目的:评价电针对急性术后痛大鼠背根神经节(DRG)程序性细胞死亡配体1(PD-L1)/程序性细胞死亡受体(PD-1)/含Src-同源区2蛋白酪氨酸磷酸酶-1(SHP-1)信号通路的影响。方法:SPF级雄性SD大鼠39只，体质量220~250 g，6~8周龄，采用随机数字表法分为3组( n＝13)：对照组(C组)、腹部手术组(S组)和腹部手术+电针组(S+EA组)。S组和S+EA组在异氟烷麻醉下行腹部手术。S+EA组于术毕即刻和术后2 h时，选取双侧足三里和三阴交穴进行电针刺激30 min，频率为10 Hz连续波，电流为1 mA。每组取7只大鼠，分别于造模前1 d(T 0)和造模后3、5、7、9、11、24 h时(T 1~6)，依次测定机械缩足反应阈(MWT)、机械缩腹反应阈(ACT)、热缩足潜伏期(TWL)和冷缩足潜伏期(CWL)。于造模后5 h每组处死6只大鼠，取出T 12~L 4 DRG，分别采用Western blot法检测IL-6、PD-L1、PD-1和SHP-1的表达，采用免疫荧光法观察PD-L1在各类神经元的表达情况。 结果:3组不同时点TWL和CWL比较差异无统计学意义( P>0.05)。与C组比较，S组T 1~5时MWT降低，T 1~6时ACT降低，DRG IL-6表达上调，PD-L1、PD-1和SHP-1表达下调( P<0.05)；与S组比较，S+EA组T 1，2时MWT和ACT升高，DRG IL-6表达下调，PD-L1、PD-1和SHP-1表达上调( P<0.05)。免疫荧光结果显示，PD-L1在小直径神经元(CGRP +神经元和IB4 +神经元)和大直径神经元(NF200 +神经元)上均存在表达，且主要表达在CGRP +神经元和IB4 +神经元上。3组间PD-L1在DRG各类神经元的表达比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:电针减轻大鼠急性术后痛的机制可能与激活PD-L1/PD-1/SHP-1信号通路有关。

目的:探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在脂多糖诱导炎症性损伤致肠屏障功能障碍中的作用及其关系。方法:32只8~9周龄雄性BALB/c小鼠随机数字表法分为Stattic 7 d组、Stattic 14 d组、假手术组(Sham组)和空白对照组(NC组)，每组8只。Stattic 7 d组和Stattic 14 d组分别给予Stattic 15 mg/(kg·d)腹腔注射7 d和14 d，Sham组给予同等容量生理盐水腹腔注射14 d；NC组不做预处理。预处理后4组小鼠单次腹腔注射脂多糖(LPS)，12 h后观察存活情况并取材，比较各组小鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)及二胺氧化酶(DAO)水平、小肠Chiu’s评分、肠组织STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、MMP-9及闭合蛋白Occludin表达情况。组间比较采用 χ2/ F检验。 结果:Sham组和NC组血清DAO高于Stattic 7 d组和Stattic 14 d组[(125.71±31.10)、(125.91±40.54)、(62.86±14.79)、(58.95±22.35) ng/ml， F＝18.329， P<0.01]，差异有统计学意义；Sham组和NC组Chiu’s评分高于Stattic 7 d组和Stattic 14 d组[(2.54±0.53)、(2.24±0.38)、(1.10±0.38)、(0.89±0.30)分， F＝32.303， P<0.01]，差异有统计学意义；p-STAT3、MMP-9，Sham组和NC组免疫组织化学阳性面积高于Stattic 7 d组和Stattic 14 d组[(10.34±2.55)、(18.60±2.61)；(17.34±2.86)、(19.84±3.50)；(9.48±2.64)、(8.53±4.04)；(10.34±2.55)、(9.71±3.37)%， F＝29.025、23.656， P<0.01]，差异有统计学意义；p-STAT3、MMP-9，Sham组和NC组蛋白相对表达量高于Stattic 7 d组和Stattic 14 d组(0.35±0.06、0.74±0.13；0.32±0.07、0.73±0.11；0.19±0.02、0.36±0.11；0.20±0.04、0.40±0.09)，差异有统计学意义( F＝21.852、27.125， P<0.01)，Stattic 7 d组和Stattic 14 d组Occludin高于Sham组和NC组(0.39±0.09、0.46±0.10、0.21±0.06、0.21±0.16， F＝23.504， P<0.01)，差异有统计学意义。 结论:IL-6/JAK2/STAT3通路参与肠黏膜中MMP-9的表达调控，并影响肠屏障功能。

