目的:观察河南"4.26" 60Co辐射事故中3例中、重度骨髓型急性放射病患者免疫系统的远期效应，总结急性辐射损伤后免疫系统长期的变化特点。 方法:对1999年河南"4.26" 60Co辐射事故中2例中度骨髓型急性放射病患者（"天"和"旺"，均为男性，年龄分别为37岁和8岁）和1例重度骨髓型急性放射病患者（"梅"，女性，38岁）进行临床随访。采用免疫透射比浊法检测患者的外周血血清免疫球蛋白（Ig) A、IgG、IgM和补体C3的水平以评估体液免疫情况；采用流式细胞术检测患者T淋巴细胞亚群的CD3 +、CD3 +CD4 +、CD3 +CD8 +T细胞的百分比及CD3 +CD4 +/CD3 +CD8 +T细胞的比值以评估细胞免疫情况。 结果:随访时间截至2019年9月4日，共随访11次。体液免疫评估结果显示，患者"梅"在受照后半年和第2年，补体C3水平均下降，第5、11、13、20年，IgG水平均升高；患者"天"在受照后第3年，IgM水平下降，第5年，IgG水平升高；患者"旺"在受照后第1、5年，补体C3水平均升高。Ig的异常频次及延续时间表现为"梅">"天"＝"旺"。细胞免疫评估结果显示，患者"梅"在受照后半年，CD3 +、CD3 +CD4 + T细胞的百分比及CD3 +CD4 +/CD3 +CD8 +T细胞的比值均显著下降，第7、11年，CD3 +、CD3 +CD4 +、CD3 +CD8 + T细胞的百分比均下降，第15年，CD3 +、CD3 +CD4 + T细胞的百分比均下降；患者"天"在受照后第5、11年，CD3 +CD4 + T细胞的百分比均升高，第7年，CD3 +、CD3 +CD8 + T细胞的百分比均下降；"旺"在受照后第7年，CD3 +、CD3 +CD4 +、CD3 +CD8 + T细胞的百分比均下降。T淋巴细胞亚群的异常频次及延续时间表现为"梅">"天"> "旺"。 结论:急性照射对免疫系统的损伤存在长期性、剂量依赖性和可逆性。对于个体而言，免疫系统的受损情况与受照剂量呈正相关，年龄和性别是其可能的影响因素。

目的:观察3例骨髓型急性放射病（ARS）患者造血系统的远后效应，探究急性外照射后造血系统的远后变化规律及其影响因素。方法:对1999年河南"4.26" 60Co辐射事故中2例中度骨髓型ARS患者（"天"和"旺"，均为男性，年龄分别为37岁和8岁）和1例重度骨髓型ARS患者（"梅"，女性，38岁）进行临床随访，随访时间截至2019年，共随访11次。依据《外照射急性放射病的远期效应医学随访规范》，于患者受照后半年开始定期采集3例患者的外周血和骨髓进行外周血象、骨髓穿刺涂片、骨髓祖细胞培养及造血刺激因子等检查。（1）外周血象检查：使用全自动血细胞分析仪分析外周血白细胞、血小板（PLT）、红细胞计数和血红蛋白（Hb）水平，以及中性粒细胞（NEUT）百分比和淋巴细胞（LYM）百分比。（2）骨髓穿刺检查：行骨髓穿刺涂片及造血祖细胞培养，检测红细胞集落生成单位（CFU-E）、爆式红细胞集落生成单位(BFU-E)、粒细胞-单核细胞集落生成单位（CFU-GM）。（3）造血刺激因子检查：检测促红细胞生成素（EPO）和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）。 结果:20年随访期间，3例患者的白细胞计数基本在正常范围内。受到照射后半年，LYM百分比均偏低，NEUT百分比均偏高。"梅"在随访期间多次出现NEUT百分比升高，"旺"多次出现LYM百分比和NEUT百分比异常。"梅"在受到照射后半年及第1年的随访中PLT计数轻度下降，分别为80×10 9个/L和91×10 9个/L；"旺"受到照射后半年，PLT计数轻度下降，为91×10 9个/L；"天"的PLT计数正常。"梅"的Hb水平多次轻度降低，受到照射后第5年中度下降，为85 g/L；"天"受到照射后第9年Hb水平异常升高；随访期间"天"和"旺"的Hb水平数次轻度升高或降低。3例患者随访期间的6次骨髓穿刺涂片检查的结果均为骨髓增生活跃或增生明显活跃。3例患者受到照射后半年的CFU-E、BFU-E和CFU-GM均异常升高；第2年，上述3项指标均降为0；其后缓慢回升，至第7年，CFU-E均高于正常值，CFU-GM基本恢复，BFU-E仍显著减低。在前3年的随访中，"天"的半年和1年EPO轻度异常，"梅"和"旺"EPO均在正常范围。受到照射后半年，3例患者的GM-CSF均<1.00 pg/mL ；"梅"第1年的GM-CSF异常升高，为14.3 pg/mL，第2年恢复正常；"天"和"旺"第1~2年的GM-CSF均正常。 结论:急性照射对造血系统的损伤具有剂量依赖性和长期性；造血刺激因子对骨髓造血功能的恢复具有长期影响；反映骨髓造血功能恢复情况的各指标间可缺乏一致性改变，随访中需要综合评估。

