水平,通过肾脏组织病理学染色和Western blot实验观察他达拉非肠溶缓释新剂型对肾脏纤维化小鼠的治疗作用.结果:与sham组相比,肾脏纤维化小鼠SCr水平显著升高,肾小管可见空泡变性、扩张,伴明显炎症细胞浸润和胶原纤维沉积,纤维连接蛋白(fibronectin,FN)及α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达显著增加(P<0.05);他达拉非新剂型和原研药治疗均可显著降低肾纤维化小鼠SCr水平,改善患侧肾组织结构的损伤,减少胶原纤维的沉积,抑制FN及α-SMA的表达和分布(P<0.05).结论:他达拉非肠溶缓释新剂型可显著减少肾组织间质中细胞外基质的沉积,减轻输尿管梗阻引起的纤维化和肾功能损伤,且与他达拉非原研药相比,具有低剂量、高疗效的显著优势.

目的:观察黄芪多糖对体外冲击波碎石治疗诱发的大鼠(购自辽宁长生生物技术有限公司)输尿管平滑肌损伤的修复作用。方法:30只大鼠随机分为5组，分别为对照组、模型组、黄芪多糖低、中、高剂量组，每组6只，除对照组外，其余各组大鼠建立肾结石模型并采用体外冲击波碎石治疗，黄芪多糖低中高剂量组大鼠分别按照20、40、80 mg/kg腹腔注射给予黄芪多糖，对照组及模型组腹腔注射给予大鼠等量生理盐水，每天1次，连续给药14 d，测定各组大鼠输尿管平滑肌收缩力、收缩频率、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平，实时定量聚合酶链反应(PCR)检测大鼠输尿管平滑肌毒蕈碱型3(M3)受体mRNA水平，蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠输尿管平滑肌B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)水平，对照组与模型组比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析，多组间两两比较采用LSD检验。 结果:黄芪多糖低、中、高剂量组大鼠收缩力[(0.39±0.11)、(0.46±0.14)、(0.57±0.16) g]及收缩频率[(14.21±2.62)、(16.73±1.47)、(17.49±2.14)次/分]、SOD活性[(40.35±3.82)、(53.59±3.17)、(66.80±4.15) U/mg蛋白]、M3受体mRNA水平(1.03±0.24、1.73±0.48、2.46±0.35)、bcl-2水平(0.83±0.08、1.17±0.15、1.44±0.19)明显高于模型组[(0.18±0.07) g、(11.31±2.85)次/分、(21.46±2.71) U/mg蛋白、0.65±0.14、0.61±0.12]，MDA水平[(1.77±0.14)、(1.21±0.27)、(0.71±0.11) nmol/mg蛋白]及bax水平(1.13±0.10、0.86±0.14、0.71±0.09)明显低于模型组[(3.27±0.07) nmol/mg蛋白、1.58±0.23]，各项指标变化差异均有统计学意义( F＝11.281、16.461、131.831、44.872、25.504、169.905、26.883， P<0.05)。 结论:黄芪多糖能够提高体外冲击波碎石治疗诱发的大鼠输尿管平滑肌收缩力、收缩频率、SOD活性、M3受体mRNA水平及bcl-2水平，降低输尿管平滑肌MDA水平及bax水平，进而发挥对输尿管平滑肌的修复作用。

目的:探讨腹腔镜下肾部分切除术治疗肾门肿瘤的可行性和临床疗效。方法:回顾性选择中山大学肿瘤防治中心2015年3月至2019年3月收治的30例行腹腔镜下肾部分切除术治疗的T1a期肾门肿瘤患者的临床资料，探讨分析患者的各项手术相关指标和并发症资料。结果:30例肾门肿瘤患者均行腹腔镜肾部分切除术治疗，其中1例改开放手术，其余29例均顺利在腹腔镜下完成手术。患者的中位热缺血时间为25(14～33 )min，中位出血量为210(120～300)mL，其中1例转开放手术患者的出血量为800 mL。术后1例患者出现活动性出血，肾周引流较多，卧床休息3 d后好转。术后中位住院时间为9(6～10)d，引流管中位留置时间为6(4～8)d。无患者因术后出血行肾切除术或介入手术，无输尿管损伤或狭窄患者。术后3 d内出现明显血尿患者2例，静卧制动2 d后消失。术后病理提示21例为透明细胞癌，5例为血管平滑肌脂肪瘤，3例为嫌色细胞癌，1例为单纯囊肿，手术切缘均为阴性。术后随访12～60个月，无肿瘤复发患者。结论:小的肾门肿瘤(直径≤4 cm)可考虑行腹腔镜下肾部分切除术，但需严格把握适应证，充分完成术前准备，选择合适的手术路径。

