目的:采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q-TOF-MS)分析二冬汤基准样品(冻干粉)中的化学成分.方法:采用 GL Sciences Inertsil ODS-3(100 mm×2.1 mm,1.8 μm)色谱柱,以 0.2%甲酸-0.05 mol/L甲酸铵水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速 0.4 mL/min,柱温 30℃,检测波长 254 nm,进样量 1 μL,在正、负离子模式下进行质谱扫描.结果:通过对照品比对,结合文献报道,共鉴定 25 个成分,包括 15 个黄酮类、8 个生物碱类、2 个皂苷类,并对各成分进行药物归属指认,均来源于黄芩、知母、荷叶、甘草 4 味药材.结论:该实验建立的定性分析方法可系统、快速地检测二冬汤基准样品中的化学成分,可为该经典名方的复方颗粒剂的研发及质量控制体系的建立提供依据.

目的 探讨黄芩汤颗粒剂联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎(UC)的临床疗效及对患者血清炎症因子的影响.方法 选择2016年2月至2017年4月该院收治的126例UC患者,按照随机数字表法分为治疗组与对照组,每组63例.治疗组采取黄芩汤颗粒剂联合美沙拉嗪治疗,对照组单用美沙拉嗪治疗,连续治疗2个月后对两组进行疗效评价,于治疗前后比较两组患者的中医证候积分、纤维结肠镜检积分,并于治疗前后抽取患者的外周静脉血,检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10及肿瘤坏死因子(T N F)-α水平.结果 经治疗2个月后,治疗组总有效率达96.83%,高于对照组的80.95%(P<0.05).经治疗后两组腹痛、腹泻、黏液脓血便、里急后重积分与总积分均有显著降低(P<0.01),治疗组各项中医证候积分及总积分降低比对照组更明显(P<0.01).经治疗2个月后两组纤维结肠镜检积分均有显著下降(P<0.01),治疗组的纤维结肠镜检积分比对照组降低更明显(P<0.01).治疗后两组血清IL-1β、IL-6、T N F-α水平均有明显降低,IL-10水平显著升高(P<0.01),治疗组以上血清指标比对照组改善更显著(P<0.01).结论 对UC患者采用黄芩汤颗粒剂联合美沙拉嗪治疗后可取得显著疗效,患者机体内炎性反应可得到缓解,有利于促进肠黏膜的恢复.

笔者运用中医经典方剂辨治水痘2例,实录如下.1 柴胡桂枝汤、五苓散合麻黄附子细辛汤褚某,女,26岁.2015年11月16日初诊.患者3天前无明显诱因出现发热,体温最高38.8℃,1天前身出现水疱,伴有瘙痒,口服疏风解毒胶囊、双黄连口服液效果不显来诊.现体温37.5℃,偶有头痛,口干多饮,时冷时热,小便黄,乏力,纳呆,汗出,咽痛,大便不成形.躯干、四肢可见散在绿豆大小红斑、水疱,水疱周围有红晕.血常规:单核细胞比率9.74％,单核细胞0.47×109/L.舌淡红、苔薄白,脉沉.辨证属太阳少阳证,方用柴胡桂枝汤合五苓散加减:桂枝、白芍、黄芩、炒莱菔子各12g,柴胡15g,茯苓、猪苓、泽泻各9g,生白术6g.4剂.颗粒剂,日1剂,水冲服.配合炉甘石洗剂外用.2015年11月20日二诊:无新发水疱,原水疱部分结痂,无瘙痒,体温36.8℃,疲乏,口干,纳差,偶有咳嗽,有痰色白,难排出,舌淡、苔薄白,左脉沉、右脉弦.证属阳虚水饮,方用麻黄附子细辛汤加减:麻黄3g,制附子、泽泻各6g,细辛2g,干姜、五味子各1g,炒莱菔子、僵蚕、炒苍术各12g,蝉蜕9g.3剂.服法同上.药后水疱完全结痂,诸证消失,遂停药.

目的 研究五倍子等10种中药颗粒剂对耐碳青霉烯类肠杆菌(CRE)体外抑菌作用.方法 收集2017年5月～2018年7月北京市第一中西医结合医院检验科细菌室低温保存的CRE菌株20株.选用肉汤稀释法,检测10种中药颗粒剂对CRE最低抑菌浓度(MIC),分析检测10种中药颗粒剂对CRE体外抑菌活性.结果 五倍子、黄连对CRE有一定的抑菌作用,MIC值分别为125、500 mg/mL,大黄、黄芩、金银花、蒲公英、黄柏、苍术、板蓝根、鱼腥草均未表现出抑菌作用.中药作用前后临床常用抗菌药物MIC值无变化,未表现出中药逆转耐药作用.结论 五倍子、黄连对CRE有抑菌效果,具有开发前景.

