目的:探究miR-377-5p对食管癌细胞TE-1放射敏感性的影响及机制。方法:TE-1细胞转染miR-377-5pmimic和miR-377-5pmimic NC构建过表达miR-377-5p细胞。对转染后的TE-1细胞照射后采用平板集落形成实验检测细胞放射生物学参数(D 0、D q、SF 2)，Transwell小室法检测细胞侵袭能力，细胞划痕实验检测细胞迁移能力，CCK8法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期，免疫印迹检测AKT1和GSK-3β磷酸化水平。 结果:2、4、6、8 Gy照射的集落形成率均显著下降( P<0.05)，且在同一剂量下miR-377-5pmimic组细胞集落形成率均显著低于miR-377-5pmimic NC组( P<0.05)。相比于miR-377-5pmimic NC组，miR-377-5pmimic组D 0、D q、SF 2均显著下降( P<0.05)，放射增敏比为1.34(D 0值比)；0 Gy照射后细胞侵袭、迁移、增殖能力显著下降，细胞凋亡水平显著上升，细胞周期被阻滞于G 1期，AKT1和GSK-3β磷酸化水平显著下降( P<0.05)；4 Gy照射后细胞侵袭、迁移、增殖能力下降，细胞凋亡水平显著上升，G 1期显著延长，AKT1和GSK-3β磷酸化水平亦显著下降(均 P<0.001)。 结论:miR-377-5p能够增加食管癌细胞TE-1的放射敏感性，其机制可能是抑制AKT1/GSK-3β信号通路。

目的:探讨Ⅺ型胶原α1蛋白（COL11A1）在肺腺癌迁移和侵袭中的作用和机制。方法:采用2020年9至11月贵州医科大学附属医院收治的4例肺腺癌患者手术病理组织，经免疫组织化学方法鉴定肺腺癌组织及癌旁组织并行转录组测序，使用TCGA和GTEx数据库行单基因预后分析。用Western blot法检测肺腺癌组织和癌旁组织中COL11A1基因表达水平。提取及培养人肺腺癌原代细胞。COL11A1 siRNA转染人肺腺癌原代细胞后转录组测序，差异基因做KEGG富集分析，分析差异基因富集的通路，Western blot法检测该通路各关键位点蛋白表达及磷酸化水平变化，划痕愈合实验检测细胞迁移、CCK8法检测细胞增殖、Transwell检测侵袭能力。结果:肺腺癌组织转录测序筛选差异表达较高的10个基因，单基因预后分析发现COL11A1基因表达水平与生存率相关（ P<0.001）；Western blot法检发现COL11A1在肺腺癌组织中表达较癌旁组织高（ P<0.001）；COL11A1 siRNA转染人肺腺癌原代细胞后转录组测序发现差异基因集中在PI3K-akt通路上，Western blot检测发现抑癌基因PTEN在siRNA转染组中表达显著高于对照组和阴性转染组，而Akt、p-Akt 473、p-Akt 308、p-PTEN、p-PDK1、p-c-Raf、p-GSK-3β基因表达均显著下调（均 P<0.05），siRNA转染组相较于阴性对照组人肺腺癌原代细胞迁移、增殖、侵袭能力均降低（均 P<0.05）。 结论:COL11A1调节PI3K/Akt/GSK-3β通路促进人肺腺癌原代细胞迁移和侵袭。

目的:观察rhGLP-1（7-36）对肝细胞Akt/GSK3信号通路的影响。方法:培养人HL7702细胞系至对数生长期，将其分为实验组和空白对照组，分别用含rhGLP-1（7-36）100nM的培养基、不含rhGLP-1（7-36）的培养基培养90min。用蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测两组Akt、糖原合成酶激酶3（glycogen synthase kinase，GSK3）、糖原合酶（glycogen synthase，GS）水平。结果:与空白对照组（1.00±0.00）比，实验组p-Akt（Thr308）蛋白相对表达水平（1.81±0.28）明显增加（ P=0.01），Akt及p-Akt（Ser473）蛋白表达水平无明显变化；实验组p-GSK3α（Ser21）（1.27±0.09）、p-GSK3β（Ser9）（1.24±0.09）蛋白表达水平明显升高（ P值分别为0.003、0.002），GSK3α及GSK3β蛋白表达水平无明显变化；实验组p-GS（Ser641）蛋白表达水平（0.70±0.16）降低（ P=0.03），GS蛋白表达水平无明显变化。 结论:GLP-1可抑制GSK3/GS信号通路，激活GS活性，促进糖原合成。

