目的:观察生物三维打印类细胞外基质(ECM)硬度对骨髓间充质干细胞(BMSC)向皮肤附属器细胞分化的影响。方法:(1)分别将1 g海藻酸钠和4 g明胶、3 g海藻酸钠和8 g明胶混匀，混合物分别溶于100 mL超纯水中，配制2种海藻酸钠-明胶复合水凝胶，分别命名为1A4G水凝胶、3A8G水凝胶，用于后续实验。观察2种水凝胶室温下、4 ℃冷凝15～30 min(冷凝条件下同)后、冷凝且用25 g/L氯化钙溶液交联(交联条件下同)后、冷凝后且用生物三维打印机(三维打印仪器下同)进行三维打印且交联后形态。取2种水凝胶冷凝并交联后，采用杨氏模量测定仪检测杨氏模量(硬度)，样本数为3。取2种水凝胶交联并冷冻干燥，用扫描电子显微镜观察其孔隙结构。取2种水凝胶交联并冷冻干燥，用无水乙醇置换法检测孔隙率，样本数为3。(2)从20只1周龄雌雄不限C57BL/6小鼠股骨和胫骨中分离培养BMSC，取第2代细胞进行实验。分别将1.0×10 7个/mL的BMSC单细胞悬液与1A4G水凝胶、3A8G水凝胶以1∶9的体积比充分混匀，制备载BMSC的1A4G水凝胶、载BMSC的3A8G水凝胶，进行三维打印，1 mL载细胞水凝胶(打印用量下同)打印1块，交联后加入间充质干细胞(MSC)专用培养基培养。根据水凝胶不同，将打印块分为1A4G组和3A8G组。取2组打印块各1块，培养7 d，采用细胞活/死试剂盒计数50倍视野下活、死细胞。取2组打印块各9块，另将9孔用2 mL MSC专用培养基培养的每孔1.0×10 6个BMSC设为二维培养组。分别于培养1、3、5 d，1A4G组与3A8G组各取3块打印块、二维培养组取3孔细胞，用细胞计数试剂盒8法检测培养液中吸光度值，以此表示细胞增殖活性。(3)同实验(2)制备载BMSC的1A4G水凝胶、载BMSC的3A8G水凝胶各10 mL，分别加入从10只新生1 d雌雄不明C57BL/6小鼠提取的足趾垫匀浆液各0.5 mL混匀进行三维打印及交联，加入MSC专用培养基培养3 d，更换为汗腺专用培养基培养。根据水凝胶不同，将打印块分为1A4G组和3A8G组。汗腺专用培养基培养7 d，采用免疫荧光法检测2组打印块中细胞的上皮细胞表面标志物细胞角蛋白5(CK5)和CK14、汗腺细胞表面标志物CK18和钠钾ATP酶(NKA)、毛囊细胞表面标志物CK17和碱性磷酸酶(ALP)蛋白表达，实时荧光定量反转录PCR法检测2组打印块中细胞的CK5、CK14、CK18、NKA(检测ATP1a1转录本)、CK17、ALP mRNA表达(样本数为3)。对数据行独立样本 t检验、Fisher确切概率法检验、析因设计方差分析及Bonferroni法。 结果:(1)与3A8G水凝胶比较，1A4G水凝胶室温下黏度稍低、流动性稍好。2种水凝胶冷凝后均呈凝胶状，在此基础上，交联后形状均匀规则，经三维打印且交联后为固态的纵横交错的圆柱块。1A4G水凝胶杨氏模量为(52±6)kPa，明显低于3A8G水凝胶的(218±5)kPa( t＝40.470， P<0.01)。2种水凝胶孔隙结构相似，横断面均呈多孔网状结构；2种水凝胶的孔隙率相近( t＝0.930， P>0.05)。(2)培养7 d，1A4G组和3A8G组打印块中活、死细胞分布相近( P>0.05)，绝大部分为活细胞。培养1、3、5 d，1A4G组和3A8G组打印块及二维培养组培养液中吸光度值两两比较，差异均无统计学意义( P>0.05)。与组内培养1 d比较，1A4G组、3A8G组打印块培养3、5 d培养液中吸光度值均明显升高( P<0.05或 P<0.01)，二维培养组细胞培养5 d培养液中吸光度值明显升高( P<0.01)；与组内培养3 d比较，1A4G组、3A8G组打印块及二维培养组细胞培养5 d培养液中吸光度值均明显升高( P<0.01)。(3)汗腺专用培养基培养7 d，2组打印块中细胞均可见CK5、CK14、CK18、NKA、CK17、ALP蛋白表达。汗腺专用培养基培养7 d，2组打印块中细胞的CK5、CK14、CK18、NKA mRNA表达量相近( t＝0.362、0.807、0.223、1.356， P>0.05)；3A8G组打印块中细胞的CK17、ALP mRNA表达量分别为1.96±0.21、55.57±11.49，均明显高于1A4G组的1.05±0.42、2.01±0.27( t＝3.333、8.074， P<0.05或 P<0.01)。 结论:1A4G水凝胶和3A8G水凝胶三维培养的BMSC均有向汗腺细胞分化的趋势，但3A8G水凝胶三维培养的BMSC向毛囊细胞分化的趋势比1A4G水凝胶明显。提示相对高的生物三维打印类ECM硬度，不仅有利于BMSC向汗腺细胞分化，还有利于其向毛囊细胞分化。