目的:研究不同剂量电离辐射对小鼠造血干/祖细胞(hematopoietic stem and progenitor cells, HSPCs)内线粒体功能的影响。方法:将48只C57BL/6小鼠按随机数表法分为对照组(0 Gy组)、全身 60Co单次照射1.0 Gy组和4.5 Gy组，每组16只，照射后12、24 h检测HSPCs线粒体活性氧(ROS)水平、膜电位、线粒体数量及线粒体压力等。c-Kit +细胞体外接受 60Co单次15 Gy照射，24 h后检测线粒体功能。 结果:建立小鼠造血系统辐射损伤模型，发现小鼠受不同剂量γ射线照射后24 h内外周血白细胞( t＝12.41、18.31、16.48、14.16、19.08、20.25， P<0.05)、红细胞( t＝4.81、6.62， P<0.05)及血小板( t＝4.33、6.68， P<0.05)均明显减少，骨髓细胞集落形成能力下降( t＝16.27、55.66、17.06、43.75， P<0.05)，HSPCs数量降低( t＝5.16、11.55， P<0.05)，且呈现时间和剂量相关效应；1 Gy照射后，HSPCs中ROS水平差异无统计学意义( P>0.05)，线粒体膜电位降低( t＝8.82、9.24， P<0.05)、线粒体数量减少，且在照射后24 h，HSPCs线粒体功能、线粒体基础代谢指数增强( t＝ 7.36、3.68、4.58、3.15、3.15， P<0.05)。4.5 Gy照射后可引起HSPCs中ROS上升( t＝4.63、4.12， P<0.05)，线粒体数量降低，线粒体膜电位降低( t＝12.29、10.46， P<0.05)，最大呼吸能力和呼吸储备能力降低( t＝ 7.81、5.78、6.70、5.83， P<0.05)，12 h基础呼吸和氧化磷酸化ATP产能低( t＝8.48、3.80， P<0.05)，24 h质子泄漏高( t＝6.57， P<0.05)，耦合效率低( t＝11.43， P<0.05)。c-Kit +细胞经15 Gy照射后24 h，ROS水平显著上升( t＝11.30， P<0.05)，线粒体膜电位降低( t＝34.92， P<0.05)，最大呼吸和呼吸储备能力提高( t＝4.25、3.44， P<0.05)。 结论:建立了HSPCs中系统评估线粒体功能方法，明确了电离辐射对HSPCs线粒体功能的影响，为深入揭示电离辐射致HSPCs线粒体损伤机制奠定基础。

[目的]探讨保护骨髓的全盆调强放疗在宫颈癌术后同步化疗中的应用价值.[方法]102例子宫颈癌术后患者,随机分为单独限量的调强放射治疗(BMS-IMRT)组51例(观察组)和不行单独限量的调强放射治疗(IMRT)组51例(对照组).两组均进行CT增强扫描定位,勾画临床靶体积及危及器官,BMS-IMRT加盆骨勾画及限量.两组均于放疗d1开始顺铂30 mg/㎡同步化疗至放疗结束.比较两组靶区的剂量不均匀系数(Ic)、适形指数(radiation conformal index,CI)及危及器官剂量分布,并比较两组白细胞下降的程度、应用集落刺激因子的数量及完成同步化疗周期数.[结果]对照组Ic、CI分别为0.218 ± 0.02、0.770 ± 0.08,与观察组0.252 ± 0.03、0.772 ± 0.09比较,差异无统计学意义(P >0.05).观察组在盆骨受照剂量≥20 Gy以后显著减少盆骨骨髓的受照体积,与对照组比较差异有统计学意义(P <0.05).观察组白细胞下降程度更低,使用粒细胞集落刺激因子数量更少,能同步完成化疗周期,差异有统计学意义(P <0.05).[结论]宫颈癌术后BMS-IMRT可降低骨髓受照体积,降低急性骨髓抑制发生的几率,减少患者住院费用,保证同步放化疗顺利完成.

