目的 初步探讨汉黄芩素(Wogonin,Wog)调节河马(Hippo)/Yes-相关蛋白(Yes associated protein,YAP)信号通路对肝硬化大鼠肝纤维化的影响.方法 将大鼠分为空白对照组(腹腔注射等量生理盐水+灌胃等量生理盐水)、模型组(腹腔注射等量生理盐水+灌胃等量生理盐水)、阳性对照组(0.8 g/kg复方鳖甲软肝片溶液灌胃)和Wog低、中、高剂量组(7、14、28 mg/kg Wog腹腔注射),每组 12只.除空白对照组外,其余各组腹腔注射四氯化碳溶液构建肝硬化模型.所有大鼠造模后给药干预,连续4周.检测大鼠血清肝功能指标谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,AST)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,ALT);ELISA法检测血清纤维化指标Ⅲ型前胶原(typeⅢprocollagen,PCⅢ)、透明质酸(hyaluronic acid hyaluronan,HA)、层粘连蛋白(laminin,LN);HE、Masson及免疫组织化学染色法观察肝硬化大鼠肝纤维化程度;Ishak评分判断肝组织纤维化程度,分析胶原体积分数(collagen volume fraction,CVF)及Ⅰ型胶原(collagen-Ⅰ,COL-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(collagen-Ⅲ,COL-Ⅲ)阳性表达;Western blot检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及Hippo/YAP信号通路蛋白表达水平.结果 与空白对照组比较,模型组AST、ALT、PCⅢ、HA、LN、Ishak评分、CVF、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、TGF-β1表达升高(P<0.05),p-大肿瘤抑制因子 1(large tumor suppressor gene 1,LATS1)/LATS1、p-YAP/YAP表达降低(P<0.05);与模型组比较,Wog低、中、高剂量组及阳性对照组AST、ALT、PCⅢ、HA、LN、Ishak评分、CVF、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、TGF-β1表达降低(P<0.05),p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP表达升高(P<0.05).Wog各剂量组AST、ALT、PCⅢ、HA、LN、Ishak评分、CVF、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、TGF-β1水平均随剂量升高而降低(P<0.05);p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP水平随剂量升高而升高(P<0.05).结论 Wog可能通过抑制Hippo/YAP信号通路的激活,改善肝硬化大鼠肝纤维化.

目的:胫前黏液性水肿(pretibial myxedema, PTM)是以真皮大量透明质酸(hyaluronan, HA)沉积和血清促甲状腺激素受体的抗体(TSH receptor antibody, TRAb)升高为特征的一种局限性甲状腺相关皮肤病。本研究探讨TRAb及其两种亚型[刺激型抗体TSAb(M22)和抑制型抗体TBAb(K1-70)]对PTM原代真皮成纤维细胞合成透明质酸的影响。方法:分离培养正常人及胫前黏液性水肿真皮成纤维细胞，用M22、K1-70及患者IgG分别刺激原代成纤维细胞，利用ELISA检测刺激原代成纤维细胞前后上清液中HA浓度，Western Blot检测细胞CEMIP、HAS2、PI3K-AKT通路蛋白及其磷酸化的变化。结果:患者IgG(TRAb 8.4 IU/L)可显著刺激PTM患者原代成纤维细胞的透明质酸胞外累积。同样，M22、K1-70处理PTM患者原代成纤维细胞均可上调上清液透明质酸含量，还显示K1-70刺激作用显著高于M22。IgG、M22及K1-70处理后，原代成纤维细胞HAS2表达增加，CEMIP表达减少；同时，p-PI3K及p-AKT增加。其中，对K1-70进一步研究，通过调控PI3K-AKT信号通路促进HA产生可被PI3K抑制剂(LY294002)抑制。结论:TRAb尤其是TBAb，通过活化成纤维细胞PI3K-AKT信号途径，促进HA的酶(HAS2)增加，HA分解酶(CEMIP)减少，造成HA在成纤维细胞外聚集，从而导致PTM皮损的发生。

