连翘为临床常用的清热解毒类中药,主要含有苯乙醇苷类、木脂素类、萜类及挥发油、黄酮类等化学成分.大量研究证实连翘具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等多种药理作用,且安全性较高.该文系统综述了连翘的化学成分、药理作用及安全性的研究进展,以总结连翘的相关研究成果,并为其进一步的开发研究和临床应用提供思路.

目的 基于血清药理学和网络药理学探究清感童饮的体外抗炎作用.方法 采用血清药理学评价方法,验证清感童饮含药血清对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)释放一氧化氮(NO)、细胞坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素 6(IL-6)的影响.利用液质联用(UHPLC-MS/MS)技术对清感童饮指标性成分进行含量测定,并根据这些成分进行网络药理学分析,对清感童饮有效成分发挥抗炎作用的潜在靶点及作用通路进行预测.结果 细胞实验证明清感童饮可明显降低NO、TNF-α、IL-6 水平(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).清感童饮中含量较高的成分为连翘酯苷A、牛蒡苷、绿原酸、野黄芩苷、没食子酸、迷迭香酸、芍药内酯苷、连翘苷.清感童饮中 17 个活性成分与炎症的交集靶点共 215 个,主要涉及ALB、VEGFA、IL-6、TNF-α等 31 个核心靶点,调节AGE-RAGE、PI3K-Akt、MAPK信号通路等多种通路发挥抗炎作用.结论 清感童饮具有多成分-多靶点发挥抗炎作用的特点.

基于超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术结合自建化学成分数据库,对连翘Forsythia suspensa的叶、花、果实、青翘、老翘、种子等11个部位中化学成分进行整体表征和鉴定.运用主成分分析、偏最小二乘法判别分析等化学计量学方法,评价连翘不同部位的质量属性与差异.从连翘中共推测鉴定出79个化合物,包括13个苯乙醇苷类、10个木脂素类、12个黄酮类、10个有机酸类、14个萜类及20个其他类型化合物.其中,34个化合物为连翘不同部位间差异的主要变量,且连翘叶和青翘中各成分的相对含量较高.应用脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型,评价了连翘不同部位提取物及主要成分的抗炎活性.结果显示,青翘、连翘花、连翘枝和连翘梗的提取物均具有一定的抗炎活性,且连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素、(+)-松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷等成分也具有可显著抑制NO释放的抗炎活性.该研究对连翘不同部位的化学成分进行了较全面的分析以及抗炎活性评价,为连翘的资源开发和综合利用提供参考.

目的 探讨连翘脂苷A是否通过微小RNA-502-3p(miR-502-3p)/细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)通路调控结肠癌细胞HCT 116增殖、迁移和侵袭.方法 将对数期的HCT 116细胞用80、160、320 mg/L连翘脂苷A处理,分别记为低剂量组、中剂量组、高剂量组,同时将未处理的细胞设为对照(NC)组.将正常人正常结肠上皮NCM460细胞用320 mg/L连翘脂苷A处理,计为NCM460高剂量组,将未处理的细胞设为对照,计为NCM460组.48 h后收集HCT 116细胞、进行增殖、迁移、侵袭、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、CDCA5蛋白表达和miR-502-3p表达测定,收集NCM460细胞进行增殖、迁移、侵袭测定.根据转染靶标将HCT 116细胞分为NC组(未行转染)、si-NC组(转染 si-NC)、si-CDCA5 组(转染 si-CDCA5)、miR-NC 组(转染 miR-NC)、miR-502-3p 组(转染 miR-502-3p)、anti-miR-NC 组(转染 anti-miR-NC)、anti-miR-502-3p 组(转染 anti-miR-502-3p)、anti-miR-NC+高剂量组(转染 anti-miR-NC+320 mg/L 连翘脂苷 A)、anti-miR-502-3p+高剂量组(转染 anti-miR-502-3p+320 mg/L连翘脂苷A),检测HCT 116细胞的增殖、迁移和侵袭.双荧光素酶活性检测分析miR-502-3p与CDCA5的靶向结合.结果 低、中、高剂量连翘脂苷A作用后结肠癌HCT 116细胞的增殖能力、细胞迁移数量、细胞侵袭数量、MMP2、MMP9、CDCA5蛋白表达量均逐渐降低,miR-502-3p表达量逐渐升高,呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(P＜0.05).NCM460组与NCM460高剂量组的NCM460细胞增殖、迁移及侵袭数量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).CDCA5低表达或miR-502-3p高表达可减弱HCT 116细胞MMP2及MMP9蛋白表达、细胞增殖、迁移及侵袭能力,差异均有统计学意义(P＜0.05),而miR-502-3p低表达的结果相反.miR-502-3p靶向调控CDCA5的表达.连翘脂苷A抑制HCT 116细胞CDCA5、MMP2、MMP9蛋白表达、增殖能力、细胞迁移和细胞侵袭的作用被miR-502-3p低表达所逆转.结论 连翘脂苷A通过上调miR-502-3p靶向调控CDCA5的表达,抑制结肠癌细胞HCT 116细胞的增殖、迁移和侵袭.

