目的 基于乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)诱导表达系统制备呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial vi-rus,RSV)口服疫苗,并对其免疫原性进行分析.方法 将构建的质粒pUC57-Pre F与pNZ8149分别经Nco Ⅰ和Kpn Ⅰ双酶切,酶切产物经T4 DNA连接酶连接后获得重组质粒pNZ8149-Pre F,电转化至感受态L.lactis NZ3900,经乳糖培养基筛选获得非分泌型重组L.lactis NZ3900/pNZ8149-Pre F,以nisin A为诱导剂诱导表达,经Western blot和免疫荧光标记对其表达产物进行分析;将雌性BALB/c小鼠随机分为PBS、L.lactis NZ3900/pNZ8149、L.lactis NZ3900/pNZ8149-Pre F组,15只/组,每只口服500 μL,于第1、2天进行初次免疫,第16、17天进行加强免疫,第14和28天经小鼠下颌取血并分离脾脏细胞,ELSIA法检测重组L.lactis NZ3900/pNZ8149-Pre F诱导的体液和黏膜免疫应答水平,ELISpot法检测重组L.lactis NZ3900/pNZ8149-Pre F诱导的细胞免疫应答水平.结果 重组L.lactis NZ3900/pNZ8149-Pre F经PCR及测序鉴定,证明构建正确;抗原蛋白Pre F特异性地表达在L.lactis NZ3900中,相对分子质量约 50 000;初次免疫后第 14 和 28天,与 PBS 和L.lactis NZ3900/pNZ8149组相比,L.lactis NZ3900/pNZ8149-Pre F组小鼠血清Pre F-特异性IgG抗体效价、肠洗液中特异性分泌型IgA抗体以及脾脏细胞中IFNγ和IL-4分泌水平均明显升高,且差异均有统计学意义(t=-30.268～-3.087,P均＜0.05).结论 基于L.lactis诱导表达系统构建的RSV 口服疫苗具有较强的免疫原性,为研发RSV黏膜疫苗提供了参考,也为开发其他病毒或细菌口服疫苗提供了新的研究策略及方法.

目的 评价低浓度异丙醇与常规消毒剂对口腔治疗所致污染物表的清洁消毒效果.方法 使用灭菌蒸馏水(阳性对照组)、75％乙醇溶液(乙醇组)、500 mg/L含氯消毒液(500 mg/L含氯组)、1 000 mg/L含氯消毒液(1 000 mg/L含氯组)、季铵盐化合物消毒湿巾(QACs组)、17.2％异丙醇+0.28％苄索氯铵消毒液(IACs组)对12例男性患者洁治过程中污染的玻璃标本进行清洁消毒.采用压印法在血琼脂平板培养基培养消毒标本表面残留微生物并计数.使用x2分割法检验不同消毒剂的清洁效果差异;使用单因素方差分析检验不同消毒剂的消毒效果.结果 QACs组和IACs组标本表面未见有血液、黏液或其他可见污染物的残留,与其他4组差异有统计学意义(P＜0.05);乙醇组(4/12)标本表面可见污染物残留率低于阳性对照组(9/12)、500 mg/L含氯组(9/12)及1 000 mg/L含氯组(7/12)3组,差异有统计学意义(P＜0.05);500 mg/L含氯组和1 000 mg/L含氯组可见污染物残留率与阳性对照组差异无统计学意义(P＞0.05).QACs组(0.05±0.01)和IACs组(0.04±0.01)物表菌落总数(TSC)差异无统计学意义(P＞0.05),而这2组TSC均小于500 mg/L含氯组(21.88±2.79)、乙醇组(8.21±1.08)及 1 000 mg/L 含氯组(2.96±0.82),差异有统计学意义(P＜0.05);500 mg/L含氯组、乙醇组及1 000 mg/L含氯组3组TSC依次减少,且差异有统计学意义(P＜0.05).结论 QACs和IACs消毒剂对口腔治疗过程中的污染物表具有良好的清洁消毒效果.