目的:探讨罗格列酮（RGZ）对肝星状细胞（HSCs）中过氧化酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）及血红素加氧酶-1（HO-1）表达的影响。方法:以体外活化的肝星状细胞（HSC-T6）为研究对象，分为：空白对照组、RGZ干预组、RGZ与锌原卟啉-Ⅸ（ZnPP-Ⅸ）共同干预组。采用四甲基偶氮唑盐法检测HSC-T6的增殖情况，酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中透明质酸（HA）及Ⅲ型前胶原肽（PⅢP）含量，实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法及免疫细胞化学技术检测PPARγ、HO-1的mRNA及蛋白相对表达水平。多组间样本均数的比较采用单因素方差分析，组间比较采用LSD检验。结果:RGZ干预组HSC-T6增殖活性及HA、PⅢP表达较空白对照组显著下降（ P值均< 0.01），但PPARγ、HO-1的mRNA及蛋白相对表达量均较空白对照组显著增加（PPARγ：2.97±0.22对比1.07±0.05，0.96±0.08对比0.31±0.03；HO-1：4.28±0.73对比1.80±0.36，1.83±0.26对比0.61±0.09）， P值均< 0.01，差异有统计学意义。RGZ与ZnPP-Ⅸ共同干预组同RGZ干预组比较，HSC-T6增殖活性及HA、PⅢP表达有所升高（ P值均< 0.05）；HO-1的的mRNA相对表达量（3.16±0.38对比4.28±0.73）和蛋白相对表达水平（1.31±0.17对比1.83±0.26）降低， P值均< 0.05，差异有统计学意义；PPARγ的mRNA及蛋白相对表达量比较，差异无统计学意义（ P值均> 0.05），但呈下降趋势。RGZ与ZnPP-Ⅸ共同干预组与空白对照组HO-1的mRNA相对表达量（1.80±0.36）及蛋白相对表达量（0.61±0.09）比较，明显增高， P值均< 0.05。免疫细胞化学染色同上述结果一致。 结论:罗格列酮诱导PPARγ表达增加进而抑制HSC增殖活化及胶原产生的作用可能是通过调控其下游HO-1的表达而实现的。

大气颗粒物可引起呼吸系统炎症，低相对分子质量透明质酸（HA）是炎症级联反应的关键作用靶点。本综述从HA的合成与分解、颗粒物与高相对分子质量量透明质酸（HMW-HA）的降低以及相对低分子质量透明质酸（LMW-HA）的增加、LMW-HA与呼吸系统炎症三个方面综述了大气颗粒物通过HMW-HA/LMW-HA失衡引起呼吸系统炎症的可能通路及作用靶点，并进一步列举了针对部分靶点的抑制剂和治疗药物，为大气颗粒物致呼吸系统炎症机制及后续研究需关注的薄弱点提供科研线索。

目的:探讨血红素加氧酶-1(HO-1)修饰的骨髓间充质干细胞(BMMSCs)在改善大鼠减体积移植肝脏的微循环中的作用。方法:贴壁法分离培养BMMSCs，转染HO-1/腺病毒(Adv)构建HO-1/BMMSCs。"二袖套"法建立大鼠原位50%减体积肝移植急性排斥反应模型，术后即刻分别注射生理盐水(NS)、BMMSCs或HO-1/BMMSCs单细胞悬液1 ml，观察存活的入组大鼠术后即刻、3、7和14 d的指标变化，每组每个时间点5只大鼠。通过生化检测线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶(mAST)的水平；化学比色法检测肝组织中Na ＋-K ＋-ATP酶活力；透射电镜技术检测术后7 d时的肝细胞线粒体超微结构；Power Lab检测肝移植术后7d时的门静脉压力；Western blot检测移植肝内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和血管性假血友病因子(vWF)的表达水平；HE染色观察肝病理学改变；免疫组化观察肝组织vWF的表达情况；ELISA检测血清中透明质酸(HA)的水平。 结果:HO-1/BMMSCs能显著减轻50%减体积肝移植急性排斥反应模型中移植肝的病理损伤及排斥反应，改善线粒体损伤及能量代谢，同时能显著促进eNOS的表达，抑制iNOS的表达，降低门静脉压力，显著促进肝窦vWF的表达及HA的降解，保护肝窦内皮细胞，进而改善肝脏微循环，与NS组和BMMSCs组比较差异具有统计学意义( P<0.05)。 结论:HO-1/BMMSCs可以通过改善肝脏微循环，发挥保护大鼠减体积移植肝的作用。

