目的:评价四价流感病毒亚单位疫苗配伍RFH01佐剂在小鼠模型中的免疫原性。方法:按照《中国药典》2020年版(三部)的方法对4种单价流感病毒亚单位疫苗原液进行鉴别试验。在研究配伍RFH01佐剂的四价流感病毒亚单位疫苗小鼠模型中，采用随机分组法将460只雌性6~8周龄BALB/c小鼠分为实验组、疫苗对照组、阴性对照组和空白组，共46组，每组10只。在研究四价流感病毒亚单位疫苗在老年和青年小鼠模型中，采用随机分组将80只雌性10月龄和80只雌性10周龄BALB/c小鼠同时分为单价流感病毒疫苗、四价流感病毒亚单位疫苗、四价流感病毒亚单位疫苗+RFH01佐剂组、鸡胚四价流感病毒裂解疫苗对照组和PBS组，共16组，每组10只。均采用肌内注射免疫，初次免疫21 d后，采血分离血清，并用相同程序和剂量进行加强免疫，第42天采血分离血清。血凝抑制试验检测小鼠血清抗体水平。结果:两次免疫后，所有配伍RFH01的疫苗组阳转率均达到100%，且血清抗体效价几何平均滴度(geometric mean titer，GMT)显著高于不含佐剂的疫苗组。配伍RFH01佐剂的单价流感病毒疫苗和四价流感病毒亚单位疫苗组与不配伍RFH01佐剂的单价流感病毒疫苗和四价流感病毒亚单位疫苗组小鼠血清效价差异有统计学意义。两次免疫后，10周龄小鼠血清H1N1、H3N2、B/Victoria和B/Yamagata抗体GMT明显高于10月龄小鼠。结论:单价流感病毒疫苗和四价流感病毒亚单位疫苗配伍RFH01佐剂在青年(6~10周龄)和老年(10月龄)小鼠中抗体效价均显著提高，具有良好的免疫原性。