目的:探讨黄芩苷对机械通气致脑损伤小鼠认知功能的影响及其机制。方法:C57BL6小鼠72只，体质量20~25 g，8~12周龄，采用随机数字表法分为对照组(C组)、机械通气组(V组)、黄芩苷组(B组)和黄芩苷+Akt抑制剂MK-2206组(BM组)，每组18只。C组小鼠不行机械通气，自主呼吸空气6 h；V组小鼠给予机械通气6 h；B组与BM组小鼠机械通气前30 min腹腔注射黄芩苷100 mg/kg，BM组小鼠机械通气前60 min脑室内注射Akt抑制剂MK-2206 300 μg/kg。每组随机选取6只小鼠分别于机械通气前1 d、机械通气后3 d和7 d时采用Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力。机械通气后1 d，每组处死6只小鼠，取脑组织，采用TUNEL法检测海马CA1区神经元凋亡情况，计算凋亡指数。于机械通气后1 d，每组处死6只小鼠，取海马，采用Western blot法检测caspase-3、caspase-9、Akt、p-Akt、GSK-3β和p-GSK-3β的蛋白表达。采用SPSS 22.0软件对数据行统计分析，多组间比较采用重复测量方差分析和单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD- t检验。 结果:Morris水迷宫结果显示，四组小鼠时间×分组交互作用不显著( F＝1.14， P>0.05)，时间主效应和组间主效应均显著( F＝47.36，59.65，均 P<0.05)。机械通气后3 d、7 d时，V组小鼠逃避潜伏期高于C组(均 P<0.05)，穿越平台次数均低于C组(均 P<0.05)；机械通气后3 d、7 d时，B组小鼠逃避潜伏期均低于V组( P<0.05)，穿越平台次数均高于V组(均 P<0.05)；BM组小鼠在机械通气后3 d，7 d逃避潜伏期均高于B组(均 P<0.05)，穿越原平台位置次数均低于B组(均 P<0.05)。TUNEL和Western blot检测结果显示，四组小鼠海马神经元凋亡指数及凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-9表达水平均差异有统计学意义( F＝51.42，41.21，40.19，均 P<0.05)。V组小鼠海马神经元凋亡指数[(40.6±3.9)%]，海马caspase-3(4.93±0.92)、caspase-9(4.81±0.88)表达水平均高于C组[(13.7±1.4)%，1.87±0.27，1.71±0.25，均 P<0.05]，B组小鼠海马神经元凋亡指数(15.6±1.6)%，海马caspase-3(1.95±0.30)、caspase-9(1.76±0.28)表达水平均低于V组[(40.6±3.9)%，(4.93±0.92)，(4.81±0.88)，均 P<0.05]，BM组小鼠海马神经元凋亡指数[(27.8±2.7)%]，海马caspase-3(3.58±0.61)、caspase-9(3.49±0.57)表达水平均高于B组[(15.6±1.6)%，1.95±0.30，1.76±0.28，均 P<0.05]。四组小鼠海马p-Akt、p-GSK-3β表达水平均差异有统计学意义( F＝37.54，43.23，均 P<0.05)。V组小鼠海马p-Akt(0.51±0.06)、p-GSK-3β(0.47±0.05)表达水平低于C组[(1.07±0.10)，(1.11±0.12)，均 P<0.05]，B组小鼠海马p-Akt(0.99±0.10)、p-GSK-3β(1.08±0.09)表达水平均高于V组(均 P<0.05)，BM组小鼠海马p-Akt(0.83±0.08)，p-GSK-3β(0.81±0.07 )表达水平均低于B组( P<0.05)。 结论:黄芩苷可改善机械通气致脑损伤小鼠认知功能，与其激活Akt/GSK3β信号通路，抑制海马神经元凋亡有关。