目的:探讨钬激光碎石后发生输尿管狭窄的病因，为临床治疗及预防提供指导意义。方法:回顾性分析2020年5月至2022年5月在本院诊断为输尿管结石的482例患者的临床资料，其中65例行后腹腔镜输尿管切开取石术，417例行输尿管镜钬激光碎石术。对正常输尿管行HE染色，提取输尿管平滑肌细胞并用钬激光处理，采用Transwell实验检测其对巨噬细胞的趋化作用，采用Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。结果:输尿管镜钬激光碎石术后的输尿管狭窄发生率高于后腹腔镜输尿管切开取石( P＝0.008)。机制上碎石过程中钬激光可造成输尿管平滑肌细胞损伤，促进巨噬细胞迁移并诱导其高表达α-SMA。 结论:钬激光碎石容易造成输尿管平滑肌细胞损伤，招募巨噬细胞参与纤维化过程，导致输尿管狭窄，术中尽量避免肌层的损伤及减少巨噬细胞的浸润有助于减少输尿管狭窄的发生。

目的 探讨柴黄益肾颗粒对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾纤维化的作用及其机制.方法 将24只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、模型组及柴黄益肾颗粒低、高剂量组(n=6).对照组仅暴露且游离右侧肾输尿管;模型组行UUO建立UUO动物模型;柴黄益肾颗粒低、高剂量组按模型组方法建立UUO小鼠模型并分别予以3.8、7.6 g/kg柴黄益肾颗粒灌胃,7 d后麻醉处死小鼠收集肾标本.采用HE、Masson染色观察肾脏病理变化及纤维化程度,天狼星红染色观察胶原沉积情况.采用Western blotting检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、β-连环蛋白(β-catenin)相关蛋白的表达水平.采用RT-PCR检测A33 及GSK-3β、β-catenin mRNA水平的变化.同时,以正常小鼠肾小管上皮细胞(TCMK1)作为正常组,并利用转化生长因子-β(TGF-β)刺激TCMK1建立体外纤维化模型,柴黄益肾颗粒含药血清处理建立体外用药模型;并通过转染A33过表达质粒在TCMK1细胞内过表达A33,观察纤维化相关指标及A33及GSK-3β、β-catenin mRNA的表达变化.结果 RT-PCR检测结果显示,与对照组比较,模型组A33水平明显升高,而柴黄益肾颗粒高、低剂量组明显降低(P＜0.05).Western blotting检测结果显示,模型组α-SMA、FN、Col-Ⅰ等纤维化相关因子的表达水平明显高于对照组(P＜0.05);与模型组比较,柴黄益肾颗粒低、高剂量组α-SMA、FN、Col-Ⅰ的表达水平明显降低(P＜0.05).HE、Masson、免疫组化染色结果显示,与对照组比较,模型组肾脏结构损伤严重,胶原沉积明显增加,且GSK-3β、β-catenin蛋白表达水平明显升高(P＜0.01);与模型组比较,柴黄益肾颗粒低、高剂量组肾脏结构良好,肾脏损伤及纤维化均明显好转,GSK-3β、β-catenin蛋白表达水平明显降低(P＜0.05).体外实验结果证实,与正常组比较,A33过表达可促进TCMK1细胞纤维化相关因子的上调,明显增加Wnt/β-catenin信号通路下游靶点GSK-3β和β-catenin mRNA的表达(P＜0.05),且A33过表达可逆转柴黄益肾颗粒含药血清下调的细胞纤维化改变(P＜0.01).结论 柴黄益肾颗粒可通过下调A33/Wnt/β-catenin信号通路明显减缓UUO小鼠肾纤维化,且A33可能是肾纤维化的一个潜在治疗靶标.

