目的:探讨T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）诱导人软骨细胞差异表达基因与大骨节病（KBD）之间的关系，寻找KBD的潜在分子标志物。方法:采用基因表达谱芯片对T-2毒素（0.01 μg/ml）、DON（1.0 μg/ml）诱导正常人软骨细胞的差异表达基因进行分析，比较其与KBD软骨细胞差异表达基因的异同；并对各组差异表达基因进行KEGG通路富集分析；进一步比较分析T-2毒素、DON诱导人软骨细胞后KBD易感基因的表达情况。结果:基因表达谱芯片分析结果显示，T-2毒素、DON诱导人软骨细胞与正常对照细胞比较分别有882（上调基因349个、下调基因533个）和2 118个差异表达基因（上调基因1 124个、下调基因994个）；与KBD软骨细胞差异表达基因比较，表达趋势一致的基因包括B细胞易位基因1（BTG1）、G蛋白信号调节蛋白5（RGS5）、脂肪酸结合蛋白4（FABP4）和衰老关键蛋白1（FBLN1），相同的KEGG通路包括p53、细胞外基质受体相互作用和磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B（PI3K-Akt）信号通路。T-2毒素、DON诱导人软骨细胞均可引起KBD易感基因生长分化因子5（GDF5）表达上调、Ⅸ型胶原A1（COL9A1）表达下调。结论:BTG1、RGS5、FABP4、FBLN1、GDF5及COL9A1基因在KBD发病中有重要作用，可作为KBD病因机制的潜在分子标志物。

目的:检测B细胞异位基因2(BTG2)在胰腺癌组织的表达情况，分析其与胰腺癌临床病理特征和预后的关系。方法:收集2015年6月至2020年12月间湖北医药学院附属国药东风总医院病理科石蜡封存的46例胰腺癌组织、对应的癌旁组织及肝胆胰外科9例行手术切除的新鲜胰腺癌组织、对应的癌旁组织，采用免疫组织化学染色法检测46例胰腺癌组织及癌旁组织BTG2蛋白表达情况，根据BTG2表达水平将其分为BTG2高表达组和低表达组。采用RT-PCR法检测9例胰腺癌组织、癌旁组织BTG2基因表达量。分析BTG2蛋白表达水平与患者临床病理特征的相关性，采用Kaplan-Meier法绘制生存时间图及死亡风险曲线图，应用单因素和多因素Cox回归模型分析影响胰腺癌患者预后的因素。结果:46例胰腺癌组织中BTG2高表达29例(63.04%)，对应癌旁组织中BTG2高表达38例(82.61%)，癌旁组织BTG2高表达率显著高于癌组织；9例胰腺癌组织中3例为高分化，6例为中低分化，高分化胰腺癌组织BTG2表达量显著高于中低分化癌组织(0.66±0.07比0.24±0.18)，癌旁组织表达量显著高于癌组织(1.00±0.00比0.38±0.30)，差异均有统计学意义( P值均<0.001)。胰腺癌BTG2低表达与肿瘤分化程度低、有血管侵犯相关( P值均<0.05)，而与肿瘤位置、大小、淋巴结转移、CA19-9水平、术后肝转移无关。BTG2高表达组中位生存期显著长于BTG2低表达组(525 d比266 d， P<0.001)；生存≥300 d患者BTG2高表达组生存时间显著长于BTG2低表达组[(616±135)d比(426±113)d]，差异有统计学意义( P<0.001)，而生存<300 d患者BTG2高表达组与低表达组生存时间差异无统计学意义。单因素分析结果显示，肿瘤分化程度、血管侵犯、BTG2表达、CA19-9水平、术后肝转移均与胰腺癌患者预后有关；多因素分析结果显示，BTG2表达水平( HR＝2.572，95% CI1.140~5.802， P＝0.023)、血管侵犯( HR＝0.203，95% CI0.072~0.572， P＝0.003)及术后肝转移( HR＝0.240，95% CI0.102~0.564， P<0.001)为影响胰腺癌患者预后的独立危险因素。 结论:胰腺癌组织BTG2表达量显著低于癌旁组织，其低表达与胰腺癌侵袭性强、分化程度低及预后差相关。BTG2对胰腺癌患者预后的影响主要在远期。

目的:探讨B细胞易位基因1(BTG1)在SU-DHL-2细胞中的表达及其通过自噬对细胞增殖和凋亡的影响。方法:实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白印迹法分别检测人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系U2932、OCI-LY-10、SU-DHL-2以及B淋巴母细胞IM-9中BTG1 mRNA和蛋白表达量。SU-DHL-2细胞按照随机数字表法分为对照组、空载体组、BTG1过表达组、3-MA组和BTG1过表达＋3-MA组，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活性，流式细胞仪检测细胞凋亡率，蛋白印迹法检测微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3 Ⅱ)、酵母Atg6同系物(Beclin1)和自噬相关蛋白5(Atg5)表达量。