目的:研究磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase，PI3K)抑制剂LY294002对AKT/GSK3β/CRMP2信号通路的影响，及通路改变对大鼠抑郁样行为及微管蛋白的影响。方法:16只成年雄性SD大鼠采用盲法随机分为LY294002组及溶剂DMSO组，每组8只。麻醉后进行海马CA1区脑立体置管，置管1周后给予LY294002或DMSO脑立体注射，并进行抑郁样行为检测。采用RT-qPCR技术检测海马AKT、GSK3β、CRMP2、tubulin的mRNA表达水平，采用Western blot检测海马AKT、p-AKT、GSK3β、p-GSK3β、CRMP2、p-CRMP2以及微管动态性相关蛋白Acet-tubulin、Tyr-tubulin表达水平。比较两组大鼠抑郁样行为表现及分子表达差异。结果:旷场实验显示，LY294002组大鼠的中心移动距离较DMSO组显著下降[(3.64±2.17)cm；(31.51±12.68)cm； t＝2.69， P＝0.03]；LY294002组中心区持续时间较DMSO组亦显著下降[(0.73±0.46)s；(4.85±2.10)s； t＝2.33， P＝0.04]。强迫游泳测试结果显示LY294002组大鼠的不动时间有升高的趋势，但差异无统计学意义。糖水偏好实验显示两组大鼠糖水消耗量差异无统计学意义( P>0.05)。RT-qPCR结果显示，LY294002组大鼠海马组织CRMP2 mRNA表达水平显著下降( P<0.05)。Western blot结果显示，与DSMO组比较，LY294002组大鼠海马组织p-AKT及p-GSK3β表达水平下降( P<0.05)；CRMP2表达水平降低，p-CRMP2表达水平显著升高，同时，Tyr-tubulin表达水平下降，Acet-tubulin表达水平显著升高，两组均差异有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:LY294002通过影响AKT/GSK3β/CRMP2信号通路，导致微管动态性损害，并使大鼠出现抑郁样行为。

目的:观察TGX-221对人膀胱癌的抗肿瘤作用效果，并探究其作用机制。方法:选取人膀胱癌T24与5637细胞株作为研究对象。将T24及5637细胞分为PBS对照组、5和10 μmol/L TGX-221实验组，使用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测不同浓度的TGX-221抑制肿瘤细胞生长的半数抑制浓度(IC 50)值，并同时检测对细胞活力的影响；使用细胞划痕实验和Transwell实验检测TGX-221对肿瘤细胞侵袭、迁移能力的抑制；使用流式细胞仪检验TGX-221干预对膀胱肿瘤细胞周期与细胞凋亡的影响，利用蛋白印迹法探寻干预后膀胱肿瘤细胞磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)相关通路蛋白变化情况，研究可能的作用机制。两组之间的比较使用独立样本 t检验，多组间比较使用单因素方差分析。 结果:TGX-221处理24 h后，5637、T24细胞株的半数致死浓度分别为15、30 μmol/L，实验组细胞增殖能力低于对照组[(66.81±4.12)%、(83.41±5.06)%比(100.00±5.65)%(5637细胞)；(78.71±5.75)%、(89.34±4.75)%比(100.00±4.50)%(T24细胞)]，实验组细胞迁移率显著降低[(34.10±3.29)%、(68.74±6.32)%比(100.00±1.52)%(5637细胞)；(69.78±6.06)%、(86.03±4.98)%比(100.00±6.55)%(T24细胞)]，实验组细胞侵袭能力显著降低[(18.44±5.17)个、(30.89±3.76)个比(51.22±4.84)个(5637细胞)；(50.33±6.26)个、(75.72±5.72)个比(101.11±8.91)个(T24细胞)]，细胞周期实验表明，实验组细胞周期大量停滞于G 