目的 探究血清长链非编码RNA a/β水解酶域11反义RNA1(lncRNAs ABHD11-AS1)、微小RNA-1231(miR-1231)表达与胃癌根治术后复发转移及远期预后的相关性.方法 选取2018年7月至2020年7月进行胃癌根治术治疗的147例患者(胃癌组),根据复发转移情况,将患者分为复发转移组48例和未复发转移组99例,根据3年预后情况,分为生存组40例和死亡组107例,选取同期体检的健康人员132例作为对照组,采用实时荧光定量PCR 法测定血清 1 ncRNAs ABHD11-AS1、miR-1231 表达水平,采用 Pearson 法分析血清 lncRNAs ABHDl1-AS1、miR-1231的相关性,采用Logistic回归分析影响胃癌根治术后复发转移的因素.结果 与对照组比较,胃癌组lncRNAs ABHD11-AS1表达水平显著升高(P＜0.05),miR-1231表达水平显著降低(P＜0.05).血清1 ncRNAs ABHD11-AS1和miR-1231表达呈负相关(r=-0.691,P＜0.05).复发转移组肿瘤直径＞5 cm、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、分化程度低分化、浸润深度T3+T4、有淋巴结转移的患者比例及lncRNAs ABHD11-AS1表达水平显著高于未复发转移组(P＜0.05),miR-1231 表达水平显著低于未复发转移患者,差异有统计学意义(P＜0.05).肿瘤直径、浸润深度、lncRNAs ABHD11-AS1是胃癌根治术后复发转移的独立危险因素,miR-1231是保护因素(P＜0.05).死亡组lncRNAs ABHD11-AS1表达水平显著高于生存组(P＜0.05),miR-1231水平显著低于生存组(P＜0.05).结论 胃癌患者血清中lncRNAs ABHD11-AS1表达水平升高,miR-1231表达水平降低,与胃癌根治术后复发转移及远期预后密切相关,可能作为胃癌根治术后复发转移及远期预后的标志物.

目的:探讨长链非编码RNA ABHD11-AS1（long non-coding RNA ABHD11-antisense RNA1，LncRNA ABHD11-AS1）通过调节miR-542-3p/MAP3K11对胃癌（gastric cancer，GC）细胞侵袭和迁移的影响。方法:胃癌细胞BGC-823常规培养后依次分为si-NC组、si-LncRNA ABHD11-AS1组、si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-NC inhibitor组、si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-542-3p inhibitor组、si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-542-3p inhibitor+si-con组和ABHD11-AS1+miR-542-3p inhibitor+si-MAP3K11组。预测并验证LncRNA ABHD11-AS1/miR-542-3p/MAP3K11之间的相互作用关系。qRT-PCR检测胃癌细胞中LncRNA ABHD11-AS1、miR-542-3p、MAP3K11 mRNA水平，Transwell法检测胃癌细胞迁移和侵袭能力，Western blot检测胃癌细胞中MAP3K11、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。结果:LncRNA ABHD11-AS1和miR-542-3p、miR-542-3p和MAP3K11靶向关系被验证。与si-NC组[（184.09±17.32）和（87.64±7.54）]比较，si-LncRNA ABHD11-AS1胃癌细胞的迁移和侵袭能力明显降低[（68.35±6.21）和（28.23±3.05）（ P均<0.05）]；与si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-NC inhibitor组[（75.39±7.08）和（31.26±3.15）]比较，si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-542-3p inhibitor组胃癌细胞迁移和侵袭能力升高[（138.24±12.58）和（61.23±5.86）（ P均<0.05）]；与si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-542-3p inhibitor+si-con组[（145.33±13.09）和（65.45±6.08）]比较，si-LncRNA ABHD11-AS1+miR-542-3p inhibitor+si-MAP3K11组胃癌细胞的迁移和侵袭能力明显降低[（108.36±9.87）和（145.33±13.09）（ P均<0.05）]。 结论:下调LncRNA ABHD11-AS1调控miR-542-3p/MAP3K11轴可抑制胃癌细胞迁移和侵袭。

目的:检测1例以鱼鳞病伴肝功能异常为主要临床表现的家系基因突变情况，并明确其诊断。方法:收集先证者临床资料，采集先证者及其父母外周血，提取基因组DNA，对先证者进行遗传性皮肤病目标基因外显子测序，确定突变位点，在家系中对突变位点进行Sanger测序验证，并对先证者及其父母外周血涂片等辅助检查结果进行分析。结果:先证者全身皮肤干燥，下肢可见白色细小鳞屑，伴有转氨酶升高、双耳轻度感音神经性耳聋和脂肪肝。先证者外周血基因组DNA中编码CGI-58蛋白的 ABHD5基因第6外显子存在纯合突变（c.933dupA），导致氨基酸序列发生移码突变（p.R312Tfs*45），其父亲、母亲该位点均为杂合突变，突变与疾病符合共分离。先证者外周血涂片发现中性粒细胞内含脂质空泡，即Jordan小体阳性。 结论:先证者表现为鱼鳞病样皮损和肝功能异常，结合其 ABHD5基因纯合突变和外周血涂片Jordan小体阳性，诊断为Chanarin-Dorfman综合征。