与其他糖尿病并发症相比，糖尿病肾脏病（DKD）的患病率在过去的30年里并无显著下降。聚焦纤维化或出现蛋白尿后的治疗无法逆转DKD，识别其始动机制对DKD的治疗更有意义。糖尿病背景下的肾小球血管内皮细胞糖萼（GEG）的损害是引起滤过屏障受损的初始和关键步骤，可作为预防或延缓DKD进展的重要靶点。目前认为，内皮细胞糖萼（EG）的调节主要由促进糖萼合成和降解机制之间的平衡决定。糖尿病引起的EG的变化可能部分反映了高血糖直接抑制EG成分的更新；蛋白水解酶如基质金属蛋白酶9、透明质酸酶1或乙酰肝素酶在糖尿病患者中的表达增加，并且在这种病理环境下可以参与GEG的降解；促血管生成分子（包括炎症介质和血管内皮生长因子）表达上升，会导致肾小球内皮细胞活化和渗透性增加，对GEG的调节亦发挥重要作用。目前，DKD的防控形势依然严峻，未来DKD的治疗应提前至糖尿病诊断之初，而非出现蛋白尿后的“强弩之末”。

目的:探讨雷帕霉素对高糖状态下肾小球系膜细胞自噬的影响。方法:将人肾小球系膜细胞(HMC)在恒温培养箱中培养，将细胞分为HMC组、低糖组、高糖组、甘露醇等渗组和雷帕霉素组。采用GFP-RFP-LC3标记各组细胞的自噬流；采用Western blot检测各组细胞的自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P62的表达情况；采用ELISA法测定各组细胞的细胞Ⅳ型胶原纤维(Col Ⅳ)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LA)的含量。结果:高糖组的自噬溶酶体最少，HMC组、低糖组、甘露醇等渗组、雷帕霉素组的自噬溶酶体均较高糖组多，其中雷帕霉素组的自噬溶酶体最多。与HMC组、低糖组、甘露醇等渗组相比，高糖组的LC3-Ⅱ表达明显减少，LC3-Ⅰ表达明显增多，P62明显增多(均 P<0.05)。雷帕霉素组的LC3-Ⅱ表达较高糖组明显增多，而LC3-Ⅰ及P62表达明显减少(均 P<0.05)。高糖组的Col Ⅳ、HA、LA含量均较HMC组、低糖组和甘露醇等渗组明显升高，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。雷帕霉素组的Col Ⅳ、HA、LA的含量均较高糖组明显下降，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:高糖状态可以抑制HMC自噬活性，增加细胞外基质的聚集，促进糖尿病肾病进展，而雷帕霉素可诱导细胞自噬的发生，减少肾小球系膜细胞系膜基质增生，进而抑制糖尿病肾病进展。

目的:探究预混有地塞米松（Dex）的高分子自交联透明质酸（cHA）水凝胶（cHA-Dex水凝胶）抑制软骨细胞凋亡缓解早期创伤性骨关节炎（PTOA）的作用机制。方法:取2月龄雄性SD大鼠140只分两组，70只进行前交叉韧带切断（ACLT）手术制造PTOA动物模型，以假手术组（70只）为对照，在术后不同时间点（1~14 d，每组每个时间点5只大鼠）检测关节灌洗液中白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、基质金属蛋白酶3（MMP-3）及MMP-13等炎性指标的变化趋势。将cHA-Dex（0.5 mg/ml）水凝胶（实验组， n=70）及预混有Dex的普通低分子透明质酸（HA）水凝胶，即HA-Dex（0.5 mg/ml）水凝胶（对照组， n=70）注入PTOA大鼠关节腔，检测每个时间点（1~14 d，每组每个时间点5只大鼠）大鼠关节液中的Dex的释放量及累计释放量，揭示cHA-Dex水凝胶的缓释机制。取2020年1月至2022年12月在山西医科大学第二医院关节科进行膝关节置换术后的骨关节炎（OA）患者（胫骨平台上Outbridge评分1~2分， n=18）膝关节软骨进行体外组织块培养，将预混有0.1、0.2、0.5 mg/ml三种梯度Dex浓度的cHA-Dex水凝胶处理软骨组织块后，检测关节软骨组织块中IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3以及MMP-13的mRNA表达水平变化。运用酶解法分离出OA软骨细胞并进行体外原代培养（来自18例OA患者，分6次重复实验，每次3例患者的软骨细胞提取后混合均匀培养），软骨细胞贴壁后分为4组，分别进行下列干预：生理盐水干预组、cHA水凝胶干预组、Dex（0.5 mg/ml）干预组、cHA-Dex（0.5 mg/ml）水凝胶干预组，检测不同干预对软骨细胞增殖及凋亡的影响。 结果:大鼠PTOA组和假手术组膝关节番红O固绿染色国际骨关节炎协会（OARSI）评分分别为（3.34±0.35）分和（1.17±0.21）分（ P=0.010）；PTOA大鼠膝关节骨赘Meachim评分相对于假手术组增高［（2.66±0.41）分比（0.22±0.17）分， P=0.010］，大鼠PTOA造模成功。与PTOA大鼠关节内炎症因子早期出现峰值变化规律相对应的cHA-Dex水凝胶中Dex也在早期释放，并在后期长期缓释。预混0.1、0.2、0.5 mg/ml Dex的cHA-Dex水凝胶处理OA关节软骨组织块后，组织块中的IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3及MMP-13的mRNA表达均下降（均 P<0.05）。体外培养OA软骨细胞，与Dex（0.5 mg/ml）水凝胶干预组相比，cHA-Dex（0.5 mg/ml）水凝胶干预组凋亡率明显减少（0.60±0.07比6.63±0.98， P=0.010）。相对生理盐水干预组或单纯cHA水凝胶干预组，cHA-Dex（0.5 mg/ml）水凝胶干预组细胞增殖明显，各时间点差异均有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:针对PTOA的早期炎症，cHA-Dex水凝胶可能通过缓释Dex，既可抑制软骨炎症，又可逆转Dex导致的软骨细胞凋亡增加、增殖率降低，最终缓解PTOA进展。

