目的:探讨溴结构域和超末端结构域(BET)抑制剂JQ1联合程序性细胞死亡配体1(PD-L1)的小干扰RNA(siPD-L1)对口腔鳞状细胞癌Scc-25细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:体外培养人Scc-25细胞株，使用不同浓度JQ1(0、0.2、1、5 μmol/L)处理Scc-25细胞，CCK-8实验检测细胞增殖能力，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PD-L1和叉头框蛋白M1(FoxM1)的表达水平，选择合适浓度的JQ1进行后续实验。将Scc-25细胞分为4组，对照组(不做任何处理)，siPD-L1组(siPD-L1转染Scc-25细胞)，JQ1组(用非特异性siRNA转染Scc-25细胞后加入JQ1)，联合处理组(用siPD-L1转染Scc-25细胞后加入JQ1)。CCK-8实验检测各组Scc-25细胞的增殖能力，Western blot检测各组细胞中cleaved caspase-3、PD-L1和FoxM1的表达水平，流式细胞术检测各组细胞的凋亡率。结果:随着JQ1浓度的增高，Scc-25细胞增殖能力以及PD-L1和FoxM1的表达水平逐渐降低(均 P<0.01)；JQ1浓度为1 μmol/L对Scc-25细胞增殖能力以及PD-L1和FoxM1的表达水平抑制作用较明显，选择1 μmol/L的JQ1进行后续实验。JQ1组、siPD-L1组以及联合处理组Scc-25细胞增殖能力、PD-L1和FoxM1的蛋白表达明显低于对照组(均 P<0.01)，cleaved caspase-3蛋白表达和细胞凋亡率明显高于对照组(均 P<0.01)；联合处理组的作用较siPD-L1组、JQ1组更为显著(均 P<0.01)。 结论:JQ1联合siPD-L1可有效抑制口腔鳞状细胞癌Scc-25细胞增殖，促进细胞凋亡，其机制可能与抑制PD-L1和FoxM1信号通路有关。

目的:探讨雷公藤甲素（TPL）联合BET蛋白抑制剂JQ1对MLL基因重排阳性急性髓系白血病（AML）细胞株MV4-11的增殖抑制及凋亡诱导作用，并探讨其协同作用机制。方法:取对数生长期MV4-11细胞，分别接受不同浓度（100、200、300、400 nmol/L）JQ1单药、4 nmol/L TPL单药或4 nmol/L TPL联合上述不同浓度JQ1处理48 h后，采用CCK-8法检测细胞增殖情况，流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡情况，JC-1法检测线粒体膜电位变化，蛋白质印迹法检测线粒体凋亡通路相关蛋白表达变化。结果:JQ1单药作用MV4-11细胞48 h半数抑制浓度（ IC50）值为（283.9±10.7）nmol/L，而4 nmol/L TPL能增强JQ1对MV4-11细胞的增殖抑制作用，联合用药 IC50值降低至（148.1±2.6）nmol/L，差异有统计学意义（ t=25.31， P=0.029）。FCM检测细胞凋亡结果显示，4 nmol/L TPL联合不同浓度（100、200、300、400 nmol/L）JQ1作用MV4-11细胞48 h后，细胞凋亡率分别为（16.4±1.9）%、（27.5±2.1）%、（32.9±3.6）%、（35.5±3.0）%，与JQ1单药组[（9.6±2.3）%、（12.6±1.4）%、（19.5±3.3）%、（22.7±2.1）%]相比，差异有统计学意义（ F=9.25， P<0.01）。4 nmol/L TPL联合JQ1作用MV4-11细胞12 h后，细胞膜电位水平低于JQ1单药组，差异有统计学意义（ P<0.05）。4 nmol/L TPL联合JQ1作用MV4-11细胞24 h后，抗凋亡蛋白bcl-2、Mcl-1水平下降，而促凋亡蛋白bax水平上升。 结论:TPL可增强BET蛋白抑制剂JQ1对MLL基因重排阳性AML细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用，其机制可能与增强线粒体凋亡途径相关。