目的 构建脂肪酸分解代谢(FAC)相关基因风险评分预后模型并验证模型中基因ABHD1和PLA2G15在结直肠癌中的作用.方法FAC相关基因集来自GSEA官网.从TCGA下载结直肠癌RNA测序数据和临床信息,并对癌组织和正常组织样本进行FAC相关基因差异分析.单因素Cox回归分析筛选出与预后相关的差异基因,之后,利用LASSO回归进一步分析并筛选出目标基因建立预后模型.外部数据集(GSE39582)验证预后模型.最后采用CCK-8、集落形成和细胞周期实验验证目标基因中ABHD1和PLA2G15在结直肠癌细胞系中的作用.结果102个FAC相关基因通过差异分析、单因素Cox回归分析及LASSO回归分析,筛选出由ABHD1、ACOX1、CPT2、HADH和PLA2G15构建的风险评分预后模型.与低风险评分相比,高风险评分的预后更差.多因素Cox回归分析显示预后模型为独立的预后因素.外部数据集(GSE39582)也验证了该模型评估预后的作用.对ABHD1和PLA2G15基因进行了实验验证,结果表明ABHD1和PLA2G15在体外具有促进结直肠癌细胞增殖的作用.结论FAC相关基因风险模型具有预测结直肠癌患者预后的作用.ABHD1和PLA2G15可能对结直肠癌的生长具有一定促进作用,值得进一步研究.

1 病例资料患者,男,25 岁,因"全身多处鳞屑、皮肤发红20 余年,瘙痒7 月,加重2 月"于2020 年11 月30 日于我院就诊.

目的 探讨长链非编码RNA ABHD11-AS1对胃癌细胞糖酵解的影响及其作用的分子机制.方法 分别将空载质粒pcDNA-Vector和过表达质粒pcDNA-ABHD11-AS1转染入ABHD11-AS1低表达的MKN45和MGC803胃癌细胞中,构建过表达组(pcDNA-ABHD11-AS1)和空载质粒对照组胃癌细胞株.运用CCK-8法检测细胞的增殖活性并绘制生长曲线,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell检测细胞迁移、侵袭能力,葡萄糖摄取实验及乳酸生成实验检测细胞糖酵解水平的变化;LncMAP数据库分析查找ABHD11-AS1可能调控的转录因子,查阅文献进行分析挑选候选转录因子,Western blot明确ABHD11-AS1是否影响候选转录因子的表达量.结果 与对照组相比,转染pcDNA-ABHD11-AS1后,MGC803和MKN45胃癌细胞中ABHD11-AS1基因表达量明显上升(P<0.01),CCK8和成克隆实验表明细胞增殖加快(P<0.05),克隆形成能力增强,Tanswell实验结果证实细胞迁移(11±2vs27±3;17±4vs28±3,P<0.01)、侵袭(15±3vs26±2;10±1vs35±2,P<0.01)作用增强;上调ABHD11-AS1后,胃癌细胞葡萄糖摄取及乳酸生成增多(P<0.05).分析数据库结果显示ABHD11-AS1可能调控经典糖酵解相关基因c-Myc,Western blot结果证实上调ABHD11-AS1后,c-Myc表达量随之升高.结论 ABHD11-AS1通过上调c-Myc促进胃癌细胞内的糖酵解,并加速胃癌进展.

目的 探讨姜黄素对活化肝星状细胞内脂质水平的影响及其可能机制.方法 向C57/B6小鼠门静脉灌注链霉蛋白酶和胶原酶,采用梯度离心法分离小鼠肝星状细胞,以不同浓度(5、10、20μmol/L)姜黄素干预肝活化星状细胞和肝AML12细胞24h.油红O染色观察细胞内脂滴数量的变化;ELISA法检测细胞内甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFA)含量;RT-qPCR和Western blotting检测细胞内脂肪酸合成酶(FAS)、固醇调控元件结合蛋白(SREBP-1c)、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)和自水解酶域包含蛋白5(abhd5)等脂质代谢相关基因的mRNA及蛋白表达.结果 细胞油红O染色后,镜下可见暗红色脂滴数量随姜黄素浓度的增加而逐渐增多且呈剂量依赖性,但姜黄素对小鼠AML12肝细胞内脂滴水平无影响.采用5、10、20μmol/L姜黄素干预小鼠肝星状细胞,细胞内TG含量[分别为(1.495±0.230)nmol/mg protein、(3.758±0.717)nmol/mg protein、(4.490±0.360)nmol/mg protein]与对照组[(1.176±0.343)nmol/mgprotein]比较明显升高(P＜0.01);FFA含量[分别为(57.250±1.463)nmol/mg protein、(78.425±1.030)nmol/mg protein、(111.150±2.350)nmol/mg protein]与对照组[(28.750±2.433)nmol/mg protein]比较亦明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).此外,姜黄素明显上调了与脂质合成相关的FAS和SREBP-1c基因的mRNA和蛋白表达,下调了与脂质分解相关的ATGL和mRNA及蛋白表达(P＜0.05),但对abhd5 mRNA和蛋白的表达无明显影响(P＞0.05).结论 姜黄素能够调节肝星状细胞脂质代谢相关基因的表达,恢复活化肝星状细胞的脂滴水平,进而抑制肝星状细胞的活化进程.