目的 探索经皮雌二醇凝胶在自然周期薄型子宫内膜患者中促进子宫内膜增长的疗效.方法 选取2022年7-12月上海市长宁区妇幼保健院收治的自然周期薄型子宫内膜患者60例,按照随机对照数字表法分为经皮雌二醇凝胶组(30例)和口服补佳乐组(30例),两组均治疗1个月经周期.通过阴道超声监测患者子宫内膜厚度、形态,比较两组治疗期间的子宫内膜厚度及临床疗效.结果 经皮雌二醇凝胶组2例失访,共58例研究对象纳入分析.结果 发现,两种治疗方案给药1个月后,经皮雌二醇凝胶组患者子宫内膜厚度为(8.66±1.18)mm,口服补佳乐组为(8.30±1.0)mm;经皮雌二醇凝胶组内膜厚度增加(3.85±1.49)mm,口服补佳乐组增加(4.01±1.53)mm;经皮雌二醇凝胶组临床有效率为96.4％,口服补佳乐组为93.3％,差异均无统计学意义(均P＞0.05);治疗后两组子宫内膜形态例数均增加,C型例数均减少,但数据对比差异无统计学意义(P＞0.05);经皮雌二醇凝胶组出现1例皮疹(3.57％),口服补佳乐组出现2例胃肠道不适(6.67％),差异无统计学意义(P＞0.05).结论 经皮雌二醇凝胶与口服雌激素在提高自然周期薄型子宫内膜患者子宫内膜容受性方面,治疗有效性相似,值得临床推广使用.

目的 探讨不同激素给药方式对宫腔镜下宫腔粘连分离术(TCRA)后患者子宫内膜代谢情况和治疗效果的影响.方法 选取2022年1月至12月于浙江省金华市妇幼保健院妇产科接受TCRA治疗的65例宫腔粘连(IUA)患者为研究对象,按照随机数字表法将其分为经皮雌激素组(22例)、口服雌激素组(22例)和口服雌孕激素组(21例).经皮雌激素组外涂经皮雌二醇凝胶治疗,口服雌激素组口服戊酸雌二醇片治疗,口服雌孕激素组口服雌二醇片/雌二醇地屈孕酮复合片治疗,三组均治疗2个月.比较三组子宫内膜代谢情况、IUA评分、治疗效果和不良反应.结果 治疗前,三组子宫内膜厚度、阻力指数和搏动指数比较,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗后,三组子宫内膜厚度均大于治疗前,阻力指数和搏动指数均高于治疗前,且口服雌孕激素组子宫内膜厚度大于经皮雌激素组和口服雌激素组,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗前,三组IUA评分比较,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗后,三组IUA评分均低于治疗前,且口服雌孕激素组低于经皮雌激素组和口服雌激素组,差异有统计学意义(P＜0.05).三组治疗总有效率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).三组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 IUA患者TCRA后接受口服雌孕激素治疗,可改善子宫内膜代谢情况,促进子宫内膜修复.