目的:探究银杏叶提取物(GBE)调节转化生长因子β1(TGF-β1)/肝细胞生长因子(HGF)信号通路对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾纤维化的影响.方法:采用单侧输尿管结扎术法构建UUO小鼠模型,造模成功后将小鼠随机分为模型组、厄沙贝坦组(20mg/kg)、GBE低、中、高剂量组(25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg),每组10只;另取10只小鼠为假手术组(仅分离左侧输尿管但不结扎).检测肾功能指标:β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理变化;马森(Masson)染色观察肾脏组织纤维化情况;免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1表达;Western blot检测肾脏组织Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、α-SMA、TGF-β1、细胞信号转导分子2(Smad2)、磷酸化Smad2(p-Smad2)、HGF蛋白表达.结果:相比于假手术组,模型组小鼠肾脏组织肾小管腔扩张或萎缩,炎症细胞浸润,胶原纤维沉积明显,NAG、Scr、BUN、TNF-α、IL-1β、IL-6、肾纤维化水平、Col-Ⅰ、α-SMA、TGF-β1、p-Smad2/Smad2表达明显升高,HGF蛋白表达明显下降(P＜0.05);相较于模型组,厄沙贝坦组和GBE低、中、高剂量组小鼠肾组织病理损伤减轻,胶原沉积纤维减少,NAG、Scr、BUN、TNF-α、IL-1β、IL-6、肾纤维化水平、Col-Ⅰ、α-SMA、TGF-β1、p-Smad2/Smad2表达明显降低,HGF蛋白表达明显升高(P＜0.05),其中厄沙贝坦组和EG高剂量组改善最为显著.结论:GBE能减轻肾功能损伤,抑制炎症反应,改善UUO小鼠的肾纤维化,其作用机制可能与调节TGF-β1/HGF信号通路平衡有关.

研究加味防己黄芪汤在小鼠单侧输尿管结扎(UUO)模型中,以及转化生长因子β1(TGF-β1)诱导大鼠肾小管导管上皮细胞(NRK-52E)纤维化模型中对上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达的影响,探讨加味防己黄芪汤减轻肾间质纤维化的分子机制.对C57/BL小鼠予UUO手术,0.5、2 倍加味防己黄芪汤以及蒙诺阳性对照药给药 7 d后取材,Masson染色观察小鼠肾间质组织胶原沉积情况,Western blot、RT-qPCR检测肾组织中TGF-β1、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、Smad2/3、Snail、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)表达水平.利用SD大鼠制备不同浓度加味防己黄芪汤含药血清,CCK-8检测不同浓度含药血清对NRK-52E增殖活力的影响.TGF-β1 诱导NRK-52E纤维化模型,显微镜观察不同浓度含药血清处理后细胞形态.TGF-β1 诱导 NRK-52E纤维化模型,1 倍加味防己黄芪汤含药血清处理,Western blot、RT-qPCR检测p-Smad2/3、Smad2/3、Snail、E-cadherin、α-SMA、vimentin表达水平,以及同等模型下shRNA沉默Snail基因后,1 倍加味防己黄芪汤含药血清处理,测量指标同上.结果显示,加味防己黄芪汤能改善UUO模型小鼠纤维化损伤,减轻TGF-β1 诱导NRK-52E纤维化模型中的纤维化,使EMT相关指标p-Smad2/3、α-SMA、Snail、vimentin蛋白及mRNA表达降低,E-cadherin蛋白及mRNA表达升高;当shRNA沉默Snail基因后,加味防己黄芪汤含药血清处理前后EMT相关指标E-cadherin、α-SMA及vimentin蛋白表达及mRNA水平差异没有统计学意义.结果表明,加味防己黄芪汤可能通过抑制TGF-β1/Smad/Snail信号通路减轻肾间质纤维化,参与EMT进程.

目的 观察活血解毒化瘀方对单侧输尿管梗阻(Unilateral ureteral obstruction,UUO)6个月大鼠模型对侧肾脏血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)焦亡的干预作用,探讨活血解毒化瘀方对慢性肾脏病(Chronic kidney disease,CKD)的部分治疗机制.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、单侧输尿管梗阻(UUO)组、依普利酮治疗(EPL)组和活血解毒化瘀方干预(HJHR)组(n=10).术后EPL组给予依普利酮,HJHR组给予中药.6个月后摘取右侧肾脏.通过HE染色和Masson染色评估对侧肾脏病理改变.免疫组化检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Cysteinyl aspartate specific proteinase1,Caspase-1)、白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β),核因子κappa-B,p65(Nuclear Factor κappa-B,NF-κB,p65)和血清和糖皮质激素诱导的激酶1(Serum and glucocorticoid-induced kinase 1,SGK1)的表达.通过TUNEL染色观察肾脏血管平滑肌细胞的DNA损伤情况.体外实验将大鼠血管平滑肌细胞随机分为4组:空白对照(CON)组、醛固酮刺激(ALD)组、醛固酮加依普利酮治疗(EPL)组和醛固酮加活血解毒化瘀方干预(HJHR)组.ALD组给予醛固酮刺激24 h,EPL组和HJHR组在醛固酮刺激前分别给予依普利酮和10%大鼠含中药血清预处理.通过流式细胞术检测细胞凋亡率.通过免疫荧光观察细胞膜中GSDMD蛋白(Gasdermin D,GSDMD)的穿孔和核受体亚家族3C组成员2(Nuclear Receptor subfamily 3 group C member 2,NR3C2)、编码盐皮质激素受体(Mineralocorticoid receptor,MR)的核转位.通过蛋白免疫印迹法检测炎症和细胞焦亡相关信号分子的蛋白质表达.通过实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞焦亡信号通路相关分子的信使RNA(Messenger RNA,mRNA)表达.结果 与Sham组比较,UUO组肾脏血管及血管平滑肌细胞的DNA损伤加重,Caspase-1、IL-1β、SGK1、NF-κB的表达增高;与UUO组比较,EPL组和HJHR组肾脏血管及血管平滑肌细胞的DNA损伤有所减轻,Caspase-1、IL-1β、SGK1和NF-κB的表达降低.与CON组比较,ALD组出现大鼠血管平滑肌细胞焦亡及细胞DNA损伤,NR3C2、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、SGK1、NF-κB的表达上调;与ALD组比较,EPL组和HJHR组细胞焦亡及细胞DNA损伤减轻,NR3C2、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、SGK1、NF-κB的表达降低.结论 活血解毒化瘀方通过抑制MR/NLRP3通路的激活,抑制血管平滑肌细胞焦亡,从而减轻UUO对侧肾脏血管损伤.