目的 构建一种耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)多黏菌素B的快速药敏试验方法,为临床抗生素的选择和精准调整提供依据.方法 采用WHONET 5.6软件对分离自西安市第一医院2023年3月至2024年3月的108株CRE菌株信息进行筛选,以肉汤稀释法为参比方法,采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)进行多黏菌素B快速药敏测定.结果 108株CRE分离株以肺炎克雷伯菌为主(48.14％),其次是产气肠杆菌和奇异变形杆菌(各占13.89％).标本来源以痰液为主(65.74％),其次尿液(18.52％)和血液(8.33％).临床科室分布以神经外科为主(48.15％),其次为重症医学科(18.52％)和呼吸内科(14.81％).CRE分离株对大部分药物呈现高度耐药,对常见β内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类、β内酰胺复合药物耐药率分别超过70％,80％,50％和75％.与肉汤稀释法相比,MALDI-TOF-MS法测定CRE对多黏菌素B药敏结果的分类一致率(CA)为98.1％,重大误差(ME)为1.85％,未出现非常重大误差(VME),均在可允许范围之内.结论 本院分离的CRE对多种抗菌药物广泛耐药,基于MALDI-TOF-MS的快速药敏试验方法准确可靠,可用来评价CRE对多黏菌素B的敏感性,便于临床及时调整泛耐药细菌治疗方案.

目的 了解浙江省杭州市零售食品中小肠结肠炎耶尔森菌的污染程度及其药物敏感性现状.方法 收集2019年、2021年及2022年杭州市各区、县零售的不同种类食品,对小肠结肠炎耶尔森菌进行分离纯化鉴定和毒力基因检测,采用微量肉汤稀释法对分纯的菌株进行药物敏感性测定,分析其耐药特征及耐药谱.结果 共采集到不同零售食品样本460份,134份分离鉴定出小肠结肠炎耶尔森菌,检出率为29.13％,其中禽肉及其制品检出率为41.00％,畜肉及其制品检出率为37.43％.所有菌株均缺失ystA、ail、virF和yadA毒力基因,但131株菌(97.76％)携带ystB基因.药敏分析结果显示,分离株对14种抗生素有不同程度的耐药,其中对头孢唑林耐药率最高(98.51％),其次是氨苄西林(45.52％)、萘啶酸(23.88％)和头孢西丁(12.69％),对其他10种抗生素耐药率为0.75％～5.00％,其中发现2株分离株对多黏菌素B耐药.多重耐药菌占23.88％,其中4重及以上耐药菌占9.70％,耐药谱分散,无明显聚集现象,最高可耐受7种抗生素(1株).组内分析发现,2022年的菌株对氨苄西林及头孢西丁的敏感率显著高于2021年.结论 杭州市零售食品中小肠结肠炎耶尔森菌污染率较高,尤其是禽畜肉制品,分离株均为非致病性的,ystB基因携带率高;小肠结肠炎耶尔森菌对多黏菌素出现耐药,需加强对各类食品中小肠结肠炎耶尔森菌及其耐药特征的监测.

目的 调查广东省深圳市海滨旅游区大鹏新区海水及市售海产品中溶藻弧菌污染状况,对溶藻弧菌环境分离株的毒力基因分布特征及耐药性进行分析,为溶藻弧菌感染防控提供数据支持.方法 2021年1月至2022年12月,每季度采集1次大鹏新区近岸海水及市售海产品样本,分离鉴定出溶藻弧菌,用肉汤稀释法测定其对17种抗生素的耐药性;采用聚合酶链式反应方法扩增溶藻弧菌毒力相关基因tdh、trh、tlh、toxR、fur、collagenase、toxS、ureR、flaA、ompW、aspA,产物用1％的琼脂糖凝胶电泳分析.结果 采集海水样本304份,有103份检出溶藻弧菌,检出率为33.88％,不同季节海水中溶藻弧菌的检出率差异有统计学意义(x2=10.090,P＜0.05),第一、第四季度检出率比第二、第三季度要高.采集海产品139份,有108份检出溶藻弧菌,检出率为77.70％.从海水及海产品中共分离鉴定出334株溶藻弧菌,分离的溶藻弧菌对氨苄西林、黏菌素表现出较高的耐药水平,耐药率分别为85.63％、45.94％.11种毒力相关基因均有不同比例的分布.结论 深圳市大鹏新区海水及海产品中溶藻弧菌污染严重,菌株携带的毒力相关基因复杂多样,存在多重耐药,需对环境中溶藻弧菌进行长期监测,包括基因分型、毒力基因分布、耐药性、进化分析等,可为进一步研究溶藻弧菌进化规律及制定防控策略提供数据支持.