目的 探讨新型吡咯类小分子化合物N67对小鼠前脂肪细胞3T3-L1的作用效果和机制.方法 培养Swiss小鼠3T3-L1细胞,设对照组,将N67以不同时间的浓度作用于3T3-L1细胞,采用MTT细胞毒性检测,求出IC50;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测相关蛋白表达.结果N67对3T3-L1细胞的生长有显著抑制作用,流式细胞术显示能诱导其凋亡,且有时间和浓度依赖性.Western blot 结果 证明其可能通过ABHD6靶点发挥作用.结论 新型小分子化合物N67可诱导3T3-L1凋亡,作用机制可能是通过抑制ABHD6表达,证明N67有可能作为新的ABHD6抑制剂.

目的 观察环状RNA含有16A的脱水酶结构域分子(circRNA ABHD16A)-微小RNA(miRNA,miR)-1237-5p-细胞凋亡相关酪氨酸激酶(AATK)轴对乳腺癌细胞密歇根癌症基金会7号细胞(MCF-7)凋亡的影响.方法 运用中国科学引文数据库(CSCD)和Target Scan在线分析分别分析ABHD16A与miR-1237-5p和miR-1237-5p与AATK的相关性.利用Luciferase assay检测circRNA ABHD16A是否靶向miR-1237-5p以及miR-1237-5p是否靶向AATK.在过表达或敲低circRNA ABHD16A的情况下,通过蛋白质印迹法(Western blot)检测AATK和乳腺癌细胞MCF-7凋亡标志蛋白表达;通过噻唑蓝(MTT)实验分析乳腺癌细胞MCF-7的细胞活力;通过磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V)染色检测乳腺癌细胞MCF-7的凋亡水平.Student's t检验分析两组单向方差分析.结果 circRNA ABHD16A靶向miR-1237-5p;miR-1237-5p靶向AATK3'UTR的320-326和469-475区域.过表达ABHD16A时,AATK的表达量明显上升(t=15.295,P＜0.01),细胞凋亡相关蛋白bcl-2拮抗剂(bak),bcl-2相关X凋亡调节因子(bax)和被切割的胱天蛋白酶9(cleaved-Cas9)的表达量明显上升(t =7.403、8.381、21.583,P＜0.01),而bcl-2细胞凋亡调节剂(bcl-2)的表达量明显下降(t =6.301,P＜0.01),MCF7细胞活力水平下降(t=17.392,P＜0.01),凋亡水平上升(t=8.491,P＜0.05).敲低ABHD16A时,AATK的表达量明显下降(t=9.290,P＜0.01),细胞凋亡相关蛋白bak、bax和cleaved-Cas9的表达量明显下降(t=8.381、5.296、11.492,P＜0.01),而bcl-2的表达量明显上升(t =5.609,P＜0.01),MCF7细胞活力水平上升(t=5.694,P＜0.01),凋亡水平下降(t=13.502,P＜0.01).结论 circRNA ABHD16A靶向miR-1237-5p后增加AATK的表达量,并促进乳腺癌细胞MCF-7凋亡.

目的:探讨lncRNA ABHD11-AS1在非小细胞肺癌中的生物学功能和作用机制.方法:选取2016年7月至2018年12月在广东医科大学附属医院行非小细胞肺癌手术的248例患者,采用χ2检验分析lncRNA ABHD11-AS1的表达与患者年龄、性别、临床病理分期、病理类型及吸烟状态的关系;采用Kaplan-Meier法分析ABHD11-AS1对非小细胞肺癌患者的预后意义;应用qRT-PCR方法检测ABHD11-AS1在非小细胞肺癌组织和细胞系中的表达;通过体外功能测定评估敲低ABHD11-AS1对细胞增殖和转移的影响;通过Western blot实验探讨ABHD11-AS1在非小细胞肺癌中致癌作用的分子机制.结果:lncRNA ABHD11-AS1高表达组较低表达组吸烟患者较少(P=0.02),分期更晚(P<0.01);ABHD11-AS1高表达预示非小细胞肺癌患者预后不良;ABHD11-AS1在非小细胞肺癌组织和癌细胞株中高表达;敲低ABHD11-AS1的表达可抑制体外细胞增殖和迁移;敲低ABHD11-AS1表达抑制STAT1和STAT3癌蛋白的表达.结论:ABHD11-AS1可能通过促进STAT1和STAT3癌蛋白的表达,从而增加非小细胞肺癌细胞的增殖、集落形成以及迁移和侵袭能力.