目的 探讨成功治疗输尿管结石的方剂中主要中药及其成分的潜在机制.方法 报告2例体外冲击波碎石术(ESWL)治疗失败、经中药治疗成功排石的输尿管结石男性病例,应用网络药理学方法,分析处方中10种中药组合治疗输尿管结石的作用机制.结果 2例患者经中药治疗成功排石,复查CT未见输尿管结石及肾盂积水征象.蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络分析发现,2例患者处方中10种中药的核心蛋白涉及ALB、MMP9、TLR4、EGF、IL-6、FN1、HSP90AA1、EGFR、AKT1、IL-10和VEGFA.京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析发现,10种中药组合主要涉及PI3K/Akt、EGFR酪氨酸激酶抑制、TNF和HIF-1等信号通路.结论 2例ESWL治疗失败的输尿管结石经中药治疗后成功排石.网络药理学分析得出10种中药组合具有舒张输尿管平滑肌、抗炎、减少输尿管内皮损伤、利尿等作用,结石成分分析和CT值提示中药对于ESWL不敏感的输尿管结石有治疗价值.

目的:探讨槲皮素对小鼠单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化的改善作用及机制.方法:将48只C57/B6健康雄性小鼠随机分为四组:对照组行单侧输尿管结扎术后给予皮下注射0.9％氯化钠溶液;低剂量给药组行单侧输尿管结扎术后给予皮下注射槲皮素3 mg/(kg·d);中剂量给药组行单侧输尿管结扎术后给予皮下注射槲皮素9 mg/(kg·d);高剂量给药组行单侧输尿管结扎术后给予皮下注射槲皮素18 mg/(kg·d).分别于术后第14天处死小鼠,取输尿管结扎侧肾组织.检测小鼠血清肌酐和尿素氮含量;肾脏组织行PAS检查损伤程度,天狼星红染色检测肾间质纤维化程度;用RT-qPCR法检测肾脏组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、胶原蛋白1(COL-1)、纤连蛋白(FN)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA相对表达量,用免疫组化检测肾组织中巨噬细胞变化,Western blot检测小鼠肾组织α-SMA、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达.结果:PAS染色和天狼星红染色结果表明,单侧输尿管结扎术后肾脏间质区胞外基质成分增多细胞成分减少,肾小管萎缩而肾小球病变不明显,肾组织出现间质纤维化改变.槲皮素治疗后,低剂量和中剂量给药组血清肌酐及尿素氮水平相比对照组无统计学差异(均P＞0.05),高剂量组血清肌酐及尿素氮相比对照组降低(均P＜0.05);高剂量组与对照组相比较炎症因子TNF-α、IL-6和纤维化因子COL-1、FN、α-SMA mRNA相对表达量下调;Western blot结果显示,槲皮素高剂量组抑制UUO小鼠肾组织α-SMA、TGF-β1的表达.结论:槲皮素可以改善UUO小鼠肾间质纤维化指标以及血肌酐和尿素氮含量,其机制可能是通过降低炎症细胞浸润,并通过下调α-SMA和TGF-β1蛋白表达,改善肾小管上皮细胞间充质转化,从而减轻纤维化程度.