目的:探讨胆囊息肉的手术适应证。方法:采用回顾性病例对照研究方法。收集2015年1月至2019年12月11家医疗中心收治的2 272例(西安交通大学第一附属医院585例、陕西省核工业215医院352例、咸阳市第一人民医院332例、陕西省人民医院233例、西安交通大学第二附属医院152例、延安大学附属咸阳医院138例、宝鸡市人民医院137例、汉中市中心医院125例、宝鸡市中心医院95例、安康市中心医院72例、榆林市第二医院51例)行手术治疗胆囊息肉患者的临床病理资料；男887例，女1 385例；年龄为(48±12)岁，年龄范围为12～86岁。观察指标：(1)手术治疗、病理学检查及住院情况。(2)随访及并发症情况。(3)非肿瘤性息肉与肿瘤性息肉患者临床病理资料比较。(4)无胆囊结石且胆囊息肉直径为7～9 mm、10～12 mm、≥13 mm患者临床病理资料比较。(5)无胆囊结石且胆囊息肉直径为10～12 mm患者发生肿瘤性息肉的影响因素分析。(6)无胆囊结石且胆囊息肉直径为10～12 mm患者肿瘤性息肉列线图预测模型构建及评估。采用门诊或电话方式进行随访，了解患者术后并发症及生存状况。随访时间截至2020年4月。正态分布的计量资料以 ± s表示，组间比较采用 t检验。偏态分布的计量资料以 M(范围)表示，组间比较采用秩和检验。等级资料采用多样本秩和检验。剔除CEA、CA19-9缺失数据后进行发生肿瘤性息肉的影响因素分析。单因素分析采用 χ2检验或多样本秩和检验，多因素分析采用Logistic回归模型。经Logistic回归模型多因素分析后，应用R 3.6.0 version软件构建列线图预测模型。 结果:(1)手术治疗、病理学检查及住院情况：2 272例患者中，行腹腔镜胆囊切除术2 199例、开腹胆囊切除术43例、胆囊癌根治术28例、腹腔镜保胆取息肉术2例，术中行快速冷冻切片病理学检查1 050例。2 272例患者中，术后病理学检查为非肿瘤性息肉1 953例(胆固醇性息肉1 681例、炎症性息肉272例)；肿瘤性息肉319例，其中良性息肉274例(腺瘤93例、腺肌瘤66例、腺瘤样增生81例、腺瘤合并上皮内瘤变34例)，恶性息肉45例(腺癌43例、腺鳞癌1例、肉瘤样癌1例)。2 272例患者术后住院时间为3 d(1～27 d)。(2)随访及并发症情况：2 272例患者中，1 932例获得随访，随访时间为3.5～63.5个月，中位随访时间为31.0个月。随访期间，发生短期并发症患者180例，发生长期并发症患者170例。(3)非肿瘤性息肉与肿瘤性息肉患者临床病理资料比较。1 953例非肿瘤性息肉患者年龄(≤50岁、>50岁)，第一次发现息肉至手术时间(<1年、1～3年、>3年且≤5年、>5年)，癌胚抗原(CEA)，CA19-9，CA125，术前B超检查息肉数目(单发、多发)，术前B超检查息肉直径(1～6 mm、7～9 mm、10～12 mm、≥13 mm)，术前B超检查息肉附壁情况(带蒂、宽基底)，术前B超检查息肉形态(结节状、乳头状、球状、桑葚状)，术中快速冷冻切片病理学检查(有、无)，术后病理学检查息肉直径(1～6 mm、7～9 mm、10～12 mm、≥13 mm)，术后病理学检查胆囊壁厚度(≤4 mm、>4 mm)分别为1 118、835例，1 027、422、230、274例，2.0 mg/L(0.2～8.6 mg/L)，14.5 U/mL(2.6～116.4 U/mL)，10.5 U/mL(1.2～58.7 U/mL)，658、1 295例，674、741、413、125例，1 389、564例，407、1 119、292、135例，832、1 121例，698、774、385、96例，1 719、234例；319例肿瘤性息肉患者上述指标分别为160、159例，204、55、26、34例，2.9 mg/L(0.2～28.8 mg/L)，19.7 U/mL(3.5～437.1 U/mL)，15.0 U/mL(1.0～945.0 U/mL)，203、116例，49、59、100、111例，154、165例，92、153、49、25例，218、101例，53、85、90、91例，263、56例；非肿瘤性息肉与肿瘤性息肉患者上述指标比较，差异均有统计学意义( χ2＝5.599， Z＝-3.668，-2.407，-3.023，-3.403, χ2＝104.474， Z＝-13.367, χ2＝65.676，12.622，73.075， Z＝-11.874, χ2＝7.649， P<0.05)。(4)无胆囊结石且胆囊息肉直径为7～9 mm、10～12 mm、≥13 mm患者临床病理资料比较。2 272例患者中，剔除合并胆囊结石311例后，胆囊息肉直径为7～9 mm 706例，直径为10～12 mm 459例，直径为≥13 mm 205例。706例胆囊息肉直径为7～9 mm患者第一次发现息肉至手术时间(<1年、1～3年、>3年且≤5年、>5年)，CEA，CA19-9，术前B超检查息肉数目(单发、多发)，术前B超检查息肉附壁情况(带蒂、宽基底)，术前B超检查息肉形态(结节状、乳头状、球状、桑葚状)，术前B超检查息肉回声强度(略强、中等、弱)，术中快速冷冻切片病理学检查(有、无)，息肉病理学类型(非肿瘤性息肉、良性息肉、恶性息肉)分别为291、170、107、138例，2.2 mg/L(0.5～8.6 mg/L)，21.0 U/mL(2.8～116.4 U/mL)，207、499例，620、86例，118、463、75、50例，252、410、44例，379、327例，657、49、0例；459例胆囊息肉直径为10～12 mm患者上述指标分别为267、85、43、64例，1.6 mg/L(0.4～9.3 mg/L)，10.4 U/mL(3.3～354.0 U/mL)，205、254例，237、222例，158、223、51、27例，222、213、24例，263、196例，373、79、7例；205例胆囊息肉直径≥13 mm患者上述指标分别为128、38、20、19例，2.1 mg/L(0.6～28.8 mg/L)，10.2 U/mL(3.6～307.0 U/mL)，120、85例，75、130例，68、97、22、18例，98、95、12例，148、57例，113、71、21例；胆囊息肉直径为7～9 mm、10～12 mm、≥13 mm患者上述指标比较，差异均有统计学意义( χ2＝46.482，8.093，39.504，66.971，277.043，60.945，19.672，22.340，197.854， P<0.05)。(5)无胆囊结石且胆囊息肉直径为10～12 mm患者发生肿瘤性息肉的影响因素分析：459例无胆囊结石且胆囊息肉直径为10～12 mm患者中，非肿瘤性息肉373例，肿瘤性息肉86例。单因素分析结果显示：CEA、CA19-9、术前B超检查息肉数目、术前B超检查息肉直径、术前B超检查息肉附壁情况是影响无胆囊结石且胆囊息肉直径为10～12 mm患者发生肿瘤性息肉的相关因素( χ2＝10.342，5.616，20.009， Z＝-4.352, χ2＝6.203， P<0.05)。多因素分析结果显示：CEA>5.0 mg/L、CA19-9>39.0 U/mL、术前B超检查息肉数目单发、术前B超检查息肉直径为11mm、术前B超检查息肉附壁为宽基底是影响无胆囊结石且胆囊息肉直径为10～12 mm患者发生肿瘤性息肉的独立危险因素(优势比＝8.423，0.082，0.337，3.694，2.318，95%可信区间为1.547～45.843，0.015～0.443，0.198～0.575，1.987～6.866，1.372～3.916， P<0.05)。(6)无胆囊结石且胆囊息肉直径为10～12 mm患者肿瘤性息肉列线图预测模型构建及评估：将CEA、CA19-9、术前B超检查息肉数目、术前B超检查息肉直径、术前B超检查息肉附壁情况导入R 3.6.0 version软件建立肿瘤性息肉列线图预测模型，其结果显示：CEA>5.0 mg/L，CA19-9>39.0 U/mL，术前B超检查息肉数目单发，术前B超检查息肉直径为10 mm、息肉直径为11 mm、息肉直径为12 mm，术前B超检查息肉附壁为宽基底列线图评分分别为25、27、100、0、26、72、98分；列线图预测模型C-index为0.768。列线图预测结果显示：直径为10、11、12 mm胆囊息肉，多发、带蒂、CEA≤5.0 mg/L和CA19-9≤39.0 U/mL的患者，肿瘤性息肉发生率分别为0、6%、10%；直径为10、11、12 mm胆囊息肉，单发、宽基底息肉患者，肿瘤性息肉发生率分别为43%、53%、70%。校准图曲线显示：列线图预测模型预测肿瘤性息肉的发生率和实际发生率较为一致。 结论:CEA>5.0 mg/L、CA19-9>39.0 U/mL、术前B超检查息肉数目单发、术前B超检查息肉直径为11 mm、术前B超检查息肉附壁为宽基底是影响无胆囊结石且胆囊息肉直径为10～12 mm患者发生肿瘤性息肉的独立危险因素。对于直径为10、11、12 mm，单发和宽基底胆囊息肉患者，应及时行胆囊切除术。

