目的 探讨医用重组胶原蛋白联合CO2点阵激光治疗皮肤瘢痕的有效性及安全性.方法 选取皮肤瘢痕患者54例,按照随机数字表法分为两组各27例,均行CO2点阵激光治疗.点阵激光治疗完成后,对照组给予红霉素软膏外用涂抹,观察组给予医用重组胶原蛋白敷料外用涂抹,均每天2次,持续使用1个月.两组CO2点阵激光治疗联合药物涂抹治疗,每2个月进行1次为1个疗程,共治疗3个疗程.采用温哥华评估量表(VSS)根据血管分布、色泽、厚度、柔软度情况对瘢痕形态进行评分,视觉模拟评分(VAS)评估创面术后疼痛和瘙痒程度;根据VSS评分计算瘢痕改善率,评价临床疗效,治疗期间观察患者不良反应发生情况.采用酶联免疫吸附法测定两组血清转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8).结果 治疗3个疗程,两组VSS评分和VAS均较治疗前降低,且观察组VSS评分和VAS低于对照组(P均<0.05);观察组治疗总有效率(96.30%)高于对照组(77.78%),不良反应发生率(7.41%)低于对照组(25.93%),差异均有统计学意义(P均<0.05);两组血清TGF-β1、IL-6、IL-8水平均较治疗前降低,且观察组血清TGF-β1、IL-6、IL-8水平低于对照组(P均<0.05).结论 医用重组胶原蛋白联合CO2点阵激光治疗皮肤瘢痕疗效好且安全性高.

目的:建立放射性心脏纤维化大鼠模型，观察重组人血管内皮抑制素(恩度)对心肌纤维化的影响，初探转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)与心肌纤维化的相关性。方法:将40只SD大鼠按随机数表法分为4组，每组10只，A组为健康对照组；B组为恩度干预组，恩度(6 mg/kg)腹腔连续注射14 d；C组为单纯照射组，心脏照射25 Gy/5次，连续5 d；D组为照射＋恩度干预组，恩度给药方法同B组、心脏照射方法同C组。照射后第1、3个月各麻醉处死5只大鼠。Masson染色评估心肌纤维化情况，Western blot检测心肌TGF-β1、CTGF及胶原蛋白Ⅰ(COL－Ⅰ)型表达。结果:照射后1和3个月，B组未见明显的心肌纤维化表现，C组和D组可见胶原纤维分布于心肌细胞间质。照射后1个月，半定量分析结果显示A组的心肌胶原容积分数(CVF)为(5.20±0.75)%，C组(10.12±2.17)%和D组(10.32±1.36)均高于A组( t＝4.74、4.93， P<0.01)，C组和D组的CVF差异无统计学意义( P>0.05)；照射后3个月C组的CVF(13.17±2.67)%仍比A组(5.23±1.32)%高( t＝4.49， P<0.01)，C组的CVF低于D组(16.92±3.58)%( t＝3.19， P<0.05)。照射后1个月，A组TGF-β1的表达量为0.441±0.063，C组0.817±0.079高于A组( t＝5.81， P<0.01)；照射后3个月，A组TGF-β1的表达量为0.501±0.110，C组0.832±0.150高于A组( t＝4.19， P<0.01)，D组1.403±0.133高于C组( t＝7.24， P<0.01)。照射后1、3个月，各组间CTGF及COL-I的变化趋势与TGF-β1的变化趋势相似。 结论:射线可引起心肌纤维化的形成，重组人血管内皮抑制素可能会加重晚期放射纤维化的形成。