目的 探讨经皮雌二醇凝胶在血栓前状态患者激素替代周期(HRT)冻融胚胎移植(FET)中的应用价值.方法 选取2021年2月至2023年2月在郑州大学第二附属医院生殖医院行HRT-FET助孕的血栓前状态患者68例为研究对象,其中采用经皮雌二醇凝胶进行内膜准备者为研究组(n=32),采用口服芬吗通进行内膜准备者为对照组(n=36),两组均在胚胎移植后给予低分子肝素治疗.比较两组HRT情况和FET妊娠结局,并比较同组胚胎移植前、移植后14 d以及组间移植后14 d的纤维蛋白原(FIB)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)及D-二聚体(D-D)水平.结果 研究组孕酮转化日子宫内膜厚度及A型子宫内膜比例显著高于对照组(P＜0.05).两组患者间移植胚胎数、移植优胚率、HCG阳性率比较均无显著差异(P＞0.05),研究组临床妊娠率显著高于对照组(65.63％vs.41.67％,P＜0.05),研究组早期流产率较对照组有所减低(9.38％vs.16.67％)但无显著差异(P＞0.05).两组患者胚胎移植后14 d的FIB及D-D水平均显著低于移植前(P＜0.01),且胚胎移植后14 d研究组D-D及F1B水平显著低于对照组(P＜0.01).结论 在血栓前状态患者HRT-FET周期中,与口服芬吗通比较,采用经皮给药的方式更能降低血栓前状态风险,提高子宫内膜容受性,改善助孕结局.因此针对这类患者,建议选择经皮雌激素进行内膜准备,并辅以肝素对症处理.

目的 研究川枳壳黄酮类化学成分及其对成骨细胞增殖的影响.方法 采用聚酰胺树脂、葡聚糖凝胶、硅胶柱色谱等方法进行成分分离,通过质谱和核磁共振波谱分析与鉴定结构,采用体外细胞实验对所得化合物进行成骨细胞增殖活性检测.结果 从川枳壳中分离得到12个黄酮类及其苷类成分,分别鉴定为柚皮苷(1)、新橙皮苷(2)、柚皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(3)、narirutin(4)、sarotanoside(5)、圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷(6)、柚皮素(7)、芜花素(8)、圣草酚(9)、angophorol(10)、南酸枣苷(11)、tetrahydroprotogenkwanone(12).其中化合物 1～4、6～9、12具有促进成骨细胞增殖作用,且化合物12的细胞增殖率达196.3％,优于阳性药雌二醇.结论 化合物5、8、10、11、12为首次从枳壳中分离得到,化合物5、10、12为首次从柑橘属中分离得到,化合物1～4、6～9、12对成骨细胞具有明显的增殖作用.

