目的:建立通关藤药材的HPLC指纹图谱，并结合化学计量学方法对不同产地通关藤质量进行评价。方法:采用HPLC法建立指纹图谱，色谱柱为DiKMA C18（250 mm ?×?4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液，梯度洗脱，流速为1.0 ml/min，检测波长230 nm，柱温30 ℃，进样量10 μl。将色谱信息导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版），进行相似度分析。采用SPSS Statistics 26进行系统聚类分析，采用SIMCA 14.1软件进行主成分分析和偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）。 结果:确定12个共有峰，指认其中2个色谱峰分别为通关藤苷G、通关藤苷I。15批样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度为0.942～0.995。当平方欧式距离为20时，样品可聚为2类，S1～S3、S13～S15聚为一类，S4～S12聚为一类；主成分分析和PLS-DA结果表明，15批通关藤质量具有一定差异性，且与产地相关。结论:该结果可为分析不同产地通关藤药材质量差异及后期相关配方颗粒的质量标准提供参考。

目的:建立同时测定通关藤药材中通关藤苷A、H、I含量的方法.方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法,色谱柱为Phenomenex Kinetex XB-C18,流动相为0.1%甲酸溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为0.2 mL/min,柱温为40℃,进样量为5 μL,离子源为电喷雾离子源,多反应离子监测模式,正离子扫描,离子源喷射电压为5500 V,雾化气压力为60 psi,加热气压力为60 psi,帘气压力为20 psi,去溶剂温度为600℃.结果:通关藤苷A、H、I检测质量浓度线性范围分别为0.1~10 ng/mL(r=0.9997)、0.025~10 ng/mL(r=0.9995)、0.025~10 ng/mL(r=0.9989);定量限分别为0.1、0.025、0.025 ng/mL,检测险分别为0.05、0.0125、0.0125 ng/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于4.0%;加样回收率分别为97.67%~99.00%(RSD=0.47%,n=6)、95.00%~101.67%(RSD=2.59%,n=6)、96.67%~103.33%(RSD=2.83%,n=6).结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于通关藤药材中通关藤苷A、H、I含量的同时测定.

目的 建立UPLC-MS/MS同时测定消癌平注射液中通关藤苷A、通关藤苷I、通关藤苷H的含量.方法 采用Phenomenex Kinetex XB-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.6 μm),以0.1％甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱分离,流速为0.2 mL·min-l,通过电喷雾离子源,多反应监测(MRM),正离子模式.结果 通关藤苷A、I、H分别在0.05～10 ng·mL-1,0.025～10 ng.mL-1,0.025～10 ng·mL-1浓度内呈良好的线性关系,r＞0.998,检测限为0.012 5～0.025 ng.mL-1,平均回收率分别为97.9％,95.7％,96.1％,RSD＜3.4％.结论 方法简单快速,准确灵敏,可用于消癌平注射液中通关藤苷A、I、H的定量测定.

目的:建立同时测定消癌平片中通关藤苷A和通关藤苷I含量的方法.方法:取消癌平片经三氯甲烷萃取后采用高效液相色谱(HPLC)法进样分析.色谱柱为Symmetry C18,流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为223 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为20μL.采用上述条件测定3批样品中通关藤苷A和通关藤苷I的含量.结果:通关藤苷A、通关藤苷I的质量浓度检测线性范围分别为26.40～264.00μg/mL(r=0.9994)、4.59～45.90μg/mL(r=0.9993),检测限分别为0.26、0.12μg/mL,定量限分别为0.79、0.36μg/mL;精密度、稳定性(12 h)、重复性试验峰面积的RSD均<2.0％(n=6);加样回收率分别为98.53％～99.28％(RSD为0.20％～0.51％,n=9)、97.00％～98.89％(RSD为0.19％～1.03％,n=9).3批样品中通关藤苷A和通关藤苷I的含量分别为2.27～2.32、0.64～0.69 mg/g.结论:本试验建立的方法简便,结果准确可靠,适用于消癌平片中通关藤苷A和通关藤苷I含量的同时测定.

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)分析消癌平注射液中通关藤苷A和I的方法 并测定其含量.方法消癌平注射液经微孔滤膜过滤,用HPLC进行分析,采用Symmetry C18(5μm,250 mm×4.6 mm)色谱柱;流动相:乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B);梯度洗脱方式(0～10 min,32％A;10～10.01 min,32％A～42％A;10.01～15 min,42％A;15～15.01 min,42％A～50％A;15.01～28 min,50％A);流速:1.0 ml/min;检测波长:223 nm.结果 通关藤苷A和I的线性范围分别为6.60～132.00、3.52～70.40μg/ml,通关藤苷A和I的平均加样回收率均>98％,相对标准偏差均<3％.结论 HPLC准确可靠、操作简便,可用于同时测定消癌平注射液中通关藤苷A和I的含量.