多组间比较采用单因素方差分析(One way-ANOVA)，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:U2932、OCI-LY-10、SU-DHL-2细胞中BTG1 mRNA表达量(0.85±0.06、0.54±0.06、0.53±0.05)均低于IM-9细胞(1.22±0.16， t＝3.750、6.893、7.129， P<0.05)，蛋白表达量(0.70±0.08、0.54±0.06、0.24±0.04)均低于IM-9细胞(0.87±0.06， t＝2.944、6.736、15.132， P<0.05)。BTG1过表达组细胞增殖活性[(74.80±1.24)%]低于对照组(100.00%， t＝35.200， P<0.05)和空载体组[(98.35±1.02)%， t＝25.404， P<0.05]；BTG1过表达组细胞凋亡率[(14.74±0.93)%]高于对照组[(6.28±0.31)%， t＝14.948， P<0.05]和空载体组[(8.53±0.55)%， t＝9.955， P<0.05]；BTG1过表达组BTG1 mRNA表达量(2.33±0.08)高于对照组(1.03±0.06， t＝22.517， P<0.05)和空载体组(1.01±0.07， t＝21.508， P<0.05)，蛋白表达量(0.88±0.07)高于对照组(0.56±0.07， t＝5.599， P<0.05)和空载体组(0.61±0.06， t＝5.072， P<0.05)。BTG1过表达＋3-MA组细胞增殖活性[(84.21±3.26)%]高于BTG1过表达组[(73.42±3.48)%， t＝3.919， P<0.05]，细胞凋亡率[(18.40±2.26)%]低于BTG1过表达组[(26.79±2.80)%， t＝4.039， P<0.05]，LC3Ⅱ、Beclin1和Atg5蛋白表达量(0.56±0.05、0.72±0.07、0.49±0.05)低于BTG1过表达组(0.71±0.06、0.89±0.05、0.68±0.05， t＝3.326、3.423、4.654， P<0.05)。 结论:BTG1过表达可诱导自噬发挥抗弥漫大B细胞淋巴瘤作用。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)人类组织相容性白细胞抗原复合物P5(HCP5)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的神经细胞损伤的影响，并分析其潜在机制。方法:将SH-SY5Y细胞分为对照组(CON组，正常培养基培养)、模型组(Model组，进行OGD/R)、干扰对照组[si-NC组，转染HCP5小分子干扰RNA阴性对照(si-NC)后进行OGD/R)]、HCP5干扰组[si-HCP5组，转染HCP5小分子干扰RNA(si-HCP5)后进行OGD/R]、HCP5干扰+抑制剂对照组[si-HCP5+anti-NC组，转染si-HCP5、miR-525-5p抑制剂阴性对照(anti-NC)后进行OGD/R]、HCP5干扰+miR-525-5p抑制剂组[si-HCP5+anti-miR-525-5p组，转染si-HCP5、miR-525-5p抑制剂后进行OGD/R]。qRT-PCR检测细胞中lncRNA HCP5、miR-525-5p的表达；MTT检测SH-SY5Y细胞活性；二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平；流式细胞术检测SH-SY5Y细胞凋亡；Western blot检测细胞中BTG2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、剪切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)蛋白的表达。SPSS 25.0软件用于分析数据，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用SNK- q检验。 结果:6组细胞中lncRNA HCP5、miR-525-5p的RNA水平和BTG2蛋白的表达水平均差异有统计学意义( F＝28.853，59.241，13.731，均 P<0.001)。Model组lncRNA HCP5水平高于CON组，miR-525-5p水平低于CON组，BTG2蛋白水平高于CON组(均 P<0.05)；si-HCP5组lncRNA HCP5水平低于Model组，miR-525-5p水平高于Model组，BTG2蛋白水平低于Model组(均 P<0.05)；si-HCP5+anti-miR-525-5p组lncRNA HCP5水平高于si-HCP5+anti-NC组，miR-525-5p水平低于si-HCP5+anti-NC组，BTG2蛋白水平高于si-HCP5+anti-NC组(均 P<0.05)。