目的:观察氧化应激条件下骨形成蛋白4（BMP4）对人视网膜微血管内皮细胞（hRMEC）的增生和迁移影响。方法:将体外培养的hRMEC分为对照组、4-羟基壬烯醛（HNE）处理组（4-HNE组）、4-HNE+BMP4处理组（BMP4组）。4-HNE组细胞培养基加入10 μmmol/L 4-HNE；BMP4组细胞培养基加入10 μmmol/L 4-HNE刺激6 h后，再加入100 ng/ml重组人BMP4。噻唑蓝比色法检测4-HNE、BMP4对hRMEC生存力的影响。细胞划痕实验测定4-HNE、BMP4对细胞迁移能力的影响。实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测对照组、4-HNE组细胞中BMP4 mRNA相对表达量以及对照组、BMP4组细胞中纤维连接蛋白（FN）、层粘连蛋白（Laminin）、α-平滑肌收缩蛋白（α-SMA）、胶原蛋白Ⅰ型（Collagen Ⅰ）、血管内皮生长因子（VEGF）、结缔组织生长因子（CTGF）mRNA相对表达量。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测对照组、4-HNE组细胞中BMP4蛋白相对表达量。两组间比较采用 t检验。 结果:与对照组比较，4-HNE组、BMP4组细胞生存力（ t=12.73、16.26， P=0.000 2、<0.000 1）、细胞迁移率（ t=28.17、37.48， P<0.000 1、<0.000 1）均明显提高，差异有统计学意义；4-HNE组细胞中BMP4 mRNA、蛋白相对表达量明显升高，差异有统计学意义（ t=16.36、69.35， P=0.000 1、<0.000 1）。qRT-PCR检测结果显示，与对照组比较，BMP4组细胞中VEGF、FN、Laminin、α-SMA、Collagen Ⅰ、CTGF mRNA相对表达量明显升高，差异有统计学意义（ t=10.61、17.00、14.85、7.78、12.02、10.61， P=0.0004、<0.000 1、0.000 1、0.001 5、0.000 1、0.000 4）。 结论:BMP4可诱导hRMEC的增生和迁移，并可调控hRMEC中血管生成因子和纤维化相关因子表达。

目的:探讨构建自交联重组胶原蛋白水凝胶的可行性及其对紫外线诱导的光老化模型修复作用。方法:2023年3—12月，于西北大学陕西省可降解生物医学材料重点实验室，使用不同浓度的重组胶原蛋白通过自交联制备重组胶原蛋白水凝胶，表征了水凝胶材料的物理机械性能，用MTT法、溶血试验检测水凝胶生物相容性；建立人皮肤成纤维细胞光老化模型，通过RT-qPCR检测炎症因子及ECM生成、降解相关基因表达量探究水凝胶分子水平改善光老化效果。建立紫外照射小鼠光老化模型，通过大体观察以评估水凝胶改善光老化效果，通过HE染色观察水凝胶的组织兼容性和降解性，通过RT-qPCR及免疫荧光染色探讨水凝胶作用机制。结果:4 mg/ml、20 mg/ml和40 mg/ml的GEL-Ⅰ水凝胶均表现出良好的物理机械性能。生物相容性研究显示不同浓度的水凝胶细胞存活率>100%，具有促细胞增殖作用，且与重组Ⅰ型胶原蛋白的浓度呈正相关；3组水凝胶溶血率均<5%。qPCR显示HSF光老化模型中，与模型组相比，3个浓度的水凝胶组细胞中Bcl-2和TGF-β1显著升高( P<0.05)，Caspase-3和Caspase-9显著下调( P<0.05)，细胞凋亡程度显著降低。MMP-9基因水平下调( P<0.05)，Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和Vimentin基因显著上调( P<0.05)。光老化小鼠模型中，与模型组相比，水凝胶组的小鼠皮肤形成的皱纹更少。HE染色显示胶原蛋白纤维表达量丰富且紧密、角质层更加光滑；与模型组相比，GEL-Ⅰ能更好地降低活性氧含量，提高SOD活性，降低MDA表达( P<0.05)，且呈浓度依赖性趋势，40 mg/ml组与对照组相比活性氧、SOD水平差异有统计学意义( P<0.05)；天狼猩红染色显示水凝胶组组织中胶原蛋白含量显著增加( P<0.05)，40 mg/ml组与对照组相比胶原含量显著增加( P<0.05)；免疫荧光染色显示肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、基质金属蛋白酶-9含量呈显著下降( P<0.05)，且呈浓度依赖性。 结论:重组Ⅰ型胶原水凝胶可改善氧化应激和炎症微环境，降低皮肤组织活性氧，下调促HSF凋亡细胞因子和基质金属肽酶9，促进皮肤光老化细胞的功能恢复，提升细胞外基质成分表达，可有效改善光损伤皮肤。