目的 观察自拟消痤方联合外用药治疗女性青春期后痤疮的临床疗效及其对血清性激素水平[主要观察睾酮(T)和雌二醇(E2)水平]的影响.方法 选取 2021 年 3 月—2022 年 2 月本院皮肤科门诊确诊的女性青春期后痤疮患者60 例,随机分为治疗组和对照组各30 例.治疗组采用内服消痤方,对照组口服螺内酯片.2 组患者均联合外用异维A酸红霉素凝胶,每晚 1 次,点涂患处.2 组均治疗 8 周,分别观察初诊及复诊时,痤疮皮损严重程度及中医证候的变化;同时,分别检测并记录首次就诊及治疗 8 周后患者血清T、E2 水平及不良反应情况.结果 治疗 8 周后,治疗组有效率显著高于对照组(93.33%比 66.67%);2 组对痤疮症状均有改善作用,尤其治疗组改善作用明显优于对照组分:(1.18±1.05 比 2.29±1.19),差异均有统计学意义(均P＜0.05);治疗组对月经异常及睡眠的改善均有显著作用,疗效优于对照组(月经异常分:0.82±0.71 比 3.25±0.67;睡眠分:0.62±0.36 比 1.62±0.89);2 组对血清T和E2 水平的改变均有显著作用,但治疗组和对照组对血清T和E2 水平改变上疗效相近.2 组均有少部分患者出现轻度不适反应,但均可耐受,不影响后续治疗,显示了良好的安全性.结论 自拟消痤方联合外用药物对女性青春期后痤疮的症状及月经异常、睡眠等证状均有明显改善作用,且可调整患者血清性激素水平;同时安全性良好,为女性青春期后痤疮提供了临床及理论基础,值得临床推广.

目的 探讨脐疗中药温敏型纳米凝胶制剂治疗勃起功能障碍(阳痿)的临床效果.方法 将90例阳痿患者按照随机数字表法分为对照组与观察组,每组45例.对照组采用西地那非治疗,观察组采用脐疗中药温敏型纳米凝胶制剂治疗,两组均连续治疗2个月.比较两组的疗效、勃起功能国际问卷(IIEF)评分、状态-特质焦虑问卷(STAI)评分、血清睾酮及雌二醇水平、阴茎勃起角度,观察两组治疗期间不良反应的发生情况.结果 观察组治疗总有效率高于对照组(P＜0.05).治疗后,两组患者的IIEF评分、血清睾酮水平较治疗前升高,STAI评分、血清雌二醇水平较治疗前降低,阴茎勃起角度较治疗前增大,且观察组上述指标优于对照组(P＜0.05).治疗期间两组均未发生不良反应.结论 脐疗中药温敏型纳米凝胶制剂治疗阳痿的效果明显,能显著改善患者的勃起功能、焦虑状态及性激素水平,安全性好.

目的:在冻融胚胎激素替代方案(HRT)中,比较给药途径不同的两种雌激素对冻融胚胎移植(FET)临床结局的影响.方法:选取2016年7月至2016年12月在本院行FET的患者共120例,根据给药途径分为A组及B组.A组为经皮雌二醇凝胶给药激素替代方案准备内膜,共60个周期,B组为口服戊酸雌二醇激素替代方案准备内膜,共60个周期.比较两组间的基本情况、子宫内膜厚度、雌激素使用量、雌激素使用时间、转化日激素水平、种植率及临床妊娠率等指标.结果:两组间患者的年龄、体重指数、不孕年限、基础激素水平均无统计学差异(P＞0.05).两组间患者的转化日子宫内膜厚度、转化日激素水平、移植胚胎数、种植率、流产率、双胎妊娠率比较也均无统计学差异(P＞0.05).A组的HCG阳性率及临床妊娠率(63.63％及52.72％)略高于B组(61.11％及46.29％),差异没有统计学意义(P＞0.05).A组的雌激素使用量及雌激素使用天数[(102.68 ±34.10) mg;(16.80 ±4.02) d]均明显高于B组[(85.52±17.18) mg;(12.64±2.52)d],差异有统计学意义(P＜0.05).结论:在FET治疗中,经皮雌二醇凝胶HRT方案可以获得与口服戊酸雌二醇HRT相类似的临床妊娠率,对于口服雌激素有胃肠道症状或肝肾功能、血脂异常的患者可作为首选,但其使用量及使用时间明显增加,是否作为常规推荐尚值得商榷.