目的:探讨建立肝细胞癌索拉非尼耐药细胞株鸡胚种植瘤模型的可行性。方法:采用药物连续诱导法，构建肝癌索拉非尼耐药细胞株；利用鸡胚动物模型，建立索拉非尼耐药细胞株的移植瘤；初步探讨耐药细胞株鸡胚种植瘤模型成瘤特点，分析相关靶点和信号通路的表达。采用 t检验。 结果:筛选到索拉非尼耐药的HepG2细胞(sHepG2)半数抑制浓度(IC 50)为(88.7±7.6) μmol/ml，显著高于HepG2( t＝16.416， P<0.01)；建立HepG2与sHepG2细胞株鸡胚种植瘤模型各5例，成功种植成瘤率为70%[(3+4)/(5+5)]；种植瘤肿瘤鲜重HepG2组[(0.093 2±0.012 2) g]低于sHepG2组[(0.141 1±0.019 4) g， t＝3.709， P<0.05]；成瘤组织蛋白质印迹法(Western blot)检测，sHepG2组磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)( t＝9.336， P<0.01)、磷酸化蛋白激酶(p-Akt/p-PKB)( t＝7.123， P<0.01)表达显著高于HepG2组，人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)( t＝6.164， P<0.01)、成纤维细胞生长因子受体1 (FGFR1)( t＝6.297， P<0.01)表达显著低于HepG2组。 结论:体外建立索拉非尼诱导的HepG2耐药细胞株，并在鸡胚移植瘤动物模型中成瘤，移植瘤生长以及瘤组织相关靶点与信号通路的差异性表明，鸡胚种植瘤模型可作为肝细胞癌索拉非尼耐药的在体研究方法。