0及G 1期[(72.40±2.22)%、(60.96±1.95)%比(45.00±3.15)%(5637细胞)；(65.88±3.05)%、(53.61±3.17)%比(43.61±1.26)%(T24细胞)]，实验组细胞凋亡率明显升高[(15.07±1.27)%、(9.93±0.97)%比(5.77±0.61)%(5637细胞)；(16.13±0.91)%、(11.06±1.19)%比(7.91±0.65)%(T24细胞)]，蛋白印迹实验中，实验组磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、波形蛋白(Vimentin)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)等蛋白含量明显下调，B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、活化的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白含明显上调。 结论:TGX-221可以抑制人膀胱癌5637与T24细胞的增殖、侵袭及迁移能力，抑制其细胞周期，促进细胞凋亡，其抑制侵袭及迁移能力的机制与蛋白激酶B(Akt)/β-catenin信号通路有关。

目的:探讨Ang1-7、Mas受体拮抗剂A779、AngⅡ作用后，对胰岛素抵抗的大鼠卵巢颗粒细胞葡萄糖摄取及胰岛素信号通路蛋白的影响。方法:①构建大鼠卵巢颗粒细胞胰岛素抵抗模型：将颗粒细胞分为空白组和模型组，模型组细胞用地塞米松、胰岛素进行处理，检测两组细胞培养基上清液24 h内葡萄糖浓度、乳酸浓度的差值。②进一步将模型组细胞分别加入不同药物处理24 h：AngⅡ组、Ang1-7组、Ang1-7+AngⅡ组、A779组、Ang1-7+A779组，并检测药物作用后细胞培养基上清液24 h内葡萄糖浓度差值。③采用Western blotting检测空白组、模型组、各药物处理组颗粒细胞Akt、GSK-3β、AS160及其磷酸化蛋白（P-Akt、P-GSK-3β、P-AS160）以及Mas受体蛋白的表达。结果:①跟空白组相比，模型组的葡萄糖浓度差值小、乳酸浓度差值小，提示颗粒细胞胰岛素抵抗模型建立成功。②与模型组比较，Ang1-7组葡萄糖浓度差值大（5.55±0.21， P=0.002 1），AngⅡ组差值小，Ang1-7+AngⅡ组、A779组差异无统计学意义（ P>0.05），Ang1-7+A779组葡萄糖浓度差值小（4.89±0.20， P=0.010 8）。③空白组、模型组、各药物处理组颗粒细胞的Akt、GSK-3β、AS160的表达无明显差异。与模型组比较，Ang1-7组P-Akt、P-GSK-3β、P-AS160的表达增强，AngⅡ组P-Akt、P-GSK-3β、P-AS160的表达减弱。与Ang1-7组比较，Ang1-7+A779组Mas受体表达量降低。 结论:①Ang1-7作用后，胰岛素抵抗的大鼠卵巢颗粒细胞葡萄糖浓度差值增加， AngⅡ作用后与Ang1-7相反，二者相互拮抗，同时Ang1-7、AngⅡ作用后颗粒细胞胰岛素信号通路关键蛋白P-Akt、P-GSK-3β及P-AS160也出现相反变化，表明通过细胞葡萄糖浓度差值体现的细胞葡萄糖代谢有可能是胰岛素信号通路蛋白P-Akt、P-GSK-3β及P-AS160表达变化的结果。②Ang1-7作用后受体Mas表达上调，加入Mas受体拮抗剂A779，细胞葡萄糖代谢受抑制，P-Akt、P-GSK-3β及P-AS160表达降低，提示Ang1-7改善葡萄糖代谢过程中，有受体Mas参与。