目的 探讨玻璃酸钠凝胶预防中度宫腔黏连(IUA)复发的临床疗效.方法 选择2013年1月至2014年1月,于广东省妇幼保健院妇科接受宫腔镜下宫腔黏连分离术(TCRA)治疗的72例中度IUA患者为研究对象.根据患者于TCRA治疗后接受的预防IUA复发治疗措施的不同,将其分为研究组(n=32),接受宫腔涂抹玻璃酸钠凝胶、放置宫内节育器(IUD)及口服戊酸雌二醇、地屈孕酮预防IUA复发治疗;对照组(n=40),接受宫腔放置IUD及口服戊酸雌二醇、地屈孕酮预防IUA复发治疗.对2组患者,均于TCRA治疗后第3个月时,观察其月经恢复情况,并进行宫腔镜复查,评估2组患者所采取措施,对于预防IUA复发治疗的有效率;于TCRA治疗后第6个月时,观察2组患者妊娠情况.采用x2检验,比较2组患者于TRCA治疗后所采取措施,对于预防IUA复发治疗的有效率,以及受试者临床妊娠率.本研究遵循的程序符合广东省妇幼保健院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并征得受试者知情同意,与之签署临床研究知情同意书.结果 ①2组患者的年龄、接受人工终止妊娠术次数等一般临床资料比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).②研究组患者于TCRA治疗后所采取措施,对于预防IUA复发治疗的有效率为71.9％(23/32),显著高于对照组的45.0％ (18/40),2组比较,差异有统计学意义(x2=5.237,P=0.022).研究组患者于TCRA治疗后第6个月时的临床妊娠率为34.4％(11/32),对照组为15.0％(6/40),2组比较,差异无统计学意义(x2 =3.700,P=0.054).结论 中度IUA患者于TCRA治疗后,采用宫腔涂抹玻璃酸钠凝胶、放置IUD及口服雌激素治疗方案,可促进月经恢复、改善宫腔形态,有效预防IUA复发.由于本研究纳入的样本量相对较小,该方法是否值得临床推广用于中度IUA患者于TCRA治疗后预防IUA复发治疗,仍然有待于大样本、多中心的随机对照研究进一步研究、证实.

目的:比较女性青春期后痤疮患者与健康女性血清性激素水平;探讨穴位埋线、火针、耳针综合针灸疗法治疗女性青春期后痤疮皮损的疗效及作用机制.方法:将107例女性青春期后痤疮患者分为综合针灸组(54例,4例剔除)和药物组(53例,5例剔除).综合针灸组采用穴位埋线、火针、耳针综合疗法,埋线取大椎、印堂、阳白透鱼腰等为主,配合辨证取穴,并于面部脓疱、囊肿皮损处行火针治疗,取耳尖及额、口等相应部位行耳针治疗;药物组口服丹参酮胶囊,每次4粒,每日3次,外用0.1％阿达帕林凝胶,每晚1次,两组均治疗8周.分别于治疗前、治疗4周、治疗8周后评价两组痤疮皮损.治疗前综合针灸组50例患者及46例健康对照组均于月经来潮24 h内检测血清睾酮(T)和雌二醇(E2)水平,并观察综合针灸组中21例性激素水平异常的患者治疗后的性激素水平变化.结果:综合针灸组治疗前E2水平明显低于健康对照组(P＜ 0.01);T/E2明显高于健康对照组(P＜0.01).综合针灸组21例性激素异常的患者治疗后E2水平显著提高(P＜ 0.01),T/E2显著降低(P＜0.01).两组治疗4周、8周后痤疮皮损积分显著降低(均P＜ 0.01),治疗4周后组间差异无统计学意义(P＞ 0.05),治疗8周后综合针灸组痤疮皮损评分低于药物组(P＜0.05).治疗4周后两组疗效差异无统计学意义(P＞0.05);治疗8周后综合针灸组、药物组愈显率分别为66.0％(33/50)、45.8％(22/48),综合针灸组优于药物组(P＜ 0.05).结论:女性青春期后痤疮患者与健康女性血清性激素水平比较,E2水平降低导致T水平相对升高;穴位埋线、火针、耳针综合疗法对女性青春期后痤疮皮损具有比药物更好的疗效,并对异常的性激素水平具有调整作用.