本研究对三种人用狂犬病疫苗进行了综合评价和比较。系统搜索了七个电子数据库。使用Cochrane手册v5.1.0评估偏倚风险。个体发病率采用随机效应模型进行整合，成对比较采用网络荟萃分析。共收录了27篇文章，共有18 630名参与者。HDCV总不良反应的合并发生率显著低于PCECV。HDCV导致局部疼痛、发热和乏力的发生率低于PVRV。HDCV引起局部疼痛和发热的发生率低于PCECV。在第7天的血清转化率或第14天的狂犬病病毒中和抗体滴度方面没有观察到显著差异。与其他两种狂犬病疫苗相比，HDCV在安全性方面表现出优势，但在免疫原性方面没有观察到相同的情况。

目的:在乙型肝炎病毒(HBV)阳性肝癌鸡胚移植模型中,探讨一氧化氮供体JS-K对肿瘤细胞生长的影响.方法:将HBV阳性肝癌细胞HepG2.2.15接种于9日龄受精鸡胚中,按照处理方式不同分为5组:阴性对照组,JS-K低、中、高剂量组(1、5、10 μg/个),索拉非尼(Sora)组(400μg/个),每组各3只.2 d后按分组给药,给药采用直接滴加于移植瘤上的方式,1次/d,连续8 d.实验结束后取出鸡胚移植瘤,观察各组移植瘤大小,拍照并称重,采用HE染色法观察各组JS-K对肿瘤细胞的影响;采用免疫印迹法检测肿瘤组织中迁移相关蛋白Vimentin及N-Cadherin的表达情况.结果:与对照组相比,不同剂量JS-K作用后,鸡胚移植瘤体积均明显减小,其中JS-K高剂量组肿瘤体积最小(P＜0.05);HE染色可见JS-K作用后瘤细胞数量明显减少;JS-K低剂量组鸡胚移植瘤波形蛋白Vimentin表达水平高于其他组,N-cadherin表达水平低于其他组(P＜0.05).结论:JS-K对HBV阳性肝癌鸡胚移植瘤具有抑瘤作用,该效应可能与抑制鸡胚移植瘤细胞迁移有关.

目的:通过1％卫可消毒剂对正压防护头罩上犬流感病毒(canine influenza virus,CIV)的消毒效果试验,确立正压防护头罩的消毒效果评价方法.方法:依照《消毒技术规范》(2002版),结合1％卫可消毒剂特性选定中和剂,通过测定不同样品接种犬肾细胞后的半数组织培养感染剂量(TCID50)验证中和剂的有效性;在同一环境下,通过测定CIV在正压防护头罩上作用不同时间的TCID50验证病毒载体及环境对病毒活性的影响;通过建立病毒载体模型及病毒浸染与采样方法,结合病毒回收率测定结果(实时定量聚合酶链式反应法和酶联免疫吸附测定法)及病毒滴度测定结果[TCID50及鸡胚半数感染量(EID50)]确定最佳消毒时间.结果:0.1％卵磷脂+2％吐温80+0.5％硫代硫酸钠磷酸缓冲盐溶液可作为1％卫可消毒剂的中和剂;在不同时间节点,实验载体及环境均对CIV活性无影响;接种犬肾细胞样本及鸡胚样本平均回收率分别为96.12％和95.98％,1％卫可消毒剂灭活正压防护头罩上CIV的最佳作用时间为4 min.结论:该研究提出的正压防护头罩消毒效果评价方法有效,可为正压防护头罩确立最佳消毒条件.

目的 探讨虫草菌丝中的3种活性成分(虫草素、腺苷、麦角甾醇)对血管新生和肝内皮细胞功能的影响.方法 采用鸡胚绒毛尿囊膜实验和转基因斑马鱼实验分别观察虫草素、腺苷、麦角甾醇对新生血管面积、功能血管数量及碱性磷酸酶变化的影响;MTT法测定3个化合物对人肝癌SK-HEP-1细胞的细胞毒活性;采用血管内皮生长因子(VEGF)诱导SK-HEP-1细胞增殖为模型,以索拉非尼为阳性对照药,MTT法测定3个化合物对细胞增殖的影响,Transwell法观察细胞迁移,Matrigel管腔形成实验观察细胞管腔形成情况,荧光探针法检测胞内一氧化氮(NO)的量和一氧化氮合酶(NOS)活性.结果 虫草菌丝中腺苷、麦角甾醇能够显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管新生、减少转基因斑马鱼功能血管数量,而虫草素能够促进鸡胚绒毛尿囊膜血管新生;与对照组相比,VEGF可诱导SK-HEP-1细胞增殖,促进细胞迁移和管腔形成,并可使其胞内NO水平和NOS活性显著升高;与模型组相比,虫草素、腺苷、麦角甾醇呈剂量依赖性地抑制SK-HEP-1细胞增殖,腺苷、麦角甾醇能抑制SK-HEP-1细胞迁移,3者均可不同程度地抑制SK-HEP-1细胞管腔形成,且剂量依赖性地降低胞内NO水平和NOS活性.结论 虫草菌丝中的虫草素、腺苷、麦角甾醇对SK-HEP-1细胞增殖、迁移、管腔形成有不同程度的抑制作用,其中腺苷的作用尤为明显;其机制与抑制细胞内NO水平和NOS活性有关.