目的:基于中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA)和癌症基因组图谱计划(TCGA)数据库分析非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶12基因( PTPN12)在脑胶质瘤中的表达和意义。 方法:回顾性分析CGGA数据库(325例)和TCGA数据库(636例)中脑胶质瘤患者的临床资料和RNA测序数据。分析不同世界卫生组织(WHO)肿瘤级别、四分型亚型、异柠檬酸脱氢酶( IDH)突变状态、O 6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶( MGMT)启动子甲基化状态的患者 PTPN12表达量的差异。根据 PTPN12的表达量将患者分为 PTPN12高表达组和 PTPN12低表达组，采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，比较两组患者的生存差异。采用单因素和多因素Cox回归分析法判断 PTPN12对脑胶质瘤患者的预后作用。进一步通过基因本体(GO)功能富集分析及京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析获得基因相关的功能以及有关的通路。 结果:两数据库中， PTPN12的表达量均随脑胶质瘤病理级别的升高而升高(均 P<0.01)；与 IDH突变型比较， IDH野生型中 PTPN12表达量升高(均 P<0.01)； MGMT启动子非甲基化者 PTPN12表达量高于 MGMT启动子甲基化者(均 P<0.01)； PTPN12在经典型、间质型、神经元型以及前神经元型中表达量的差异均具有统计学意义，间质型中表达量最高(均 P<0.01)。两数据库中， PTPN12高表达者均比低表达者的生存期短(均 P<0.01)。两个数据库中，多因素Cox回归分析结果均显示， PTPN12表达量为脑胶质瘤患者生存期的独立影响因素(CGGA数据库中， HR＝1.433，95% CI：1.094～1.876， P＝0.009；TCGA数据库中， HR＝1.588，95% CI：1.018～2.477， P＝0.042)。GO分析结果显示， PTPN12表达量正相关的基因更多地富集在增殖、凋亡、黏附、蛋白水解、免疫反应、血管生成、药物反应、缺氧反应、肿瘤细胞G 2/M期的转化、肿瘤细胞G 1/S期的转化等多个与脑胶质瘤恶性进展相关的功能上。KEGG分析结果显示，与 PTPN12表达量呈正相关的基因更多地富集在肿瘤相关通路、PI3K-Akt通路、丝裂原活化蛋白激酶通路、肿瘤坏死因子通路、缺氧诱导因子1通路、p53通路、凋亡通路以及细胞周期通路上。 结论:不同WHO肿瘤级别的脑胶质瘤患者 PTPN12表达量不同， PTPN12表达量可独立用于脑胶质瘤患者的预后判断，且与多个脑胶质瘤恶性进展相关的功能和通路有关。

目的 探讨非受体蛋白酪氨酸磷酸酶12(PTPN12)在肝癌组织与其癌旁组织中的表达并研究其表达与原发性肝细胞癌预后的关系.方法 以肝癌组织与其癌旁组织为研究对象,用免疫组化法检测肝癌组织及癌旁肝组织的PTPN12蛋白的表达.用等级相关和Cox比例风险回归模型等评估PTPN12蛋白的表达与原发性肝细胞癌预后的关系.结果 与癌旁肝组织相比,在肝癌组织中的PTPN12蛋白表达明显下调(55.83％ vs.43.12％,P＜0.005).进一步的相关分析表明PTPN12蛋白表达降低与肿瘤复发密切相关(x2=4.346,P=0.015);单因素分析结果表明肝癌PTPN12表达降低与肝癌肿瘤特异生存率和肝癌复发相关(x2 =5.687,P＜0.001);多变量Cox比例风险回归模型分析发现PTPN12表达是肝癌患者预后的独立因素(x2 =6.687,P＜0.05).结论 PTPN12蛋白在人肝癌组织中表达下降或缺失,PTPN12表达可能作为肝细胞癌患者复发和预后的生物标志物.