目的 通过对伏诺拉生相关研究进行文献计量及可视化分析,探析近8年该领域的研究演变历程和热点变化.方法 检索Web of Science(WOS)核心数据库收录伏诺拉生研究相关的文献,出版时间限定为2015年至2023年,利用Citespace软件对作者、引文、期刊、国家/地区、机构和关键词等进行可视化分析,并对引文采用重要性指数进行评估.结果 共纳入文献460篇,发文量呈现逐年增加的趋势,中国已成为发文量第2、中心度第3的国家,出现频次最高的关键词是"幽门螺杆菌根除",关键词聚类分析提示伏诺拉生应用于内镜下黏膜剥离术,治疗胃食管反流、幽门螺杆菌感染等酸相关性疾病是研究热点,关键词突现提示伏诺拉生序贯疗法、对肠道菌群的影响及消化性溃疡的治疗是近年来的关注点.结论 伏诺拉生已广泛应用于酸相关性疾病的治疗,近年来学者更关注其在根除幽门螺杆菌及治疗消化性溃疡方面的潜力.

目的 旨在研究茱萸丸对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成的影响及其相关机制.方法 采用高脂饲料喂养雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠诱导动脉粥样硬化模型,造模周期为12周.造模成功的47只ApoE-/-小鼠随机分成5组,即模型组10只,茱萸丸低、中、高剂量组各9只,阿托伐他汀钙组10只,以同周龄雄性C57BL/6J小鼠10只作为空白组.空白组与模型组予等体积无菌蒸馏水灌胃,茱萸丸低、中、高剂量组分别给予130.54、261.08、522.16 mg·kg-1灌胃,阿托伐他汀钙组10.40 mg·kg-1灌胃,每日1次,各组小鼠共灌胃12周.给药结束后,采用苏木精-伊红(HE)染色观测主动脉及肝脏病理变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、单核细胞趋化蛋-1(MCP-1)、血管细胞黏附分-1(VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平;生化法检测肝脏总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;超高效液相色谱-质谱联用技术(UHPLC-MS/MS)检测血浆三甲胺(TMA)、氧化三甲胺(TMAO)含量;免疫荧光法检测小鼠肝脏中二甲基苯胺单加氧酶3(FMO3)蛋白的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测肝脏FMO3、腺苷三磷酸结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、B族Ⅰ型清道夫受体(SR-B1)、ATP结合盒转运子G5抗体(ABCG5)、三磷酸腺苷结合盒转运体G8(ABCG8)和细胞色素P4507A1(CYP7A1)mRNA表达水平.结果 与空白组比较,模型组小鼠HE染色可见主动脉内膜大面积增厚,肝脏脂肪变性及炎性浸润严重;血清中ox-LDL、MCP-1、VCAM-1、ICAM-1升高;肝脏TC、TG、LDL-C升高;血浆中TMA、TMAO水平升高;以及肝脏中FMO3 mRNA与蛋白表达水平升高,ABCA1、SR-B1、ABCG5、ABCG8、CYP7A1 mRNA表达水平升高(P＜0.01).与模型组比较,茱萸丸低、中、高剂量组及阿托伐他汀钙组HE染色随着茱萸丸浓度的增加,斑块富集区域逐渐缩小,肝脏脂肪变性及炎性浸润降低;血清中ox-LDL、MCP-1、VCAM-1、ICAM-1降低;肝脏TC、TG、LDL-C降低;血浆中TMA、TMAO水平降低;以及肝脏中FMO3 mRNA与蛋白表达水平降低,ABCA1、SR-B1、ABCG5、ABCG8、CYP7A1 mRNA表达水平降低(P＜0.01或P＜0.05).结论 茱萸丸对小鼠动脉粥样硬化斑块具有较好的治疗作用,其机制可能与调节TMA/FMO3/TMAO脂代谢通路,促进胆固醇的逆向转运和分解有关.

乙二胺四乙酸(EDTA)是口腔临床中常用的一种有机化合物,因其作用温和,能够稳定螯合无机物、去除玷污层,传统中常用于根管治疗中钙化物的去除、牙周翻瓣术后的根面处理等.随着近年来现代口腔医学的发展,大量研究发现EDTA因其螯合作用可与其他药物或治疗方法联合使用,起到疗效"增强剂"的作用.本文就近年来EDTA单独或联合其他药物在口腔牙体牙髓病根管治疗中的根管消毒、牙髓再生治疗中的根管冲洗、牙周再生治疗中的根面处理、修复中的黏接面处理、外科中的抗菌作用及骨再生等应用的研究进展做一综述,旨在为进一步研究及临床使用中提供帮助.