6组细胞的细胞活性和ROS水平均差异有统计学意义( F＝16.180，59.950，均 P<0.001)。Model组的细胞活性低于CON组(0.33±0.12，0.63±0.11)，ROS水平高于CON组(224.62±23.27，100.00±0.00)( P<0.05)；si-HCP5+anti-miR-525-5p组细胞活性低于si-HCP5+anti-NC组(0.38±0.08，0.58±0.08)( P<0.05)，ROS水平高于si-HCP5+anti-NC组(207.83±19.39，135.27±14.36)( P<0.05)。6组细胞的凋亡率和凋亡蛋白Bcl-2、Bax、cleaved-Caspase-3的表达水平均差异有统计学意义( F＝27.994，29.660，45.000，52.983，均 P<0.001)。与si-NC组比较、si-HCP5组与si-HCP5+anti-NC组比较，Model组SH-SY5Y细胞中Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3蛋白水平和凋亡率均差异无统计学意义(均 P>0.05)；与CON组相比，Model组细胞凋亡率、Bax、cleaved-Caspase-3蛋白水平显著上调(均 P<0.05)，Bcl-2蛋白水平显著下调( P<0.05)；与Model组、si-NC组相比，si-HCP5组细胞凋亡率、Bax、cleaved-Caspase-3蛋白水平显著下调(均 P<0.05)，Bcl-2蛋白水平上调( P<0.05)；与si-HCP5组、si-HCP5+anti-NC组相比，si-HCP5+anti-miR-525-5p组细胞凋亡率、Bax、cleaved-Caspase-3蛋白水平显著上调(均 P<0.05)，Bcl-2蛋白水平显著下调( P<0.05)。 结论:lncRNA HCP5可能通过靶向上调miR-525-5p来抑制BTG2表达，从而导致OGD/R模型中神经细胞发生凋亡。

目的:探讨睾丸弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的临床病理特征及预后。方法:回顾性分析2001年10月至2020年4月上海交通大学医学院附属瑞金医院收治的68例睾丸DLBCL患者的临床病理资料，采用靶向测序（55个淋巴瘤相关基因）评估患者的基因突变情况，同时进行生存和预后因素分析。结果:68例睾丸DLBCL中，原发睾丸DLBCL患者45例（66.2%），继发睾丸DLBCL患者23例（33.8%）。继发睾丸DLBCL患者Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ期（ P<0.001）、LDH升高（ P<0.001）、ECOG评分≥2分（ P＝0.005）、IPI评分3~5分（ P<0.001）的比例高于原发睾丸DLBCL患者。62例（91%）患者接受以R-CHOP（利妥昔单抗+环磷酰胺+阿霉素+长春新碱+泼尼松）方案为基础的治疗，54例（79%）患者在化疗前接受睾丸切除术。继发睾丸DLBCL患者的预期5年无进展生存（PFS）率（16.5%对68.1%， P<0.001）及预期5年总生存（OS）率（63.4%对74.9%， P＝0.008）低于原发睾丸DLBCL患者，继发睾丸DLBCL患者的完全缓解率（57%对91%， P＝0.003）也低于原发患者。ECOG评分≥2分（PFS： P＝0.018；OS： P<0.001）、Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ期（PFS： P<0.001；OS： P＝0.018）、LDH升高（PFS： P＝0.015；OS： P＝0.006）、多结外受累（PFS： P<0.001；OS： P＝0.013）是睾丸DLBCL患者的不良预后因素。20例睾丸DLBCL患者的靶向测序结果显示，突变频率≥20%的突变基因为PIM1（12例，60%）、MYD88（11例，55%）、CD79B（9例，45%）、CREBBP（5例，25%）、KMT2D（5例，25%）、ATM（4例，20%）、BTG2（4例，20%），继发睾丸DLBCL患者KMT2D突变发生率高于原发睾丸DLBCL患者（66.7%对7.1%， P＝0.014），且与睾丸DLBCL患者较低的5年PFS率相关（ P＝0.019）。 结论:继发睾丸DLBCL患者的PFS和OS较原发睾丸DLBCL患者更差。ECOG评分≥2分、Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ期、LDH升高和多结外受累为睾丸DLBCL的不良预后因素。PIM1、MYD88、CD79B、CREBBP、KMT2D、ATM、BTG2是睾丸DLBCL中常见的突变，KMT2D突变患者预后不佳。