目的:探讨大黄蛰虫丸联合替诺福韦酯治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的疗效以及对肠道菌群的影响。方法:选取2018年3月至2019年11月南通大学附属如皋医院收治的慢性乙型肝炎肝纤维化患者120例，按随机数字表法分为观察组和对照组，各60例。对照组给予替诺福韦酯治疗，每次口服1片，每天1次。观察组在对照组治疗的基础上给予大黄蛰虫丸内服，3 g/次，2次/d。两组患者均观察48周。比较两组患者治疗前后肝功能指标、肝纤维化指标、乙肝病毒e抗原（HBeAg）转阴率、乙型肝炎病毒（HBV）-DNA载量、临床疗效以及肠道菌群变化，并比较两组不良反应。结果:治疗后观察组肝功能指标天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰基转移酶、总胆红素水平均低于对照组[（41.62 ± 5.93）U/L比（50.41 ± 7.12）U/L、（41.99 ± 5.76）U/L比（52.17 ± 7.09）U/L、（34.46 ± 5.31）U/L比（49.41 ± 6.23）U/L、（20.35 ± 3.04）μmol/L比（25.60 ± 3.95）μmol/L]，差异有统计学意义（ P<0.01）。治疗后观察组肝纤维化指标透明质酸、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层黏蛋白水平均低于对照组[（167.45 ± 18.75）μg/L比（209.44 ± 22.96）μg/L、（103.44 ± 12.75）μg/L比（140.08 ± 16.33）μg/L、（81.41 ± 10.06）μg/L比（126.36 ± 14.94）μg/L、（108.41 ± 12.72）μg/L比（169.41 ± 19.22）μg/L]，差异有统计学意义（ P<0.01）。治疗后观察组临床总有效率高于对照组[91.67%（55/60）比76.27%（45/59）]，差异有统计学意义（ χ2=4.170， P=0.041）。观察组治疗后HBeAg、HBV-DNA转阴率均高于对照组[28.33%（17/60）比11.86%（7/59）、83.33%（50/60）比66.10%（39/59）]，差异有统计学意义（ χ2=4.041， P=0.044； χ2=4.685， P=0.030）。观察组治疗后肠道菌群指标双歧杆菌、乳酸杆菌明显增加，大肠杆菌、肠球菌显著降低，且观察组肠道菌群改善均显著优于对照组（ P<0.01）。观察组不良反应发生率低于对照组，但差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:大黄蛰虫丸联合替诺福韦酯治疗慢性乙型肝炎肝纤维化，可改善患者的肝功能、肝纤维化，提高HBeAg血清学转阴率，抑制HBV-DNA复制，增加治疗效果，且安全性好。大黄蛰虫丸的调节肠道菌群作用可能与其疗效有关。