目的 研究制备了一种用于脱除小柴胡汤复方制剂(小柴胡颗粒剂及小柴胡水煎剂)中重金属的高效环保复合仿生材料.方法 使用SEM、TEM、FT-IR及XRD技术对仿生材料的形貌进行表征,再结合ICP-MS与HPLC技术验证该仿生材料对不同类型重金属的脱除效率、对药效成分的影响程度等.结果 该仿生材料在水煎剂及颗粒剂中重金属Cd,Hg,Pb的脱除率分别为:98.66％,98.37％,99.87％与99.87％,98.41％,99.92％,且药效成分黄芩苷含量减少仅为4.80％与7.38％.结论 该复合仿生材料可用于脱除小柴胡汤复方制剂中的重金属镉、铅和汞,且有效成分的损失率较低,为脱除水煎剂和颗粒剂中的重金属提供一定的理论和技术支持,并为安全使用中药材制剂提供了便捷且可靠的方法.

目的 采用网络药理学和体外实验探讨小柴胡汤扶正祛邪的核心配伍"柴胡-黄芩-人参"治疗流行性感冒的作用靶点及信号通路.方法 筛选"柴胡-黄芩-人参"有效成分并对应靶点基因,并检索流感疾病靶点.应用Cytoscape3.6.1软件构建"柴胡-黄芩-人参"-流感-靶点-通路网络,筛选核心靶点基因,进行GO功能和KEGG富集分析.根据网络药理学结果,基于自噬途径以甲型H1N1流感病毒感染的狗肾(MDCK)细胞为研究对象,以柴胡-黄芩-人参和自噬抑制剂3-MA为干预药物,孵育12 h后,用Westernblot法检测自噬标志蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ及自噬降解底物P62的表达量.结果 预测获得"柴胡-黄芩-人参"治疗流感的靶点102个,其主要活性成分有豆甾醇、β-谷甾醇、二甲氧基黄酮、千层纸甲素A、黄芩新素、荠苎黄酮、汉黄芩素等,其核心基因为AKT1、IL6、VEGFA、TNF、TP53、JUN、CXCL8等54个,涉及生物过程及相关代谢通路多与炎症反应、各种代谢、免疫反应、细胞死亡等相关.根据以上网药预测结果及相关文献,筛选自噬途径进行细胞生物学层面的实验验证,结果显示,甲型H1N1病毒感染组与空白对照组相比,LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P＜0.01)."柴胡-黄芩-人参"颗粒剂与病毒感染组相比,有下调LC3-Ⅱ蛋白表达的作用(P＜0.01),并上调 自噬降解底物P62蛋白的表达(P＜0.05).结论 小柴胡汤扶正祛邪的核心配伍"柴胡-黄芩-人参"对流感病毒抑制(如干预病毒吸附)和宿主因素调节(如免疫应答、活性氧调节、细胞死亡、各种代谢等)两方面都发挥着抗流感的作用,尤以调节宿主内环境的稳态(如自噬)为主,并通过体外实验初步验证,"柴胡-黄芩-人参"可能是通过调节AKT抑制甲型H1N1流感病毒诱导的细胞自噬,从而调控甲型H1N1流感病毒的致病作用,这也正与其体现的"扶正祛邪"治法高度吻合.

目的 比较不同制备方式的柴胡—黄芩药对对甲型H1 N1流感病毒的体外抑制作用,进而筛选出最适制备方式并基于自噬途径探讨其潜在作用机制.方法 以中药复方体外实验的三种常用方式制备柴胡—黄芩水提醇沉提取液、颗粒剂及含药血清,运用AlamarBlu?细胞毒性检测和神经氨酸酶活性检测法观察不同制备方式的抗病毒药效,并用非线性回归法计算不同制备方式的柴胡—黄芩药对对狗肾细胞株(Madin-Darby canine kidney,MDCK)的半数细胞毒性浓度(concentration of cytotoxicity 50％,CC50)、半数有效浓度(concentration for 50％of maximal effect,EC50)及选择性指数(selectirity index,SI)筛选出最适制备方式,并进一步采用免疫蛋白印记法检测自噬相关蛋白并探讨其对流感所致自噬的影响.结果 柴胡—黄芩颗粒剂在0～1.56 mg/mL的浓度范围内对MDCK细胞的正常生长没有影响,存活率大于97％,且在此无毒范围内对甲型流感病毒神经氨酸酶活性具有一定的抑制作用,EC50为2.597 mg/mL,抗病毒选择指数为2.小鼠血清使细胞活力更强,细胞存活率高于100％,并与病毒感染组相比,对神经氨酸酶活性具有显著抑制作用(P<0.01).免疫蛋白印记结果显示,与正常组相比,病毒感染组自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、beclin-1表达水平显著升高(P<0.01、P<0.05),p-mTOR蛋白表达水平显著下降(P<0.01).与病毒感染组相比,柴胡—黄芩颗粒剂可以下调LC3-Ⅱ、beclin-1并上调p-mTOR蛋白表达水平(P<0.05、P>0.05、P<0.01).结论 柴胡—黄芩药对在一定浓度下具有抗病毒作用,其体外抑制作用最适制备方式为柴胡—黄芩颗粒剂,其机制可能为通过调节宿主细胞自噬而发挥抗病毒的作用.