胶原蛋白是一种构成动物结缔组织细胞外基质的高分子蛋白质，在生物医学、组织工程、食品以及化妆品等领域均有着广泛的应用和发展。胶原蛋白由于来源丰富且具有良好的生物相容性、低免疫原性与可降解性等优点，可被用作敷料或组织工程支架用于创面修复。根据材料来源，胶原蛋白可被分为天然胶原蛋白和重组胶原蛋白，天然胶原蛋白主要是从哺乳动物和鱼类中直接提取的；而重组胶原蛋白是基于基因工程技术得到的，来源包括微生物、动物或植物重组表达体系。该文总结了胶原蛋白的来源及不同来源的胶原蛋白在创面修复中的作用及其优点、不足等，胶原蛋白结合三维打印技术用于创面修复的特殊性与优越性，以及中国胶原蛋白产业的市场规范对创面修复领域的影响，并对研发胶原蛋白相关产品的注意事项等做了进一步说明，旨在为选择合适来源的胶原蛋白进行创面修复提供新思路。

Ⅲ型胶原蛋白是一种重要的结构蛋白，广泛分布于皮肤、血管壁、大部分组织的网状纤维中；因其生物及物理性质方面的优点，已广泛用于生物医学组织工程和临床。临床应用的Ⅲ型胶原蛋白大多是动物源性胶原蛋白，因其不良反应和传播疾病的风险，存在应用局限性。通过基因组织工程合成的重组人源Ⅲ型胶原蛋白较好地解决了该问题，同时为临床应用Ⅲ型胶原蛋白安全性和推广性提供了保障，为疾病的治疗提供更多的思路。

目的:探讨三阴性乳腺癌(TNBC)细胞中Ⅹ型胶原蛋白α1(COL10A1)的表达及其潜在的生物学作用及机制。方法:利用Ualcan在线分析工具探索COL10A1在TNBC中的表达并在乳腺癌细胞中应用蛋白质印迹法(Western blot)验证。利用小干扰RNA(siRNA)与重组过表达质粒GV703-COL10A1转染三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231和BT-549，获得COL10A1敲低实验组(Si-COL10A1)和对照组(Si-NC)、过表达实验组(OE-COL10A1)和对照组(NC)的细胞。利用细胞计数试剂盒(CCK-8)法细胞活力测定、平板克隆、划痕实验、细胞迁移实验检测TNBC细胞的增殖、迁移能力；采用体外小管形成实验检测人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的体外血管形成能力。两组之间比较采用独立样本 t检验。 结果:生信分析及Western blot结果显示TNBC中COL10A1高表达，且与更差的总生存期(OS)、无复发生存期(RFS)相关。细胞克隆形成实验显示COL10A1敲降组MDA-MB-231、BT-549细胞克隆形成率[(10.47±0.91)、(11.10±1.35)%]明显低于其对照组[(16.77±2.33)%、(18.43±2.40)%， t＝4.373、4.609， P<0.05)；COL10A1过表达后两细胞克隆形成率[(21.50±0.62)%、(27.83±3.72)%]明显高于其对照组[(15.23±2.79)%、(19.40±1.47)%， t＝3.792、3.648， P<0.05]。划痕实验结果显示COL10A1敲降组MDA-MB-231、BT-549细胞的划痕愈合率[(17.00±1.07)%、(15.38±0.89)%]明显低于其对照组[(30.58±1.88)%、(23.78±1.58)%， t＝6.284、4.636， P<0.01]；COL10A1过表达后两细胞划痕愈合率[(47.40±3.09)%、(41.26±4.33)%]高于其对照组[(34.48±2.03)%、(21.80±1.03)%， t＝3.491、4.737， P<0.01]。在细胞迁移实验中，COL10A1敲降组MDA-MB-231、BT-549细胞进入下室的数量[(151.70±33.25)、(76.67±10.41)个]低于对照组[(378.00±26.51)、(303.70±15.50)个， t＝9.219、21.060， P<0.01]；COL10A1过表达后两细胞进入下室的数量[(1 519.00±144.10)、(551.00±61.65)个]高于对照组[(426.30±46.07)、(288.30±27.57)个， t＝12.510、6.736， P<0.01]。COL10A1过表达细胞的条件培养基培养的HUVEC，细胞成管的交叉点数和总主干长度均显著高于对照组( P<0.01)。 结论:COL10A1在三阴性乳腺癌中高表达；COL10A1可以增强TNBC细胞MDA-MB-231和BT-549的增殖和迁移活性，并具有促进血管生成的作用。