目的 探讨当归补血汤干预NRF2-Notch信号调控辐射旁效应“毒损髓络”的机制.方法 将72只BALB/c小鼠随机分成正常对照组,全身辐射组,半身辐射组,给药1、2、3组.4Gy 137Cs-γ射线照射辐射各组小鼠,除全身辐射组外均仅照射小鼠上半身,给药各组并用不同剂量的当归补血汤灌胃1周,处死小鼠取脾和骨髓.观察各组小鼠生存状态改变,并检测体重和脾指数的变化;cck8法检测骨髓细胞的增殖活力;realtime RT-PCR、Western-blot技术检测小鼠骨髓的NRF2-Notch通路相关基因蛋白的表达变化.结果 同正常对照组相比:仅辐射各组小鼠生存状态明显弱于给药各组,小鼠骨髓细胞增殖活力降低(P＜0.05);骨髓细胞NRF2、Notch1、Jagged1及PCNA基因mRNA表达下调(P＜0.05);骨髓细胞Jagged1、HES1及PCNA蛋白表达下调,全身辐射组尤为明显.服药1周后,除给药1组外,给药各组骨髓细胞活力增加(P＜0.05),且具有剂量依赖性;骨髓细胞NRF2 mRNA表达增加,激活Notch通路,其下游节点基因HES1表达上调(P＜0.05),靶基因PCNA表达增加(P＜0.05);骨髓细胞Jagged1、HES1及PCNA蛋白表达量均增加,且具有剂量依赖性,实验各组小鼠骨髓细胞Cleaved Notch1的表达成阴性.结论 当归补血汤可能通过上调NRF2基因的表达,激活Notch通路,促进辐射小鼠骨髓细胞的增殖分化,缓解电离辐射靶效应或旁效应造成的骨髓抑制,促进造血免疫系统重建.

背景:课题组前期发现, 炎症预激活的骨髓间充质干细胞条件培养基可促进大鼠小肠急性辐射损伤后的结构和功能修复, 该修复作用是否通过调控小肠干细胞得以实现, 目前相关研究尚未明确.目的:探究炎症预激活的骨髓间充质干细胞条件培养基对辐射损伤大鼠小肠上皮干细胞的影响, 以进一步明确其修复辐射损伤小肠黏膜的机制.方法: (1) 分离、培养、鉴定SD幼鼠 (中山大学北校区实验中心提供) 骨髓间充质干细胞, 分别与正常对照和辐射损伤的小肠隐窝细胞株IEC-6在Transwell培养板中共培养24h, 预刺激的骨髓间充质干细胞继续单独培养48 h, 收集到的上清液分别为正常状态间充质干细胞条件培养基 (MSC-CMNOR) 和辐射炎症预激活间充质干细胞条件培养基 (MSC-CMIR); (2) 将成年SD大鼠 (中山大学北校区实验中心提供) 随机分为4组:对照组, 单纯辐射损伤组, 辐射损伤+MSC-CMNOR组, 辐射损伤+MSC-CMIR组, 每组20只.后3组以14 Gy剂量一次性腹部局部照射制备急性小肠辐射损伤大鼠模型, 造模成功后4 h内, 单纯辐射损伤组尾静脉注射DMEM-F12培养基, 200μL/d, 连续注射3 d;辐射损伤+MSC-CMNOR组、辐射损伤+MSC-CMIR组采用胶囊渗透压泵腹腔植入的方式注射MSC-CMNOR和MSC-CMIR, 胶囊内含2 mL浓缩条件培养基, 植入腹腔后以10μL/h的速率匀速释放.于辐射后第1, 3, 5, 7天取小肠组织行免疫组织化学染色、Western blot及qRT-PCR检测.结果与结论: (1) 辐射后第3天, 位于隐窝基底增殖活跃的Lgr5+小肠上皮干细胞与对照组相比显著减少, 几乎难以观察到阳性细胞;而在输注MSC-CMIR后, Lgr5+小肠上皮干细胞与单纯辐射损伤组相比明显增多, MSC-CMNOR组Lgr5+小肠上皮干细胞未见明显增多; (2) 辐射损伤后第3天, 位于小肠隐窝+4位置相对静止的Bmi1+小肠上皮干细胞几乎无法观察到;而输注MSC-CMIR后, Bmi1+小肠上皮干细胞与单纯辐射损伤组相比明显增多, 不仅分布在+4细胞位置, 还分布在Lgr5+细胞常见的位置, 表明Bmi1+细胞在辐射损伤后有可能通过分化为Lgr5+细胞发挥修复效应; (3) Western blot和q RT-PCR进一步验证, MSC-CMIR组的Lgr5表达在同一时间点均明显高于单纯辐射损伤组和MSC-CMNOR组, 持续高水平表达后于第7天恢复至正常水平.MSC-CMNOR修复作用较弱, 仅在第7天时与单纯辐射损伤组相比差异有显著性意义; (4) 结果表明, 炎症预激活状态的骨髓间充质干细胞条件培养基具有保护小肠上皮干细胞的作用.