目的 通过观察高氧戊己汤对幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染小鼠体内Hp定植、胃黏膜组织病理学损伤的改善情况以及白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)表达的影响,分析高氧戊己汤对Hp感染小鼠胃黏膜保护作用的机理.方法 将72只SPF级BalB/c小鼠随机分为空白组、模型组、戊己丸组、高氧水组、高氧戊己汤组、西药组.除空白组外,另外5组采用Hp菌液复制Hp感染模型.造模成功后,对应给药治疗2周后处死取胃组织,快速尿素酶实验检测Hp感染情况,ELISA法检测IL-6、IL-8的表达水平,瑞氏-吉姆萨染色法观察胃黏膜Hp的定植情况,HE染色法观察胃黏膜病理学损伤改善情况.结果 各治疗组的Hp转阴率明显高于模型组,高氧戊己汤组的转阴率高于戊己丸组和高氧水组;与空白组比较,模型组IL-6、IL-8的表达显著增加(P＜0.01),Hp定植评分显著增高(P＜0.01),与模型组比较,戊己丸组、高氧水组、高氧戊己汤组、西药组IL-6、IL-8的表达显著减少(P＜0.01),Hp定植评分显著降低(P＜0.01).高氧戊己汤组IL-6、IL-8的表达较戊己丸组和高氧水组有降低趋势,高氧戊己汤组Hp定植评分低于戊己丸组、高氧水组(P＜0.05).HE染色结果显示空白组小鼠胃黏膜光滑完整,未见炎症浸润,腺体排列整齐.模型组小鼠胃黏膜充血水肿,表面欠光滑,黏膜层可见淋巴细胞、中性粒细胞等炎症细胞浸润,腺体排列紊乱.戊己丸组、高氧水组、高氧戊己汤组、西药组小鼠胃黏膜炎症程度明显减轻,胃黏膜充血水肿较模型组稍改善,表面光滑,腺体整齐,可见少量炎症细胞浸润.结论 高氧戊己汤、戊己丸和高氧水可通过减少Hp在胃黏膜上的定植和减轻Hp感染所致的炎症反应来减少胃黏膜组织病理学损伤,从而有效地保护Hp感染小鼠的胃黏膜,且高氧戊己汤药效高于戊己丸和高氧水单用.

目的:探讨慢性萎缩性胃炎（CAG）患者中幽门螺杆菌（Hp）感染与炎性细胞因子及病理特征关系。方法:选取2020年1月至2021年1月大庆市第四医院收治CAG患者152例，胃镜检查收集胃黏膜病变组织标本，统计Hp感染情况，分析Hp感染与炎症细胞因子和病理特征相关性。结果:152例CAG患者中Hp感染阳性84例，阴性68例。两组间质炎细胞中IL-1以弱阳性表达为主，Hp阳性组间质炎细胞中IL-1阳性和强阳性表达率明显高于阴性组（P<0.05）。两组间质炎细胞中TNF-α均以强阳性为主、TNF-β以阳性为主，差异无统计学意义（P>0.05）。两组胃小凹上皮中IL-1以弱阳性为主、TNF-α以强阳性为主，差异无统计学意义（P>0.05）；阴性组TNF-β以强阳性为主，阳性组则以阳性为主，但差异无统计学意义（P>0.05）。阴性组中慢性炎症程度以中度为主，其次为轻度，阳性组以中度为主，其次为重度，两组差异有统计学意义（P<0.01）；两组萎缩程度、肠化生程度差异无统计学意义（P>0.05）。相关性分析显示，慢性炎症程度与CAG患者胃小凹上皮和间质炎细胞IL-1水平呈正相关（P<0.05），与TNF-α、TNF-β水平无相关性（P>0.05）；萎缩、肠化生与胃小凹上皮和间质炎细胞IL-1、TNF-α、TNF-β水平无相关性（P>0.05）。结论:IL-1在胃小凹上皮和间质炎细胞表达与Hp感染和CAG症程度相关，与萎缩和肠化生关系需进一步研究。