目的:从粪样代谢组学角度探讨麻黄细辛附子汤对肾阳虚外感小鼠的作用机制.方法:昆明小鼠按体质量、肛温随机分为正常对照组、模型组、给药组.采用腹腔注射苯甲酸雌二醇法复制肾阳虚小鼠模型,滴鼻感染流感病毒H1N1鸡胚尿囊液建立肾阳虚小鼠外感模型,再以中药麻黄细辛附子汤干预.给药干预6d,末次给药12h后取小鼠粪便,对小鼠粪样进行HPLC-MS分析,然后使用R语言、MPP、SIMCA-P等软件对数据进行处理.结果:模型组、正常对照组和给药组小鼠代谢物有明显的差异,利用Metpa数据平台分析发现并鉴定了5个潜在的生物标志物,分别为犬尿氨酸、酮戊二酸等,这些生物标志物主要涉及色氨酸代谢、柠檬酸代谢等5条代谢通路.结论:与正常对照组相比,模型组小鼠内源性物质犬尿氨酸和酮戊二酸等含量发生明显变化.麻黄细辛附子汤给药作用后,代谢通路发生逆转并趋于正常状态,说明麻黄细辛附子汤可能从改善氨基酸代谢和能量代谢等方面发挥作用.

寨卡病毒(ZIKV)属于黄病毒科黄病毒属的一员,是一种以蚊虫为主要传播媒介的RNA病毒,可通过母婴传播、血液传播以及性传播等途径传播.寨卡病毒感染人体后一般引起较轻的临床症状,但也可引起吉兰-巴雷综合征和新生儿小头畸形.目前还没有针对性的疫苗和药物可用于寨卡病毒病的防治,因此迫切需要建立合适的实验模型用于寨卡病毒致病机制的研究和防治措施的研发.本文主要对目前研究已构建的寨卡病毒感染动物模型进行综合整理,对比这些模型的特征,为进一步研究寨卡病毒感染、致病机制及疫苗和药物的制备等提供依据.

目的 探讨高良姜素体内、体外对肿瘤血管生成的影响.方法 采用磺酰罗丹明B(SRB)法测定高良姜素对人微血管内皮细胞(EaHy926)增殖的影响;细胞划痕实验检测其对EaHy926迁移能力的影响;观察其对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型体内血管生成的影响.实验分为对照组(高良姜素0 μg)、高良姜素药物组(1、5和10 μg);采用H22细胞株建立裸鼠肝癌种植瘤模型,模型小鼠分成5组,阴性对照组,高良姜素低、中、高剂量组小鼠按照10、20和40 mg/(kg·d)分别灌胃给药,阳性对照组环磷酰胺按20 mg/(kg·d)腹腔注射,连续15 d;免疫组化法分析肿瘤组织中微血管密度(MVD),观察高良姜素裸鼠对肿瘤生长及肿瘤血管形成的影响.结果 不同浓度的高良姜素对EaHy926细胞生长、迁移能力及体外Matrigel小管的形成均有抑制作用,且抑制作用随药物浓度递增而增强;高良姜素5和10 μg组对CAM血管形成均呈现较强的抑制作用(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,高良姜素20和40 mg/(kg·d)剂量组和环磷酰胺组能显著降低肿瘤瘤重(P<0.05),其抑瘤率分别为34.17%,79.73%,55.71%;同时,高良姜素20和40 mg/(kg·d)剂量组能显著降低肿瘤组织中MVD(P<0.05).结论 高良姜素体内体外都具有抑制肿瘤血管生成的作用.