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中蛋白酪氨酸磷酸酶受体J(PTPRJ)的水平及临床意义.方法 收集本院2015年1月至2017年12月手术切除的NSCLC患者癌组织112例,采用实时定量PCR(QPCR)以104例癌旁组织为对照检测癌组织的PTPRJ mRNA水平,根据癌组织PTPRJ mRNA水平的均数分为低表达组(＜均数)和高表达组(≥均数),分析不同临床病理特征(性别、年龄、吸烟史、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期、病理类型和PS评分)对应癌组织的PTPRJ mRNA水平和表达分布情况,根据随访资料比较不同PTPRJ mRNA水平的中位总生存期(OS).结果 QPCR结果 显示NSCLC组织的PTPRJ mRNA水平为0.313±0.149,低于癌旁组织的1.028±0.286,差异有统计学意义(P＜0.05).将112例NSCLC组织分为低表达60例和高表达52例;PTPRJ mRNA水平与NSCLC的性别、年龄、病理类型和PS评分均无关,而与吸烟史、淋巴结转移、肿瘤大小和TNM分期有关.有吸烟史、淋巴结转移、肿瘤较大(≥3 cm)和分期较晚(Ⅲ期)的PTPRJ mRNA水平和高表达率分别为0.290±0.128和38.0％(30/79)、0.282±0.158和28.6％(20/70)、0.244±0.099和26.2％(17/65)及0.266±0.106和29.7％(11/37),均低于无吸烟史、淋巴结无转移、肿瘤较小(＜3 cm)和分期较早(Ⅰ～Ⅱ期)的0.367±0.182和66.7％(22/33)、0.364±0.119和76.2％(32/42)、0.407±0.156和74.5％(35/47)及0.336±0.162和54.7％(41/75).全组随访时间9～36个月,中位随访25个月,中位OS为34.0个月,其中PTPRJ mRNA高表达者的中位OS超过36.0个月,长于低表达者的24.0个月,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 低表达的PTPRJ参与了NSCLC的发生发展,发挥类似抑癌基因的作用且低表达者的预后较差,该因子有望成为诊断和判断NSCLC预后的潜在因子.

目的 检测非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶12(protein tyrosine phosphatase,non-receptor type 12,PTPN12)及PTPN12基因mRNA在肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)组织及相应正常组织中的表达.方法 运用免疫组化P-V染色法检测RCC组织中及相应正常组织中PTPN12蛋白的表达,采用实时定量基因扩增荧光检测系统(real-time quantitative polymerase chain reaction detecting system,RT-qPCR)检测RCC组织及相应正常组织中PTPN12基因mRNA相对表达量,并分析其与各临床病理资料之间的关系.结果 在RCC组织中PTPN12蛋白表达的阳性率及mRNA的相对表达量显著低于相应正常组织,差异有统计学意义(P<0.05).RCC组织中PTPN12蛋白及mRNA表达情况与患者的发病年龄、性别、肿瘤直径及临床分期之间均无明显关联(P>0.05).结论 RCC中PTPN12的低表达可能与RCC的发生有关,但可能与患者发病年龄、性别、肿瘤直径及临床分期无关.