经典Ph -骨髓增殖性肿瘤(MPN)包括真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)和原发性骨髓纤维化(PMF)。伴驱动基因 JAK2、 MPL及 CALR突变是MPN的主要诊断标准之一，骨髓组织病理学特征和非驱动基因突变可以辅助进行MPN诊断和患者预后判断。第1代Janus激酶(JAK)2抑制剂芦可替尼，可快速、显著、持续缩小MPN患者脾体积，并缓解机体症状。多项Ⅲ期临床研究结果证实，第2代JAK抑制剂，如fedratinib、momelotinib和pacritinib，在PMF治疗中的疗效良好。除JAK抑制剂外，针对其他靶点的新药，如B细胞淋巴瘤/白血病(BCL)-2/BCL-xL抑制剂navitoclax、端粒酶抑制剂imetelstat和溴结构域和超末端结构蛋白(BET)抑制剂CPI-0610，也在Ph -MPN患者中显示出缩小脾体积，甚至控制骨髓纤维化(MF)程度的疗效。为了提高临床医师对经典Ph - MPN的认识，笔者拟就近年经典Ph -MPN诊断、预后分层、治疗及疗效评价方面的最新研究进展进行阐述。

目的 探讨雷替曲塞联合贝伐珠单抗对晚期结直肠癌患者肿瘤标志物及基质金属蛋白酶的影响.方法 选取2020年2月至2022年10月辽阳市中心医院收治的92例晚期结直肠癌患者为研究对象,按照随机数字表法分为对照组(46例)和观察组(46例).对照组采用卡培他滨联合贝伐珠单抗进行治疗,观察组采用雷替曲塞联合贝伐珠单抗进行治疗.比较两组的临床总有效率、疾病控制率、不良反应发生率、治疗前后的肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原125(CA125)及糖类抗原72-4(CA72-4)]及基质金属蛋白酶[基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)].结果 观察组的临床总有效率及疾病控制率均高于对照组,不良反应发生率低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗前两组的肿瘤标志物及基质金属蛋白酶比较,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗2个周期及4个周期后两组的肿瘤标志物及基质金属蛋白酶均低于治疗前,且观察组的上述两大类指标均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 雷替曲塞联合贝伐珠单抗在晚期结直肠癌患者中的疗效较好,安全性较高,且可有效降低肿瘤标志物及基质金属蛋白酶的表达,在晚期结直肠癌患者中的应用价值较高.

目的 探讨一种新型溴结构域和超末端结构域(BET)小分子抑制剂ABBV-744在干预心力衰竭小鼠心脏纤维化中的作用.方法 将24只8～10周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、JQ1干预组和ABBV-744干预组,每组6只.假手术组不建立心力衰竭模型,其余3组小鼠行主动脉缩窄术(TAC)构建心力衰竭模型,通过检测主动脉弓流速确定造模成功.在TAC术后18 d开始2个干预组小鼠分别进行JQ1腹腔注射和ABBV-744灌胃,1次/d,连续给药30 d.给药结束后,采用超声心动图检测小鼠心功能情况;心脏相关指数分析小鼠心脏肥大情况;苏木精-伊红(HE)染色分析小鼠心脏以及肾脏组织炎症细胞浸润情况;天狼星红染色评估小鼠心脏组织纤维化程度;蛋白质印迹法和荧光定量聚合酶链反应验证小鼠心脏组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、α1-Ⅰ型胶原(COL1A1)、α1-Ⅲ型胶原(COL3A1)表达情况;取血浆检测天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素、血肌酐、血尿素氮指标评估药物对肝肾功能的影响.结果 超声心动图显示与模型组比较,ABBV-744干预组小鼠的左心室射血分数和左心室短轴缩短率均显著升高[(55±4)％比(45±4)％、(28.0±2.6)％比(22.4±2.4)％],左心室收缩末期内径和左心室舒张末期内径均显著降低(P＜0.05或P＜0.01).与模型组比较,ABBV-744干预组小鼠心脏重量与体重比值、心脏重量与胫骨长度比值均明显减小(P＜0.05或P＜0.001).HE染色表明ABBV-744减轻了心脏微血管的炎症细胞浸润;天狼星红染色表明ABBV-744能够减轻TAC后心力衰竭的胶原沉积,减轻心脏纤维化.与模型组比较,ABBV-744干预组α-SMA蛋白和COL1 A1、COL3A1 mRNA表达均明显下调(P＜0.05或P＜0.01).小鼠肾脏HE染色和血浆生化检测提示与JQ1相比,ABBV-744对小鼠肝肾损伤更轻.结论 ABBV-744能有效改善TAC小鼠心力衰竭并减轻心脏纤维化,可能与抑制成纤维细胞激活蛋白相关,与JQ1相比对肝肾功能影响更小.