目的:探讨黄芪多糖对深Ⅱ度烧伤大鼠创面愈合的影响及其机制。方法:采用实验研究方法。取50只雄性7周龄SD大鼠，按照随机数字表法分为正常组、单纯烧伤组、黄芪多糖组、抑制剂组和抑制剂+黄芪多糖组，每组10只。除正常组外，其余4组大鼠均在背部制作1个深Ⅱ度烧伤创面。正常组、单纯烧伤组大鼠腹腔注射生理盐水，其余3组大鼠分别注射黄芪多糖和/或整合素连接激酶（ILK）抑制剂。注射7 d后，计算4组烧伤大鼠创面愈合率，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测5组大鼠血清中γ干扰素、白细胞介素2（IL-2）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量。取正常组大鼠正常皮肤组织及4组烧伤大鼠创面组织，测定水分并计算水分占比，采用ELISA法检测γ干扰素、IL-2和TNF-α的含量，采用实时荧光定量反转录PCR法检测表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）以及ILK mRNA表达量，采用蛋白质印迹法检测ILK、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、糖原合成激酶-3β（GSK-3β）及磷酸化GSK-3β（p-GSK-3β）蛋白表达量。对数据行单因素方差分析、LSD检验。结果:注射7 d后，黄芪多糖组大鼠创面愈合率为（67±5）%，明显高于单纯烧伤组的（52±4）%和抑制剂+黄芪多糖组的（59±5）%（ P值均<0.05）；抑制剂+黄芪多糖组大鼠创面愈合率明显高于抑制剂组的（48±4）%（ P<0.05）。注射7 d后，与正常组大鼠血清或正常皮肤组织比较，单纯烧伤组大鼠血清中γ干扰素、TNF-α、IL-2含量和创面组织水分占比均明显升高（ P<0.05）；与黄芪多糖组比较，单纯烧伤组和抑制剂+黄芪多糖组大鼠血清中γ干扰素、TNF-α、IL-2含量及创面组织水分占比均明显升高（ P<0.05）；与抑制剂组比较，抑制剂+黄芪多糖组大鼠血清中γ干扰素、TNF-α、IL-2含量及创面组织水分占比均明显降低（ P<0.05）。注射7 d后，与正常组大鼠正常皮肤组织比较，单纯烧伤组大鼠创面组织中γ干扰素、TNF-α和IL-2含量均明显升高（ P<0.05）；与黄芪多糖组比较，单纯烧伤组和抑制剂+黄芪多糖组大鼠创面组织中γ干扰素、TNF-α和IL-2含量均明显升高（ P<0.05）；与抑制剂组比较，抑制剂+黄芪多糖组大鼠创面组织中γ干扰素、TNF-α和IL-2含量均明显降低（ P<0.05）。注射7 d后，与正常组大鼠正常皮肤组织比较，单纯烧伤组大鼠创面组织中EGF、bFGF、ILK mRNA表达量及ILK、p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达量均明显升高（ P<0.05）；与黄芪多糖组比较，单纯烧伤组和抑制剂+黄芪多糖组大鼠创面组织中EGF、bFGF和ILK mRNA表达量及ILK、p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达量均明显降低（ P<0.05）；与抑制剂组比较，抑制剂+黄芪多糖组大鼠创面组织中EGF、bFGF和ILK mRNA表达量以及ILK、p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达量均明显升高（ P<0.05）。正常组大鼠正常皮肤组织以及4组烧伤大鼠创面组织中Akt和GSK-3β蛋白表达量比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:黄芪多糖可能通过激活ILK/Akt/GSK-3β信号通路，减轻深Ⅱ度烧伤大鼠全身和局部炎症反应，减轻组织水肿，促进愈合因子表达，从而促进创面愈合。

目的:研究芍药苷对糖尿病足大鼠创面愈合的促进作用及对神经生长因子（nerve growth factor，NGF）/Akt/糖原合成酶激酶-3（glycogen synthase kinase-3β，GSK3β）通路的调节作用。方法:将60只大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组及芍药苷低、中、高剂量组，每组12只。采用腹腔注射STZ及电热烫伤法建立糖尿病足大鼠模型，芍药苷低、中、高剂量组大鼠腹腔注射20、40、80 mg/kg的芍药苷，1次/d，连续21 d。