目的:筛选增生型糖尿病视网膜病变（DR）患者差异表达基因（DEG ），为增生型DR(PDR）治疗提供新的生物学治疗靶点。方法:基础研究。2020年10月于天津医科大学眼科医院检查确诊的PDR患者3例（PDR组）及非糖尿病患者3例（对照组）纳入研究。另外分别选取同期PDR、非糖尿病患者各40例并据此分为PDR验证组、对照验证组。PDR验证组、对照验证组行外周血验证试验；PDR组、对照组进行RNA测序。采用转录组学（RNAseq）测序技术筛选PDR组、对照组DEG。对筛选得到的DEG进行基因注释（GO）功能富集分析、京都基因与基因组百科全书（KEGG）的信号通路富集分析和蛋白-蛋白互作网络（PPI）分析。应用基因表达总集数据库查找与PDR相关高通量数据行多队列比对分析，通过Targetscan平台对差异表达的miRNA进行靶基因预测，明确筛选所得DEG与PDR的相关性。采用逆转录聚合酶链反应、蛋白免疫印迹法对与PDR相关的DEG mRNA、蛋白表达进行验证。PDR验证组、对照验证组之间PDR相关的DEG mRNA、蛋白相对表达量比较行配对 t检验。 结果:RNAseq测序共筛选出1 337个DEG，上调基因419个，下调基因918个。具有低等电点的直接凋亡抑制蛋白结合蛋白（ DIABLO）、锌指和含BTB域10 （ ZBTB10 ）、polo样激酶3 （ PLK3 ）、调节亚单位1 （ PIK3R1）、B细胞易位基因3 （ BTG3）等基因在PDR组患者中差异表达。GO功能富集分析结果显示， DIABLO、 ZBTB10、 PLK3、 PIK3R1、 BTG3等基因参与了与PDR相关的病理过程。KEGG富集分析结果显示，细胞外基质受体作用、细胞因子调控通路、p53信号通路、半乳糖代谢等糖代谢途径可能参与了DEG涉及过程。PPI分析结果提示，DEG关联蛋白节点越大，关联的节点数量越多，其中 DIABLO、 ZBTB10、 PLK3、 PIK3R1、 BTG3等基因对该作用网络形成作用显著。Targetscan平台预测发现，DR患者房水、玻璃体、血浆中显著差异miRNA与本研究所发现的DEG具有调控关系。与对照验证组比较，PDR验证组患者外周血中 DIABLO、 ZBTB10、 PLK3、 PIK3R1 mRNA、蛋白相对表达量上调， BTG3 mRNA、蛋白相对表达量下调。 结论:PDR患者的DEG为 DIABLO、 ZBTB10、 PLK3、 PIK3R1、 BTG3，其通过调控细胞增生、纤维化及氧化应激等生物学过程参与疾病进程。

目的:探讨循环肿瘤DNA（ctDNA）检测在嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）治疗难治复发弥漫大B细胞淋巴瘤（R/R DLBCL）中的预后预测价值，为CAR-T细胞治疗失败患者的预防和后续治疗提供一定指导。方法:纳入2017年12月至2022年3月在浙江大学医学院附属第一医院接受CAR-T细胞治疗的48例R/R DLBCL患者。对患者治疗前外周血进行187个淋巴瘤相关基因集的ctDNA检测。将患者分为完全缓解（CR）和未达完全缓解（nonCR）两组。使用卡方检验和 t检验比较组间临床特征的差异，使用Log-rank检验比较组间生存差异。 结果:CAR-T细胞治疗R/R DLBCL nonCR患者中，突变频率最高的10个基因由高到低依次为TP53（41%）、TTN（36%）、BCR（27%）、KMT2D（27%）、IGLL5（23%）、KMT2C（23%）、MYD88（23%）、BTG2（18%）、MUC16（18%）、SGK1（18%）。Kaplan-Meier生存分析结果表明相较于ctDNA突变基因数≤10的患者，ctDNA突变基因数>10的患者总生存（OS）（1年OS率：0对73.8%， P<0.001）和无进展生存（PFS）较差（1年PFS率：0对51.8%, P＝0.011）。治疗前MUC16突变阳性的患者OS更好（2年OS率：56.8%对26.7%， P＝0.046），而BTG2突变阳性的患者OS较差（1年OS率：0对72.5%， P＝0.005）。 结论:ctDNA检测可以作为评估CAR-T细胞治疗R/R DLBCL患者疗效的工具，治疗前的基因突变负荷、MUC16以及BTG2的突变具有潜在的预后预测价值。