Bromodomain-containing protein 4(BRD4),a pivotal member of the bromodomain and extra-ter-minal domain(BET)family,is integral to the regulation of vital biological processes,including the cell cycle and gene ex-pression.Studies have identified extensive expression of BRD4 in cardiomyocytes and its influence on various signaling pathways.The dysregulation of BRD4 leads to significant alterations in these pathways,culminating in pathological states such as myocardial inflammation,fibrosis,oxidative stress,and hypertrophy.These changes are instrumental in the onset and progression of cardiovascular diseases.This review summarizes the advances in research on BRD4 and its inhibitors in the context of cardiovascular diseases,with a focus on providing insights for precise therapeutic interventions.

目的 探究甜菜碱(BET)对人食管癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路的调控作用.方法 体外培养人食管癌OE19细胞系,分为对照组(不做干预)、200/300/400 mmol/LBET 组、阳性药组(3 mg/L 顺铂)、BET+抑制剂组(300 mmol/LBET+30 μmol/L PI3K/AKT 通路抑制剂 LY294002)和 BET+激活剂组(300 mmol/LBET+10 μmol/L PI3K/AKT通路激活剂SC79),干预24 h.采用活细胞计数(CCK-8)法测定人食管癌OE19细胞活力;Transwell小室测定细胞的迁移和侵袭能力;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法对细胞EMT表达水平进行分析;蛋白免疫印迹(WB)法测定EMT及PI3K/AKT通路相关蛋白表达水平.结果 与对照组比较,不同浓度BET组的细胞活力随浓度增加逐渐降低,其中300 mmol/L组和400 mmol/L组显著降低(P＜0.05),为避免细胞死亡过多对实验的影响,故选择300 mmol/L组进行后续实验.后续实验中,与对照组相比,300 mmol/L组和阳性药组细胞迁移数、侵袭数及p-PI3K、p-AKT、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白水平下降(P＜0.05),N-cadherin、Vimentin mRNA 水平下降(P＜0.05),E-钙粘蛋白(E-cadherin)mRNA和蛋白水平上升(P＜0.05);与300 mmol/L组相比,BET+抑制剂组细胞迁移数、侵袭数及p-PI3K、p-AKT 蛋白、N-cadherin、Vimentin mRNA 和蛋白水平下降(P＜0.05),E-cadherin mRNA 和蛋白水平上升(P＜0.05),BET+激活剂组细胞迁移数、侵袭数及p-PI3K、p-AKT蛋白、N-cadherin、Vimentin mRNA和蛋白水平上升(P＜0.05),E-cadherin mRNA和蛋白水平下降(P＜0.05).结论 BET可抑制PI3K/AKT通路的活化从而抑制人食管癌OE19细胞的迁移、侵袭和EMT进程.

目的:探讨BET蛋白抑制剂JQ1对MRL/lpr狼疮小鼠外周B细胞分化的影响及其治疗作用.方法:12周龄MRL/lpr小鼠分别腹腔注射JQ150 mg/(kg·d)或10％DMSO;每2周检测24 h尿蛋白定量;6周后检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、补体C3、补体C4、抗ds-DNA抗体、ANA及IgG、IgG1、IgG2a、IgM等免疫球蛋白水平;PAS染色观察肾脏组织病理学改变,免疫荧光染色观察IgG和C3免疫复合物沉积情况.利用流式细胞术检测小鼠B细胞各亚群细胞的比例;RT-qPCR检测脾脏prdm1 mRNA表达水平.结果:与DMSO组相比,JQ1治疗组小鼠24 h尿蛋白定量显著减少,血清BUN、Cr水平明显降低,补体C3、C4水平明显升高,抗ds-DNA抗体、ANA以及IgG、IgG1、IgG2a和IgM等免疫球蛋白水平明显降低;此外,JQ1治疗组小鼠肾小球、肾血管的病理损害程度均明显减轻,肾脏IgG和C3免疫复合物沉积显著减少.同时,JQ1治疗组小鼠脾脏、淋巴结、外周血B细胞中浆细胞和记忆B细胞亚群的比例显著下降;JQ1治疗亦显著抑制狼疮小鼠B细胞内调节浆细胞分化的关键转录因子prdm1 mRNA表达.结论:BET蛋白抑制剂JQ1对MRL/lpr狼疮小鼠具有显著的治疗作用,通过抑制Blimp1表达进而调节浆细胞分化可能是其发挥治疗作用的机制之一.BET蛋白可能是SLE治疗的新靶标.