目的 建立HPLC-DAD-ELSD法同时测定22个产地通关藤Marsdenia tenacissima (Roxb.) Wight et Am.中3种皂苷的含有量.方法 通关藤70％乙醇提取物的分析采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-水(45∶55);检测波长235 nm;体积流量1.0 mL/min;漂移管温度80℃;载气压力3.5 bar(1 bar=100kPa).结果 通关藤苷G、H、I分别在1.768～5.305μg (r=0.999 2)、3.842～ 11.526 μg (r=0.999 0)、3.026～9.078 μg (r=0.999 1)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.60％ (RSD=1.86％)、99.88％(RSD=2.49％)、99.08％(RSD=1.14％),不同产地样品中三者含有量有明显差异.结论 该方法 稳定可靠,可用于通关藤的质量控制.

目的 建立超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS/MS)测定消癌平片中的通关藤苷A、H和I的含量.方法 采用Phenomenex Kinetex XB-C18色谱柱,以0.1％甲酸:乙腈为流动相,线性梯度洗脱,通过电喷雾离子源,多反应监测(MRM),正离子模式.结果 通关藤苷A、H、I质量浓度线性范围分别为0.1～10.0 ng/ml(R=0.9997)、0.025～10.0 ng/ml(R=0.9995)、0.025～10.0 ng/ml(R=0.9989);平均加样回收率分别为97.71％、98.93％和98.92％,RSD分别为1.70％、0.58％和0.49％.消癌平片中通关藤苷A、H、I含量分别为620.33～622.00、310.67～311.33、377.33～379.33μg/g.结论 UPLC-MS/MS方法快速、准确、灵敏,可用于消癌平片中通关藤苷A、H、I的含量测定.

目的 评价通关藤中4种C21甾体化合物(通关藤苷I、通关藤苷G、通关藤苷H和17β-通关藤苷元B)对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞A2780/Taxol(A2780/T)耐药的逆转作用及相关机制.方法 将人卵巢癌A2780/T细胞分为对照组、C21甾体单用组、紫杉醇单用组、C21甾体联合紫杉醇组(1∶1),MTT法检测细胞增殖能力,中效原理分析两药联用效应(Fa)与合用指数(CI)的关系;划痕实验观察细胞迁移能力;流式细胞术及Hoechst 33258染色检测细胞周期和凋亡情况;RT-PCR、Western blot法分别检测ABCB1、SLC4A2、SLCO1A2 mRNA及P-gp表达水平;药物外排实验检测A2780/T细胞内紫杉醇及罗丹明123的蓄积量.结果 4种C21甾体单用或与紫杉醇联用均能抑制A2780/T细胞增殖,且呈剂量依赖效应.通关藤苷G、通关藤苷H与紫杉醇联用48 h具有协同效应,能够显著抑制A2780/T细胞迁移、阻滞细胞于G2/M期、促进细胞凋亡,显著抑制ABCB1、SLC4A2、SLCO1A2 mRNA水平,下调P-gp表达,显著促进了紫杉醇及罗丹明123在A2780/T细胞内的蓄积.结论 通关藤苷G、通关藤苷H与紫杉醇联用均产生协同效应,可逆转人卵巢癌A2780/T细胞对紫杉醇的耐药性,其机制可能与降低基因ABCB1、SLC4A2、SLCO1A2及P-gp的表达水平,促进紫杉醇在A2780/T细胞内蓄积有关.

目的:优选半仿生酶法提取通关藤中甾体苷类成分的最佳工艺.方法:采用正交试验设计法,以通关藤中通关藤苷A、G、I、H的含量为综合评分指标,考察料液比、酶解时间、酶解温度3个因素对提取效果的影响,并进行验证试验.结果:3个因素对有效成分提取率的影响大小顺序为料液比＞酶解温度＞酶解时间,3个因素均具有显著影响;半仿生酶法提取的最优工艺参数为料液比1 ∶ 14,酶解温度50℃,酶解时间1 h.结论:优选的半仿生酶法提取工艺操作简单、结果稳定可行,可用于通关藤的提取.

消癌平注射液(XAP-I)提取自通关藤,在我国临床上广泛用于治疗各种癌症,而从其复杂组分中阐释生物活性成分一直是学界研究的热点内容.本文结合三重四级杆质谱仪中的全扫描(full scan,FS)、母离子扫描(precursor ion scan,PCIS)、子离子扫描(product ion,PDIS)及多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式鉴定了XAP-I中的主要孕甾烷糖苷及酚酸类成分,可利用丰富的加合离子信息确定组分结构特性并实现高灵敏度分析.此外,本文应用定向细胞结合植物化学组分筛选策略以发现XAP-I中的生物活性成分,该策略可实现对XAP-I的高通量定性、定量分析,并显著提高XAP-I潜在生物活性成分筛选的灵敏度及选择性.