目的:表达和纯化重组人Ⅲ型胶原蛋白（rhCol），并评价其性能。方法:构建重组基因工程菌pET30a（+）-1880/pACYCDuet-hy726/BL21（DE3），稳定共表达rhCol和脯氨酰羟化酶。通过大肠杆菌高密度发酵与盐析和柱层析蛋白纯化技术制备并纯化rhCol。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定rhCol的纯度，全自动蛋白质多肽测序仪测定rhCol的N端氨基酸序列，紫外分光光度法测定rhCol中的羟脯氨酸含量，噻唑蓝法评价rhCol的细胞相容性。结果:高密度发酵最终菌体湿重约200 g/L，表达量约3 g/L，通过亲和层析获得的rhCol的纯度大于95%。rhCol的羟脯氨酸含量为11.44%，其水溶性及细胞相容性良好。结论:本研究制备的rhCol可作为一种优良的生物材料广泛用于皮肤护理及生物医药等领域。

目的:探讨面部皮肤微针注射重组Ⅲ型人源化胶原蛋白对皮肤年轻化的效果。方法:2021年7—12月，四川大学华西口腔医院医疗美容科招募志愿者25例，男1例、女24例；年龄30~58(38±9)岁，体质指数(22.23±1.36)kg/m 2。面部微针注射重组Ⅲ型人源化胶原蛋白，分别在治疗前及结束治疗后1、2、3个月采集图像，用VISIA图像分析系统进行对比分析，对受试者满意度进行评估，对治疗后并发症发生情况进行记录。 结果:VISIA图像分析治疗前及治疗后1个月各维度分值，斑点(32.06±6.92)比(27.59±7.69)分、红色区(32.79±11.80)比(27.74±9.49)分、毛孔(17.66±9.79)比(14.60±7.07)分、棕色斑(43.61±11.93)比(37.59±16.22)分，疗程结束后均低于治疗前，差异均有统计学意义( F＝3.44、4.21、7.47、7.11，均 P<0.05)；疗程结束后1个月，患者满意21例，占84%；结束后3个月，患者满意20例，占80%；无严重不良反应。 结论:面部注射重组Ⅲ型人源化胶原蛋白对皮肤年轻化有较好效果，受试者满意度较高、安全性较高，值得临床应用。

目的:评价急性肾损伤小鼠肾纤维化时CXCL16与自然杀伤T细胞的关系。方法:清洁级健康雄性C57BL/6小鼠24只，8～10周龄，体重20～30 g，采用随机数字表法分为4组( n＝6)：对照组(C组)、急性肾损伤组(AKI组)、对照+重组CXCL16蛋白组(C-rCXCL16组)和急性肾损伤+重组CXCL16蛋白组(AKI-rCXCL16组)。AKI-rCXCL16组和AKI组腹腔注射叶酸250 mg/kg制备急性肾损伤小鼠肾纤维化模型，分别于注射叶酸后第3、6、9、12天时腹腔注射rCXCL16 0.1 mg/kg和等容量溶剂；C组和C-rCXCL16组分别于相应时点腹腔注射等容量溶剂和rCXCL16。注射叶酸后第14天时采集眼眶血标本，检测血清BUN和Cr浓度；采用天狼星红染色和Masson染色观察肾纤维化面积；采用免疫荧光法测定肾组织纤维连接蛋白(FN)、Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达；采用流式细胞术检测CD1d Tetramer +-IL-4 +双阳性细胞比例；采用RT-PCR法检测肾组织IL-4、甘露糖受体(CD206)和精氨酸酶-1(Arg-1) mRNA的表达。 结果:与C组比较，AKI组和AKI-rCXCL16组血清BUN和Cr浓度升高，肾组织纤维化面积增加，IL-4、CD206、Arg-1 mRNA和FN、Col-Ⅲ、α-SMA表达上调，CD1d Tetramer +-IL-4 +细胞比例增加( P<0.05)，C-rCXCL16组上述各指标差异无统计学意义( P>0.05)；与AKI组比较，AKI-rCXCL16组血清BUN和Cr浓度升高，肾组织纤维化面积增加，IL-4、CD206、Arg-1的mRNA和FN、Col-Ⅲ、α-SMA表达上调，CD1d Tetramer +-IL-4 +细胞比例增加( P<0.05)。 结论:CXCL16参与急性肾损伤小鼠肾纤维化过程的机制与其募集自然杀伤T细胞分泌IL-4调控巨噬细胞向M2型极化有关。