目的 对不同产地、不同炮制方式连翘的主要化学成分含量及抗菌活性进行比较评价.方法 选取不同产地、不同炮制方式的连翘,通过超高效液相色谱法(ultra performance liquid chromatography,UPLC)测定连翘苷、(+)松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷、芦丁、连翘酯苷A的含量;通过测定连翘煎煮液对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),比较抗菌活性.结果 相同产地清蒸连翘的(+)-松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷、芦丁、连翘酯苷A及连翘苷的含量均显著高于生晒连翘;在清蒸连翘中,陕西产地连翘的 4 种主要化学成分含量均最高;在生晒连翘中,陕西产地连翘的松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷和芦丁含量最高,而山东产地的连翘酯苷A和连翘苷含量最高.不同产地、不同炮制方式连翘煎煮液的MIC值明显不同,清蒸连翘的MIC值显著低于生晒连翘.结论 利用UPLC测定连翘主要化学成分含量的方法简便、准确,可用于不同产地、不同炮制方式连翘药材的区分及质量评价;连翘煎煮液对金黄色葡萄球菌的抑制作用的测定,也为其进一步抗菌作用机制研究提供参考.

采用硅胶、ODS、MCI、Sephadex LH-20 等柱色谱分离技术对牛蒡叶乙酸乙酯部位进行化学成分研究.通过NMR、MS、IR、UV、X衍射等现代波谱技术及结合文献数据对分离得到的化合物进行结构鉴定,共鉴定出 20 个化合物,分别为arcta-nol(1)、柑橘苷A(2)、melitensin 15-O-β-D-glucoside(3)、11β,13-氢化刺蓟苦素(4)、11β,13-dihydrosalonitenolide(5)、8α-羟基-β-桉叶醇(6)、紫丁香苷(7)、二氢丁香苷(8)、3,4,3',4'-tetrahydroxy-δ-truxinate(9)、松脂素(10)、连翘脂素(11)、丁香脂素(12)、山柰酚(13)、槲皮素(14)、木犀草素(15)、金丝桃苷(16)、4,5-二咖啡酰奎宁酸(17)、1H-indole-3-carboxaldehyde(18)、苄醇-β-D-葡萄糖苷(19)、N-(2'-苯基乙基)异丁酰胺(20).其中化合物 1 为新的降碳倍半萜,化合物 2~5、7~8、18~20 为首次从牛蒡属中分离得到.

目的 建立同时测定连翘花中芦丁、连翘酯苷A、(+)-松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘苷、连翘脂素5种成分的方法.方法 采用超高效液相色谱(UPLC)法进行检测.色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3 C18;流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱);流速为 0.3 mL/min;检测波长为275 nm(0～8 min)、330 nm(8～10.5 min)、275 nm(10.5～32 min);柱温为25℃;进样量为1 μL.以芦丁为参照物,采用一测多评(QAMS)法计算各成分含量,并与外标法进行比较.结果 QAMS法所得连翘花中连翘酯苷A、(+)-松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、连翘苷、连翘脂素的含量分别为7.472～7.671、2.919～2.986、1.439～1.486、1.523～1.566 mg/g,外标法测定结果为7.454～7.664、2.913～2.996、1.444～1.484、1.519～1.562 mg/g,两种方法测定结果无明显差异,相对偏差＜1.0%.结论 本研究成功建立了UPLC-QAMS法同时测定连翘花中5种成分的含量,且该方法与外标法所得结果无明显差异,可用于连翘花的质量控制.