测定给药后各组大鼠创面愈合率，使用血糖仪测定大鼠空腹血糖，全自动生化分析仪测定HbAlc、TC、LDL-C、TG水平，ELISA法测定血清CRP、IL-6、IL-1β及TNF-α水平，HE染色法观察创面组织病理学变化，RTq-PCR法测定皮肤组织NGF、Akt、GSK3β mRNA水平，免疫印迹法测定NGF、Akt、GSK3β蛋白及其磷酸化水平。结果:与模型组比较，芍药苷低、中、高剂量组大鼠创面愈合率升高（ P<0.05），空腹血糖、HbAlc、TC、LDL-C、TG水平及血清CRP、IL-6、IL-1β、TNF-α水平降低（ P<0.05），大鼠皮肤组织NGF mRNA［（0.83±0.12）、（3.17±0.11）、（4.54±0.25）比（0.31±0.06）］、Akt mRNA［（1.71±0.14）、（2.96±0.27）、（4.10±0.34）比（0.97±0.20）］水平升高（ P<0.05），GSK3β mRNA［（4.28±0.35）、（2.82±0.14）、（1.22±0.33）比（7.62±0.43）］水平降低（ P<0.05），NGF［（0.46±0.02）、（0.70±0.04）、（0.87±0.04）比（0.30±0.06）］、Akt［（0.51±0.09）、（0.63±0.03）、（0.79±0.06）比（0.41±0.05）］、p-NGF/NGF［（0.47±0.06）、（0.61±0.04）、（0.83±0.07）比（0.25±0.03）］、p-Akt/Akt［（0.54±0.08）、（0.83±0.11）、（0.96±0.07）比（0.13±0.05）］蛋白表达升高（ P<0.05），GSK3β［（0.67±0.05）、（0.54±0.04）、（0.45±0.03）比（0.86±0.05）］蛋白表达及p-GSK3β/GSK3β［（0.78±0.09）、（0.64±0.07）、（0.42±0.07）比（0.97±0.05）］降低（ P<0.05），且各项指标与芍药苷剂量具有出一定的依赖性。 结论:芍药苷可调节糖尿病足大鼠血糖血脂水平，抑制血清炎性细胞因子水平，促进创面愈合，其机制可能与调节NGF/Akt/GSK3β通路有关。

目的:评价肿瘤坏死因子α诱导蛋白家族8样蛋白2(TIPE2)在小鼠脓毒症心肌损伤中的作用及其与丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)/糖原合酶激酶3β(GSK-3β)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的关系。方法:选择16只雄性野生型C57BL/6N小鼠和16只雄性TIPE2基因敲除C57BL/6N小鼠，6~8周龄，体质量20~25 g，按照随机数字表法分为野生型假手术组(WT-Sham组)、野生型CLP组(WT-CLP组)、TIPE2基因敲除型假手术组(WT-Sham组)和TIPE2基因敲除CLP组(KO-CLP组)，每组8只。采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症小鼠急性心肌损伤模型。术后24 h时采集下腔静脉血标本，采用ELISA法检测血清心肌cTnI浓度，然后处死小鼠，取心肌组织，HE染色观察病理学结果，采用q-PCR法检测TNF-α、IL-1β及IL-6的mRNA表达，Western blot法检测TIPE2、磷酸化AKT(p-AKT)、磷酸化(p-GSK-3β)及β-catenin表达。结果:与相应Sham组比较，相应CLP组血清cTnI浓度升高，心肌组织TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达、p-AKT、p-GSK-3β和β-catenin表达上调，TIPE2表达下调( P<0.05)，发生心肌病理学损伤；与WT-CLP组比较，KO-CLP组血清cTnI浓度升高，心肌组织TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达、p-AKT、p-GSK-3β和β-catenin表达上调，TIPE2表达下调( P<0.05)，心肌病理学损伤加重。 结论:TIPE2可能通过抑制AKT/GSK-3β/β-catenin信号通路减轻脓毒症小鼠心肌损伤。