目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶,非受体型22(protein tyrosine phosphatase non-receptor type 22,PTPN22)在大鼠脑出血后炎症反应中的作用及其机制.方法 采用自体血注人脑内建立大鼠脑出血(intracerebral hemorrage,ICH)模型,36只SD大鼠随机分为假手术组,ICH3、6、12、24、48h组(n=6),Western blot筛选大鼠脑出血后PTPN22表达的时间窗.72只大鼠随机分为假手术组、ICH组、ICH+NC组、ICH+PTPN22干扰组(n=18).ICH24h后,对各组大鼠进行神经功能评分(mN55),脑含水量测定,Western blot检测大鼠脑出血后血肿周围NLRP3,成熟的白介素-1β(cleaved-IL-1β),成熟的白介素-18(cleaved-IL-18)以及激活的半胱天冬酶-1(cleaved-caspase-1)的表达,HE和Nissl染色观察大鼠脑组织形态学改变,免疫荧光染色检测血肿周围髓过氧化物酶(MPO)的表达.结果 大鼠脑出血后12hPTPN22的表达开始升高,24h达到峰值,48h开始降低.差异具有统计学意义(P＜0.05);与ICH+NC组相比,ICH+PTPN22干扰组神经功能评分降低,脑含水量减少,差异具有统计学意义(P＜0.05);HE和Nissl染色结果可见,ICH+PTPN22干扰组脑组织损伤程度与ICH+NC组相比明显减轻;ICH+PTPN22干扰组大鼠脑出血后血肿周围NLRP3、cleaved-IL-1β、cleaved-IL-18以及 cleaved-caspase-1的表达与 ICH+NC组相比明显降低(P＜0.05);ICH+PTPN22干扰组MPO细胞与ICH+NC组相比明显减少.结论 干扰PTPN22可通过抑制NLRP3炎性体的激活从而减轻大鼠脑出血后的炎症损伤.

目的 探讨长链非编码RNA AL1 17378.1对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响.方法 选取2016年8月-2017年12月鄂东医疗集团黄石市中心医院收治的14例膀胱癌患者的肿瘤组织及癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测14例膀胱癌组织及对应的癌旁组织、膀胱癌细胞株(5637、J82、T24、BIU-87)及对应的人膀胱正常上皮细胞(SV-HUC-1)中AL117378.1的表达水平.以表达水平最低的膀胱癌细胞株为对象分别转染阴性对照质粒(对照组)和载有AL117378.1的质粒(实验组).qRT-PCR检测转染后细胞中AL117378.1和非受体型蛋白质酪氨酸磷酸酶9(PTPN9) mRNA的表达水平.Western blotting检测PTPN9、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞周期蛋白依懒性激酶4(CDK4)和细胞周期蛋白A2(Cyclin A2)蛋白的表达水平.四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验和TransweH侵袭实验分别检测两组细胞的增殖能力和侵袭能力.计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用两独立样本t检验.结果 膀胱癌组织中AL117378.1的表达低于癌旁组织(P＜0.01).膀胱癌细胞株中AL117378.1的表达均低于人膀胱正常上皮细胞(P＜0.01),其中AL117378.1在J82细胞中的表达水平最低(P＜0.01).对照组和实验组J82细胞中AL117378.1的相对表达量分别为1.02±0.11和7.96±1.06,差异具有统计学意义(=6.51,P＜0.01);PTPN9 mRNA的相对表达量分别为1.01±0.08和4.99±0.50,差异具有统计学意义(t=7.84,P＜0.01).Western blotting实验结果显示,PTPN9和E-cadherin蛋白表达升高,α-SMA、CDK4和Cyclin A2蛋白表达降低.MTT实验结果显示,转染AL117378.1的细胞增殖能力明显下降(P＜0.05).Transwell侵袭实验结果显示,对照组和实验组的侵袭细胞数分别为(97.96±13.71)个和(38.02±7.51)个,差异具有统计学意义(=3.84,P＜0.01).结论 AL117378.1在膀胱癌组织和细胞株(5637、J82、T24、BIU-87)中表达均明显减少,AL117378.1可通过正向调控PTPN9基因的表达明显抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭.