目的 对3例Co源事故照射所致的中度骨髓型急性放射病患者进行17年的医学随访,观察其辐射远期效应.方法 按照医学随访计划观察3例患者(分别称为“明”、“军”、“磊”)血液系统、免疫系统、神经系统、生殖系统、眼晶状体和细胞遗传学等随访项目的变化.结果 3例患者均有易感冒、性功能障碍和神经衰弱症状主诉.双眼慢性结膜炎,视力下降,眼晶状体点片状浑浊.血常规、肝肾功能和性激素正常.细胞免疫指标CD3、CD4、CD8和CD4/CD8下降.染色体畸变率(双着丝粒体和断片)和微核率随着时间的推移逐年降低.“明”和“军”有肌酸激酶同工酶增高和缺血性心电图改变.“明”受照后第12年患甲状腺癌,“磊”受照后第14年患甲状腺结节.结论 本次随访为急性放射病患者的远期效应规律积累了材料,为患者的后期医疗干预提供了客观依据.

目的 探究生物等效均匀剂量(EUD)在非小细胞肺癌放疗调强计划应用中的剂量学意义和临床价值.方法 筛选本科已经接受调强放疗的ⅢB期非小细胞肺癌患者20例,其中内靶区(ITV)处方剂量66 Gy,计划靶区(PTV)处方剂量60 Gy.分成两组进行剂量优化分析对比,对照组(n=10)用物理优化方法进行剂量约束,观察组(n=10)把危及器官(食道、心脏、肺、脊髓)的剂量约束条件加入EUD函数优化的剂量约束,其他剂量约束条件不变.比较这两组是否具有剂量学差异.结果 观察组PTV和ITV的平均剂量较对照组有明显改善(P＜0.05).观察组和对照组的ITV和PTV的剂量CI、HI指标差异均无统计学意义(P＞0.05).观察组较对照组显著降低了全肺组织的低剂量区(P＜0.05).对于串行器官脊髓,观察组较对照组能显著降低最高剂量点Dmax的剂量(P＜0.05).对于串行器官食道,观察组较对照组显著降低了食道的高剂量区以及低剂量区(P＜0.05).两组全肺组织的高剂量区、平均剂量Dmean,以及心脏、食道的高剂量区比较差异均无统计学意义(P＞0.05).观察组和对照组的总有效率分别为90％和70％,差异无统计学意义(P＞0.05).观察组和对照组Ⅱ～Ⅳ级放射性肺炎发生率分别为30％(3/10)和80％ (8/10),差异有统计学意义(P＜0.05).观察组和对照组Ⅱ～Ⅳ级骨髓抑制的发生率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在保证疗效的前提下加入EUD函数优化的调强计划能更有效地提高靶区平均剂量,对正常组织的保护更有优势,在保护重要器官的同时还能有效降低放射性肺炎的发生率.

本文观察了800拉德γ线导致大鼠组织中PDE活力变化以及雌二醇对它的防护效应。实验是用杂种雄性成年或雌性未成年大鼠 60Coγ线一次全身照射800rad或在照射前15分钟静脉给17β-雌二醇（100μg/100g体重）。于照后不同时间测定其胸腺、脾脏、睾丸（子宫）和骨髓PDE的活力。结果表明大鼠照射后胸腺、脾脏和睾丸（子宫）组织中PDE活力逐渐下降未见明显的规律性变化，而在骨髓组织中PDE活动力则随照后不同时间，尤其以照后24小时最为明显。在我们的实验条件下，雌二醇对正常和受照大鼠骨髓中PDE活力没有显示出防护作用。这可能与甾体激素的放射防护效应不是通过细胞表面受体在cAMP系统中的作用有关。

小鼠经低剂量率（70拉德／天）γ线连续照射25天后，造血干细胞和造血祖细胞数量大幅度减少。在连续观察的一年期间，虽然骨髓有核细胞数和晚红系祖细胞（CFU-E）很快恢复到了正常水平，但造血干细胞（CFU-S）、祖细胞（BFU-E、CFU-GM）却始终处于低下状态，其水平相当于同年龄正常动物的50～70%。骨髓造血微环境也同时受到不同程度的破坏，停止照射后半年其CFU-F只恢复至正常的70%。这些结果表明，小鼠经低剂量率γ线连续照射后，造血组织中存在着潜在的损伤，它是产生一系列辐射远后效应的重要原因。