目的 探讨表观遗传学信号分子BET蛋白的抑制剂JQ1对脑缺血再灌注损伤的保护作用和机制.方法 选择成年雄性Wistar大鼠55只,并随机分为对照组、模型组和实验组,利用线栓法制造大鼠脑缺血再灌注损伤模型.实验组在造模的同时给予JQ1干预.24 h后处死所有实验动物,并通过Zea-Longa神经行为学评分、TTC染色、HE染色、ELISA法等方法,检测大鼠的神经功能、脑梗死体积、脑组织病理学改变、变性细胞指数(DCI)以及脑组织炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)]的水平.结果 模型组和实验组大鼠的神经行为学评分较对照组均明显增高(P<0.05),但实验组大鼠的神经行为学评分较模型组明显下降(P<0.05);模型组大鼠的脑梗死体积、DCI明显高于对照组(P<0.05);当给予JQ1干预后,虽然实验组大鼠脑梗死体积、DCI仍然高于对照组(P<0.05),但是较模型组已明显下降(P<0.05);模型组大鼠脑组织的炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的水平明显高于对照组(P<0.05);当给予JQ1干预后,虽然实验组大鼠脑组织的炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的水平仍然高于对照组(P<0.05),但较模型组已明显下降(P<0.05).结论 BET蛋白的抑制剂JQ1对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与JQ1具有抑制炎症因子表达的作用有关.

目的:观察莫洛尼小鼠白血病病毒的前病毒插入点激酶l (provirus integration site for Moloney murine leukemia virus kinase 1,Pim-1)抑制剂对2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenestdfonic acid,TNBS)诱导的小鼠炎症性肠病的治疗作用,同时研究Pim-1抑制剂对肠黏膜中T细胞分化的影响.方法:将45只BALB/c小鼠随机分成5组(n=9):溶媒对照组、TNBS模型组、小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组.用TNBS和乙醇混合液灌肠诱导小鼠炎症性肠病模型,小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组造模后分别采用5,10 mg/kg Pim-1抑制剂每天1次腹腔注射,激素治疗组给予0.1 mg泼尼松每天1次灌胃,共5d.观测各组小鼠的一般情况、疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分、小鼠结肠长度、结肠大体标本评分及病理学评分,评估Pim-1抑制剂对小鼠炎症性肠病的治疗作用,并与激素治疗组比较.运用RT-PCR、Western印迹分别检测Th1,Th2,Th17,免疫调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)的特异性转录因子T细胞表达的T盒(T-box expressed in T cells,T-bet)、GATA连接蛋白3(GATA binding protein3,GATA-3)、维甲酸相关孤儿受体γ(RA orphan receptorγ,RORγt)、叉头蛋白P3(forkhead box P3,Foxp3)基因及蛋白的表达.结果:溶媒对照组小鼠无腹泻、便血,体重平稳增加,TNBS模型组小鼠逐渐出现便血、腹泻、体重减轻;与溶媒对照组比较,TNBS模型组结肠长度明显缩短,DAI评分、结肠大体标本评分、病理学评分明显升高(P＜0.05);小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组小鼠便血、腹泻、体重减轻较TNBS模型组明显好转,DAI评分、结肠长度的缩短、结肠大体标本评分、病理学评分较TNBS模型组明显降低(P＜0.05);小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组比较,差别无统计学意义(P＞0.05).RT-PCR和Western印迹结果显示:与溶媒对照组比较,TNBS模型组GATA3和RORγt表达升高,Foxp3表达明显下降(P＜0.05),而T-bet无明显差异;与TNBS模型组比较,小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组结肠组织中GATA3,RORγt的表达明显下降,Foxp3的表达明显升高(P＜0.05),小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组之间比较,差别无统计学意义(P＞0.05).RT-PCR果显示:与TNBS模型组比较,小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组结肠组织中T-bet的表达明显下降(P＜0.05);小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组之间比较,差别无统计学意义(P＞0.05).Western印迹结果显示:与TNBS模型组比较,小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组结肠组织中T-bet的表达稍下降,差别无统计学意义(P＞0.05),但激素治疗组表达明显下降(P＜0.05);小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组之间比较,差别无统计学意义(P＞0.05).结论:Pim-1抑制剂能抑制BALB/c小鼠炎症性肠病模型Th2特异性表达因子GATA3,Th17特异性表达因子RORγt的表达,促进Treg细胞的特异性表达因子Foxp3的表达,从而发挥抑制以Th2和Th17为主的免疫炎症反应,促进向Treg细胞分化的作用,对小鼠炎症性肠病具有一定的治疗作用.