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与棘皮动物微管相关样蛋白4与间变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因共存(以下简称双基因异常)的非小细胞肺癌的临床病理特征及治疗策略.方法:回顾性收集并分析2012年1月至2016年12月我院收治的EGFR突变与EML4-ALK融合基因共存的非小细胞肺癌患者的临床资料及病理特点.结果:11例双突变非小细胞肺癌占医院同期入院非小细胞肺癌患者的0.68％(11/1620);男性6例,女性5例;年龄23-70岁,平均年龄51.6岁;11例患者均不吸烟;腺癌9例,肉瘤样癌2例;临床分期,ⅠA期3例,ⅡB期1例,ⅢA期1例,ⅢB期1例,Ⅳ期5例;6例行手术治疗,4例使用传统化疗,最好疗效为稳定(SD),最长无进展生存期(PFS)为6月;5例患者使用表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗,使用EGFR-TKI最好疗效为部分缓解(PR),PFS为3-23月,中位PFS为9月;截止2017年12月,死亡4例,11例患者的生存时间为1-67月,中位存活时间为21月.结论:EGFR基因突变与EML4-ALK融合基因共存型非小细胞肺癌临床少见,多见于不吸烟或少吸烟的肺腺癌患者,双基因异常的非小细胞肺癌的靶向药物的治疗缺乏统一性,有待进一步研究,基于EGFR及EML4-ALK的磷酸化水平或肿瘤突变负荷选择靶向药物的个体化精准治疗是非常重要的.

目的 探讨非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶12(PTPN12)在胃贲门腺癌(GCA)的表达以及对胃癌细胞体外增殖、迁移和侵袭等生物学特性的影响.方法 分别采用RT-qPCR和SP免疫组织化学法检测67例GCA组织及其相应癌旁正常组织中PTPN12 mRNA和蛋白的表达情况,分析其与患者临床病理特征的关系;分别采用RT-qPCR和蛋白质印迹法方法检测PTPN12在胃癌细胞中mRNA和蛋白的表达;构建pcDNA3.1-PTPN12过表达质粒并转染BGC823细胞,检测其转染效率,并应用MTS法、克隆形成实验、划痕实验、Transwell小室分别检测转染前后细胞增殖、迁移和侵袭的变化.结果 在GCA组织中,PTPN12 mRNA的相对表达量显著低于其相应癌旁正常组织,Z=-10.359,P<0.01;与淋巴结转移(Z=-2.704,P=0.007)和TNM分期(Z=-3.699,P<0.01)相关.在GCA组织中,PTPN12蛋白阳性表达率与相应癌旁正常组织阳性表达率分别为32.84％(22/67)和79.10％(53/67),差异有统计学意义,χ2=29.101,P<0.01;并且与淋巴结转移(χ2=5.298,P=0.021)和TNM分期(χ2=5.761,P=0.016)相关;在胃癌细胞中PTPN12 mRNA和蛋白表达均低于对照组,F=862.733,P<0.01.在BGC823细胞中转染PTPN12过表达质粒,BGC823未转染组、pcDNA3.1-NC组和pcDNA3.1-PTPN12组PTPN12 mRNA相对表达量分别为1.279±0.258、1.100±0.052和20.442±0.619,F=2457.892,P<0.01.BGC823未转染组与pcDNA3.1-NC组差异无统计学意义,t=1.178,P=0.304.转染后0、24、48、72和96 h,BGC823未转染组细胞增殖速度分别为0.237±0.005、0.306±0.017、0.551±0.016、0.877±0.075和1.014±0.039,pcDNA3.1-NC组增殖速度分别为0.227±0.010、0.310±0.010、0.508±0.045、0.886±0.025和0.923±0.050,pcDNA3.1-PTPN12组增殖速度分别为0.232±0.010、0.261±0.010、0.395±0.025、0.676±0.035和0.678±0.038.在BGC823细胞中过表达PTPN12,与对照组相比,在72 h其增殖能力显著减弱,F72 h=22.668,P<0.01;96 h其增殖能力显著减弱(F96 h=66.812,P<0.01),克隆形成率显著减少(F=1484.140,P<0.01),抑制其侵袭能力(F=234.999,P<0.01).结论 PTPN12在GCA组织中低表达,并与胃贲门腺癌的发生发展密切相关,PTPN12过表达可抑制胃癌细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力.