目的:探讨高脂低碳水化合物饮食联合放疗对肺移植瘤小鼠肿瘤微环境的影响。方法:选用C57BL/6J小鼠建立Lewis肺癌模型，分为普通饮食组、高脂低碳水化合物饮食组、普通饮食+放疗组和高脂低碳水化合物饮食+放疗组，每组18只。普通饮食组和普通饮食+放疗组小鼠予以普通饮食（脂肪供能比例为12.11%）饲养，高脂低碳水化合物饮食组和高脂低碳水化合物饮食+放疗组小鼠予以高脂低碳水化合物饮食（脂肪供能比例为45.00%）饲养。第12～14天对普通饮食+放疗组和高脂低碳水化合物饮食+放疗组小鼠的肿瘤部位进行放射治疗，照射剂量为24 Gy/3f，观察和监测小鼠体重、肿瘤体积、血糖和血酮值、肝肾功能、生存情况。采用免疫组织化学染色检测CD34和淋巴管内皮透明质酸受体1（LYVE-1），采用天狼星染色检测胶原纤维，采用多重免疫荧光检测CD8和程序性死亡蛋白1（PD-1），采用流式细胞术检测免疫细胞表型。结果:接种后第27天，普通饮食组小鼠的体重为（24.78±2.22）g，高于普通饮食+放疗组［（22.15±0.48）g， P=0.030］和高脂低碳水化合物饮食+放疗组［（22.02±0.77）g， P=0.031）］。在接种后第15天，高脂低碳水化合物饮食+放疗组的肿瘤体积为（220.88±130.05）mm 3，小于普通饮食组［（504.37±328.48）㎜ 3， P=0.042）］和高脂低碳水化合物饮食组［（534.26±230.42）mm 3， P=0.016］，但与普通饮食+放疗组［（274.64±160.97）mm 3］差异无统计学意义（ P＞0.05）。第4周高脂低碳水化合物饮食组小鼠的血糖值为（8.00±0.36）mmol/L，低于普通饮食组［（9.57±0.40）mmol/L， P＜0.05］。第2周和第3周高脂低碳水化合物饮食组小鼠的血酮值分别为（1.00±0.20）mmol/L和（0.90±0.17）mmol/L，均高于普通饮食组［分别为（0.63±0.06）mmol/L和（0.70±0.10）mmol/L，均 P＜0.05］。接种后第30天，普通饮食组与高脂低碳水化合物饮食组小鼠的天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、肌酐和尿素等指标差异均无统计学意义（均 P＞0.05），各组小鼠的心、肝、脾、肺、肾均未见明显毒性改变及肿瘤转移。普通饮食组、高脂低碳水化合物饮食组和普通饮食+放疗组小鼠的中位生存时间分别为38、41和55 d，高脂低碳水化合物饮食+放疗组小鼠的中位生存时间未达到。高脂低碳水化合物饮食+放疗组小鼠肿瘤组织中CD8表达上调，PD-1、CD34、LYVE-1和胶原纤维表达下调。高脂低碳水化合物饮食+放疗组的肿瘤旁淋巴结中CD8 + T细胞比例［（25.13±0.97）%］高于普通饮食组［（20.60±2.23）%， P＜0.05］和普通饮食+放疗组［（19.26±3.07）%， P＜0.05］，但与高脂低碳水化合物饮食组［（22.03±1.75）%］差异无统计学意义（ P＞0.05）。普通饮食+放疗组肿瘤旁淋巴结中CD4 + T细胞比例［（31.33±5.16）%］和高脂低碳水化合物饮食+放疗组肿瘤旁淋巴结中CD4 + T细胞比例［（30.63±1.70）%］高于普通饮食组［（20.27±2.15）%， P＜0.05］和高脂低碳水化合物饮食组（23.70±2.62， P＜0.05）。普通饮食+放疗组的肿瘤旁淋巴结中Treg细胞在T细胞中占比最高［（16.58±5.10）%］，但与普通饮食组、高脂低碳水化合物饮食组和高脂低碳水化合物饮食+放疗组比较，差异均无统计学意义（均 P＞0.05）。 结论:高脂低碳水化合物饮食联合放疗可促进肺癌肿瘤微环境中免疫效应细胞的募集并增强其功能，抑制肿瘤微血管生成，从而抑制肿瘤生长。