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中微小RNA(miR)-25表达水平与病灶内癌基因表达变化的相关性。方法:选择海南省人民医院2018年3月至2020年12月期间NSCLC患者为NSCLC组，以同期健康志愿者作为对照组，测定外周血中miR-25的表达水平以及肺癌组织、癌旁组织中miR-25、抑癌基因、增殖侵袭基因的表达水平，应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肺癌细胞株和正常肺上皮细胞BEAS-2B中的miR-25表达水平。不同组间计量资料的分析采用独立样本 t检验。相关分析采用Pearson检验。 结果:NSCLC组患者外周血中miR-25的表达水平高于对照组(1.88±0.24比1.03±0.14， t＝22.432， P<0.05)，肺癌病灶内miR-25的表达水平高于癌旁病灶(2.19±0.32比1.05±0.17， t＝21.797， P<0.05)且NSCLC组患者外周血中miR-25的表达水平与肺癌病灶内miR-25的表达水平呈正相关( r＝0.641、 P<0.01)。miR-25在NSCLC细胞株中的表达量高于正常人肺上皮细胞(2.05±0.35比1.01±0.15， t＝15.237， P<0.05)；肺癌病灶内Krüppel样因子4(KLF4)、B细胞易位基因2(BTG2)、含F-框及WD重复域蛋白7(FBXW7)、Kazal基序逆向诱导半胱氨酸丰富蛋白(RECK)的mRNA表达量水平均低于癌旁病灶(分别0.44±0.08比1.04±0.17、0.64±0.07比1.01±0.15、0.59±0.08比0.98±0.13、0.48±0.06比1.02±0.14， t＝22.407、15.681、18.053、24.827， P<0.05)且与外周血中miR-25的表达水平呈负相关( r＝-0.574、-0.625、-0.512、-0.663， P<0.05)。肺癌病灶内细胞周期蛋白(Cyclin) D1、c-Myc、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的mRNA表达量水平均高于癌旁病灶(分别2.33±0.32比0.97±0.14、1.93±0.24比1.04±0.18、2.08±0.28比0.99±0.11、2.27±0.31比1.02±0.15、2.55±0.38比1.03±0.17， t＝28.771、21.567、26.832、26.756、26.966， P<0.05)且与外周血中miR-25的表达水平呈正相关( r＝0.564、0.692、0.503、0.672、0.485， P<0.05)。 结论:NSCLC患者外周血中miR-25的高表达与抑癌基因表达下调、增殖侵袭基因表达上调密切相关，NSCLC细胞株中的miR-25的表达也高于正常肺上皮细胞。

目的 探讨原发性骨弥漫性大B细胞淋巴瘤(primary bone diffuse large B-cell lymphoma,PB-DLBCL)的临床病理特征、突变图谱及预后影响因素.方法 纳入2006年5月至2021年9月上海交通大学医学院附属瑞金医院收治的初治PB-DLBCL患者37例.采用淋巴瘤相关55个基因靶向测序描绘PB-DLBCL患者的突变图谱,采用单因素Cox回归模型评估临床因素和基因突变与无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)之间的关系.结果 37例初治PB-DLBCL患者中,男性21例(56.8％),年龄＞60岁21例(56.8％),Ann Arbor分期为Ⅳ期22例(59.5％),非生发中心来源(non-GCB)亚型22例(59.5％),国际预后指数评分为3～5的患者18例(48.6％).靶向测序结果显示,MYD88、PIM1、CCND3、CD79B、CIITA、HIST1H1E、KMT2C、PRDM1、TNFAIP3、ZFP36L1为常见突变,突变频率高于20％.单因素分析结果显示,BTG2基因突变(P=0.015)、MYD88基因突变(P=0.049)及MYC/BCL2双表达淋巴瘤(DEL,P=0.009)与PB-DLBCL患者低PFS率显著相关.结论 PB-DLBCL患者中non-GCB亚型较为常见,DEL,BTG2和MYD88基因突变是PB-DLBCL患者PFS的不良影响因素.

目的 初步阐明miR-139在肝细胞癌(HCC)发展过程中的作用及其介导的信号通路.方法 通过CCK-8实验验证miR-139对HCC增殖的影响;运用TargetScan、MiRanda、Clip-seq和miRDB四组数据库对miR-139下游可能存在的通路进行预测,结合文献回顾,寻找出miR-139在HCC中可能存在的靶点.Western blot法验证靶点受miR-139调节的情况,双荧光素酶报告基因分析验证miR-139与靶点的相关性.结果 通过CCK-8实验证明,miR-139具有抑制肝癌细胞增殖的作用;利用4个数据库交叉比对和文献回顾,筛选得到5个感兴趣的潜在基因,包括细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(ICK)、B细胞异位基因3(BTG3)、含CUB和LCCL结构域盘状蛋白2(DCBLD2)、真核起始因子4F(EIF4G2)和核不均一核糖核蛋白F(HNRNPE).Western blot实验和双荧光素报告分析发现miR-139在肝细胞肝癌中具有直接抑制BTG3基因表达的作用.结论 miR-139可以直接调控BTG3基因的表达,影响肝癌细胞增殖.