采用色谱法从臭参中分离得到24个化合物,利用波谱学方法鉴定了它们的结构,分别鉴定为choushenglycolipid A(1)、(-)-(7R,8S,7'E)-4-hydroxy-3,5'-dimethoxy-7,4'-epoxy-8,3'-neolign-7'-ene-9,9'-diol 9'-ethyl ether(2) 、(7S,8R)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol(3)、3-O-demethyldihydrodehydrodiconiferyl alcohol(4)、prunustosanan AI(5)、threo-guaiacylglycerol-β-O-4-lariciresinol ether(6)、(+)-落叶松脂素(7)、5'-methoxylariciresinol (8)、(-)-(7'S,8S,8'R)-4,4'-dihydroxy-3,3',5,5'-tetramethoxy-7',9-epoxy-lignan-9'-ol-7-one(9)、(7S,8S)-3-methoxy-3',7-epoxy-8,4'-oxyneoligna-4,9-diol 9'-O-β-D-glucopyranoside(10)、(-)-secoisolariciresinol(11)、(+)-异落叶松脂素(12) 、burselignan(13) 、threo-guaiacylglycerol-β-O-4'-coniferyl ether(14)、4-[1-乙氧基-1-(4'-羟基-3'-甲氧基)苯基]甲基-2-(4-羟基-3-甲氧基)苯基-3-羟甲基四氢呋喃(15)、(-)-(7R,7'R,7"R,8JS,8'S,8"S)4',4"-dihydroxy-3,3',3",5-tetramethoxy-7,9':7',9-diepoxy-4,8"-oxy-8,8'-sesquineolignan-7",9"'-diol(16)、连翘脂素-4'-O-β-D-葡萄糖苷(17)、retusin-8-methylether(18)、ladanein(19)、怀特酮(20)、3-methoxy-9-hydroxy-pterocarpan(21) 、trichocarpin(22)、(Z)-8-O-β-D-glucopyranosyl cinnamic acid(23)和4-hydroxycinnamyl-O-β-D-glucopyranoside(24).化合物1为新化合物,除化合物7、11 ～ 13、23和24外,其余化合物均为首次从本属中被分离得到.

目的:制备连翘标准汤剂并进行其质量标准研究.方法:根据标准汤剂的制备要求,制备16批连翘标准汤剂,以连翘苷、连翘酯苷A作为定量检测指标,计算指标成分转移率与出膏率,建立其HPLC指纹图谱分析方法.结果:通过对16批连翘标准汤剂进行测定,建议连翘标准汤剂出膏率范围13.61％ ～25.27％;连翘苷转移率范围58.61％ ～100.00％;连翘酯苷A转移率范围27.88％ ～51.78％.利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)软件进行指纹图谱分析,标定了共有峰10个,分析确认了6个色谱峰,分别为forsythenside F(3号峰),连翘酯苷Ⅰ(4号峰),(+)松脂醇4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5号峰),连翘酯苷A(6号峰),连翘苷(7号峰)和连翘脂素(10号峰).采用特征峰评价模式,以峰7作为S峰,规定上述6个特征峰与S峰的相对保留时间分别为0.47,0.52,0.67,0.71,1.00,1.27.结论:本研究成功建立了连翘标准汤剂的质量评价方法,该方法准确、重复性好、特征性强,可为连翘配方颗粒的质量控制提供参考.

目的 研究连花清瘟胶囊化学成分.方法 采用硅胶、凝胶柱色谱、液相色谱等多种色谱方法对其进行分离和纯化,根据理化性质及波谱数据进行结构鉴定.结果 从连花清瘟胶囊孔树脂70％乙醇部位分离得到20个化合物,分别鉴定为芦荟大黄素(1)、连翘脂素(2)、cepharanone B(3)、松脂醇(4)、表松脂醇(5)、松脂素单甲醚(6)、胡椒内酰胺A(7)、反式对羟基肉桂酸乙酯(8)、刺芒柄花素(9)、异甘草素(10)、柚皮素(11)、山柰酚(12)、ω-羟基大黄素(13)、大黄酸(14)、大黄素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15)、4,5-dioxodehydroasimilobine(16)、kaempferol-3-O-α-L-ramnopyranosyl-4"-O-E-(4-hydroxy)-cinnamoyl(17)、大黄酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(18)、大黄酚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(19)、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(20).结论 化合物2、3、5～17、19、20为首次从该复方中分离得到,为阐明连花清瘟胶囊药效物质奠定了基础.